人线粒体超氧化物歧化酶真核表达载体的构建及其在HUVEC中的表达

人线粒体超氧化物歧化酶真核表达载体的构建及其在HUVEC
中的表达
仲苓芝;李文雪;李秀英;李新娜;李玉林;李荣贵
【期刊名称】《吉林大学学报（医学版）》
【年(卷),期】2014(040)001
【摘要】目的:构建人线粒体超氧化物歧化酶2 (SOD2)的真核细胞表达载体,探讨其在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的表达效果.方法:以HUVEC mRNA为原始模板,应用RT-PCR技术,扩增编码线粒体SOD2全长的cDNA片段.利用分子生物学技术,将扩增的cDNA片段与真核细胞表达载体pcDNA3.0的多酶切位点相连接,构成重组质粒并转染到HUVEC,将细胞分为HUVEC母细胞组、转染pcDNA3.0空载组和转染pcDNA3.0-SOD2组.应用RT-PCR方法检测SOD2在HUVEC中的表达情况.结果:将表达SOD2全长cDNA片段定向克隆至质粒pcDNA3.0,测序结果表明成功构建人线粒体SOD2的真核细胞表达载体pcDNA3.0-SOD2.该载体稳定转染HUVEC后,在细胞内获得了稳定表达.与母细胞组和空载组比较,转染pcDNA3.0-SOD2组SOD2 mRNA表达水平明显增加.结论:成功构建SOD2的真核细胞表达载体pcDNA3.0-SOD2,并在人HUVEC中成功表达.本研究为SOD2对细胞保护作用研究提供了实验模型.
【总页数】5页(P10-14)
【作者】仲苓芝;李文雪;李秀英;李新娜;李玉林;李荣贵
【作者单位】吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室,吉林长春130021;吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室,吉林长春130021;吉
林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室,吉林长春130021;吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室,吉林长春130021;吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室,吉林长春130021;吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室,吉林长春130021
【正文语种】中文
【中图分类】Q78
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