215501265_肉苁蓉及其有效成分调节抗生素所致小鼠肠道菌群失调

肉苁蓉及其有效成分调节抗生素所致小鼠肠道菌群失调
韩天雨，杨　栋，周树青，乔亚梅，尹　静，金　敏，李君文△
（军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所，天津３０００５０）
【摘要】　目的：研究肉苁蓉及其有效成分肉苁蓉多糖和松果菊苷对抗生素相关性腹泻（ＡＡＤ）小鼠肠道菌群的影响。

方法：４
８只Ｂａｌｂ／ｃ小鼠随机分为对照（ＣＯＮ）组、ＡＡＤ组、菊粉（ＩＮＵ）组、肉苁蓉（ＲＣＲ）组、肉苁蓉多糖（ＲＣＲＤＴ）组和松果菊苷（ＥＣＨ）组，每组８只，连续７ｄ灌胃盐酸林可霉（３ｇ／ｋｇ）造小鼠腹泻模型，随后灌胃ＩＮＵ（５ｇ／ｋｇ）、ＲＣＲ（５ｇ／ｋｇ）、ＲＣＲＤＴ（２００ｍｇ／ｋｇ）和ＥＣＨ（６０ｍｇ／ｋｇ）各０．２ｍｌ，１次／日，治疗７ｄ，ＣＯＮ组和ＡＡＤ组小鼠灌胃同体积的生理盐水。

通过观察小鼠一般体征、结肠ＨＥ染色、６ＳｒＤＮＡ高通量测序分析，综合评价肉苁蓉及其有效成分肉苁蓉多糖和松果菊苷对抗生素所致小鼠肠道菌群失调的作用。

结果：与ＣＯＮ组相比，ＡＡＤ组小鼠体重减轻，出现明显腹泻症状，结肠组织出现炎性改变，肠道菌群多样性降低（Ｐ＜０．０５），说明造模成功。

与ＡＡＤ组相比，ＩＮＵ组、ＲＣＲ组、ＲＣＲＤＴ组和ＥＣＨ组小鼠体重恢复，腹泻症状明显改善；ＥＣＨ组小鼠结肠病理恢复至正常水平；与ＡＡＤ组相比，ＲＣＲ组、ＲＣＲＤＴ组和ＥＣＨ组小鼠肠道厚壁菌门含量明显减少，Ｂｌａｕｔｉａ和Ｌａｃｈｎｏｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ含量增加，Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ＿ｓｅｎｓｕ＿ｓｔｒｉｃｔｏ＿１含量减少（Ｐ＜０．０５），此外，ＥＣＨ组小鼠肠道菌群丰度和多样性恢复至正常水平，肠道菌群结构得到良性调整，拟杆菌属、Ｆｌａｖｏｎｉｆｒａｃｔｏｒ、Ａｇａｔｈｏｂａｃｔｅｒ、Ｌａｃｈｎｏｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ９等含量增加（Ｐ＜０．０１）。

结论：肉苁蓉及其有效成分肉苁蓉多糖和松果菊苷均可以调节抗生素所致肠道菌群失调，改善ＡＡＤ症状，其中松果菊苷的作用更明显。

【关键词】　肉苁蓉；肉苁蓉多糖；松果菊苷；抗生素相关性腹泻；肠道菌群；小鼠
【中图分类号】Ｒ３３２ 【文献标识码】Ａ 【文章编号】１０００ ６８３４（２０２２）０６ ７６６ ００６【ＤＯＩ】１０．１２０４７／ｊ．ｃｊａｐ．６３８１．２０２２．１３９
ＲｅｇｕｌａｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｏｆａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆＣｉｓｔａｎｃｈｅｄｅｓｅｒｔｉｃｏｌａｏｎ
ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｄｙｓｂａｃｔｅｒｉｏｓｉｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓｉｎｍｉｃｅ
ＨＡＮＴｉａｎ ｙｕ，ＹＡＮＧＤｏｎｇ，ＺＨＯＵＳｈｕ ｑｉｎｇ，ＱＩＡＯＹａ ｍｅｉ，ＹＩＮＪｉｎｇ，ＪＩＮＭｉｎ，ＬＩＪｕｎ ｗｅｎ
△
（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌａｎｄＯｐｅｒａｔｉｏｎａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｉｌｉｔａｒｙＳｃｉｅｎｃｅｓ，
Ｔｉａｎｊｉｎ３０００５０，Ｃｈｉｎａ）
【ＡＢＳＴＲＡＣＴ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆＣｉｓｔａｎｃｈｅｄｅｓｅｒｔｉｃｏｌａａｎｄｉｔｓａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓＣｉｓｔａｎｃｈｅｄｅｓｅｒｔｉｃｏｌａｐｏｌｙｓａｃｃｈａ ｒｉｄｅａｎｄＥｃｈｉｎａｃｏｓｉｄｅｏｎｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｆｌｏｒａｏｆａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｄｉａｒｒｈｅａ（ＡＡＤ）ｍｉｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｆｏｒｔｙ ｅｉｇｈｔＢａｌｂ／ｃｍｉｃｅｗｅｒｅｒａｎ ｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｃｏｎｔｒｏｌ（Ｃｏｎ）ｇｒｏｕｐ，ＡＡＤＧｒｏｕｐ，ｉｎｕｌｉｎ（Ｉｎｕ）ｇｒｏｕｐ，Ｃｉｓｔａｎｃｈｅｄｅｓｅｒｔｉｃｏｌａ（ＲＣＲ）ｇｒｏｕｐ，Ｃｉｓｔａｎｃｈｅｄｅｓｅｒｔｉｃｏｌａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ（ＲＣＲＤＴ）ｇｒｏｕｐａｎｄＥｃｈｉｎａｃｏｓｉｄｅ（Ｅｃｈ）ｇｒｏｕｐｗｉｔｈ８ｍｉｃｅｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅｄｉａｒｒｈｅａｍｏｄｅｌｏｆｍｉｃｅｗａｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆｌｉｎｃｏｍｙｃｉｎｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（３ｇ／ｋｇ）ｆｏｒ７ｄａｙｓ，ａｎｄｔｈｅｎｔｒｅａｔｅｄｂｙｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆＩＮＵ（５ｇ／ｋｇ），ＲＣＲ（５ｇ／ｋｇ），ＲＣＲＤＴ（２００ｍｇ／ｋｇ）ａｎｄＥＣＨ（６０ｍｇ／ｋｇ），０．２ｍｌｏｎｃｅａｄａｙｆｏｒ７ｄａｙｓ，ＣｏｎｇｒｏｕｐａｎｄＡＡＤｇｒｏｕｐｗｅｒｅｇｉｖ ｅｎｔｈｅｓａｍｅｖｏｌｕｍｅｏｆｎｏｒｍａｌｓａｌｉｎｅ．Ｂｙｏｂｓｅｒｖｉｎｇｇｅｎｅｒａｌｓｉｇｎｓｏｆｍｉｃｅ，ｃｏｌｏｎＨＥｓｔａｉｎｉｎｇ，１６ＳｒＤＮＡｈｉｇｈ ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇａ ｎａｌｙｓｉｓ，ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆＣｉｓｔａｎｃｈｅｄｅｓｅｒｔｉｃｏｌａ，ＣｉｓｔａｎｃｈｅｄｅｓｅｒｔｉｃｏｌａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅａｎｄＥｃｈｉｎａｃｅａｇｌｙｃｏｓｉｄｅｏｎｔｈｅｉｍｂａｌａｎｃｅｏｆｉｎｔｅｓｔｉ ｎａｌｆｌｏｒａｉｎｄｕｃｅｄｂｙａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓｉｎｍｉｃｅｗｅｒｅｅｖａｌｕａｔｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ＣｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＣｏｎｇｒｏｕｐ，ＡＡＤｇｒｏｕｐｍｉｃｅｌｏｓｔｗｅｉｇｈｔ，ｐｒｅｓｅｎｔｅｄｏｂｖｉｏｕｓｄｉａｒｒｈｅａｓｙｍｐｔｏｍｓ，ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｃｈａｎｇｅｓｉｎｃｏｌｏｎｔｉｓｓｕｅａｎｄｄｅｃｒｅａｓｅｄｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｆｌｏｒａｄｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｐ＜０．０５）ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇｔｈｅｓｕｃ ｃｅｓｓｏｆｔｈｅｍｏｄｅｌ．ＣｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＡＡＤｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｗｅｉｇｈｔａｎｄｄｉａｒｒｈｅａｏｆＩＮＵ，ＲＣＲ，ＲＣＲＤＴａｎｄＥＣＨｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｍ ｐｒｏｖｅｄ，ａｎｄｔｈｅｃｏｌｏｎｐａｔｈｏｌｏｇｙｏｆＥＣＨｇｒｏｕｐｗａｓｒｅｓｔｏｒｅｄｔｏｎｏｒｍａｌｌｅｖｅｌ．ＣｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＡＡＤｇｒｏｕｐ，ＲＣＲｇｒｏｕｐ，ＲＣＲＤＴｇｒｏｕｐａｎｄＥＣＨｇｒｏｕｐｈａｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄｉｎｔｅｓｔｉｎａｌＦｉｒｍｉｃｕｔｅｓ，ｉｎｃｒｅａｓｅｄＢｌａｕｔｉａａｎｄＬａｃｈｎｏｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ，ａｎｄｄｅｃｒｅａｓｅｄＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ＿ｓｅｎｓｕ＿ｓｔｒｉｃｔｏ＿１（Ｐ＜０．０５）．ＩｎＥＣＨｇｒｏｕｐ，ｔｈｅａｂｕｎｄａｎｃｅａｎｄｄｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｍｉｃｒｏｆｌｏｒａｗｅｒｅｒｅｔｕｒｎｅｄｔｏｎｏｒｍａｌｌｅｖｅｌ，ａｎｄｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｍｉｃｒｏｆｌｏｒａｗａｓｗｅｌｌａｄｊｕｓｔｅｄ，ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ，Ｆｌａｖｏｎｉｆｒａｃｔｏｒ，Ａｇａｔｈｏｂａｃｔｅｒ，ＬａｃｈｎｏｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍａｎｄＰｒｅｖｏｔｅｌｌａ ９ｗｅｒｅｉｎｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＢｏｔｈＣｉｓｔａｎｃｈｅｄｅｓｅｒｔｉｃｏｌａａｎｄｉｔｓａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｃｉｓｔａｎｃｈｅｄｅｓｅｒｔｉｃｏｌａｐｏｌｙ ｓａｃｃｈａｒｉｄｅａｎｄｅｃｈｉｎａｃｏｓｉｄｅｃａｎｒｅｇｕｌａｔｅｔｈｅｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｆｌｏｒａｉｍｂａｌａｎｃｅｃａｕｓｅｄｂｙａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓａｎｄｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｓｙｍｐｔｏｍｓｏｆＡＡＤ，ｅｓｐｅ ｃｉａｌｌｙｅｃｈｉｎａｃｏｓｉｄｅ．
【ＫＥＹＷＯＲＤＳ】　Ｃｉｓｔａｎｃｈｅｄｅｓｅｒｔｉｃｏｌａ；　Ｃｉｓｔａｎｃｈｅｄｅｓｅｒｔｉｃｏｌａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；　Ｅｃｈｉｎａｃｏｓｉｄｅ；　ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｄｉａｒｒｈｅａ；　ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｆｌｏｒａ
；　ｍｉｃｅ６６７ＣｈｉｎＪＡｐｐｌＰｈｙｓｉｏｌ，２０２２，３８（６）
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【基金项目】国家自然科学基金重点项目（４１８３１２８７）
【收稿日期】２０２２ １１ ０１【修回日期】２０２２ １１ ２７
　△【通讯作者】Ｔｅｌ：１３１１６１４６３７３；Ｅ ｍａｉｌ：ｊｕｎｗｅｎ９９９９＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ
抗生素相关性腹泻（ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｄｉａｒ ｒｈｅａ，ＡＡＤ）是指伴随着抗生素的使用而发生且无法用其他原因解释的腹泻，严重者可引起艰难梭菌感
染，继而引发伪膜性肠炎，甚至危及生命［１］。

近年
来，由于大量广谱抗生素的使用，ＡＡＤ的发生率呈逐渐上升趋势，且艰难梭菌感染已成为全球性公共
卫生问题，发病人群也呈现年轻化趋势［２］。

此外，
抗生素所致肠道菌群失调与多种疾病密切相关，如
焦虑、结肠癌、糖尿病等［３］，亟需寻找有效的治疗。

目前，针对抗生素相关性腹泻的治疗主要包括益生菌疗法和粪菌移植疗法等，其生物学机制、有效性和
安全性仍需进一步深入研究［
４，５］。

中药不仅来源广、活性成分丰富，还不易产生耐药性，但其治疗腹泻的药理机制不明确。

肉苁蓉（ＣｉｓｔａｎｃｈｅｓＨｅｒｂａ）始载于《神农本草经》，性温，味甘、咸，归肾、大肠经，具有补肾壮阳，润肠通便的功效，其主要有效成分包括苯乙醇苷类（主要包括松果菊苷和毛蕊花糖苷）、多糖类（如肉苁蓉多糖）、环烯醚萜类等，具有调节肠道菌群、调
节免疫活性抗衰老等诸多药理作用［６］。

目前关于
肉苁蓉有效成分治疗ＡＡＤ的研究较少，且药理机制尚不明确，因此本研究选择肉苁蓉及其有效成分肉苁蓉多糖和松果菊苷作为研究对象，以ＡＡＤ模型小鼠进行中药治疗，观察小鼠的腹泻症状、结肠病理改变情况以及肠道菌群变化，初步探讨肉苁蓉有效成分对抗生素所致肠道菌群失调的调节作用，以期为肉苁蓉治疗ＡＡＤ的临床合理应用提供参考。

１　材料与方法
１．１　实验动物
４８只ＳＰＦ级６周龄Ｂａｌｂ／ｃ雄性小鼠，体质量（２０±２）ｇ，购自北京维通利华公司［生产许可证号为ＳＣＸＫ（京） ２０１６ ０００６］。

动物饲养于清洁级实验动物房中，１２ｈ昼夜交替，室内温度２０～２４℃，相对湿度５０％～６０％。

动物饲养使用标准鼠饲料和水，所有动物均严格按照动物伦理程序和规范处理（伦理批号：ＩＡＣＵＣｏｆＡＭＭＡ ０４ ２０２１ ０３４）。

１．２　试剂
盐酸林可霉素（北京索莱宝科技有限公司，货号：Ｌ８３９０）；菊粉（上海生物工程股份有限公司，货号：Ａ６０２２２７）；肉苁蓉（北京同仁堂，生产厂商为北
京美康堂医药科技有限公司）；肉苁蓉多糖标准品（上海源叶生物公司，货号：Ｂ２６８９６）；肉苁蓉松果菊苷标准品（成都瑞芬思生物公司，货号：８２８５４ ３７ ３）；４％组织细胞固定液（北京索莱宝科技有限公司，货号：Ｐ１１１０）；天根磁珠法提取试剂盒（Ｑｉａｇｅｎ，Ｖａｌｅｎｃｉａ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，ＵＳＡ）；ＤＮＡ纯化回收试剂盒（ＴｉａｎＧｅｎ，Ｃｈｉｎａ，货号：ＤＰ２１４）。

１．３　仪器
电子分析天平（梅特勒 托利多仪器公司）；超低温冰箱（Ｔｈｅｒｍｏ，ＵＳＡ）；恒温水浴锅（天津市华仪鑫达仪器仪表有限公司）；微型漩涡混合仪ＸＭ ８０Ａ（上海沪西分析仪器厂）；正置白光拍照显微镜（日本尼康公司）；Ｂｉｏ ｒａｄＴ１００梯度ＰＣＲ仪（ＢＩＯ ＲＡＤ，ＵＳＡ）；ＵＩｌｌｕｍｉｎａＭｉＳｅｑ平台（Ｉｌｌｕｍｉｎａ，ＵＳＡ）。

１．４　实验药物制备
肉苁蓉水煎液的制备［７］
：称取肉苁蓉１００ｇ，加
４倍量冷水浸泡３０ｍｉｎ，煎煮３０ｍｉｎ，过滤，再加２倍量水煎煮２０ｍｉｎ，过滤，合并滤液。

浓缩滤液至２００ｍｌ，肉苁蓉生药含量０．５ｇ／ｍｌ，密封，于４℃冰箱保存备用。

１．５　动物分组与模型制备
小鼠适应性饲养１周后，按照数字表法随机分为６组，分别为对照（ＣＯＮ）组、ＡＡＤ组、菊粉（ＩＮＵ）组、肉苁蓉（ＲＣＲ）组、肉苁蓉多糖（ＲＣＲＤＴ）组、松果菊苷（ＥＣＨ）组，每组８只小鼠。

造模小鼠每天灌胃
盐酸林可霉素３ｇ／ｋｇ［８］
，连续给药７ｄ；ＣＯＮ组小鼠
灌胃同体积的生理盐水。

１．６　给药方案
菊粉（５ｇ／ｋｇ）［９］
、肉苁蓉（５ｇ／ｋｇ）、肉苁蓉多糖（２００ｍｇ／ｋｇ）和松果菊苷（６０ｍｇ／ｋｇ）［１０］
，灌胃０．２
ｍｌ，１次／日，连续治疗７ｄ。

由于菊粉是有效调节肠道菌群的益生元，因此本研究选择菊粉作为阳性对
照［９］。

ＣＯＮ组和ＡＡＤ组小鼠灌胃同体积的生理盐
水。

１．７　一般情况观察
每天观察小鼠精神饮食状态、活动度、体质量、粪便状况及尾部肛口干净程度等，重点记录小鼠体质量、２ｈ粪便量及粪便的变化情况，并分析各组腹泻的严重程度。

１．８　结肠组织病理观察
取各组小鼠距肛门１ｃｍ处的结肠组织置于４％的多聚甲醛中固定，进行石蜡包埋、切片，并用苏木素 伊红（ＨＥ）染色，在显微镜下观察切片。

１．９　菌群分析
药物治疗７ｄ后，无菌条件下，处死小鼠并采集
７
６７中国应用生理学杂志，２０２２，３８（６）Copyright ©博看网. All Rights Reserved.
小鼠结肠内容物，液氮速冻后置于干冰中寄送至北京诺禾致源科技股份有限公司（Ｎｏｖｏｇｅｎｅ）进行１６ＳｒＤＮＡ测序。

所用测序平台为Ｉｌｌｕｍｉｎａ平台，仪器为ＮｏｖａＳｅｑ６０００。

通过ＰＣＲ扩增１６ＳｒＤＮＡ基因的Ｖ３ Ｖ４区域。

初始Ｄ
ＮＡ片段用Ｆｌａｓｈ软件进行读取，使用Ｑ
ＩＩＭ软件对拼接数据进行质量控制，合格后，使用ＮｏｖａＳｅｑ６０００进行上机测序得到原始数据（ｒａｗｄａｔａ），对其进行拼接、过滤，得到有效数据（ｃｌｅａｎｄａｔａ）；然后以９７％的一致性（ｉｄｅｎｔｉｔｙ）进行ＯＴＵ（ｏｐｅｒａｔｉｏｎａｌｔａｘｏｎｏｍｉｃｕｎｉｔｓ）聚类和物种分类分
析［１１］。

１．１０　统计学处理
计量资料用均数±标准差（珋ｘ±ｓ）进行统计描述，数据使用ＳＰＳＳ２５．０统计软件进行分析，组间比较采用单因素方差分析，组间的两两比较用Ｌ
ＳＤ法。

２　结果
２．１　一般体征
灌胃盐酸林可霉素７ｄ后，小鼠开始出现不同程度的腹泻，表现为精神萎靡、２ｈ排便量增加和排便次数增加等症状，严重者可见肛门处有粪便黏附（图１
）。

造模结束后，与ＣＯＮ组相比，ＡＡＤ组小鼠体重明显减轻（Ｐ＜０．０５），且２ｈ粪便量明显增加（Ｐ＜０．０１），说明出现明显腹泻症状，造模成功。

治疗７ｄ后，与ＡＡＤ组对比，ＩＮＵ组、ＲＣＲ组、ＲＣＲＤＴ组和ＥＣＨ组小鼠体重明显增加（Ｐ＜０．０５），２ｈ粪便量明显减少（Ｐ＜０．０５），说明菊粉、肉苁蓉、肉苁蓉多糖和松果菊苷均可以有效改善ＡＡＤ
症状。

Ｆｉｇ．１　ＢｏｄｙｗｅｉｇｈｔｃｕｒｖｅｏｆｍｉｃｅａｎｄＦｅｃａｌｖｏｌｕｍｅｏｆｍｉｃｅｉｎ
２ｈｏｕｒｓ（ｎ＝８）
Ｐ＜０．０５，
Ｐ＜０．０１ｖｓＣＯＮ；＃Ｐ＜０．０５，＃＃Ｐ＜０．０１ｖｓ
ＡＡＤ
２．２　结肠组织形态学变化
中药治疗７ｄ后，ＣＯＮ组小鼠结肠皱襞结构清晰，粘膜层肠上皮结构完整，上皮细胞形态结构正常，固有层肠腺数量丰富，未见明显病变；与ＣＯＮ组相比，ＡＡＤ组浆膜层、粘膜层及绒毛结构完整但排列稀疏，浆膜层毛细血管增生，绒毛破损明显且排列无序，上皮细胞有坏死脱落（黄色箭头），粘膜层有
明显炎症细胞浸润（红色箭头）；ＩＮＵ组、ＲＣＲ组、ＲＣＲＤＴ组小鼠浆膜层、粘膜层及绒毛结构完整，绒毛长度正常分布均匀，粘膜层有较明显炎症细胞浸润（红色箭头）；ＥＣＨ组小鼠浆膜层、粘膜层及绒毛结构完好，细胞排列整齐，结构紧密，绒毛分布及长度正常，未见明显炎性细胞浸润，基本恢复至正常水平（图２）。

Ｆｉｇ．２　ＨＥｓｔａｉｎｉｎｇｏｆｍｏｕｓｅｃｏｌｏｎｔｉｓｓｕｅｓ（ｎ＝８
）２．３　肠道菌群Ａｌｐｈａ（α
）多样性分析α多样性主要评价肠道菌群丰富度和多样性。

本研究采用花瓣图、Ｓｉｍｐｓｏｎ指数、Ｓｈａｎｎｏｎ指数综合评价各组肠道菌群丰富度和多样性。

５组小鼠肠道菌群共有的ＯＴＵｓ数量为６８，ＣＯＮ组、ＡＡＤ组、ＩＮＵ组、ＲＣＲ组、ＲＣＲＤＴ组和ＥＣＨ组独有的ＯＴＵｓ数目分别为１５９、２０、１４、１１７、２０８、３２２，说明给药治疗后，
ＲＣＲ组、ＲＣＲＤＴ组和ＥＣＨ组丰度较ＡＡＤ组均有所增加（Ｐ＜０．０５），ＩＮＵ组却明显减少（图３Ａ）。

与ＣＯＮ组相比，ＡＡＤ组、ＩＮＵ组、ＲＣＲ组和ＲＣＲＤＴ组小鼠肠道菌群Ｓｉｍｐｓｏｎ指数、Ｓｈａｎｎｏｎ指数显著降低（
Ｐ＜０．０５），ＥＣＨ组的Ｓｈａｎｎｏｎ指数和Ｓｉｍｐｓｏｎ指数较ＡＡＤ组显著增加（Ｐ＜０．０５）。

综上所述，造模后，ＡＡＤ组小鼠肠道菌群丰度和多样性均有所减少，ＲＣＲ、ＲＣＲＤＴ和ＥＣＨ治疗后，小鼠肠道菌群丰度和多样性均有恢复，其中ＥＣＨ治疗效果最好（图３Ｂ Ｃ）。

Ｆｉｇ．３　Ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅａｌｐｈａｄｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆｍｏｕｓｅｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｆｌｏｒａ
（ｎ＝４）
Ａ：Ｆｌｏｗｅｒｆｉｇｕｒｅ；Ｂ：Ｓｈａｎｎｏｎ；Ｃ：Ｓｉｍｐｓｏｎ
Ｐ＜０．０５ｖｓＣＯＮ；＃Ｐ＜０．０５ｖｓＡＡＤ
２．４　肠道菌群Ｂｅｔａ（β
）多样性分析β多样性分析包括Ｐ
ＣｏＡ分析和ＬＥｆＳｅ分析等，主要研究样本群落组成的相似性或差异性。

与ＣＯＮ组相比，ＡＡＤ组小鼠肠道菌群的样本距离较远，表示两组物种组成差异较大，治疗７ｄ后，与ＡＡＤ组相比，ＩＮＵ组、ＲＣＲ组、ＲＣＲＤＴ组和ＥＣＨ组小鼠肠道菌群的样本距离较近，说明治疗后各组物
８６７ＣｈｉｎＪＡｐｐｌＰｈｙｓｉｏｌ，２０２２，３８（６）
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种组成较相似（图４）。

ＬＥｆＳｅ分析可以检测到各组小鼠肠道有显著差异的菌群。

ＬＤＡｓｃｏｒｅ大于设定值（默认设置为３．５）的物种，可以看出肉苁蓉及肉苁蓉有效成分组肠道菌群丰度增加，存在较多明显差异Ｂｉｏｍａｒｋｅｒ，ＩＮＵ组没有差异Ｂｉｏｍａｒｋｅｒ。

其中ＣＯＮ组发现４２个分类群，包括Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ、Ａｃｔｉ ｎｏｂａｃｔｅｒｉａ和Ｄｅｓｕｌｆｏｂａｃｔｅｒｏｔａ，Ｌａｃｈｎｏｓｐｉｒａｃｅａｅ＿ＮＫ４Ａ１３６＿ｇｒｏｕｐ、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ、Ｐａｒａｓｕｔｔｅｒｅｌｌａ、Ｌｉｇｉｌａｃｔｏｂａ ｃｉｌｌｕｓ等；ＡＡＤ组发现１１个分类群，包括Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ，Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａ，Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ＿ｓｅｎｓｕ＿ｓｔｒｉｃｔｏ＿１、Ｒｏｍｂｏｕｔｓｉａ等；ＲＣＲ组发现１７个分类群，包括Ａｃｉｄｉｂａｃｔｅｒ、Ｂｌａｕｔｉａ等；ＲＣＲＤＴ组发现９个分类群，包括Ｐｒｏｔｅｏｂａｃｔｅｒｉａ，Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ Ｓｈｉｇｅｌｌａ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ等；ＥＣＨ组发现２２个分类群，包括Ｃｙａｎｏｂａｃｔｅｒｉａ，Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｆｌａｖｏｎｉ ｆｒａｃｔｏｒ、Ａｇａｔｈｏｂａｃｔｅｒ、Ｌａｃｈｎｏｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ９等。

由此可见，治疗７ｄ后，肉苁蓉及其提取物组均可调节ＡＡＤ小鼠肠道菌群结构（图４）。

Ｆｉｇ．４　Ｐｒｉｎｃｉｐａｌｃｏ ｏｒｄｉｎａｔｅｓａｎａｌｙｓｉｓａｎｄＬＤＡｅｆｆｅｃｔｓｉｚｅ（ｎ＝４）
２．５　肠道菌群构成分析
门水平上，Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ和Ｐｒｏｔｅｏｂａｃ ｔｅｒｉａ为优势物种（图５Ａ）。

与ＣＯＮ组小鼠相比，ＡＡＤ组小鼠Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ和Ｄｅｓｕｌｆｏｂａｃｔｅｒｏｔａ明显减少（Ｐ＜０．０１），Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ明显增加（Ｐ＜０．０１）。

给药治疗之后，ＩＮＵ组、ＲＣＲ组、ＲＣＲＤＴ组和ＥＣＨ组小鼠肠道菌群Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ含量明显减少（Ｐ＜０．０１），ＩＮＵ组、ＲＣＲ组和ＲＣＲＤＴ组Ｐｒｏｔｅｏｂａｃｔｅｒｉａ含量有所增加（Ｐ＜０．０５，图５Ｂ）。

Ｆｉｇ．５　Ｐｈｙｌｕｍｌｅｖｅｌｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｆｌｏｒａａｂｕｎｄａｎｃｅ（ｎ＝４） Ｐ＜０．０５ｖｓＣＯＮ；＃Ｐ＜０．０５ｖｓＡＡＤ
属水平，选取各组小鼠肠道菌群丰度排名前４０的属，红色代表增加，蓝色代表减少，利用Ｍｅｔａｓｔａｔ分析各组间差异性菌属，与ＣＯＮ组对比，ＡＡＤ组小鼠肠道菌群整体减少，其中显著增加３个菌属的含量，分别是：Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ＿ｓｅｎｓｕ＿ｓｔｒｉｃｔｏ＿１（Ｐ＜０．０１）、Ｒｏｍｂｏｕｔｓｉａ、Ｔｅｒｒｉｓｐｏｒｏｂａｃｔｅｒ（Ｐ＜０．０５），显著减少Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｃｏｌｉｄｅｘｔｒｉｂａｃｔｅｒ、Ｌａｃｈｎｏｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ、［Ｅｕ ｂａｃｔｅｒｉｕｍ］＿ｘｙｌａｎｏｐｈｉｌｕｍ＿ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０１），Ｌａｃｈｎｏｓｐｉ ｒａｃｅａｅ＿ＮＫ４Ａ１３６＿ｇｒｏｕｐ、Ａ２、Ｅｎｔｅｒｏｒｈａｂｄｕｓ、Ｌａｃｈｎｏｓｐｉ ｒａｃｅａｅ＿ＵＣＧ ００６、ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ＿Ｒｕｍｉｎｏｃｏｃｃａｃｅａｅ、ｕｎｉ ｄｅｎｔｉｆｉｅｄ＿Ｒｕｍｉｎｏｃｏｃｃａｃｅａｅ１、Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ＿Ｓａｃｃｈａｒｉ ｍｏｎａｓ、［Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ］＿ｓｉｒａｅｕｍ＿ｇｒｏｕｐ、［Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ］＿ｖｅｎｔｒｉｏｓｕｍ＿ｇｒｏｕｐ等菌属含量。

与ＡＡＤ组对比，ＩＮＵ组小鼠显著增加４个菌属含量：Ｒｏｂｉｎｓｏｎｉｅｌｌａ（Ｐ＜０．０１）、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｂｌａｕｔｉａ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ Ｓｈｉｇｅｌｌａ（Ｐ＜０．０５）；减少Ｃｏｌｉｄｅｘｔｒｉｂａｃｔｅｒ、Ｐａｒａｓｕｔｔｅｒｅｌｌａ、Ｅｎｔｅｒｏｒｈａｂｄｕｓ、Ｒｏｓｅｂｕｒｉａ、Ｌｉｇｉｌａｃｔｏｂａｃｉｌ ｌｕｓ、［Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ］＿ｘｙｌａｎｏｐｈｉｌｕｍ＿ｇｒｏｕｐ，Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ＿ｓｅｎｓｕ＿ｓｔｒｉｃｔｏ＿１、Ｌａｃｈｎｏｓｐｉｒａｃｅａｅ＿ＵＣＧ ００６（Ｐ＜０．０５）等菌属含量；ＲＣＲ组小鼠增加３个菌属：Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ Ｓｈｉｇｅｌｌａ、Ｌａｃｈｎｏｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ、Ｂｌａｕｔｉａ（Ｐ＜０．０５），减少２个菌属：Ｐａｒａｓｕｔｔｅｒｅｌｌａ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ＿ｓｅｎｓｕ＿ｓｔｒｉｃｔｏ＿１（Ｐ＜０．０１）；ＲＣＲＤＴ组丰度整体增加，其中显著增加６个菌属含量：Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ Ｓｈｉｇｅｌｌａ、Ｂｌａｕｔｉａ、Ｒｏｂｉｎｓｏｎｉｅｌｌａ（Ｐ＜０．０１），Ｌａｃｈｎｏｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｏｉｄｅｓ和Ｅｎｔｅｒｏ ｃｏｃｃｕｓ（Ｐ＜０．０５）；减少Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ＿ｓｅｎｓｕ＿ｓｔｒｉｃｔｏ＿１、Ｃｏｌｉｄｅｘｔｒｉｂａｃｔｅｒ、Ｅｎｔｅｒｏｒｈａｂｄｕｓ、Ｐａｒａｓｕｔｔｅｒｅｌｌａ、［Ｅｕｂａｃ ｔｅｒｉｕｍ］＿ｘｙｌａｎｏｐｈｉｌｕｍ＿ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０１）和Ｔｅｒｒｉｓ ｐｏｒｏｂａｃｔｅｒ（Ｐ＜０．０５）等菌属含量；ＥＣＨ组小鼠肠道菌群丰度整体增加，其中显著增加６个菌属含量：Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ、ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ＿Ｃｈｌｏｒｏｐｌａｓｔ、ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ＿Ｍｉ ｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ（Ｐ＜０．０１），Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ Ｓｈｉｇｅｌｌａ、Ｃｈｒｙｓｅｏｂａｃｔｅ ｒｉｕｍ、Ｂｌａｕｔｉａ和Ｃｈｒｙｓｅｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ（Ｐ＜０．０５）；减少３个菌属含量：Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ＿ｓｅｎｓｕ＿ｓｔｒｉｃｔｏ＿１（Ｐ＜０．０１），Ｔｅｒｒｉｓｐｏｒｏｂａｃｔｅｒ和Ｒｏｍｂｏｕｔｓｉａ（Ｐ＜０．０５，图６）。

３　讨论
目前认为，引起ＡＡＤ的主要原因是抗生素的使用破坏了宿主正常的肠道菌群，尽管抗生素相关腹泻短时间内得到了治疗，但其对肠道菌群以及代谢造成的影响持续存在［１２］。

临床上，青霉素类、头孢菌素类及林可霉素类是引起腹泻的常见药物［１］。

本研究采用盐酸林可霉素造ＡＡＤ模型原因如下：盐酸林可霉素是大环内酯类抗生素，其造模时间短、腹泻持续时间长且主要通过粪便排出，与肠道菌群充分接触。

本研究造模结束后，小鼠体重减轻，出现明显腹泻症状，结肠组织明显炎性改变，小鼠肠道
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中国应用生理学杂志，２０２２，３８（６）
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Ｆｉｇ．６　Ｈｅａｔｍａｐａｎｄｍｅｔａｓｔａｔａｎａｌｙｓｉｓｏｆｇｅｎｕｓｌｅｖｅｌｉｎｍｉｃｅ（ｎ＝４）
Ｐ＜０．０５， Ｐ＜０．０１ｖｓＣＯＮ；＃Ｐ＜０．０５，＃＃Ｐ＜０．０１ｖｓＡＡＤ
Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｌａｃｈｎｏｓｐｉｒａｃｅａｅ＿ＮＫ４Ａ１３６＿ｇｒｏｕｐ等益生菌含量减少，Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ＿ｓｅｎｓｕ＿ｓｔｒｉｃｔｏ＿１、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ Ｓｈｉｇｅｌｌａ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ等机会致病菌含量增加，与以往结果一致，表明ＡＡＤ模型构建成功［８］。

肉苁蓉可以调节肠道菌群失调，如何梦梦［１３］等研究发现肉苁蓉水提物具有一定的抗氧化能力及调节肠道菌群紊乱的作用等。

肉苁蓉多糖具有调节肠道菌群、调节免疫活性、改善学习记忆能力等诸多药理作用［１４］。

同时中药多糖可以有效干预肠道菌群治疗相关疾病，如李珊珊等［８］研究发现人参多糖可以改善抗生素相关性腹泻小鼠的肠道菌群。

张名伟［１５］等研究发现山药多糖及其肠道发酵产物通过与肠道菌群相互作用，改善菌群结构、增加短链脂肪酸生成而发挥抗炎作用等。

松果菊苷是肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物的主要成分，其含量最高可达３０％，主要药理作用是抗氧化、保护神经、保护肝脏、抗炎、抗肿瘤以及免疫调节等［１６］。

钱浩［１７］等研究发现松果菊苷的口服生物利用度较低，在与肠道菌群代谢物结合后更好的发挥作用。

李磊［１８］等研究发现松果菊苷可通过抑制ｍＴＯＲＳＴＡＴ３途径减轻ＬＰＳ诱导的大鼠肠道炎症反应和细胞凋亡，至于其是否能缓解抗生素相关性腹泻及其与肠道菌群相互作用的机制尚不明确。

本研究结果发现，肉苁蓉及其有效成分都可以有效调节抗生素导致的小鼠肠道菌群失调，效果优于菊粉，其中松果菊苷效果最好，可以增加Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｆｌａｖｏｎｉ ｆｒａｃｔｏｒ、Ａｇａｔｈｏｂａｃｔｅｒ、Ｌａｃｈｎｏｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ、Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ９等含量。

研究表明，Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ［１９］可以通过调节肠道短链脂肪酸代谢，保护宿主肠道屏障，具有改善肠道疾病，治疗肠道炎症、免疫功能障碍和代谢紊乱等作用［２０］，说明松果菊苷可能通过调整肠道菌群紊乱治疗ＡＡＤ。

不过，在肉苁蓉多糖治疗７ｄ后，虽然小鼠体重恢复，腹泻症状有所改善，Ｂｌａｕｔｉａ、Ｌａｃｈｎｏｃｌｏｓ ｔｒｉｄｉｕｍ含量增加，但同时也存在Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ Ｓｈｉｇｅｌ ｌａ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ等机会致病菌，分析原因可能是因为治疗时间短，肠道菌群还没有完全改善。

综上所述，肉苁蓉、肉苁蓉多糖和松果菊苷均可通过调节肠道微生物群，对肠道内的有益菌和致病菌进行良性调整，从而调节肠道菌群代谢产物，恢复结肠炎性改变改善小鼠腹泻症状，松果菊苷作用较明显。

下一步，我们将探究松果菊苷改善抗生素所致肠道菌群失调的主要机制，为临床治疗ＡＡＤ提供新的途径和选择。

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丹珍头痛胶囊对慢性偏头痛大鼠的干预作用
王瑞琼１，２，宁艳梅１，吴国泰１，２△
，杜丽东１，２，王志旺１
，２（１．甘肃中医药大学，兰州７３００００；２．甘肃省中药药理与毒理学重点实验室，兰州７３００００）
【摘要】　目的：探讨丹珍头痛胶囊对中枢敏感介导的慢性偏头痛大鼠的干预作用。

方法：将６０只ＳＤ大鼠随机分为正常组、模型组、盐酸氟桂利嗪组（ＦＮＺ）、丹珍头痛胶囊（ＤＺＴＴ）高、中、低剂量组（１．０、０．５、０．２５ｇ／ｋｇ）（ｎ＝１０）。

采用连续皮下注射硝酸甘油法制作慢性偏头痛大鼠模型，丹珍头痛胶囊给予大鼠灌胃治疗，每天１次，连续３５ｄ。

观测各组大鼠大体状态、耳红出现及消失时间、搔头次数、爬笼次数等疼痛行为学指标，测定眶周及足底的机械痛阈值，ＲＴ ＰＣＲ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ技术分别检测三叉神经脊束核尾侧（ＴＮＣ）组织中ＣＲＥＢ、ＥＲＫ的ｍＲＮＡ表达及ＣＲＥＢ、ｐＣＲＥＢ、ＥＲＫ、ｐＥＲＫ蛋白表达水平。

结果：与正常组比较，模型组大鼠行为学评分明显升高，眶周及足底机械痛阈值逐日下降，ＴＮＣ组织中ＣＲＥＢ、ＥＲＫ基因表达及ＣＲＥＢ、ｐＣＲＥＢ、ＥＲＫ、ｐＥＲＫ蛋白表达水平均显著升高（Ｐ＜０．０１）；与模型组比较，ＤＺＴＴ、ＦＮＺ组大鼠疼痛症状明显缓解，疼痛行为学评分显著降低而眶周及足底机械痛阈值显著升高，
ＴＮＣ组织中ＣＲＥＢ、ＥＲＫ基因表达及ＣＲＥＢ、ｐＣＲＥＢ、ＥＲＫ、ｐＥＲＫ蛋白表达水平均显著下降（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）；与ＦＮＺ组比较，在给药第３５日，ＤＺＴＴ高剂量组大鼠疼痛行为学评分、眶周及足底机械痛阈、ＴＮＣ组织中ＣＲＥＢｍＲＮＡ表达及ＥＲＫ、ｐＥＲＫ蛋白表达水平差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。

结论：ＤＺＴＴ对中枢敏感介导的慢性偏头痛具有一定的治疗作用，抑制ＣＲＥＢ、ＥＲＫ的激活和磷酸化是其可能机制之一。

【关键词】　丹珍头痛胶囊；慢性偏头痛；中枢敏化；环磷腺苷反应元件结合蛋白（ＣＲＥＢ）；细胞外信号调节激酶（ＥＲＫ）【
ＫＥＹＷＯＲＤＳ】　Ｄａｎｚｈｅｎｈｅａｄａｃｈｅｃａｐｓｕｌｅ（ＤＺＴＴ）；　ｃｈｒｏｎｉｃｍｉｇｒａｉｎｅ；　ｃｅｎｔｒａｌｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ；　ＣＲＥＢ；　ＥＲＫ【中图分类号】Ｒ２８５．５，Ｒ７４７．２ 【文献标识码】Ａ 【文章编号】１０００ ６８３４（２０２２）０６ ７７１ ００６【ＤＯＩ】１０．１２０４７／ｊ．ｃｊａｐ．６３２９．２０２２．１４０
【基金项目】甘肃省中药药理与毒理学重点实验室开放基金项
目（ＺＤＳＹＳ ＫＪ ２０１８ ００３）【收稿日期】２０２２ ０６ １４【修回日期】２０２２ １１ ２２　△【通讯作者】Ｔｅｌ：０９３１ ５１６１１７５；Ｅ ｍａｉｌ：ｗｇｔ＠ｇｓｚｙ．ｅｄｕ．ｃｎ
偏头痛是一种临床常见的神经系统疾病，具有单侧、发作性、中重度、搏动样头痛等特征。

根据发作频率将其分为慢性偏头痛（ｃｈｒｏｎｉｃｍｉｇｒａｉｎｅ，ＣＭ）和发作性偏头痛（ｅｐｉｄｅｍ
ｉｃｍｉｇｒａｉｎｅ，ＥＭ），而每年大约有２．５％～３．０％的ＥＭ患者转化为ＣＭ患者。

ＣＭ在临床上通常反复发作，难以治愈，具有较高的发病率和致残率，已被ＷＨＯ列为四大最严重的慢性
功能障碍性疾病之一［
１］。

中枢敏化为中枢神经系统内兴奋性和抑制性神经递质的不平衡而导致的疼痛神经元敏感性
增加［２］。

研究表明，中枢敏化是ＣＭ的重要发病机制之一，
不仅影响偏头痛的严重程度，而且促使发作性偏头痛向慢性
１
７７中国应用生理学杂志，２０２２，３８（６）Copyright ©博看网. All Rights Reserved.。