ACQUITY UPLC 操作规程

ACQUITY UPLC TM操作规程
Waters 中国有限公司
ACQUITY UPLC TM 操作规程
一.开机程序
1.首先制备新鲜流动相和清洗液(详见细则)
2.打开网络集线器电源
3.打开计算机电源,进入Windows操作系统
4.打开BSM和SM电源,待通过自检后
5.登录Empower软件,进入运行样品界面
6.打开控制台界面(图标在SM界面右下角)
7.进行仪器的 Start up 操作(详见细则)
8.设定0.1ml/min-0.2ml/min流速,冲洗检测池
9.当检测池出口有液体流出后,打开TUV(PDA)检测器电源
10.待检测器通过自检以后,在控制台界面RESET检测器
11.编制仪器方法,监测基线,准备开始 UPLC 分析实验
二.开机细则
1. 制备新鲜流动相和清洗液
A.UPLC对流动相的要求
有机溶剂要求用色谱纯(进口名牌最好)
水或缓冲盐溶液要用超纯水(18.2MΩ),当天制备
B.UPLC对洗针液的要求
强洗针液用较高比例的甲醇/水或乙腈/水(例如:80/20)
弱洗针液用纯水或含少量甲醇或乙腈的水溶液(例如:10%甲醇溶液)
C.清洗柱塞密封垫(Seal Wash)的溶液
含5%-10%甲醇的超纯水
*特别提示: 以上溶剂或溶液均需:
用0.22μm的膜过滤并脱气
用洁净的玻璃容器盛放,避免污染
2. UPLC Start Up 操作
A. 首先灌注柱塞杆清洗液(Prime Seal wash)
选择 Control>Prime Sealwash,点击之
至出口管有液体滴出即可停止灌注
*提示:为避免污染,请勿循环使用Seal wash清洗液
B. 第二步湿灌注(Wet Priming)BSM(二元溶剂管理器)
选择 Control>Prime A/B Solvents,点击之
选择 A1(或A2)、B1 (或B2) ，时间设定为3分钟，点击 start
Prime时的流速已设定为:A泵和B泵各4ml/min, 总流速为8mL/min,无需改动
C. 做过BSM的wet prime之后，要准备SM样品管理器
灌注SM注射器和进样针操作
选择Sample Manager,单击Control > Prime syringes 选择“ Sample syringe and wash syringes”
在Number of cycles中输入要作灌注的次数(默认值为1) (建议: 如果更换溶剂，做5－7次灌注)
单击 OK. 当系统状态是 “Idle(待机),” 就表示灌注做完了 接下来做冲洗进样针
在控制台的Sample Manager窗口,单击Control > Wash Needle,出现Wash Needle对话框
输入需要的强洗针液的体积. 默认为: 0.0 μL
在弱洗针框中输入弱洗针液的体积, 默认值: 200.0μL, 建议值:200 到 500 μL
单击OK. 开始洗针过程
当洗针过程完成时, 回到“Idle”状态
提示: 不要使用缓冲盐作为洗针液
D. 样品制备
用流动相溶样
用0.22um样品过滤膜过滤
放入Waters UPLC 适用的样品瓶
提示: 不要使用非Waters指定的样品瓶,以免损坏进样针
三.关机操作
用超纯水置换缓冲盐流动相,清洗色谱柱及系统(100倍柱体积) 待系统中缓冲盐冲洗干净,用乙腈/水冲洗系统
用纯有机溶剂(乙腈或甲醇)充满系统
缓慢降低流速至零,关闭TUV/PDA检测器电源,关闭SM,BSM电源 关闭网络集线器电源
退出Empower软件,关计算机。