蝉花虫草居群遗传学研究
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ａ
ｏｆ Ｃ ｃｉｃａｄａｅ ｉｓ
ｃｉｃａｄａｅ（Ｍｉｑ．）Ｓａｍｓｏｎ，ｗｉｔｈ
ｗｉｄｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ｈｏｓｔ．
ＤＡＬＰ（Ｄｉｒｅｃｔ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ
ｏｆ ｌｅｎｇｔｈ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ）Ｗａｓ ａｐｐｌｉｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ＤＮＡ ｃｉｃａｄａｅ，ｆｉｖｅ ｐｒｉｍｅｒ
ｒｅｃｅｎｔ ｙｅａｒｓ，ａｎｄ
ｎｏｗ ｔｈｉｓ
ｆｕｎｇａｌ
ｒｅｓｏｕｒｃｅ
ｉｓ ｉｎ
ｅｎｄａｎｇｅｒｉｎｇ．Ｉｎ
ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｂｅｔｔｅｒ
ｃｏｎｓｅｒｖｉｎｇ
ａｎｄ
ｓｕｓｔａｉｎａｂｌｅ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｒｅｓｏｕｒｃｅ，ｉｔｓ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ
关键词：蝉花虫草；居群；ＤＡＬＰ；虫草多糖；虫草酸；
Ａｂｓｔｒａｃｔ
Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｃｉｃａｄａｅ
Ｘ．Ｑ．Ｓｈｉｎｇ
ｉｓ
ａ
ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｉｎ Ｃｈｉｎａ，ｂｅｉｎｇ ｓｉｍｉｌａｒ ｉｔｓ ｐｒｉｃｅ ｉｓ ｏｎｌｙ
ｏｎｅ
ａｃｔｉｖｅ ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ ｔｏ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ
摘要
摘要
蝉花虫草Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ
ｃｉｃａｄａｅ
Ｘ．Ｑ．Ｓｈｉｎｇ是一种传统药用真菌，与冬虫夏草
Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｂｅｒｋ．）Ｓａｔｅ．含有相似的活性成分，其价格仅为冬虫夏草的ｌ～２％，
因而被用作冬虫夏草的代用品。近年，由于虫草需求量大增，导致冬虫夏草价格 直线上升，进而推动了对蝉花虫草的需求，加之生态环境破坏，使得蝉花虫草资
ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｂｅｒｋ．）Ｓａｃｃ．，ｂｕｔ
ａｓ ａ
ｔｏ ｔｗｏ
ｐｅｒｃｅｎｔ ｏｆ ｃ．ｓｉｎｅｎｓｉｓ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｉｔ ｉｓ ｕｓｅｄ
ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ ｃ．ｓｉｎｅｎｓｉｓ．ｂｅｃａｕｓｅ ｔｈｅ
ｄｅｍａｎｄ ｏｆ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｓｔｒａｉｇｈｔｌｙ ｔｈｅｓｅ ｒｅｃｅｎｔ ｔｗｅｎｔｙ ｙｅａｒｓ，ａｎｄ ｔｈｅ
位点，其中多态位点１７９个，多态位点百分比ＰＰＢ为８７．７５％。物种水平，平均观
察等位基因数（胁）是１．８７７５，平均有效等位基因数（肫）是１．３５７２、平均遗传
多样性指数（日）是０．２２０８，Ｓｈａｎｎｏｎ，Ｓ多样性指数（，）是Ｏ．３４６２；居群水平， Ｎａ、Ｎｅ、日与Ｊ分别是１．３８１０、１．１９６７、０．１ １７８与０．１８０２。基因分化系数Ｇｓｔ为 ０．４７３７。基因分化系数Ｇｓｔ表明蝉花虫草在物种水平有５２．６３％的遗传变异来自居 群内，４７．３７％的遗传变异来自居群间。 子座部分多态位点百分比ＰＰＢ为８５．２９％，物种水平，Ｎａ、Ｎｅ、Ｈ、１分 别为１．８５２９、１．３７４５、０．２２７０和０．３５２２；居群水平，Ｎａ、Ｎｅ、日、１分别为１．４０９０、 １．２４４８、０．１４４１、０．２１６３。Ｇｓｔ为０．４３９９。比较发现，菌核部分的ＰＰＢ高于子座。 菌核部分和子座部分居群间基因流（Ｎｍ）的估计值分别为Ｏ．５５５４和０．６３６６，表明 蝉花虫草居群间存在较强的遗传分化，基因流受到阻碍（Ｎｍ＜１）。
源面临枯竭的局面。为了更好的保护和利用蝉花虫草，本文从分子和形态学水平 探讨了蝉花虫草居群遗传变异和遗传结构，为更好的保护和利用蝉花虫草资源提 供其遗传背景资料。同时，本文还讨论了蝉花虫草多糖和虫草酸在居群、个体及
虫草不同部位的分布式样，以期为蝉花虫草的人工培养起到指导作用，为可持续
利用蝉花虫草提供有价值理论依据。 蝉花虫草主要分布于我国南方各省，大致可分为西南地区和东南部沿海地区。 在西南地区的分布比较集中于金沙江、怒江、澜沧江河谷地带。海拔在ｌＯ～３０００ｍ， 由于产地海拔等的不同，采收时间可以从７月份持续至１１月份。蝉花虫草无性型 真菌为蝉拟青霉Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ ｃｉｃａｄａｅ（Ｍｉｑ．）Ｓａｍｓｏｎ，其寄主范围极广。 ＤＡＬＰ研究显示，在蝉花虫草菌核部分，５组引物７个居群中检测到２０４个
ｐｒｉｃｅ ｏｆ Ｃ．ｓｉｎｅｎｓｉｓ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｒｉｓｉｎｇ ｔｅｒｒｉｂｌｙ
ａ
ｌｏｔ．Ａｓ
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ｒｅｓｕｌｔ，ｔｈｅ
ｄｅｍａｎｄ ｏｆ Ｃ．ｃｉｃａｄａｅ
ｒｅｄｕｃｅｄ
ｒａｐｉｄｌｙ ｉｎ
ｉｓ ａｌｓｏ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ａｓ ｗｅｌｌ，ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｗｉｌｄ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｈａｓ ｂｅｅｎ
ＩＩ
摘要
通过蝉花虫草、冬虫夏草及阔胞虫草Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｃｒａｓｓｉｓｐｏｒａ Ｍ
Ｚａｎｇ，Ｙａｎｇ ｅｔ Ｌｉ
的遗传关系比较，得出蝉花虫草与冬虫夏草及阔胞虫草有很近的亲缘关系，而阔 胞虫草则是冬虫夏草的一个类群，它们尚未达到种级分化。 蝉花虫草１２个形态性状的变异主要分布于个体间，其中子座重与菌核重存在 一定程度的负相关，而冬虫夏草子座与菌核则是呈正相关。说明蝉花虫草与冬虫 夏草形态建成机制不一样。 对蝉花虫草不同部位虫草多糖和虫草酸的研究发现，蝉花虫草子座部分的多
ｏｆ ｇｅｎｅ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ（ＧｓＯ Ｗａｓ
０．４７３７ ｂｅｔｗｅｅｎ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ａｎｄ
ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ．ｎａｍｅｌｙ
ｒｅｓｔ
４７．３７％ｇｅｎｅｔｉｃ ｖａｒｉａｔｉｏｎ ｏｃｃｕｒｒｉｎｇ
ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ．
ａｍｏｎｇ
５２．６３％ｗｉｔｈｉｎ
Ｉｎ ｔｈｅ ７ ｓｔｒｏｍａ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｏｆ．Ｃ．ｃｉｃａｄａｅ，ｔｈｅ ＰＰＢ Ｗａｓ ８５．２９％，ｔｈｅ ｔｏｔａｌ Ｎａ，Ｎｅ，
Ｎｅ ｗａｓｌ．１９６７；ｔｈｅ
Ｏ．１ １ ７８；ｔｈｅ ｔｏｔａｌ
ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ（硒Ｗａｓ
Ｏ．２２０８ ａｎｄ ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ Ｏ．３４６２
Ｈ Ｗａｓ
Ｓｈａｎｎｏｎ’ｓ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ
ｉｎｄｅｘ∽Ｗａｓ
ａｎｄ
ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ １ ｗａｓ ０．１ ８０２．Ｔｈｅ
ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ
ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｂｅｒｋ．）Ｓａｃｃ．，ｂｕｔ
ａｓ ａ
ｔｏ ｔｗｏ
ｐｅｒｃｅｎｔ ｏｆ ｃ．ｓｉｎｅｎｓｉｓ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｉｔ ｉｓ ｕｓｅｄ
ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ ｃ．ｓｉｎｅｎｓｉｓ．ｂｅｃａｕｓｅ ｔｈｅ
ｄｅｍａｎｄ ｏｆ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｓｔｒａｉｇｈｔｌｙ ｔｈｅｓｅ ｒｅｃｅｎｔ ｔｗｅｎｔｙ ｙｅａｒｓ，ａｎｄ ｔｈｅ
ｐｒｉｃｅ ｏｆ Ｃ．ｓｉｎｅｎｓｉｓ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｒｉｓｉｎｇ ｔｅｒｒｉｂｌｙ
ａ
ｌｏｔ．Ａｓ
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ｒｅｓｕｌｔｄａｅ
ｒｅｄｕｃｅｄ
ｒａｐｉｄｌｙ ｉｎ
ｉｓ ａｌｓｏ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ａｓ ｗｅｌｌ，ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｗｉｌｄ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｈａｓ ｂｅｅｎ
ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ＤＡＬＰ ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ ａｌｓｏ
ｄｉｓｃｕｓｓｅｄ ｔｈｅ
ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｐａｔｔｅｒｎｓ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ
ａｎｄ ｍａｎｎｉｔｏｌ
ｉｎ ｔｈｅ ｓｃｌｅｒｏｔｉｕｍ ａｎｄ
糖及虫草酸含量明显低于菌核部分含量，而菌核部分虫草多糖含量全部变异存在 于居群内个体间，菌核部分虫草酸含量仅有７．８４％的变异存在于居群间，变异主要
存在于个体间；而子座部分虫草多糖和虫草酸在居群和个体间的的变异大致各占
一半。这对于蝉花虫草的人工培养具有指导作用，根据虫草多糖和虫草酸成分在
居群间和居群内的分布样式，选取优良菌株和优化培养条件，以期提高虫草多糖 和虫草酸成分生产效益。
Ｈ，１ｗｅｒｅ
１．８５２９，１．３７４５，０．２２７０ ａｎｄ ０．３５２２，ｔｈｅ
ａｖｅｒａｇｅＮａ，Ｎｅ，Ｈ，１ｗｅｒｅ
１．４０９０、
ａｍｐｌｉｆｉｅｄ
１ ７９ ｗｅｒｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ， ｔｈｅ ７ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ，ｔｈｅ
ｂａｎｄｓ（ＰＰＢ）Ｗａｓ ８７．７５％．Ｉｎ
１．８７７５
ａｌｌｅｌｅｓ（№）Ｗａｓ
ａｎｄ
ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ Ｎａ ｗａｓ１．３ ８ １ ０，ｔｈｅ
ａｌｌｅｌｅｓ（Ｎｅ）ｗａｓｌ．３５７２
ａｎｄ ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ
摘要
通过蝉花虫草、冬虫夏草及阔胞虫草Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｃｒａｓｓｉｓｐｏｒａ Ｍ
Ｚａｎｇ，Ｙａｎｇ ｅｔ Ｌｉ
的遗传关系比较，得出蝉花虫草与冬虫夏草及阔胞虫草有很近的亲缘关系，而阔 胞虫草则是冬虫夏草的一个类群，它们尚未达到种级分化。 蝉花虫草１２个形态性状的变异主要分布于个体间，其中子座重与菌核重存在 一定程度的负相关，而冬虫夏草子座与菌核则是呈正相关。说明蝉花虫草与冬虫 夏草形态建成机制不一样。 对蝉花虫草不同部位虫草多糖和虫草酸的研究发现，蝉花虫草子座部分的多
关键词：蝉花虫草；居群；ＤＡＬＰ；虫草多糖；虫草酸；
Ａｂｓｔｒａｃｔ
Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｃｉｃａｄａｅ
Ｘ．Ｑ．Ｓｈｉｎｇ
ｉｓ
ａ
ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｉｎ Ｃｈｉｎａ，ｂｅｉｎｇ ｓｉｍｉｌａｒ ｉｔｓ ｐｒｉｃｅ ｉｓ ｏｎｌｙ
ｏｎｅ
ａｃｔｉｖｅ ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ ｔｏ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ
糖及虫草酸含量明显低于菌核部分含量，而菌核部分虫草多糖含量全部变异存在 于居群内个体间，菌核部分虫草酸含量仅有７．８４％的变异存在于居群间，变异主要
存在于个体间；而子座部分虫草多糖和虫草酸在居群和个体间的的变异大致各占
一半。这对于蝉花虫草的人工培养具有指导作用，根据虫草多糖和虫草酸成分在
居群间和居群内的分布样式，选取优良菌株和优化培养条件，以期提高虫草多糖 和虫草酸成分生产效益。
ｃｏｖｅｒｓ
Ｊｉｎｓｈａ，Ｎｕｊｉａｎｇ ａｎｄ
Ｌａｎｃａｎｇｊｉａｎｇ
Ｒｉｖｅｒ．Ｔｈｅ
ｌ Ｏ－－。３０００ｍ，ｏｗｉｎｇ ｔｏ ｄｉｆｆｅｒｒｅｎｔ ａｌｔｉｔｕｄｅ，ｔｈｅ
ｃｏｌｌｅｃｔｉｎｇ ｔｉｍｅ ｃｏｎｔｉｎｕｅｓ ｆｒｏｍ Ｊｕｌｙ ｔｏ Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ
Ｎｏｖｅｍｂｅｒ．Ｔｈｅ ａｎａｍｏｒｐｈ
ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃ ｃｉｃａｄａｅ．Ｉｎ ｔｈｅ ７ ｓｃｌｅｒｏｔｉｕｍ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｃ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｓｃｒｅｅｎｅｄ．Ａｍｏｎｇ ２０４ ＤＮＡ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｉ．ｅ．ｔｈｅ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ｔｏｔａｌ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｔｏｔａｌ Ｎｅｉ’Ｓ ｇｅｎｅ
ＩＩ
摘要
ｓｔｒｏｍａ ｏｆ Ｃ ｃｉｃａｄａｅ．Ｔｈｅ ｍａｉｎ ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｒｅ
ａｓ
ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ：
Ｔｈｅ
Ｃ ｃｉｃａｄａｅ ｉｓ ｄｉｓｔｒｕｂｕｔｅｄ ｉｎ ｓｏｍｅ ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ ｏｆ Ｓｏｕｔｈ Ｃｈｉｎａ，ｗｈｉｃｈ
ｃａｎ
ｂｅ ｏｆ
ｔｗｏ ｐｒｉｎｃｉｐａｌ ａｒｅａｓ：ｔｈｅ ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ ａｒｅａ ａｎｄ ｃｏａｓｔａｌ ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ ｓｏｕｔｈｅａｓｔ Ｃｈｉｎａ．Ｉｎ ｔｈｅ ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ Ｃｈｉｎａ，ｔｈｅ Ｃ ｃｉｃａｄａｅ ｉｓ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｖａｌｌｅｙ ｏｆ ａｌｔｉｔｕｄｅ
ｒｅｃｅｎｔ ｙｅａｒｓ，ａｎｄ
ｎｏｗ ｔｈｉｓ
ｆｕｎｇａｌ
ｒｅｓｏｕｒｃｅ
ｉｓ ｉｎ
ｅｎｄａｎｇｅｒｉｎｇ．Ｉｎ
ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｂｅｔｔｅｒ
ｃｏｎｓｅｒｖｉｎｇ
ａｎｄ
ｓｕｓｔａｉｎａｂｌｅ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｒｅｓｏｕｒｃｅ，ｉｔｓ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ
同一寄主被不同虫草无性型菌株感染所形成子实体差异如分布于云南省兰坪县等地区的蝉花虫草ccicadae和拟黑虫草cordycepsnigrellayketdshimizu寄主相同通过分离纯化得到两种在形态上完全不一样的无性型真菌这反映了虫草无性型在种问上的差异
云南大学 硕士学位论文 蝉花虫草居群遗传学研究 姓名：曾文波 申请学位级别：硕士 专业：植物学 指导教师：虞泓 20080401
ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ＤＡＬＰ ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ ａｌｓｏ
ｄｉｓｃｕｓｓｅｄ ｔｈｅ
ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｐａｔｔｅｒｎｓ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ
ａｎｄ ｍａｎｎｉｔｏｌ
ｉｎ ｔｈｅ ｓｃｌｅｒｏｔｉｕｍ ａｎｄ
ｏｆ Ｃ ｃｉｃａｄａｅ ｉｓ
ｃｉｃａｄａｅ（Ｍｉｑ．）Ｓａｍｓｏｎ，ｗｉｔｈ
ｗｉｄｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ｈｏｓｔ．
ＤＡＬＰ（Ｄｉｒｅｃｔ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ
ｏｆ ｌｅｎｇｔｈ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ）Ｗａｓ ａｐｐｌｉｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ＤＮＡ ｃｉｃａｄａｅ，ｆｉｖｅ ｐｒｉｍｅｒ
ｒｅｃｅｎｔ ｙｅａｒｓ，ａｎｄ
ｎｏｗ ｔｈｉｓ
ｆｕｎｇａｌ
ｒｅｓｏｕｒｃｅ
ｉｓ ｉｎ
ｅｎｄａｎｇｅｒｉｎｇ．Ｉｎ
ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｂｅｔｔｅｒ
ｃｏｎｓｅｒｖｉｎｇ
ａｎｄ
ｓｕｓｔａｉｎａｂｌｅ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｒｅｓｏｕｒｃｅ，ｉｔｓ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ
关键词：蝉花虫草；居群；ＤＡＬＰ；虫草多糖；虫草酸；
Ａｂｓｔｒａｃｔ
Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｃｉｃａｄａｅ
Ｘ．Ｑ．Ｓｈｉｎｇ
ｉｓ
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ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｉｎ Ｃｈｉｎａ，ｂｅｉｎｇ ｓｉｍｉｌａｒ ｉｔｓ ｐｒｉｃｅ ｉｓ ｏｎｌｙ
ｏｎｅ
ａｃｔｉｖｅ ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ ｔｏ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ
摘要
摘要
蝉花虫草Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ
ｃｉｃａｄａｅ
Ｘ．Ｑ．Ｓｈｉｎｇ是一种传统药用真菌，与冬虫夏草
Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｂｅｒｋ．）Ｓａｔｅ．含有相似的活性成分，其价格仅为冬虫夏草的ｌ～２％，
因而被用作冬虫夏草的代用品。近年，由于虫草需求量大增，导致冬虫夏草价格 直线上升，进而推动了对蝉花虫草的需求，加之生态环境破坏，使得蝉花虫草资
ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｂｅｒｋ．）Ｓａｃｃ．，ｂｕｔ
ａｓ ａ
ｔｏ ｔｗｏ
ｐｅｒｃｅｎｔ ｏｆ ｃ．ｓｉｎｅｎｓｉｓ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｉｔ ｉｓ ｕｓｅｄ
ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ ｃ．ｓｉｎｅｎｓｉｓ．ｂｅｃａｕｓｅ ｔｈｅ
ｄｅｍａｎｄ ｏｆ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｓｔｒａｉｇｈｔｌｙ ｔｈｅｓｅ ｒｅｃｅｎｔ ｔｗｅｎｔｙ ｙｅａｒｓ，ａｎｄ ｔｈｅ
位点，其中多态位点１７９个，多态位点百分比ＰＰＢ为８７．７５％。物种水平，平均观
察等位基因数（胁）是１．８７７５，平均有效等位基因数（肫）是１．３５７２、平均遗传
多样性指数（日）是０．２２０８，Ｓｈａｎｎｏｎ，Ｓ多样性指数（，）是Ｏ．３４６２；居群水平， Ｎａ、Ｎｅ、日与Ｊ分别是１．３８１０、１．１９６７、０．１ １７８与０．１８０２。基因分化系数Ｇｓｔ为 ０．４７３７。基因分化系数Ｇｓｔ表明蝉花虫草在物种水平有５２．６３％的遗传变异来自居 群内，４７．３７％的遗传变异来自居群间。 子座部分多态位点百分比ＰＰＢ为８５．２９％，物种水平，Ｎａ、Ｎｅ、Ｈ、１分 别为１．８５２９、１．３７４５、０．２２７０和０．３５２２；居群水平，Ｎａ、Ｎｅ、日、１分别为１．４０９０、 １．２４４８、０．１４４１、０．２１６３。Ｇｓｔ为０．４３９９。比较发现，菌核部分的ＰＰＢ高于子座。 菌核部分和子座部分居群间基因流（Ｎｍ）的估计值分别为Ｏ．５５５４和０．６３６６，表明 蝉花虫草居群间存在较强的遗传分化，基因流受到阻碍（Ｎｍ＜１）。
源面临枯竭的局面。为了更好的保护和利用蝉花虫草，本文从分子和形态学水平 探讨了蝉花虫草居群遗传变异和遗传结构，为更好的保护和利用蝉花虫草资源提 供其遗传背景资料。同时，本文还讨论了蝉花虫草多糖和虫草酸在居群、个体及
虫草不同部位的分布式样，以期为蝉花虫草的人工培养起到指导作用，为可持续
利用蝉花虫草提供有价值理论依据。 蝉花虫草主要分布于我国南方各省，大致可分为西南地区和东南部沿海地区。 在西南地区的分布比较集中于金沙江、怒江、澜沧江河谷地带。海拔在ｌＯ～３０００ｍ， 由于产地海拔等的不同，采收时间可以从７月份持续至１１月份。蝉花虫草无性型 真菌为蝉拟青霉Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ ｃｉｃａｄａｅ（Ｍｉｑ．）Ｓａｍｓｏｎ，其寄主范围极广。 ＤＡＬＰ研究显示，在蝉花虫草菌核部分，５组引物７个居群中检测到２０４个
ｐｒｉｃｅ ｏｆ Ｃ．ｓｉｎｅｎｓｉｓ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｒｉｓｉｎｇ ｔｅｒｒｉｂｌｙ
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ｄｅｍａｎｄ ｏｆ Ｃ．ｃｉｃａｄａｅ
ｒｅｄｕｃｅｄ
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ｉｓ ａｌｓｏ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ａｓ ｗｅｌｌ，ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｗｉｌｄ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｈａｓ ｂｅｅｎ
ＩＩ
摘要
通过蝉花虫草、冬虫夏草及阔胞虫草Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｃｒａｓｓｉｓｐｏｒａ Ｍ
Ｚａｎｇ，Ｙａｎｇ ｅｔ Ｌｉ
的遗传关系比较，得出蝉花虫草与冬虫夏草及阔胞虫草有很近的亲缘关系，而阔 胞虫草则是冬虫夏草的一个类群，它们尚未达到种级分化。 蝉花虫草１２个形态性状的变异主要分布于个体间，其中子座重与菌核重存在 一定程度的负相关，而冬虫夏草子座与菌核则是呈正相关。说明蝉花虫草与冬虫 夏草形态建成机制不一样。 对蝉花虫草不同部位虫草多糖和虫草酸的研究发现，蝉花虫草子座部分的多
ｏｆ ｇｅｎｅ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ（ＧｓＯ Ｗａｓ
０．４７３７ ｂｅｔｗｅｅｎ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ａｎｄ
ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ．ｎａｍｅｌｙ
ｒｅｓｔ
４７．３７％ｇｅｎｅｔｉｃ ｖａｒｉａｔｉｏｎ ｏｃｃｕｒｒｉｎｇ
ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ．
ａｍｏｎｇ
５２．６３％ｗｉｔｈｉｎ
Ｉｎ ｔｈｅ ７ ｓｔｒｏｍａ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｏｆ．Ｃ．ｃｉｃａｄａｅ，ｔｈｅ ＰＰＢ Ｗａｓ ８５．２９％，ｔｈｅ ｔｏｔａｌ Ｎａ，Ｎｅ，
Ｎｅ ｗａｓｌ．１９６７；ｔｈｅ
Ｏ．１ １ ７８；ｔｈｅ ｔｏｔａｌ
ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ（硒Ｗａｓ
Ｏ．２２０８ ａｎｄ ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ Ｏ．３４６２
Ｈ Ｗａｓ
Ｓｈａｎｎｏｎ’ｓ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ
ｉｎｄｅｘ∽Ｗａｓ
ａｎｄ
ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ １ ｗａｓ ０．１ ８０２．Ｔｈｅ
ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ
ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｂｅｒｋ．）Ｓａｃｃ．，ｂｕｔ
ａｓ ａ
ｔｏ ｔｗｏ
ｐｅｒｃｅｎｔ ｏｆ ｃ．ｓｉｎｅｎｓｉｓ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｉｔ ｉｓ ｕｓｅｄ
ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ ｃ．ｓｉｎｅｎｓｉｓ．ｂｅｃａｕｓｅ ｔｈｅ
ｄｅｍａｎｄ ｏｆ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｓｔｒａｉｇｈｔｌｙ ｔｈｅｓｅ ｒｅｃｅｎｔ ｔｗｅｎｔｙ ｙｅａｒｓ，ａｎｄ ｔｈｅ
ｐｒｉｃｅ ｏｆ Ｃ．ｓｉｎｅｎｓｉｓ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｒｉｓｉｎｇ ｔｅｒｒｉｂｌｙ
ａ
ｌｏｔ．Ａｓ
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ｒｅｓｕｌｔｄａｅ
ｒｅｄｕｃｅｄ
ｒａｐｉｄｌｙ ｉｎ
ｉｓ ａｌｓｏ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ａｓ ｗｅｌｌ，ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｗｉｌｄ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｈａｓ ｂｅｅｎ
ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ＤＡＬＰ ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ ａｌｓｏ
ｄｉｓｃｕｓｓｅｄ ｔｈｅ
ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｐａｔｔｅｒｎｓ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ
ａｎｄ ｍａｎｎｉｔｏｌ
ｉｎ ｔｈｅ ｓｃｌｅｒｏｔｉｕｍ ａｎｄ
糖及虫草酸含量明显低于菌核部分含量，而菌核部分虫草多糖含量全部变异存在 于居群内个体间，菌核部分虫草酸含量仅有７．８４％的变异存在于居群间，变异主要
存在于个体间；而子座部分虫草多糖和虫草酸在居群和个体间的的变异大致各占
一半。这对于蝉花虫草的人工培养具有指导作用，根据虫草多糖和虫草酸成分在
居群间和居群内的分布样式，选取优良菌株和优化培养条件，以期提高虫草多糖 和虫草酸成分生产效益。
Ｈ，１ｗｅｒｅ
１．８５２９，１．３７４５，０．２２７０ ａｎｄ ０．３５２２，ｔｈｅ
ａｖｅｒａｇｅＮａ，Ｎｅ，Ｈ，１ｗｅｒｅ
１．４０９０、
ａｍｐｌｉｆｉｅｄ
１ ７９ ｗｅｒｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ， ｔｈｅ ７ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ，ｔｈｅ
ｂａｎｄｓ（ＰＰＢ）Ｗａｓ ８７．７５％．Ｉｎ
１．８７７５
ａｌｌｅｌｅｓ（№）Ｗａｓ
ａｎｄ
ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ Ｎａ ｗａｓ１．３ ８ １ ０，ｔｈｅ
ａｌｌｅｌｅｓ（Ｎｅ）ｗａｓｌ．３５７２
ａｎｄ ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ
摘要
通过蝉花虫草、冬虫夏草及阔胞虫草Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｃｒａｓｓｉｓｐｏｒａ Ｍ
Ｚａｎｇ，Ｙａｎｇ ｅｔ Ｌｉ
的遗传关系比较，得出蝉花虫草与冬虫夏草及阔胞虫草有很近的亲缘关系，而阔 胞虫草则是冬虫夏草的一个类群，它们尚未达到种级分化。 蝉花虫草１２个形态性状的变异主要分布于个体间，其中子座重与菌核重存在 一定程度的负相关，而冬虫夏草子座与菌核则是呈正相关。说明蝉花虫草与冬虫 夏草形态建成机制不一样。 对蝉花虫草不同部位虫草多糖和虫草酸的研究发现，蝉花虫草子座部分的多
关键词：蝉花虫草；居群；ＤＡＬＰ；虫草多糖；虫草酸；
Ａｂｓｔｒａｃｔ
Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｃｉｃａｄａｅ
Ｘ．Ｑ．Ｓｈｉｎｇ
ｉｓ
ａ
ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｉｎ Ｃｈｉｎａ，ｂｅｉｎｇ ｓｉｍｉｌａｒ ｉｔｓ ｐｒｉｃｅ ｉｓ ｏｎｌｙ
ｏｎｅ
ａｃｔｉｖｅ ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ ｔｏ Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ
糖及虫草酸含量明显低于菌核部分含量，而菌核部分虫草多糖含量全部变异存在 于居群内个体间，菌核部分虫草酸含量仅有７．８４％的变异存在于居群间，变异主要
存在于个体间；而子座部分虫草多糖和虫草酸在居群和个体间的的变异大致各占
一半。这对于蝉花虫草的人工培养具有指导作用，根据虫草多糖和虫草酸成分在
居群间和居群内的分布样式，选取优良菌株和优化培养条件，以期提高虫草多糖 和虫草酸成分生产效益。
ｃｏｖｅｒｓ
Ｊｉｎｓｈａ，Ｎｕｊｉａｎｇ ａｎｄ
Ｌａｎｃａｎｇｊｉａｎｇ
Ｒｉｖｅｒ．Ｔｈｅ
ｌ Ｏ－－。３０００ｍ，ｏｗｉｎｇ ｔｏ ｄｉｆｆｅｒｒｅｎｔ ａｌｔｉｔｕｄｅ，ｔｈｅ
ｃｏｌｌｅｃｔｉｎｇ ｔｉｍｅ ｃｏｎｔｉｎｕｅｓ ｆｒｏｍ Ｊｕｌｙ ｔｏ Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ
Ｎｏｖｅｍｂｅｒ．Ｔｈｅ ａｎａｍｏｒｐｈ
ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃ ｃｉｃａｄａｅ．Ｉｎ ｔｈｅ ７ ｓｃｌｅｒｏｔｉｕｍ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｃ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｓｃｒｅｅｎｅｄ．Ａｍｏｎｇ ２０４ ＤＮＡ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｉ．ｅ．ｔｈｅ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ｔｏｔａｌ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｔｏｔａｌ Ｎｅｉ’Ｓ ｇｅｎｅ
ＩＩ
摘要
ｓｔｒｏｍａ ｏｆ Ｃ ｃｉｃａｄａｅ．Ｔｈｅ ｍａｉｎ ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｒｅ
ａｓ
ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ：
Ｔｈｅ
Ｃ ｃｉｃａｄａｅ ｉｓ ｄｉｓｔｒｕｂｕｔｅｄ ｉｎ ｓｏｍｅ ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ ｏｆ Ｓｏｕｔｈ Ｃｈｉｎａ，ｗｈｉｃｈ
ｃａｎ
ｂｅ ｏｆ
ｔｗｏ ｐｒｉｎｃｉｐａｌ ａｒｅａｓ：ｔｈｅ ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ ａｒｅａ ａｎｄ ｃｏａｓｔａｌ ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ ｓｏｕｔｈｅａｓｔ Ｃｈｉｎａ．Ｉｎ ｔｈｅ ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ Ｃｈｉｎａ，ｔｈｅ Ｃ ｃｉｃａｄａｅ ｉｓ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｖａｌｌｅｙ ｏｆ ａｌｔｉｔｕｄｅ
ｒｅｃｅｎｔ ｙｅａｒｓ，ａｎｄ
ｎｏｗ ｔｈｉｓ
ｆｕｎｇａｌ
ｒｅｓｏｕｒｃｅ
ｉｓ ｉｎ
ｅｎｄａｎｇｅｒｉｎｇ．Ｉｎ
ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｂｅｔｔｅｒ
ｃｏｎｓｅｒｖｉｎｇ
ａｎｄ
ｓｕｓｔａｉｎａｂｌｅ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｒｅｓｏｕｒｃｅ，ｉｔｓ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ
同一寄主被不同虫草无性型菌株感染所形成子实体差异如分布于云南省兰坪县等地区的蝉花虫草ccicadae和拟黑虫草cordycepsnigrellayketdshimizu寄主相同通过分离纯化得到两种在形态上完全不一样的无性型真菌这反映了虫草无性型在种问上的差异
云南大学 硕士学位论文 蝉花虫草居群遗传学研究 姓名：曾文波 申请学位级别：硕士 专业：植物学 指导教师：虞泓 20080401
ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ＤＡＬＰ ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ ａｌｓｏ
ｄｉｓｃｕｓｓｅｄ ｔｈｅ
ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｐａｔｔｅｒｎｓ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ
ａｎｄ ｍａｎｎｉｔｏｌ
ｉｎ ｔｈｅ ｓｃｌｅｒｏｔｉｕｍ ａｎｄ