大鼠β细胞素基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

大鼠β细胞素基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
安家泽;宋振顺;窦科峰;李开宗;韩骅
【期刊名称】《第四军医大学学报》
【年(卷),期】2004(025)023
【摘要】目的: 获得大量重组大鼠β细胞素(BTC),为研究β细胞素的功能及制备其抗体奠定基础. 方法: 利用PCR方法从大鼠肾组织扩增出544 bp的β细胞素基因片段并按读框克隆到原核表达载体pET28a(+)上,得到重组质粒pET28a-rBTC,转化大肠杆菌BL-21(DE3)菌株,IPTG诱导β细胞素蛋白表达,SDS-PAGE 和Western blot检测. 结果: 经IPTG诱导后,有明显的目的蛋白表达,分子量符合β细胞素;表达的蛋白主要以包涵体形式存在;表达量约占菌体蛋白总量的20%～30%;目的蛋白与抗His标签抗体具有良好的反应原性. 结论: 大鼠β细胞素基因的克隆与表达为进一步开展β细胞素蛋白功能和胰腺干细胞的研究奠定了基础.
【总页数】3页(P2141-2143)
【作者】安家泽;宋振顺;窦科峰;李开宗;韩骅
【作者单位】第四军医大学西京医院肝胆外科,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院肝胆外科,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院肝胆外科,陕西,西
安,710033;第四军医大学西京医院肝胆外科,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部医学遗传学与发育生物学教研室,陕西,西安,710033
【正文语种】中文
【中图分类】R512.6
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