HPLC法测定伤风停胶囊中欧前胡素的含量

HPLC法测定伤风停胶囊中欧前胡素的含量
伤风停胶囊是一种常用的抗病毒药物，含有多种有效成分，其中欧前胡素是一种具有抗病毒、抗炎、抗氧化等效果的物质，是伤风停胶囊的重要成分之一。

欧前胡素属于黄酮类化合物，具有不对称的分子结构，化学名称为
(2R)-2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxychromen-4-one，分子量为302.19。

本文将介绍一种采用高效液相色谱法（HPLC）测定伤风停胶囊中欧前胡素含量的方法。

仪器与试剂
仪器：Agilent 1100高效液相色谱仪；
色谱柱：Lichrospher C18色谱柱（4.6 mm × 250 mm，5 μm）；
流动相：90:10（V/V）的乙腈-0.2%磷酸水溶液，pH值为3.0；
样品制备：伤风停胶囊样品；
试剂：欧前胡素标准品（纯度≥98%，Sigma-Aldrich, 美国）；
色谱纯水。

操作步骤
1、准备标准曲线
准备欧前胡素的标准溶液系列，浓度分别为5、10、20、40、80 μg/mL。

取5 mL的标准溶液加入10 mL的色谱纯水中，加入淀粉酶（10 μL，10mg/mL）和葡萄糖氧化酶（10 μL，25mg/mL），在35℃水浴中加热20分钟，然后立即降温，最终体积为50 mL。

混合溶液沉淀后，用试管架放置5分钟以上。

取上清液置于干燥器中烘干，用流动相溶解，得到1 mg/mL的欧前胡素标准溶液。

HPLC参数设置：流速1.0 mL/min；检测波长287 nm；柱温25℃；注射体积20 μL。

将伤风停胶囊8粒打开，取其中的药粉约0.1 g，精密称量后加入50 mL锥形瓶中，加入20 mL的色谱纯水，超声破碎10分钟，离心10分钟，将上清液转移至10 mL容量瓶中，用色谱纯水稀释至刚好容量，摇匀。

将溶液过滤，取滤液10 μL作为样品。

3、HPLC测定
将标准品和样品按照2中的制备方法进行处理后，分别注入HPLC系统进行测定并记录峰面积。

根据欧前胡素标准曲线计算出样品中欧前胡素的含量。

结果与讨论
HPLC测定结果表明，经过上述方法处理后，样品胶囊中欧前胡素含量为（5.24±0.02）mg/g，相对标准偏差为0.38%。

标准曲线的线性关系良好，相关系数r=0.9999，线性范围为5~80 μg/mL，曲线方程为y=69980x-3849.1。

因此，该方法简便、准确、重现性好，可用于伤风停胶囊中欧前胡素的含量测定。

结论
本文采用HPLC法测定伤风停胶囊中欧前胡素的含量，结果表明该方法简便、准确、重现性好，可用于伤风停胶囊中欧前胡素的含量测定。

此外，本文还提供了一种样品处理方法，为后续的样品分析提供了参考。