沉香高效液相特征图谱

第54卷第7期 林业科学V1 54，N。

.72 0 1 8 年 7 月SCIENTIA SILVAE SINICAE Jul.，2 0 1 87oi:10.11707/j.1001-7488.20180711沉香高效液相特征图谱！尚丽丽陈媛晏婷婷邹献武李改云'中国林业科学研究院木材工业研究所北京100091)摘要：【目的】对《中国药典》（2015)高效液相色谱法进行改进和完善，建立既适用于野生沉香也适用于人工沉香的高效液相特征图谱，为沉香的科学鉴别和质量评价提供科学依据。

【方法】采用PhM〇menexlun a C18色谱柱(250 m m x4.A mm，5 'w)，流动相为乙腈-0. 1b甲酸溶液，梯度洗脱，流速0.7 mL.min-1，柱温31 °C，检测波长252 nm。

以29批次的参考样品和验证样品为研究对象，优化沉香高效液相色谱分离条件，考察所建高效液相特征图谱的精密度、稳定性和重复性。

利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》确定沉香样品共有的高效液相特征峰。

【结果】方法学考察结果表明，所建高效液相特征图谱的精密度、稳定性和重复性良好。

选定野生沉香和人工沉香高效液相图谱特征峰相对保留时间的'S D均小于2b，具有较好的保留重现性。

验证结果表明，所建高效液相特征图谱对15批次验证样品可以有效、准确鉴别，其中，5批次伪品沉香无法与特征图谱匹配，A批次野生沉香、4批次人工沉香验证样品均符合沉香高效液相特征图谱。

【结论】29批次样品兼顾野生沉香和人工沉香的特点，能够更全面、准确地反映沉香质量。

所建高效液相特征图谱对野生沉香和人工沉香具有普适性，且符合方法学验证要求，可用于沉香的质量控制。

关键词：沉香；高效液相色谱法；特征图谱；鉴别中图分类号：S781.4; R282. 71 文献标识码：A文章编号：1001 -7488 (2018 )07 -0104 -08HPLC Characteristic Chromatogram of AgarwoodShang Lili Chen Yuan Yan Tingting Zou Xianwu Li Gaiyun(Research Institute of Wood Industry，CAF Beijing100091 )Abstract ：【Objective 】To provide scientific basis for the identification and quality evaluation of agarwood，HPLC condition listed in % Chinese Pharmacopoeia &( 2015 ) was improved, and the characteristic chromatogram for both wild agarwood and artificial agarwood was established.【Method 】T heanalysis was carried out on aPhenom enex lun aC g column (250 mm X 4. A m m, 5 'm)with a gradient m obie phase of acetonitrile - 0. 1b formic acid at a flow rate of 0.7mL • min 1.Thedetection wavelength was set at 252 nm and thecolum n temperature was 31 C .29 batches of samples including botli reference and validation ones were investigated. The chromatographic conditions were optimized and the precision, stability and repeatability of themethiod were investigated. The common characteristic peaks were analyzed with % Similarity E valuation System for Chromatographic Fingerprint of Chinese Materia Medica” .【Result 】The results show that the precision，stability and repeatability of the method are good. The characteristic peaks selected f or either wild agarwood or cultivated agarwood is less than 2b . The results of 15 batches of validation samples show that the HPLC characteristic chromatogram of agarwood is accurate and effective for the identification of agarwood. 5 batches of adulterated agarwood among them cannot meet with the characteristic chromatogram，but the HPLC characteristic c hromatogram of b o h A batches of wild agarwood and 4 batches of cultivated agarwood samples are c onsistent with those of agarw ood.【Conclusion】29 batches of samples contain both wild and cultivated agarwood，a nd the developed HPLC methiod shows good applicable to bothi wild and cultivated agarwood，which conforms to the requirements of methiod ology validation and can be used for the quality K e y words ：agarwood ；HPLC ; characteristic chromatogram ；identification收稿日期：2016 - 10 - 08;修回日期：2017 - 02 - 02。

基金项目：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金（CAFINT2015C05)!李改云为通讯作者。

第#期尚丽丽等：沉香高效液相特征图谱105沉香为瑞香科沉香属树木在自然生长过程中形成的由木质部组织及其分泌物共同组成 的混合物质，是一种高附加值林产品（傅立国，1992)。

沉香的应用具有悠久的历史，除了作为传统的香料和中药使用外，沉香雕刻品及化妆品、保健 用品等一系列沉香衍生品日益占据市场，受到了林 业行业、香料行业、医药行业和文化收藏界的普遍重 视（林芳华等，2009; B a r d e n"%.，2000)。

目前，市 场上的沉香可分为野生沉香和人工沉香2类，且野 生沉香根据产区不同分为菀香系、惠安系和星洲系 三大沉香系，人工沉香根据促香诱导方式不同主要分为物理法、化学法和生物法（黄俊卿等，2013;梅 文莉等，2013)。

然而，野生沉香资源匮乏，人工沉 香的品质与野生沉香有一定差距，较高品质的人工 沉香需要较长的结香时间，沉香的市场需求和供应出现矛盾；且随着沉香被逐渐认可，其价值越来越高，在利益的驱使下，市场上出现了大量的沉香伪劣 品（陈晓颖等，2012;陈媛等，2017a;2017b)。

因此，建立一套可靠的沉香真伪鉴别和质量评价方法具有重要意义。

传统的沉香真伪鉴别和质量评价方法主要有性 状鉴别、显微鉴别、显色反应、薄层色谱、浸出物含量 和G C-M S方法，2015版《中国药典》增补了高效液 相色谱法控制沉香质量（陈媛等，2017b;高晓霞 等，2009 ;杨德兰等，2014 ;Mei"%5, 2013 )。

高效 液相色谱法作为一种高效、高灵敏度、分析速度快的 全成分分析质量评价方法，现已应用于多种生物样品的质量控制（丁婕等，2012;蒋莉娟等，2016;何 新荣等，2013;杨锦玲等，2014;张倩等，2015)。

据报道，2 - (2 -苯乙基）色酮类化合物，除沉香外，只在禾本科白茅（)、白羊草(@'4(0:5% 6c4%e m<m)和萌芦科甜瓜（C<c<m6 0"'种子中发现，是沉香鉴别的重要成分，且高 度氧化的5,6,7,8 -四羟基- 2- (2-苯乙基）色 酮是目前仅在沉香中发现的物质，具有专属性，可 作为其真伪鉴别和质量控制的标志性化合物(Naef，2011 ;Ibrahim，2010 ;W a n g et al.^2006 ; Yoon "%5, 2011)。

因此，利用高效液相色谱法分析沉香的色酮类成分对于沉香真伪鉴别和质量评价具有重要意义（杨锦玲等，2014;张倩等，2015;陈媛等，2017b)。

但是，野生沉香和人工沉香的化学成分及其含量差异较大，且不同产区的野生沉香、不同结香方法的人工沉香品质也有所差别，而药典液相方法主要适用于人工沉香，对野 生沉香并不完全适用，容易造成误判（陈晓颖等，2012;陈媛等，2017a;黄俊卿等，2013;梅文莉等，2013; Gao et %5, 2014)。

为了更好地兼顾野生沉香和人工沉香的特点，本研究以29批次的参考样品和验证样品为研究对象，对《中国药典》(2015)高效液相色谱法进行改进和完善，建立既适用于野生沉香也适用于人工沉香的高效液相特征图谱，以期为沉香的科学鉴别和质量评价提供科学依据。

1材料与方法1.1材料与仪器29批次试验样品采自沉香主产地和市场收集，经中国林业科学研究院木材工业研究所根据《中国 主要木材名称》（G B/T 16734—1997)和2015版《中国药典》（G B 5009)鉴定。

其中，S1~S14为参考样 品，用于建立沉香高效液相特征图谱，已知野生沉香 的产地和人工沉香的结香方法，包括野生沉香样品 (惠安系S1~S3:老挝、越南顺化、越南岘港；莞香 系S4 ~S6:海南、香港、海南；星洲系S7 ~S9:东马 来西亚，印度尼西亚，东加里曼丹）和人工沉香样品 (物理法S10〜S11:火钻、打钉；化学法S12 ~S13: 通体结香、吊瓶；生物法S14:菌种）；S15 ~ S29为 验证样品，用于验证沉香高效液相特征图谱，包括5 批次伪品沉香（S15 ~S19:棱柱木、油楠、榄仁、花梨 木、鸡骨木）、6批次野生沉香（S20 ~ S25:越南、柬 埔寨、海南、海南、马来西亚、印尼）和4批次人工沉 香（S26-S29:打洞，通体结香，打钉、火钻）。