福尔马林致痛大鼠神经元多巴胺-β-羟化酶表达变化及其调控机制

重庆医科大学
博士学位论文
福尔马林致痛大鼠神经元多巴胺-β-羟化酶表达变化及其调控
机制
姓名：***
申请学位级别：博士
专业：神经病学
指导教师：***
20070601
大，直径约２４－３０ｕｍ，呈卵圆形或三角形，染色较浅（图ｌ一１３）：在ＤＢＨ阳性神经元周围，分布有大量的ＤＢＨ阳性纤维。

而中间带和后角未见ＤＢＨ阳性神经元，但有数量不等的ＤＢＨ阳性纤维分布（图１－１４）。

在脊髓的前角、中间带和后角均可见ＡＰ－２Ｑ阳性神经元（图１－１５）。

４．２．２疼痛模型组
各实验组动物小脑ＰＣ均为阳性反应，形态与对照组相似，ＤＢＨ免疫组化结果的染色强度明显高于对照组，其平均光密度由对照组的０．１４±Ｏ．０２增加到３ｄ时的０．２６士Ｏ．０８，以福尔马林注射后第３ｄ反应最为明显（图１－１６）。

ＡＰ．２ａ染色也和ＤＢＨ染色有相似的变化。

图像分析结果显示，福尔马林注射后第２４ｈ、３ｄ和７ｄ，小脑ＰＣ中ＤＢＨ和ＡＰ－２ａ免疫组化染色强度与对照组相比较，增高程度具有显著性差异（Ｐ＜Ｏ．０５）。

（表１－２、图Ｉ－１７）
表１－２福尔马林疼癌模型ＰＣ的ＤＢＨ／ＡＰ－２ａ免疫纽化染色平均光密度变化（ＯＤ，ｉ士ｓ）１ｈｂｌｅｌ－２ＴｈｅＯＤｏｆＤＢＨ／ＡＰ－２ＣｔｐｏｓｉｔｉｖｅｎｅｕｒｏｎｓｉｎＣｅｒｅｂｅｌｌａｒＰＣｏｆｆｏｒｍａｌｉｎｉｎｄｕｃｅｄｐａｉｎ
ｍｏｄｅｌｒａｔｓ（ＯＤ。

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６与对照组比较Ｐ＜０．０５
图１．１７福尔马林瘁茄模型ＰＣ的ＤＢＨ／ＡＰ－２ａ免疫组化染色平均光密度变化
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表ｌ－４福尔马林疼痛模型大鼠ＬＣ内ＡＰ－２ａ阳性神经元免疫组化染色积分灰度变化（ＡＶ，
彳士３）
Ｔａｂｌｅｌ一４Ｔｈｅａｃｃｕｍｕｌａｔｅｄｇｒａｙｖａｌｕｅ博叻ｏｆＡＰ－２ａｐｏｓｉｔｉｖｅｎｅｕｒｏｎｓｉｎＬＣｏｆｆｏｒｍａｌｉｎ
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‘与对照组比较Ｐ＜０．０５
图１－２０福尔马林疼痛模型大鼠ＬＣ内ＡＰ－２ａ阳性神经元免疫组化染色积分灰
度变化（ＡＶ，舅士ｓ）
№１－２０Ｔｈｅａｅｅｕｍｕｌａｔｅｄｇｒａｙｖａｌｕｅ（＾∽ｏｆＡＰ－２ＱｐｏｓｉｔｉｖｅｎｅｕｒｏｎｓｉｎＬＣｏｆ
ｒａｔｓ觚ｉ士ｓ１
ｆｏｒｍａｌｉｎｉｎｄｕｃｅｄｎａｉｎｍｏｄｅｌ
实验组大鼠脊髓各节段灰质各层神经元均有ＤＢＨ表达，前角内可见ＤＢＨ阳性神经元染色加强，数量增多，由正常的１１－－－－－３个达到福尔马林注射后３ｄ的３６＋－－５个，其胞体较大，直径为２４～３５ｕ１１１，呈圆形、三角形等多种形状（图１－２１），ＤＢＨ免疫组化染色的积分灰度值由正常的２８．３２＋－９．０４达到福尔马林注射后３ｄ的６４．７３＋－１５．０１；后角各层可见以小细胞神经元为主的ＤＢＨ阳性神经元分布，数量由正常的Ｏ个达到福尔马林注射后３ｄ的４０±９个，其直径为乱１４Ｉｔｍ，形状主要为圆形或卵圆形，ＤＢＨ免疫组化染色的积分灰度值由正常的０＋－０达到福尔马林注射后３ｄ的７５．０５±１９．３７（图１－２２）；于中间带可见少量的ＤＢＨ阳性神经元，数量由正常的０个达到福尔马林注射后３ｄ的３８±８个其形状和大小与后角的ＤＢＨ阳性神经元相似，ＤＢＨ免疫组化染色的积分灰度值由正常的Ｏ±０达到福尔马林注
射后３ｄ的６０．６６±１６．４０（图１－２３）。

ＡＰ．２Ｑ的表达范围和表达强度也明显增强。

脊髓内ＤＢＨ阳性神经元数量和ＤＢＨ／ＡＰ．２Ｑ免疫组化染色灰度值通过计算机图像分析和统计学分析表明，福尔马林注射后各组与对照组相比较，具有显著性增加（Ｐ＜ｏ。

０５）（表ｌ－５、表１－６、表１．７、图２４、图２５、图２６）。

表ｌ＿５大鼠脊硝詹角，中闻带、前角内ＤＢＨ阳性神经元数量（ｉ岛）
Ｔａｂｌｅｌ一５ＴｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆＤＢＨ－ｐｏｓｉｔｉｖｅｎｅｕｒｏｎｓｉｎａｎｔｅｒｉｏｒｈｏｒｎ．ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｇｏｎｅａｎｄｄｏｒｓａｌ
ｃｏｒｄｏｆｒａｔ（孑坷）
ｈｏｒｎｏｆｓｐｉｎａｌ
对照组实验组ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｇｒｏｕｐ
Ｃ，ｍｌｔｒｏｌｇｎｍｐ１ｈ６ｈ２４ｈ３ｄ７ｄ中间带蛐一０４－０２１±４‘３０±６＋３４＋１１’３８４－８＋３０４－７’
后角Ⅷｈ０４－０２６４－５＋３２４－７＋３６４－１２’４０＋９’３２＿＋８‘’Ｐ＜０．０５，与对照组比较
图１－２４大鼠脊髓后角、中问带．前角内ＤＢＨ阳性神经元数量Ｆｉ９１－２４ＴｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆＤＢＨ－ｐｏｓｉｔｉｖｅｎｅｕｒｏｎｓｉｎａｎｔｅｒｉｏｒｈｏｒｎｓ，ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｇｏｎｅ
ａｎｄｄｏｒｓａｌｈｏｒｎｓｏｆｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｏｆｒａｔ
表１－６大鼠脊髓后角．中问带．前角内ＤＢＨ阳性神经元平均灰度变化（ｉ蛔）
Ｔａｂｌｅｌ－６Ｔｈｅａｃｃｕｍｕｌａｔｅｄｇｒａｙｖａｌｕｅ似ＤｏｆＤＢＨ－ｐｏｓｉｔｉｖｅｎｅｕｒｏｎｓｉｎａｎｔｅｒｉｏｒｈｏｒｎ，ｉｎｆｏｒｍｅｄｉａｔｅｇｏｎｅａｎｄｄｏｒｓａｌｈｏｒｎｏｆｓｐＪｍＩｅｏｒｄｏｆｒａｔ（ｉ士ｓ）
前角ａｎｔｅｒｉｏｒｈａｍ２８３２４＂９０４３５７１±ｌｌ８３．５６２４ｆｌ：１１．８９＊５７９０＋１３０４＊６４．７３４－１５．０１’６１３７４－１６．７０＋中筒带ｉｎｔｅｎｎｅｄｉａｔｅ２ｒｏｌｅ０４－０３７３５４－１２０ｓ＊５４１９４－１２４３＊５６９７４－１４．２８＂６０．０６４－１６．４０＂５２７２４－１４．５４‘后角ｄｏ璃ｘｌｈｏｒｎ０４－Ｏ４８７１＋１２２０＊６４．３１４－１４２９＊６６１８：ｔ：１５２６＊７５．０５±｜９．３７＊６８．５８４－１６３９’
图１－２５大鼠脊髓后角．中间带，前角内ＤＢＨ阳性神经元平均灰度变化Ｆｉｇｌ－２５Ｔｈｅａｃｃｕｍｕｌａｔｅｄｇｒａｙｖａｉｎｅ（ＡＤｏｆＤＢＨ－ｐｏｓｉｔｉｖｅｎｅｕｒｏｎｓｉｎａｎｔｅｒｉｏｒｈｏｒｎｓ，ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｚｏｎｅａｎｄｄｏｒｓａｌｈｏｒｕｓｏｆｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｏｆｒａｔ
表ｌ－７大鼠脊髓袭质后角，中间带，前角内ＡＰ－２ａ阳性神经元积分灰度变化（ｉ士ｏ）
ＴａＭｅｌ一７Ｔｈｅａｃｃｕｍｕｌａｔｅｄｇｒａｙｖａｌｕｅ（ＡＤｏｆＡＰ－２ａ－ｐｏｓｉｔｉｖｅｎｅｕｒｏｎｓｉｎａｎｔｅｒｉｏｒｈｏｒｎ，ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｚｏｎｅａｎｄｄｏｒｓａｌｈｏｒｎｏｆｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｏｆｒａｔ（ｉ趣）
＋Ｐ＜０．０５，与对照组比较
图１－２６大鼠脊髓灰质后角．中间带．前角内ＡＰ－２ｄ阳性神经元积分灰度变化
ａｃｃｕｍｕｌａｔｅｄｇｒａｙｖａｌｕｅａ∽ｏｆＡＰ－２ｃｔ－ｐｏｓｉｔｉｖｅｎｅｕｒｏｎｓｉｎａｎｔｅｒｉｏｒＦｉｇｌ－２６Ｔｈｅ
ｈｏｒｎｓ，ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｚｏｉｌｅａｎｄｄｏｒｓａｌｈｏｒｕｓｏｆｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｏｆｒａｔ。