深圳市酒店集中空调通风系统微生物污染基线调查_林爱红

深圳市酒店集中空调通风系统微生物污染基线调查
林爱红,梁焯南,叶宝英,曾惠芳,张　然
摘要:　目的　了解深圳市公共场所集中空调通风系统微生物污染状况。

　方法　按卫生部《公共场所集中空调通风系统卫生规范》,随机抽取深圳市32家宾馆运行2年以上的集中空调通风系统42套,检测通风系统的风管积尘量及积尘中细菌总数、真菌总数、溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及冷却塔水、冷凝水中的军团菌。

　结果　集中空调风管积尘中真菌总数污染严重;管道积尘量中等污染;积尘中细菌总数严重污染率为81.9%。

32家宾馆的集中空调冷却水、冷凝水中检出3株军团菌。

　结论　本次调查的公共场所集中空调通风系统微生物污染严重,应加强卫生管理。

关键词:　空气污染,公共场所;集中空调通风系统;微生物污染
中图分类号:R126.4 文献标识码:B
随着我国经济的发展和人民生活水平的提高,集中空调越来越广泛地应用于宾馆、商场和办公写字楼等公共场所[1],公共场所集中空调通风系统(以下简称空调系统)若受微生物污染,微生物会在温、湿度适宜的部件中大量生长繁殖,随空调送风进入空调环境可能造成传染病的流行(如嗜肺军团菌等)[2]。

美国环保局、丹麦技术大学等在美国和欧洲的调查结果表明,室内污染中来自于空调通风系统的占42%～53%[3]。

为掌握基线资料,预防传染性疾病通过空调系统在公共场所的传播,为卫生管理提供技术依据,遂对深圳市3星级以上宾馆或酒店中空调系统微生物污染状况进行了专项调查。

1　材料与方法
1.1　采样仪器　M AS-100型撞击式大气采样器,采样空气流量为100L min,RRK-SR-Ⅰ型定量采样机器(北京人人康空气净化技术有限公司)。

1.2　采样点　随机抽取深圳市22家3星级以上宾馆或酒店运行2年以上的空调系统,每家各抽取1～2套共42套,每套空调系统各随机抽取4～5个送风口,共采集223份;采集送风管内表面212份、冷却水75份、冷凝水84份等样品,进行微生物污染指标的检测调查。

1.3　采样方法
1.3.1　风管内表面采样　依照《公共场所集中空调通风系统卫生规范》附录I的方法,在送风管的下内壁处,采用5cm×5 cm无菌规格板,布2个采样点,采内表面50cm2,用灭菌生理盐水湿润棉拭子,在规格板内有顺序地来回涂抹10次,用灭菌剪刀剪去棉签接触手的部位,将棉拭子放入10ml生理盐水管内送检。

1.3.2　冷却水、冷凝水采样　依照《公共场所集中空调通风系统卫生规范》附录A的方法,用加有硫代硫酸钠的无菌玻璃瓶,每份冷却水、空调冷凝水采250ml水样,4h内送检。

作者单位:深圳市疾病预防控制中心(广东　深圳　518020)
作者简介:林爱红(1966-),女,大学学历,主任技师,主要从事微生物检验工作。

1.3.3　新风总管内表面积尘量采样与检测　在新风总管内表面布3个面作采样点,采用RRK-SR-Ⅰ型定量采样机器采样;每点采样50cm2;采样条在采样前先110℃恒温干燥4h,然后放置硅胶干燥皿中冷冻2h后称重,计算3个采点积尘量均值。

1.4　检验项目　细菌总数、真菌总数、β-溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及嗜肺军团菌。

1.5　采样介质　普通营养琼脂培养基(北京陆桥技术有限公司生产),沙氏培养基(北京陆桥技术有限公司生产),血平板, GV PC琼脂(法国生物梅里埃有限公司),血清初筛试剂(OX-OID公司),血清分型试剂(日本生研试剂公司及法国生物梅里埃有限公司)。

1.6　检验方法
1.6.1　风管内表面细菌总数及霉菌总数检测　将对空调风管内表面进行涂抹采样的无菌棉拭子和空气积尘样品分别放入2 ml灭菌生理盐水中,震荡后各取1ml做细菌培养(37℃48h)、霉菌培养(28℃3d),计数菌落数。

1.6.2　军团菌检测　水样摇匀后静置15min,取450ml上层水用装有0.22μm孔径滤膜的过滤器过滤,然后取滤膜并剪碎与5ml原水样混合并震荡3～5min后作酸处理,取预处理后的水样0.1ml于G VPC琼脂平板中,用L棒推匀至干,置5% CO2培养箱中培养,挑选在G VPC平板上生长为白色、圆形稍凸、湿润光滑、挑起似牙膏状粘稠,新鲜长出的菌落边缘有紫色光泽,定为可疑菌落。

将可疑菌株分别接种于BCY E、无半胱氨酸BCY E及血平板中,放置5%CO
2
培养箱中37℃培养2d后观察结果。

凡在BCY E平板上生长,在无半胱氨酸BCYE平板上不生长者可初步判断为军团菌。

再进行血清学凝集试验、生化试验、军团菌属和种的特异基因PCR扩增。

1.6.3　β-溶血性链球菌　将用棉拭子采集的样品标本直接插入葡萄糖肉浸液中增菌培养24h,取一环增菌液涂布接种于血琼脂平板上,挑选可疑菌落进行革兰染色、触酶、溶血试验。

1.6.4　金黄色葡萄球菌　将用棉拭子采集的标本直接插入7.5%NaCl肉汤中增菌培养24h,取1环增菌液涂布接种于
Baird-Parker平板和血平板,37℃培养24h,挑取可疑菌落进行革兰染色,触酶及血浆凝固酶实验。

1.7　空调送风系统微生物检测　在选取的送风口下15～20 cm处采样,细菌总数用营养琼脂平皿;β-溶血性链球菌和金黄色葡萄球菌用血平皿,分别置于(36±1)℃恒温箱培养48h,挑取可疑菌落进行鉴定。

真菌总数用沙氏培养基,置于25℃～28℃恒温箱观察3d;观察结果。

2　结果
2.1　空调送风系统微生物检测结果　22家宾馆42套空调送风系统中,检测223份样本,细菌总数检出范围2～1705cfu m3,合格率94.2%;真菌总数检出范围15～788cfu m3,合格率为84.8%;1份β-溶血性链球菌阳性样本,合格率99.6%;2份金黄色葡萄球菌阳性样本,合格率99.1%。

见表1。

表1　42套空调系统空调送风微生物指标检测结果
检测项目份数
最大值
(cfu m3)
最小值
(cfu m3)
中位数
(cfu m3)
合格份数
(%)
细菌总数22317052121210(94.2)真菌总数22315788159189(84.8)β-溶血性链球菌223---222(99.6)金黄色葡萄球菌223---221(99.1)
注:经正态性检验,检测数据呈现非正态分布,故采用中位数表示数据的集中趋势
2.2　空调系统风管内表面微生物指标检测结果　风管内表面212份样品中,积尘量检出范围0.020～189.4g m2,合格率94.5%;细菌总数检出范围1～192cfu cm2,合格率95.8%;真菌总数检出范围1～776cfu cm2,合格率92.0%;β-溶血性链球菌1份阳性,合格率99.5%。

见表2。

表2　42套空调系统送风管内表面微生物指标检测结果
检测项目份数
最大值
(cfu cm2)
最小值
(cfu cm2)
中位数
(cfu cm2)
合格份数
(%)
积尘量223189.40.0201.75094.5
细菌总数212192121203(95.8)真菌总数212776140195(92.0)β-溶血性链球菌212---211(99.5)
注:经正态性检验,检测数据呈现非正态分布,故采用中位数表示数据的集中趋势。

积尘量计量单位为g m2。

2.3　冷却水、冷凝水嗜肺军团菌检测结果　75份冷却塔冷却水,嗜肺军团菌检出42份,检出率为56.0%;84份冷凝水,嗜肺军团菌检出3份,检出率为
3.6%;嗜肺军团菌总检出率为21.0%。

在检出嗜肺军团菌中,主要是Lp3+型嗜肺军团菌,占65.22%,其次是L p1+和Lp5+型嗜肺军团菌,分别占3
4.78%和1.74%。

3　讨论
20世纪70年代后,高层建筑蜂拥而起,它们均通过中央空调来调节室内的空气环境。

集中空调大多在封闭半封闭的空间使用,由于节能等诸种因素,室内70%～80%空气循环利用,空气的清洁度主要依靠空调本身的过滤和定时输送适量新风维持,生长在空调系统风道中的各种有害微生物容易随着空调风吹送到各个房间,使集中空调系统成为污染物传播和扩散的媒介[4]。

报道显示:空调冷却塔、冷凝水已成为军团病暴发的污染源之一[5,6]。

如果不对冷却塔系统进行及时和定期的清洗和消毒,军团菌会在冷却塔中生长和繁殖,并随着送风系统进入房间,对人们的健康产生极大的潜在危害[7]。

本次调查结果显示,空调送风细菌总数、真菌总数合格率分别为94.2%、84.8%,溶血性链球菌与金葡菌合格率分别为99.6%、99.1%;送风管内表面细菌总数、真菌总数合格率分别为95.8%、92.0%,溶血性链球菌合格率为99.5%;冷却水、冷凝水嗜肺军团菌检出率分别为56.0%、3.6%,微生物污染严重,其造成的室内空气污染问题和可能产生的健康危害应该引起管理部门的高度重视。

[参考文献]
[1]何晖,黎淑端,粱晓芸,等.广州市部分公共场所集中空调通风系统
卫生现况调查[J].疾病预防控制,2008,8(4):386-387.
[2]陈悦,林海江,衰东.上海市部分空调系统微生物污染状况的初步调
查[J].环境与职业医学,2004,21(3):214-217.
[3]祝学礼,刘颖,尚琪,等.空调对室内环境质量与健康的影响[J].卫
生研究,2001,30(1):62-63.
[4]张素敏.商场空气污染对从业人员健康的影响[J].实用预防医学,
2002,9(3):245-246.
[5]Greig JE,Carnie JA,Tallis GF,et al.An outbreak of Legionnaires′dis-
ease at the M elbourne aquarium,April2000:investigation and case-control studies[J].M ed JAust,2004,180(11):566-572.
[6]Brown C M,NuortiPJ,BreimanRF,et al.A comm unity outbreak of Le-
gionnaires′disease linked to hospital cooling towers:an epidemiological m ethod to calculate dose of expos u re[J].Int J Epide-miology,1999, 28(2):353-395.
[7]张志昕,段莉莉,周凤岩.吉林市部分公共场所集中空调通风系统微
生物污染状况调查[J].中国卫生工程学,2007,6(5):293.
(收稿日期:2010-06-16)。