流动注射化学发光法测定头孢曲松钠
流动注射化学发光法测定头孢噻肟钠
２１ Ｏ ０年 ７月
化
学 研
究
中 国科 技 核 心 期 刊
ｈ ｙ＠ ｈ ｎ ． ｄ ． ｒ ｘ ｊ ｅ ｕ ｅ ｕ ｃｌ
ＣＨ ＥＭ Ｉ ＣＡ Ｉ
ＲＥＳＥＡＲＣ Ｈ
流 动 注 射 化 学 发 光 法 测 定 头 孢 噻 肟 钠
王 珏， 屈建莹 陈文静， ， 王金中
ｏ ｅ ｏ ａ ｍ ｅ ｓ ｄｉ ｆｃ ｆ ｔ ｘｉ ｏ ｕｍ ａ ｅ ｄｅ ｅ ｍｉ ｅ ｔａ ｒ ｌｔｖ ｔ ｎｄ ｒ ｅ ｉｔｏ （ ｃ ｎ ｂ ｔ ｒ ｎ ｄ ａ ｅ ａ ｉ ｅ ｓ ａ ａ ｄ ｄ ｖ ａ ｉ ｎ ＲＳＤ） ｏ ． ．Ｔｈ ｆ１ ０ ｅ ｍｅ ｈｏ ｔ ｄ，ｂｅｎｇ ｓｍｐｌ ，ｒ ｐｉ ｎｄ ｒ ｌａ ｌ ｉ ｉ ｅ ａ ｄ ａ ｅ ｉ ｂ ｅ，ｃ ｎ ｂｅｓ ｔｓ ａ ｔ ｒｌ ｓ ｄ ｔ ｔ ｒ ｎ ｅ ｏｔ ｘｉ ｅＳ — ａ ａ ｉｆ ｃ ｏ ｉｙ ｕ ｅ ｏ ｄｅ ｅ ｍｉ ｅ ｃ ｆ ａ ｍ Ｏ
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ａ ｅ ｍ ｅ ｈ ｄ ｆ ｒ ｄ ｔ ｒ ｉ ｔｏ ｆ ｃ ｆ ａ ｉ ｅ ｓ ｉ ｍ ｓ ｂ ｅ ｓ ａ ｉｈｅ ｙ ｕ ｉ ｓｒ ｃ ： ｎ ｗ ｔ ｏ ｏ ｅ ｅ ｍ ｎａ ｉ ｎ ｏ ｅ ｏｔ ｘ ｍ ｏｄ ｕ ｈａ ｅ ｎ ｅ ｔ ｂｌｓ ｄ ｂ ｓｎｇ
Ｄ ｔｒ ｎ ｔ ｎ ｏ ｅｏａ ｉ ｏ ｉｍ ｙＦｏ ｎ ｔ ｎ ｅｅｍｉａｉ ｆＣ ｆｔｘｍｅＳ ｄｕ ｂ ｌｗ Ｉｊｃｉ — ｏ ｅ ｏ
Ｃｈｅ ｉｕ ｉ ｅ ｃ ｎｃ ｍ ｌｍ ｎ ｓｅ ｅ
ＷＡＮＧ ｕ ，ＱＵ ｉｎ ｙｎ ，ＣＨＥＮ ｅ —ｉｇ，Ｗ ＡＮＧ ｉ—ｈ ｎ Ｊｅ Ｊａ — ｉ ｇ Ｗ ｎｊｎ Ｊｎ ｚ ｏ ｇ
鲁米诺化学发光分析研究综述
鲁米诺化学发光分析研究综述化学发光是化学反应体系中的某些分子，如反应物、中间体或反应产物吸收了化学反应释放出的化学能，由基态跃迁至激发态，当其从激发态返回基态时所产生的光辐射[1]。
化学发光法则是根据化学反应的发光强度或发光总量确定相应组分含量的一种分析方法。
同荧光法相比，化学发光法不需要外来的光源，减少了拉曼散射和瑞利散射，降低了噪音信号的干扰，提高了检测的灵敏度[4]，扩大了线性范围。
鲁米诺（5-氨基-2，3-二氢-1，4-二杂氮萘二酮，也称3-氨基邻苯二甲酰肼）因其结构简单、易合成、水溶性好，以及发光量子效率高等特点，鲁米诺是最常用的液相化学发光试剂之一。
自从1928年albrecht首次报道了鲁米诺与氧化剂在碱性溶液中的化学发光反应以来，人们对该化学发光体系的研究就一直十分活跃，使得该化学发光体系被应用于许多领域之中。
white等通过比较鲁米诺体系的化学发光光谱和3-氨基邻苯二甲酸根离子的荧光光谱，提出鲁米诺化学发光反应的发光体。
在碱性条件下，鲁米诺首先被氧化为叠氮酮，然后形成桥式六元环过氧化物中间体，分解后以光子的形式释放出能量产生化学发光。
下面笔者简要介绍鲁米诺化学发光反应的机理，详细地总结近五年来鲁米诺化学发光体系的应用进展。
鲁米诺化学发光体系的分析应用主要基于以下几个方面。
鲁米诺-过氧化氢化学发光体系应用最为广泛。
许多过渡金属离子对鲁米诺-过氧化氢化学发光反应具有很好的催化作用。
李正平等发现铁蛋白催化，产生很强的化学发光信号，建立简便灵敏的检测铁蛋白的化学发光方法。
方法的线性范围为0.5～10μg/l，检出限为0.36μg/l，为铁蛋白作为纳米粒子标记物及直接检测提供一种新的途径。
戴路等报道了一种新的测定雌性激素的流动注射化学发光方法。
在碱性条件下，金银复合纳米粒子能显著地增强鲁米诺-过氧化氢化学发光，而雌性激素能明显地抑制该体系的化学发光强度，建立了测定天然雌激素（雌酮、雌二醇和雌三醇）的化学发光方法。
胶束增敏流动注射化学发光法测定头孢哌酮钠
第２ ７卷 第 ５期
、 Ｏ ．２ ７ １ ＮＯ．５
西 南 师 范 大 学 学 报 （自然 科 学 版 ）
Ｊｕ ａ ｆ Ｓ ｕｈ ｅｔ ｈｎ Ｎ ｒ ｌ ｅｓｔ （ Ｎ ｔｒｌ ｃｅ ｃ ） ｏ ｒ ｌ ｏ ｔｗ ｓ ｎ ｏ Ｃ ｉａ ｏｍａ Ｕ ｒｉ ｙ ａｕａ Ｓ ｉｎｅ
２０ ０ ２年 １ ０月
Ｏｃ ｔ
文 章 编 号 ： １Ｏ ５ ７ （０ ２ ０ ０ ０ ０ ０ ０ ４ １ ２ ０ ）５— ８６— ５
胶 束 增 敏 流 动 注 射 化 学 发 光 法 测 定 头 孢 哌 酮 钠
陈朝 晖 ， 蔡 富春 ，
黄玉明 ， 刘 卫 兵
１ 西南 师 范 大 学 化 学 化 工 学 院 ，重 庆 ４ ０ １ ；２ 西 南 农 业 大学 荣 昌 校 区 ．重 庆 ４ ２ ６ ． ０ ７ ５ ０４ ０
收 稿 １期 ：２ ０ １ ３ ０ １ ０—１ ３ 作 简 介 ：陈 朝 晖 （ ９ ２一 ，女 ． Ｐ 川 资 中 人 ，讲 帅 ，硕 ｛ 究 ． 主 ‘ Ｉ７ ） ｑ ＋ 研 ｆ． 从 ， 发 光分 析 的 研 究 ｝
维普资讯
第 ５期
陈 朝 晖 ， 等 ：胶 束 增 敏 流 动 注 射 化 学 发 光 法 测 定 头 孢 哌 酮 钠
摘 要 ：基 于 在盐 酸 介 质 中 ，十 二 烷 基 苯 磺 酸 钠 （ Ｄ Ｓ 形 成 的 皎 束 能 增 强 高 锰 酸钾 一 孢 哌 酮 钠 体 系 的 化 学 发 光 这 一 ＳＢ） 头
现 象 ．建 立 了 一 种 简 易 、快 速 测 定 头 孢 哌 酮 钠 的 流 动 注 射 化 学 发 光 新 方 法 ．在 优 化 的 实 验 条 件 下 ，头 孢 哌 酮 钠 的
注射用头孢曲松钠含量测定的不确定度分析
度评定 的模 型 ， 以期 建立 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ外 标 法 不确 定 度 评 定 ２ ．３ｍ 、 ３５ ｇ分 别 置 １０ｍｌ 瓶 中 ， ３５ ｇ②２ ．６ｍ ， ０ 量 加水 适
学 验证 ， 文 重 新 建 立 了样 品前 处 理 方 法 ， 方 法 简 本 且 便、 易于操 作 。
３３ 滤 膜 吸 附试 验 醋 酸 氢 化 可 的 松 乳 膏 剂 ， 用 ． 采
３ 讨 论
３ １ 流动相 与供试 品溶 液 浓 度 的 确定 以 乙腈 一水 ．
（６ ４ 为流 动相 ， 酸氢 化 可 的松 峰与 醋 酸 可 的松 ３ ：６ ） 醋
量， 是一个 确定 的差 值 ， 数 轴 上 表示 为一 个 点 ， 在 而测
ｍ ５Ｉ ； 特勒 Ａ ２ ５电子 天 平 （ 士 ， ｍ， ｍ）梅 ｘ Ｇ一 ４ 瑞 十万 分
量不确 定度 表示 被 测量 之 值 的分 散性 ， 以分 布 区 间 之一 ） 头孢 曲松 对 照 品 （ 国 药 品生 物 制 品 检 定 所 ， 它 ； 中 的半宽 度表示 ， 因此 在 数 轴上 它表 示 一 个 区间 。在 相 含 量 ８ ． ％ ， 号 １０ ８ ２ ０ ０ ） 注 射用 头 孢 曲松 ４１ 批 ３ ４ ０— ０ ３ ２ ； 同的条 件下进行 测量 时 ， 理赋 于被 测 量 的任何 值 ， 合 均 钠 （ 台湾泛 生 制药 厂 股 份有 限公 司 ， 格 Ｉｇ支 ， 号 规 ／ 批
据 。方 法 ： 用 高 效 液 相 色谱 法 （ Ｐ Ｃ 测 定 注 射用 头孢 曲松 钠 含 量 ， 析 并 计 算 测 量 不 确 定 度 。 结 果 ： 次 实 验 注 射 用 采 ＨＬ） 分 本
流动注射抑制化学发光法测定头孢曲松钠
Ａ ｓ ａ ｔＡ ｎ ｖｌ ｈ ｍ ｌｍｉ ｓｅ ｃ Ｃ ）ｓｓ ｍ ｆｒ ｈ ｅ ｒ ｉａｉ ｆ ｅｔａｏ ｅｓｄｕ ｉ ｏ ｎ ｃ ｏ ｂ ｔ ｃ ： ｏｅ ｃｅ ｉ ｎ ｃｎ ｅ（ Ｌ ｙｔ ｅｄ ｔ ｍ ｎ ｔ ｎｏ ｆｉ ｎ ｏ ｉｍ ｗｔ ｆ ｗ ｉ ｅ ｔ ｎ ｒ ｕ ｅ ｅ ｏｔ ｅ ｏ ｃ ｒｘ ｈｌ ｊ ｉ
制其化 学发光 ， 建立 了磷钼 钒杂 多酸一 鲁米诺一 头孢 曲松 钠化 学发光抑 制 法测定 头孢 曲松钠 的新 体 系． 结合 流动 注射分析技 术 ， 头孢 曲松钠 的浓度在 ４ ０×１ 一 ４ ０×１ ｇｍ 范围 内与相对化 学发光 强度 呈线性 关 Ｌ ｕ — ｎ ， Ｕ Ｍａ—ａ ， ａ—ｎ Ｕ Ｐ ｎ ，ＩＧ ｏｆ ｇ Ｘ ｏｔ ｎ ＭＡ Ｈｕｉ ｉｇ ａ ｉ ｌ
（ ｅａｔ ｎ ｏ ｈ ｍｓ ｙ ｈｎ ｑ ｅｃｅ ｏｅｅ Ｓ ａｇｉ ７ ００，ｈｎ ） Ｄ ｐｒ ｍｅｔ ｆ ｅ ｉｒ，Ｓ ａｇｉ Ｔ ａｈｒ Ｃｌ ｇ ， ｈｎ ｑ ４ ６ ０ Ｃ ｉａ Ｃ ｔ ｕ ｓ ｌ ｕ
维普资讯
第２ ４卷 第 ６期 ２ ０ 年 ６ 月 ０８
商 丘 师 范 学 院 学 报 Ｊ Ｕ Ｎ Ｌ Ｏ ＨＡ Ｇ Ｉ Ｅ Ｃ Ｅ Ｓ Ｃ Ｌ Ｅ Ｅ Ｏ Ｒ Ａ ＦＳ Ｎ Ｑ Ｕ Ｔ Ａ Ｈ Ｒ Ｏ Ｌ Ｇ
Ｖｏ ． ４ １２ Ｎｏ． ６
ａ ｏ ｅ ｓ ｄ ｕ ｄ ｔｒ ｎ ｔｏ ｎ ｈ ｏ ｏ ｅ ｙ ｔｍ ａ ａｉｆｃｏ ｉ ｅ ｎ ａ ｐｌ ｄ ｔ ｈ ｎ ｌ ｓｓｏ ｅｔｉｘ ｎ Ｏ ｘ ｎ ｏ ｉ ｍ ｅｅ ｍｉ ａ ｉｎ ａ ｄ ｔ ｅｐｒ ｐ ｓ ｄ ｓ ｓｅ ｈ ｓｓ ｔｓａ ｔｒｌ ｂ ｅ ｐ ｉ ｏ ｔ ｅ ａ ａ ｙ ｉ ｆｃ ｆｒａ ｏ ｅ Ｓ — ｙ ｅ ｄ ｕ ｔｂ ｅｓ ｉ ｍ ａ ｌｔ ．
HPLC法测定注射用头孢曲松钠中头孢曲松的含量
HPLC法测定注射用头孢曲松钠中头孢曲松的含量目的：建立注射用头孢曲松钠中头孢曲松的含量测定方法。
方法：HPLC法；C18柱（4.6×150mm，5μm）；流动相：0.02mol/l正辛胺溶液-乙腈（73∶27）；流速：1.0 ml/min；检测波长：254nm；柱温：20℃；进样量：20μl。
结果：头孢曲松在浓度91.9～459.6μg/ml与峰面积有良好的线性关系（r=0.9996）。
结论：该法简单，专属性强，准确度高，可用于对注射用头孢曲松钠的质量控制。
标签：HPLC；头孢曲松；含量测定头孢曲松为第三代头孢菌素，对革兰阴性菌包括肠杆菌类、铜绿假单胞菌及厌氧菌有较强的作用，用于敏感致病菌所致的下呼吸道感染、尿路、胆道感染，以及腹腔感染、皮肤软组织感染、骨和关节感染、败血症、脑膜炎等感染预防。
单剂可治疗单纯性淋病[1] 。
本文采用HPLC法测定注射用头孢曲松钠中头孢曲松的含量，准确可靠，简便。
同时通过HPLC色谱图，可以判断注射用头孢曲松钠的质量控制水平，为临床用药提供依据。
1 仪器与试药1.1 仪器Waters高效液相色谱仪（Waters 2695 HPLC PumP Waters；2998二级管阵列检测器；Epower化学工作站）；赛多利斯CPA225D电子分析天平。
1.2 试药头孢曲松对照品（批号：130480-200903，中国药品生物制品检定所）。
注射用头孢曲松钠（批号：1212061、1301182，辅仁药业集团有限公司）。
水为纯化水；乙腈为色谱纯；正辛胺为化学纯，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果2.1 色谱条件[2] 色谱柱：Waters Sunfire C18柱（4.6×150mm，5μm）；流动相：0.02mol/l正辛胺溶液-乙腈（73：27），并用磷酸调节pH值6.5；流速：1.0 ml/min；检测波长：254nm；柱温20℃；进样量20μl。
2.2 溶液的制备[2]2.2.1 对照品溶液的制备精密称定头孢曲松对照品适量，加流动相溶解并定量稀释制成0.22mg/ml的对照品溶液。
鲁米诺化学发光体系的应用
鲁米诺化学发光体系的应用鲁米诺（5-氨基-2，3-二氢-1，4-二杂氮萘二酮，也称3-氨基邻苯二甲酰肼）俗名发光氨luminol，因其结构简单、易合成、水溶性好，以及发光量子效率高等特点，常温下是一种黄色晶体或者米黄色粉末，是一种比较稳定的化学试剂,化学式C8H7N3O2 。
鲁米诺是最常用的液相化学发光试剂之一。
自从1928年albrecht首次报道了鲁米诺与氧化剂在碱性溶液中的化学发光反应以来，人们对该化学发光体系的研究就一直十分活跃，使得该化学发光体系被应用于许多领域之中。
通常用于酶促化学发光实验以及刑侦上的微量血迹检测。
由于其结构简单、易合成、发光量子效率高的特点，现也被用于蛋白质印迹试验western blot 中。
鲁米诺化学发光体系的分析应用主要基于以下几个方面。
一、鲁米诺-过氧化氢化学发光体系应用最为广泛。
许多过渡金属离子对鲁米诺-过氧化氢化学发光反应具有很好的催化作用。
李正平等发现铁蛋白催化，产生很强的化学发光信号，建立简便灵敏的检测铁蛋白的化学发光方法。
方法的线性范围为0.5～10μg/l，检出限为0.36μg/l，为铁蛋白作为纳米粒子标记物及直接检测提供一种新的途径。
戴路等报道了一种新的测定雌性激素的流动注射化学发光方法。
在碱性条件下，金银复合纳米粒子能显著地增强鲁米诺-过氧化氢化学发光，而雌性激素能明显地抑制该体系的化学发光强度，建立了测定天然雌激素（雌酮、雌二醇和雌三醇）的化学发光方法。
该方法已用于孕妇尿样中雌激素总量的测定。
刘振波等基于人的血清白蛋白对鲁米诺-过氧化氢-叶绿素铜钠化学发光体系的抑制作用，采用流动注射技术建立了一种简单、快速、可连续测定人的血清白蛋白的新方法。
二、鲁米诺-高碘酸钾化学发光体系。
王瑞琪等发现在碱性介质中，镧（iii）对鲁米诺-高碘酸钾体系的化学发光反应有显著的增敏作用。
据此，建立了测定镧（iii）的反相流动注射化学发光新方法，并将此法用于合成样品的测定。
【国家自然科学基金】_头孢曲松钠_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140730
科研热词 头孢曲松钠 流动注射 化学发光 鲁米诺 量子点 赤藓红 荧光猝灭法 荧光猝灭 磷钼钒杂多酸 牛血清白蛋白 抗生素 分光光度法 共振瑞利散射法 二氧化钛:光催化降解 cu(ⅱ)
推荐指数 5 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
ห้องสมุดไป่ตู้
2013年 科研热词 推荐指数 荷移反应 2 头孢曲松钠 2 分光光度法 2 鸡 1 门诊 1 酶特性 1 运动性 1 谷氨酸 1 脑缺血 1 缺血预处理 1 等温滴定微量热法 1 稀释焓 1 百里酚蓝 1 电针 1 焓相互作用系数 1 注射用头孢曲松钠 1 氯化钾 1 氯化钠 1 松材线虫 1 抗菌素 1 抗生素 1 对苯醌 1 呼吸科 1 合理用药 1 原核表达 1 再灌注损伤 1 兴奋性氨基酸转运2 1 克隆 1 α -三噻吩 1 blatem-57型β -内酰胺酶 1
2009年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23
科研热词 头孢曲松钠 生物陶瓷 壳聚糖 鸡福氏志贺菌 骨形态发生蛋白 酶特性 超广谱β -内酰胺酶 荧光光谱 肺炎链球菌 耐药性 紫外光谱 福氏志贺茵 溴化乙锭 抗生素 抑菌 成骨 圆二色谱 原核表达 儿童 tem-1v shv-12型esbls shv-12 dna
2014年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
科研热词 推荐指数 头孢菌素 2 切花月季 2 谷氨酸转运体-1 1 膜质过氧化 1 维氏气单胞菌 1 结直肠扩张-内脏运动反射 1 生物学特性 1 瓶插寿命 1 水分胁迫 1 应激障碍,创伤后 1 分离鉴定 1 内脏高敏感性-痛觉敏化 1 乌鳢 1
【国家自然科学基金】_头孢曲松_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140801
推荐指数 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2013年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52
科研热词 耐药性 病原菌 头孢曲松 鸭大肠杆菌病 飞行质谱分析 非发酵菌 铜绿假单胞菌 蛋白组分分析 药敏试验 致病性大肠杆菌 能量代谢 肠道菌群 细菌 磺胺甲唑 生殖道感染 生存率 环丙沙星 抗菌药物 抗药性 恩诺沙星 左氧氟沙星 奶牛 头孢曲松钠 嗜麦芽窄食单胞菌 呼吸道感染/微生物学 呼吸道感染 分离鉴定 优势菌群失衡 乳房炎 2-d native/sds page
推荐指数 3 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2011年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
2011年 科研热词 铜绿假单胞菌 鉴定 诱导耐药株 荧光定量rt-pcr 耐药 细菌耐药性监测 淋球菌 次抑菌浓度诱导 弗氏柠檬酸杆菌 头孢曲松 医院感染 主动外排调控基因 pcr-sscp mrna表达水平 cox-staurt趋势检验 16s rdna 推荐指数 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
推荐指数 3 2 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2010年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30
头孢曲松钠如何进行检测？
头孢曲松钠如何进行检测？头孢曲松钠是一种广泛应用于临床治疗中的抗菌药物，其检测方法主要包括物理性质分析、色谱分析和免疫分析等多种方法。
下面将逐一介绍这些常用的检测方法。
首先，头孢曲松钠的物理性质可以通过以下几种方法进行分析。
1. 熔点测定：头孢曲松钠的熔点为116-120℃，可以用电热炉或熔点仪进行测定。
2. 红外光谱分析：通过红外光谱仪对头孢曲松钠样品进行光谱扫描，根据样品吸收峰的位置和强度，可以确定其分子结构和官能团。
3. 紫外可见光谱分析：将头孢曲松钠样品溶解于适当的溶剂中，然后用紫外可见分光光度计测定样品的吸收率和吸收峰的波长，可以快速判定样品的纯度和含量。
其次，头孢曲松钠的色谱分析方法有以下几种。
1. 液相色谱法：液相色谱法是最常用的分析方法之一，可通过高效液相色谱仪(HPLC)进行分析。
首先将头孢曲松钠样品溶解于适当的溶剂中，然后利用适宜的柱和流动相进行分析，通过峰的保留时间和峰面积对样品进行定量分析。
2. 气相色谱法：气相色谱法适用于易挥发性的样品。
首先将头孢曲松钠样品转化为易挥发的衍生化物，然后通过气相色谱仪进行分析。
通常使用毛细管气相色谱进行分离，并通过检测器对化合物进行定性和定量分析。
3. 薄层色谱法：薄层色谱法是一种简单、快速和实用的分析方法。
将头孢曲松钠样品涂敷在薄层色谱板上，然后放入适当的溶剂中进行分离，可根据样品在指定条件下的迁移距离和颜色进行初步鉴定。
最后，免疫分析是一种特异性强、准确度高的检测方法。
1. 酶联免疫吸附测定(ELISA)：首先将头孢曲松钠样品和特异性抗体充分反应，然后通过酶标免疫反应和底物-检色剂体系对样品进行鉴定和定量分析。
相比于传统的色谱分析方法，ELISA具有灵敏度高、准确性好和操作简单等优点。
2. 荧光免疫分析法：该方法利用头孢曲松钠与特异性荧光标记抗体的结合反应，通过荧光标记物的发射强度进行定性和定量分析。
该方法具有高灵敏度和高选择性的特点。
注射用头孢曲松钠含量的测定方法
注射用头孢曲松钠含量的测定方法张给智【摘要】目的:根据USP29[1]各论要求,考察注射用头孢曲松钠含量测定分析方法的系统适用性、专属性、精密度、线性和范围、准确度和耐用性项目,通过验证证明该方法在现有实验条件下操作准确可靠.方法:高效液相色谱法[2-3].结果:本次分析方法验证中的验证结果均达到了既定接受标准.结论:该分析方法可靠、准确,并且具有稳定性指示能力,能达到使用目的.【期刊名称】《黑龙江科技信息》【年(卷),期】2013(000)015【总页数】1页(P45)【关键词】注射用头孢曲松钠;高效液相色谱;含量【作者】张给智【作者单位】哈药集团制药总厂,黑龙江哈尔滨150086【正文语种】中文1 试验材料试验用具及试剂：二极管阵列检测器，厂家：Waters；紫外检测器 2489，厂家：Waters；Alliance自动进样及分离单元，厂家：Waters；色谱柱 Thermo C18 4.6*150mm 5μm，厂家：Waters；pH 计DELTA320，厂家：Mettler；电子天平 MS205DU，厂家：Mettler。
磷酸氢二钾，磷酸，氢氧化钾，柠檬酸钠和柠檬酸，色谱纯，厂家：科密欧；四庚基溴化铵，色谱纯，厂家：fluka；乙腈，色谱纯，厂家：TEDIA；纯化水。
标准品：头孢曲松钠，350mg/瓶，批号：H0J296，来源：USP药典委员会；头孢曲松钠E-异构体，25mg/瓶，批号：I1I212，来源：USP药典委员会。
2 试验条件和溶液配制液相色谱条件：检测波长270nm；4.6mm×150mm不锈钢色谱柱；固定相：十八烷基硅烷键合硅胶（5μm）；流速：2.0ml/min；柱温：30℃；进样量：20μl。
pH7.0缓冲液-取磷酸氢二钾13.6g和磷酸二氢钾4.0g，用水溶解并稀释至1000ml。
用磷酸或10N氢氧化钾溶液调整pH7.0±0.1。
pH5.0缓冲液-取柠檬酸钠25.8g，用水溶解并稀释至500m l，用柠檬酸溶液（1→5）调整pH5.0±0.1，再用水稀释至1000m l。
流动注射化学发光测定头孢类药物研究
第4期2017年8月No.4 August，2017现代盐化工Modern Salt and Chemical Industry化学发光分析法（ChemiLuminescence ，CL ）是根据化学反应过程当中产生的辐射光的强度来确定各种物质含量的分析方法，指的是某些化学反应过程中发出可见光的现象。
其发光的反应机理是反应体系中的某些物质的分子吸收了反应所释放出的能量而由基态跃迁到激发态，然后再由从激发态返回到基态，同时将能量以光辐射的形式释放产生化学发光其过程可表示为A+B →C*+D ，C*→C+hv 或A+B →C*+D ，C*+F →F*+c ，F*→F+hv 。
将化学发光反应应用于分析化学当中，据某一时刻的发光强度或者反应的总发光量来确定整个体系当中的相对应组分含量的分析方法叫作化学发光分析法。
该种方法虽然具有仪器简单、线性范围宽、灵敏度高并且不存在空白的优点，但化学发光现象出现时间短并且随时间变化发光强度会有较大变化，而且受到环境因素的影响较大，导致反应进程很难控制，选择性和重现性都较差，很难实现自动化等。
流动注射技术却可以弥补此法的不足之处，所以将流动注射技术与化学发光法有机地结合起来，集二者之优点，最终就可实现自动化，而且还能将化学发光信号的重现性显著提高，因而，化学发光分析法成了一种灵敏、高效的痕量和超痕量分析技术。
目前，主要使用的化学发光反应体系有：（1）Ce （Ⅳ）—Rh6G ；（2）高锰酸钾；（3）磷钼钒杂多酸—鲁米诺；（4）Luminol —H 2O 2；（5）鲁米诺—高锰酸钾；（6）NBS —荧光素等。
作为高效的痕量和微量分析方法，化学发光分析法有其独特的优势，在生命科学、医学等领域中的应用前景都较为广泛。
本研究从对与生命相关物质以及目前各种药物和药物在人体中代谢产物的化学发光分析进行了简要综述。
1 头孢类药物头孢类药物属于头孢菌素类抗生素，微生物或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其他活性的一类次级代谢产物即为抗生素。
测定注射用头孢曲松钠含量的方法[发明专利]
![测定注射用头孢曲松钠含量的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/acaeac3984254b35effd348c.png)
专利名称：测定注射用头孢曲松钠含量的方法专利类型：发明专利
发明人：王强,张静文,刘萍
申请号：CN201410482727.8
申请日：20140921
公开号：CN104407063A
公开日：
20150311
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种测定注射用头孢曲松钠含量的方法，该方法包括配制pH为7.0的磷酸氢二钾和磷酸二氢钾缓冲液、配制pH为5.0的柠檬酸钠缓冲液，再配制分离度溶液：取头孢曲松钠对照品和头孢曲松钠E-异构体对照品各4mg，用流动相溶解并稀释至25.0mL，配制对照品溶液和待测溶液，再测定含量。
本发明可靠准确、具有系统适用性、专属性，能够满足检测的稳定性需求。
申请人：四川制药制剂有限公司
地址：610000 四川省成都市高新西区百叶路18号
国籍：CN
更多信息请下载全文后查看。
可见光分光光度法测定头孢曲松钠
可见光分光光度法测定头孢曲松钠刘荣森;张长水【摘要】基于头孢曲松钠能被Fe3+氧化,Fe3+被还原为Fe2+,Fe2+与铁氰化钾生成可溶性普鲁士蓝,通过测定生成的普鲁士蓝在733nm处的吸光度,建立了测定头孢曲松钠的新方法.头孢曲松钠含量在0.11 ～7.20μg·mL-1范围内与吸光度呈良好线性关系,线性回归方程A=0.2717o(μg·mL-1)+0.0325,相关系数R=0.9992,表观摩尔系数ε=1.8×105L·(mol·cm)-1.测定了市售头孢曲松钠粉针剂的含量,平均回收率为100.5％,结果令人满意.【期刊名称】《化学工程师》【年(卷),期】2015(029)005【总页数】3页(P26-27,34)【关键词】头孢曲松钠;普鲁士蓝;分光光度法【作者】刘荣森;张长水【作者单位】河南林业职业学院,河南洛阳471002;河南科技大学化工与制药学院,河南洛阳471003【正文语种】中文【中图分类】O657.32头孢曲松钠（Ceftriaxone Sodium）是第三代头孢菌素类抗生素，用于敏感致病菌所致的下呼吸道感染、尿路、胆道感染，以及腹腔感染、盆腔感染、皮肤软组织感染、骨和关节感染、败血症、脑膜炎等及手术期感染预防。
测定头孢曲松钠的含量对药品质量的控制及指导临床用药都具有极其重要的意义。
目前，已报道的测定头孢曲松钠的方法有：可见光分光光度法[1-3]、紫外分光光度法[4]、流动注射化学发光分析法[5，6]、毛细管区带电泳法[7]、共振锐利散射光谱法[8]、高效液相色谱法[9]等。
但基于生成普鲁士蓝来测定头孢曲松钠的方法还未见报道。
研究表明：在一定温度下，Fe3+能被头孢曲松钠还原为Fe2+，Fe2+与铁氰化钾生成可溶性普鲁士蓝，通过测定普鲁士蓝的吸光度间接测定头孢曲松钠的含量。
本法和其他分光光度法相比，由于使用无毒、价格便宜的铁氰化钾进行显色，使测试成本低廉；采用FeCl3在一定条件下直接氧化头孢曲松钠，由于分析步骤少，使分析误差较低；使用可见光分光光度法进行分析，具有测试仪器简单、操作容易等优点；本法还具有灵敏度高，线性范围较宽等特点。
头孢曲松钠的流动注射化学发光抑制法测定
头孢曲松钠的流动注射化学发光抑制法测定
刘波;王金中;满勇
【期刊名称】《分析测试学报》
【年(卷),期】2003(022)004
【摘要】基于吖啶橙在氢氧化钠介质中, 能被高锰酸钾氧化产生较强的化学发光, 头孢曲松钠能强烈抑制其化学发光, 建立了高锰酸钾-吖啶橙-头孢曲松钠化学发光抑制测定头孢曲松钠的方法; 头孢曲松钠的质量浓度与化学发光强度在 2～ 20 mg/L范围内呈良好线性关系, 方法的检出限为8 μ g/L, 对 10 mg/L头孢曲松钠连续进行 11次测定的相对标准偏差为 3.1%; 方法用于头孢曲松钠针剂测定, 取得了满意的结果.
【总页数】3页(P45-47)
【作者】刘波;王金中;满勇
【作者单位】河南大学,化学化工学院,河南,开封,475001;河南大学,化学化工学院,河南,开封,475001;河南大学,化学化工学院,河南,开封,475001
【正文语种】中文
【中图分类】O657.32;R978.11
【相关文献】
1.流动注射抑制化学发光法测定头孢曲松钠 [J], 瞿鹏;李国防;徐茂田;马淮凌
2.流动注射化学发光法测定头孢曲松钠 [J], 权新军;满文慧;宋乃忠;郑松志;王洪艳;金为群
3.流动注射-化学发光抑制法测定三叶青中痕量山奈酚 [J], 刘彬;张强;李爱民
4.流动注射-抑制化学发光法测定岩白菜素 [J], 张韫;高苏亚;扈本荃
5.反相流动注射抑制化学发光法测定头孢唑啉钠 [J], 瞿鹏;瞿昊宏;宋凌霄;田爱华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
荧光配合法测定头孢曲松钠的含量
荧光配合法测定头孢曲松钠的含量
张远馥;王金中;王崇妍;李永强
【期刊名称】《医药导报》
【年(卷),期】2007(26)3
【摘要】目的测定头孢曲松钠含量.方法采用荧光配合法,头孢曲松钠与铁离子(Fe3+)在一定条件下发生配合反应生成荧光物质,其荧光物质的最佳激发波长378 nm,发射波长487 nm.结果其线性范围为1～10 mg·L-1,检出限0.231 0 mg·L-1,回收率为100.4%.结论该方法简单、快速、灵敏.
【总页数】2页(P296-297)
【作者】张远馥;王金中;王崇妍;李永强
【作者单位】河南大学化学化工学院,开封,475001;河南大学化学化工学院,开
封,475001;河南大学化学化工学院,开封,475001;河南大学化学化工学院,开
封,475001
【正文语种】中文
【中图分类】R9
【相关文献】
1.自制的苄氧基葫芦脲[6]应用于荧光光度法测定商业制剂中头孢曲松钠的含量 [J], 王冬梅;孙军勇
2.阻抑动力学荧光法测定头孢曲松钠 [J], 郝巧艳;张远馥;王金中
3.钇配合物荧光猝灭法测定姜黄素含量 [J], 王峰;黄薇;张运军;唐波
4.配合物荧光光度法测定蔬菜中磷含量 [J], 尹红
5.高效液相色谱法测定注射用头孢曲松钠含量的不确定度评定 [J], 刘姣;崔成伟;李蕊
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
流动注射-化学发光法测定头孢拉定
流动注射-化学发光法测定头孢拉定
范顺利;吕超;周庆祥;王军
【期刊名称】《分析化学》
【年(卷),期】2001(029)003
【摘要】@@1引言rn 头孢拉定(cephradine, CEP)是广泛用于临床治疗的一种头孢类抗生素药物。
目前对其测定的主要方法有高效液相色谱法、分光光度计、荧光法和吸附极谱法等。
利用Ce(Ⅳ)与某些含巯基的化合物作用产生化学发光从
而测定这些化合物的研究已有文献报道，但未见用于头孢拉定的测定。
头孢拉定的降解产物含有巯基，本文采用流动注射技术考察了该降解产物与Ce(Ⅳ)作用产生
化学发光的条件，发现罗丹明6G对该化学发光体系有很强的增敏作用，据此建立了测定头孢拉定的新方法。
该方法用于胶囊中头孢拉定含量的测定，结果令人满意。
【总页数】1页(P367)
【作者】范顺利;吕超;周庆祥;王军
【作者单位】河南师范大学化学与环境科学学院,;河南师范大学化学与环境科学学院,;河南师范大学化学与环境科学学院,;河南师范大学化学与环境科学学院,
【正文语种】中文
【中图分类】O65
【相关文献】
1.Luminol-Cu2+体系流动注射化学发光法测定头孢拉定 [J], 李红
2.头孢拉定流动注射-化学发光分析法的研究 [J], 陈效兰;肖柳婧;徐淑静;杨娟
3.流动注射电化学发光法测定头孢拉定的研究 [J], 陈小利;张成孝
4.流动注射化学发光法测定头孢氨苄和头孢拉定 [J], 汪敬武;熊和玉
5.鲁米诺-铁氰化钾流动注射化学发光法测定头孢拉定 [J], 陈效兰;徐淑静;肖柳婧;杨娟
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
流动注射化学发光法测定头孢哌酮钠
流动注射化学发光法测定头孢哌酮钠【摘要】目的：建立了测定头孢哌酮钠含量的新方法。
方法：在碱性条件下，头孢哌酮钠对KMnO4-鲁米诺化学发光体系的发光强度具有明显的增敏作用，且头孢哌酮钠质量浓度与化学发光的变化在一定范围内呈线性关系。
结果：在优化实验条件下，用该法测定头孢哌酮钠的线性范围为4.0×10-7~2.0×10-5g/mL，检出限为1.1×10-7g/mL，相对标准偏差为2.0％（c=3.0×10-6 g/mL，n=11）。
结论：该法简便、快速、可靠，用于药物制剂中头孢哌酮钠含量的测定，结果令人满意。
【关键词】化学发光；流动注射；高锰酸钾；鲁米诺；头孢哌酮钠头孢哌酮钠（Cefoperazone sodium；CRO）又名氧哌羟苯唑头孢菌素钠，是半合成的第三代头孢菌素类抗菌素，能对抗多种β内酰胺酶的降解作用，具有广谱的抗菌作用，主治革兰氏阴性菌、变形杆菌、大肠杆菌、克雷百氏杆菌感染。
中国药典采用高效液相色谱法______________________________[1]对CRO进行测定，迄今报道的其它测定方法有分光光度法[2]、色谱法[3]、电化学分析法[4]和毛细管电泳法[5]等。
分光光度法需要对样品进行加热，线性范围比较窄；电化学分析法中，样品在汞电极上的预富集时间长；高效液相色谱法分析时间长，操作繁琐仪器价格昂贵，毛细管电泳法灵敏度差，因此在实际应用中受到一定限制。
目前国内采用流动注射化学发光法测CRO的研究还比较少。
1 实验部分1.1 仪器与试剂IFFM-E型流动注射化学发光分析仪；FA2004电子分析天平。
鲁米诺储备液（美国sigma 公司）1.0×10-2 mol/L，用0.1mol/LNaOH溶液配制，避光保存；CRO对照品溶液（开封豫港有限公司提供）：3.0×10-3 g/ml水溶液，4 ℃冰箱中保存。
KMnO4溶液（1.0×10-2 mol/L）；NaOH溶液（2.0 mol/L）；所用试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
ａｋ ｌ ｅ ｍｅ ｕ ｌ ａ ｉ ｄｉｍ． Ｕｎ ｅ ｈ ｐ ｉ ｍ ｏ ｄ ｔ ｎ ｎ ｄ ｒｔ ｅ ｏ ｔｍｕ ｃ ｎ ｉ ｏ ｓ，ｔ ｅ ｄ ｔｒ ｎ ｔｏ ａ ｇ ｆｍｅ ｈ ｄ ｉ １～４ ０ ｍｇ Ｌ ｎ ｉ ｈ ｅ ｅ ｍｉ ａｉ ｎ ｒｎ ｅ ｏ ｔ ｏ ｓ ０． ０ ／ ａｄ
研 究 简 报
流 动 注 射化 学发 光 法 测 定 头孢 曲松 钠
权新军 满文慧 宋Байду номын сангаас 忠 郑松志 王洪艳 金为群 ， ， ， ， ，
（ ．吉林大学 化学学院 ， １ 长春 １０ １ ； ．长春大学 生物科学技术学 院， ３０ ２ ２ 长春 １０ ２ ） ３０ ２
摘要 ： 于在碱 性介质 中头孢 曲松钠 对 鲁 米 诺．，ｅ Ｃ 化 学 发 光体 系的增 强 作用 ，建 立 基 Ｋ Ｆ （ Ｎ）
Ｋ ｙ ｗｏ ｄ ｅ ｒ ｓ：ｃ ｆ ｉ ｏ ｅ ｓ ｄ ｕ ；ｃ ｅ ｌ ｍｉ ｅ ｃ ｎ ｅ ｌ ｗ ｉｊ ｃ ｉｎ ｅ ｒａ ｎ ｏ ｉ ｍ ｌ ｘ ｈ ｍｉ ｕ ｎ ｓ ｅ ｃ ；ｆ ｎ ｅ ｔ ｏ ‘ ｏ
头孢 曲松钠 （ 简称 Ｃ Ｏ） 目前 临床上 应用 广泛 的长效 、 Ｒ 是 广谱 第三代 头孢 菌素类 抗生素 之一 ， 测定 其 在药物 制剂及 体液 中的含量 对于指 导临床 用药 及药物在 体 内的药代 动力学 分析 都具 有重 要 意义 ．目 前， 测定 头孢 曲松钠 的高灵 敏方法 主要有微 生 物法 、高效 液 相色 谱法 Ｊ 、毛细 管 电泳法 以及化 学 发光
Ｗ ＡＮＧ ｎ — ａ Ｈｏ ｇ ｙ ｎ。 ＪＮ Ｗ ｅ— ｕ Ｉ ｉｑ ｎ
，
（ ．Ｃｌｇ ｈｍｓｙ Ｊ ｉ Ｕ ｉｒ ｔ， ｈｎ ｃｕ ３ ０ ２ Ｃ ｉａ １ ｏｌ ｅｆＣ ｅ ｉｒ， ｉｎ ｎ ｅ ｉ Ｃ ａｇｈ ｎ１０ １ ， ｈｎ ； ｅ ｏ ｔ ｌ ｖ ｓｙ ２ ｏｅｅｏ ｉ—ｃ ｎｉｃａｄＴｃｎ ａ， ｈ ｎｃｕ ｎ ｅ ｉ ， ｈ ｎｃｕ ０ ２ Ｃ ｉ ） ．Ｃ ｌｇ ＢｏＳｉ ｔ ｎ ｅｈ ｉ ｌ Ｃ ａ ｇｈｎ Ｕ ｉ ｒｔ Ｃ ａ ｇｈ ｎ１０ ２ ， ｈｎ ｌ ｆ ｅｆ ｃ ｖ ｓｙ ３ ａ
头孢 曲松 钠粉针 剂 的测定 ，结果令 人满 意．
关键 词 ：头孢 曲松钠 ； 学发 光 ；流动注 射 化 中图分类 号 ： ６ ７ ３ ０ ５ ． 文献标 识码 ： Ａ 文章编 号 ：１７ －４ ９ ２ ０ ） ６１０ －４ ６ １５ ８ （０ ８ ０ —２ ２０
Ｄｅ ｅ ｍ ｉ ａ ｉ ｎ ｏ ｆｒ ａ ｏ ｅ Ｓ ｄ ｕ ｙ ｔ ｒ ｎ ｔｏ ｆ Ｃｅ ｔ ｉ ｘ ｎ ｏ ｉ ｍ ｂ
Ｆｏ ｎｅ ｔ ｎ Ｃ ｅ ｌｍｉｅｃｎ ｅ ｌｗ Ｉｊｃｉ ｈ ｍｉ ｎ ｓｅ ｃ ｏ ｕ
Ｑ Ａ ｉ－ ｎ ，Ｍ Ｎ Ｗｅ ．ｕ ， Ｏ Ｇ Ｎ ｉ ｈ ｎ Ｚ Ｅ Ｇ Ｓ ｎ － ｉ， Ｕ Ｎ Ｘ ｎｊ Ａ ｎｈ ｉ Ｓ Ｎ ａ— ｏ ｇ ， Ｈ Ｎ ｏ ｇｚ ｕ ｚ ｈ
第４ ６卷
第６ 期
吉 林 大 学 学 报 （理 学 版 ）
Ｊ Ｕ Ｎ ＬＯ ＩＩ Ｎ Ｖ Ｒ ＩＹ （ ＣＥ Ｃ Ｄ ＴＯ Ｏ Ｒ Ａ ＦＪＬＮ Ｕ Ｉ Ｅ ＳＴ Ｓ ＩＮ ＥＥ ＩＩＮ）
Ｖｏ ． ６ Ｎ ． １４ ｏ ６ Ｎ Ｖ ２０ Ｏ ０ ８
２０ ０ ８年 １ １月
法 等．其 中化 学发光法 以其灵 敏度 高 、 性范 围宽 、 线 分析 速度快 、 器设备 结构 简单 、价格便 宜 、 仪 操作
方法 简单 等优点 ， 近年来 在药 物分析 领域受 到人 们广泛 关注 Ｊ 但 目前 利 用该 法测 定 Ｃ Ｏ的研 究还 ， Ｒ
比较少．刘波等人 基于在碱性介质中 Ｃ Ｏ对高锰酸钾一 Ｒ 吖啶橙化学发光体系的抑制作用 ， 建立了测 定 Ｃ Ｏ的流 动注射化 学发光 法 ；张德 懿 等 人 ＿ 基 于高 锰 酸 钾 对 Ｃ Ｏ碱 性 水 解 液 的 氧化 产 生 化 学发 Ｒ ５ Ｒ 光， 建立了一种新的利用流动注射技术测定 Ｃ Ｏ的方法 ； Ｒ 李银环等人 利用鲁米诺． ６ 高锰酸钾反应建 立了测定包括 Ｃ Ｏ在内的 ６ Ｒ 种 ． 内酰胺类抗生素的流动注射化学发光分析法 ； 何云华等人 发现可
ｔ ｅｄ ｔｃ ｉｎ ｌ ｔ ｓ ． ６ ｍｇ Ｌ ｈ ｅ ａｉｅ ｓａ ｄ ｒ ｅ ｉｔ ｎ ｆｒｔ ｅｄ ｔｒ ｉ ａｉｎ ｏ ． ／ ｅ ｒ ｘ ｎ ｈ ｅｅ ｔ ｉ ０ ／ ．Ｔ ｅ ｒ ｌｔ ｔｎ ａ ｄ ｄ ｖａｉ ｏ ｅ ｅ ｎ ｔ ｆ ２ ｍｇ Ｌ ｃ ｆ ｉ ｏ ｅ ｏ ｍｉ ｉ ０ ｖ ｏ ｈ ｍ ｏ ０ ｌ ａ
ｓｄｕ ． ％ （ ｏｉｍ ｉ １６ ｎ＝１ ） ｔ ａ ｂｅ ａｉａｔ ｌ ａｐｉ ｅｄｔｒ ｉａｉ ｆ ｅ ｒ ｘｎ ｏｉｍ ｉ ｔｅ ｓ ０ ．Ｉｈ ｓ ｅｎｓｔｆｃ ｒｙ ｐ ｌ ｄｔ ｔ ｅ ｍ ｎ ｔ ｎｏ ｆｉ ｏｅｓｄｕ ｓ ｏ ｉ ｅ ｏｈ ｅ ｏ ｅｌ ａ ｎｈ ｉ ｅｔ ｎ． ｎ ｃｉ ｓ ｊ ｏ
Ａ ｓｒｃ：Ｃ ｆｉ ｏｅｓｄ ｍ ｗ ｓｄｔ ｍ ｎ ｄｂ ｏ ｎｅｔ ｎ ｃｅ ｉ ｍ ｎｓｅｃ ，ｗ ｉｈｉ ｂ ｓｄ ｏ ｈ ｂ ｔ ｔ ｅ ｒ ｘｎ ｏ ｉ ａ ｅ ｒ ｉｅ ｙｆ ｗ ｉｊ ｉ ｈ ｍ ｌ ｉｅｃｎ ｅ ｈｃ ｓ ａｅ ｎｔｅ ａ ｌａ ｕ ｅ ｌ ｃｏ ｕ ｓ ｏ ｇｅｈ ｎ ｅ ｅ ｔ ｆ ｃ ｏ ｅ ｒ ｘｎ ｏ ｉｍ ｏ ｕ ｉｏ－ ３ ｅ Ｃ ６ｃ ｅ ｌ ｎｓｅ ｃ ｙｔ ｎ ｔｅ ｔ ｎ ｎ ａ ｃｍ ｎ ｅ ｅｔ ｆｃｆｉ ｏ ｅｓｄｕ ｎ Ｌ ｍ ｎ ｌ （ Ｎ） ｈｍｉ ｍｉｅｃｎｅ ｓｓ ｍ ｉ ｈ ｒ ｆ ｌａ ＫＦ ｕ ｅ