血清与粪便S100A12蛋白在新生儿坏死性小肠结肠炎诊断及临床分期中的应用研究

血清与粪便S100A12蛋白在新生儿坏死性小肠结肠炎诊断及临床分
期中的应用研究
目的：分析血清与粪便S100A12蛋白在新生儿坏死性小肠结肠炎诊断及临床分期中的应用。

方法：选取2013年12月-2015年12月笔者所在医院收治的NEC患儿50例作为病例组，选择同期住院的黄疸新生儿患儿52例作为对照组。

分别检测比较两组的血清与粪便S100A12蛋白水平，分析血清与粪便中S100A12蛋白与疾病进展的关系。

结果：两组血清和粪便S100A12蛋白检出率及检测浓度比较差异均有统计学意义（P=0.00）；病例组极期的粪便及血清S100A12蛋白浓度明显高于Ⅰ期及恢复期，Ⅰ期的粪便及血清S100A12蛋白浓度高于恢复期，两组粪便及血清S100A12蛋白浓度各期间比较差异均有统计学意义（P=0.00）。

结论：S100A12蛋白检测是一种有效可行的非侵入性的诊断NEC的手段。

标签：血清S100A12蛋白；粪便S100A12蛋白；新生儿；坏死性小肠结肠炎；临床分期
新生儿坏死性小肠结肠炎（NEC）是一种严重的获得性肠道急性出血性坏死性炎症疾病，是儿科常见的急腹症之一，多见于早产儿和低体重儿，目前其发病机制尚不清楚，但与感染、早产、新生儿缺氧等因素有密切关联。

NEC早期缺乏典型症状，以肠缺血症状表现为主，极大程度依靠患儿临床表现和主治医师临床经验来诊断，典型症状出现之前常被误诊、漏诊，发展到后期极有可能出现肠坏死、穿孔症状，预后较差。

所以，临床医师在积极寻找NEC早期诊断的血清学标志物，旨在提高NEC早期诊出率[1]。

有研究发现，血清S100钙结合蛋白A12（S100A12）与抗体在炎症性肠病中明显上升，敏感性86%，特异性96%，这种中性粒细胞分泌的蛋白提供了一种新的监测炎症性肠病的非侵入性的生物学指标。

笔者选择NEC患儿为病例组，另选同期住院的黄疸新生儿作为对照组，采用病例-对照研究的方法，探讨血清与粪便中S100A12蛋白对不同严重程度的新生儿坏死性小肠结肠炎的诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2013年12月-2015年12月笔者所在医院收治的NEC患儿50例作为病例组，选择同期住院的黄疸新生儿患儿52例作为对照组。

病例组所有患儿都已经确诊，且参照Bell分级分为NEC Ⅰ期16例和Ⅱ～Ⅲ期（极期）25例，恢复期9例。

排除标准：不能明确诊断NEC者，患儿同时患有其他如腹泻、中毒性巨结肠等消化系统疾病者，患儿患其他亚种感染性疾病，患儿存在HIV和其他传染性疾病患儿。

本研究所有研究对象监护人均知情，并且签订了知情同意书，均自愿参加本研究；本研究经笔者所在医院医学伦理委员会审阅、批准，所有参与研究者均保证整个研究过程遵循中华伦理委员会制定的伦理学标准。

两组患儿的一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性，见表1。

1.2 方法
采集研究对象入组时的粪便5～10 g及血清2 ml，1∶200稀释血清样品，均采用ELISA法检测S100A12蛋白的表达水平，检测新生儿坏死性小肠结肠炎患儿血清与粪便中S100A12蛋白的表达变化，分析血清与粪便中S100A12蛋白与疾病进展的关系。

1.3 统计学处理
应用SPSS 17.0统计软件对数据进行统计学分析，计量资料以（x±s）表示，多组间比较采用方差分析，组间两两比较采用t检验，计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果
对照组粪便及血清S100A12蛋白检出率皆为7.69%（4/52），病例组粪便S100A12蛋白检出率为Ⅰ期81.25%（13/16），极期84.00%（21/25），恢复期77.78%（7/9）；血清S100A12检出率为Ⅰ期87.50%（14/16），极期88.00%（22/25），恢复期77.78%（7/9）。

病例组血清和粪便S100A12蛋白检出率高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05），两组血清及粪便S100A12蛋白检测浓度比较差异均有统计学意义（F=9.563，9.134，P=0.00）；病例组极期的粪便及血清S100A12蛋白浓度明显高于Ⅰ期及恢复期，Ⅰ期的粪便及血清S100A12蛋白浓度高于恢复期，两组粪便及血清S100A12蛋白浓度比较差异均有统计学意义（F=7.82，6.25，P=0.00），见表2。

3 讨论
3.1 研究背景
新生儿坏死性小肠结肠炎是一种严重的获得性肠道急性出血坏死性炎症疾病，是儿科常见的急腹症之一，多见于早产儿和低体重儿，目前其发病机制尚不清楚，但与感染、早产、新生儿缺氧等因素有密切关联。

NEC可引起严重多器官、多系统炎症反应，病死率高达20%～50%。

NEC目前是新生儿，尤其是极低体重儿早期死亡的主要原因[2]。

NEC早期缺乏典型症状，以肠缺血症状表现为主，极大程度依靠患儿临床表现和主治医师临床经验来诊断，典型症状出现之前常被误诊、漏诊，发展到后期极有可能出现肠坏死、穿孔症状，预后较差。

NEC疾病谱较广，轻度仅为大便隐血阳性，病情进展迅速，重症可表现为穿孔性腹膜炎、全身炎症反应、休克、DIC等，病死率高，如治疗不当会导致患者数日或数周内死亡，临床经验表明早期诊断能提高NEC的治愈率。

所以，临床医师在积极寻找NEC早期诊断的血清学标志物，旨在提高NEC早期诊出率。

目前NEC的诊断依据主要有临床症状及体征，实验室检查如白细胞增高、分类核左移、血小板减少，粪便检查与血培养（两者培养出的细菌与粪培养一致，对诊断NEC的病因有意义），腹腔穿刺液涂片及细菌培养，其他辅助检查如腹部X线平
片检查对诊断NEC有非常大的价值，但经常要多次随访检查，观察动态变化，还有腹部B超等，但由于其早期临床表现、实验室指标及腹部X线片缺乏特异性，目前仍缺乏能早期判断病情、把握手术时机的客观指标。

由于血液、粪便及尿液中生物标记物监测具备无创性或无放射线伤害的特点，因而NEC的生物标记物受到国内外学者的广泛关注。

3.2 S100A12蛋白检测的价值
NEC标志物可分为血源性、尿液源性、粪便源性等，有特异性指标也有非特异性指标，不同的标志物均具有独特的生化特征和属性。

但是这些生物标记物与NEC的发病或疾病进程的关系还需进一步考证，其诊断敏感性、特异性及正常值范围尚在研究中。

S100A12蛋白作为众多标志物中的一种，在炎症调节中起关键作用，目前S100A12蛋白在炎症性肠病中的作用逐渐引起国内外学者的关注。

S100A12蛋白是粒细胞分泌的一种促炎性反应蛋白，本研究数据表明肠炎新生儿粪便与血清S100A12蛋白水平与黄疸组相比均明显增高。

Kaiser等研究发现S100A12蛋白水平在肠炎患者粪便中明显高于健康人和肠易激综合征患者，对于鉴别肠易激综合征和炎症性肠病有重要意义，在进一步的粪便标本检测中发现在炎症性肠病和肠易激惹综合征对照中，这种标志物敏感性为86%，特异性为96%。

本研究中，血清S100A12蛋白检出率是Ⅰ期87.50%，极期88.00%，恢复期77.78%，略低于同期文献[3-4]中的参考值，与其他研究数据吻合。

而在炎症性肠病和健康人对照中，标志物的敏感性和特异性可以达到86%和100%，因此认为S100A12蛋白可以作为监测炎症性肠病活动的理想的非侵入性标志物，这种中性粒细胞分泌的蛋白提供了一种新的监测炎症性肠病的非侵入性的生物学指标[5]。

S100A12蛋白属于钙结合蛋白家族S100蛋白，通过对钙离子的调节及与靶蛋白的相互作用在体内发挥多种生物学功能，钙与炎症性肠病具有密切的关系。

对极低体重儿通过前瞻性研究发现S100A12蛋白可能通过免疫反应干扰细菌定植[6]。

所以S100A12蛋白与粪便微生物群有密切关系，并推断S100A12蛋白可能成为NEC的诊断指标；Dbritz等对145名出生体重小于1500 g的早产儿的粪便样本中的S100A12蛋白进行检测，认为粪便S100A12蛋白水平可能是NEC的有价值的诊断指标，而且可以用来预测疾病严重程度、进行NEC的早期风险评估。

3.3 研究体会
关于S100A12与NEC的关系研究尚在起步中，国内尚未见报道，所以本课题组拟对S100A12蛋白与NEC的关系及其临床应用展开探讨，S100A12蛋白在粪便中具有较高的肠道特异性，而S100A12蛋白在新生儿血清中属于非特异性炎症反应标志物，但仍具有一定的研究价值。

S100A12蛋白可以作为检测炎症性肠病理想的非侵入性标志物，损伤更小。

所以对血清和粪便中S100A12蛋白均进行检测，一方面探讨NEC患儿血清和粪便中S100A12的变化过程及其关系，发现在NEC患儿的血清和粪便中S100A12蛋白均明显升高，二者检出率和检出浓度差异较小；另一方面可以寻找出相对准确的诊断途径，以期在一定程度上指导NEC的早期及中晚期的诊断、治疗方案的制定、疗效的检测及预后判断。

从此次的数据中也可观察到在不同时期血清和粪便中的S100A12蛋白表达水平是有差异的，如果能在进一步的研究中探讨清楚其浓度的变化范围与分期的关系，对于指导临床用药将会是重大突破。

S100A12蛋白检测作为一种非侵入性的检查方法，对于NEC临床应用价值高，可以提高新生儿坏死性小肠结肠炎的诊断准确率，对于指导临床治疗、有效阻止疾病进展、降低死亡率、提高治愈率有重要意义。

参考文献
[1]刘素佳，杨长仪，陈涵强.新生儿坏死性小肠结肠炎相关炎性标志物研究进展[J].中国新生儿科杂志，2015，30（15）：64-65.
[2]颜慧恒，王艳丽，陈运彬.粪便钙卫蛋白检测及其在早产儿坏死性小肠结肠炎中的意义[J].中国新生儿科杂志，2011，26（15）：58-59.
[3]李红新，侯德红，屠文娟，等.粪便钙卫蛋白水平检测在极低出生体质量儿坏死性小肠结肠炎中的意义[J].中华妇幼临床医学杂志（电子版），2015，6（1）：21-22.
[4]陈学才，王乐红.近足月小于胎龄儿与适于胎龄儿并发坏死性小肠结肠炎的预后对比研究[J].江西医药，2016，51（2）：173-175.
[5]黄志宇.早产儿坏死性小肠结肠炎危险因素分析[J].现代诊断与治疗，2014，25（6）：1352-1353.
[6]郭丽侠，王月怡.新生儿坏死性小肠结肠炎的临床分析[J].中国妇幼保健，2015，30（7）：1040-1041.。