应用ELISA试剂盒检测鸡传染性支气管炎抗体
鸡传染性支气管炎的症状和防治策略
鸡传染性支气管炎的症状和防治策略钱海霞/江苏省南通市如东县苴镇畜牧兽医站 226409摘 要：鸡传染性支气管炎作为鸡的一种急性、迅速传播的病毒性疾病，其临床表现为呼吸道、泌尿生殖道和胃肠道组织的感染。
本病对蛋鸡和种鸡的危害大，给蛋鸡业带来了很大的困扰和损失。
本病的防控主要为做好鸡场的疫苗接种和生物安全，提高鸡群的非特异性抵抗力。
关键词：鸡传染性支气管炎；临床症状；诊断；预防策略近几年鸡传染性支气管炎发病呈上升趋势，对蛋鸡和种鸡的危害很大，本病的发病雏鸡和青年鸡阶段症状不明显，但到产蛋期高峰上不去，软皮蛋及沙壳蛋增加时，怀疑为早期感染鸡传染性支气管炎，这时为时已晚，损失已造成，所以蛋鸡和种鸡传支的防控成为重点。
此外，本病临床症状的轻重除了和鸡群养殖密度较高、生物安全不健全之外，也与疫苗与野毒毒株的不匹配相关，这就大大增加了疾病防控难度。
1 流行病学本病的病原体是冠状病毒科，多形性，但大多是团形。
本病毒在胞浆中复制，通过不连续转录机制形成6条信使RNA，从而能够出现重组株。
在37℃条件下培养本病毒，感染后3～4h就开始出现新病毒，12h细胞内病毒量达到最大。
本病毒对热和酸碱度稳定，在室内病毒春季能存活12d，冬季能存活56d，但其对乙醚、福尔马林和普通消毒液敏感。
这种致病性冠状病毒呈世界性分布，并产生了许多血清型，在一个地区可同时存在2～3个血清型。
当鸡群发生感染时，病毒存在于呼吸道分泌物、粪便和污染的蛋壳上。
经空气由飞沫传播。
因食入被污染的食物和饮水，及因接触病鸡，受污染的设备、饲养员的工作而传播。
感染过一些毒株的鸡群康夏后，仍可将病毒排入粪便，可延续一个多月。
由于免疫力降低或出现不同的血清型，产蛋鸡和育种鸡的病毒感染常呈周期性发生。
2 临床症状本病在雏鸡孵出18～48h就可出现症状，发病率几乎为100%，且其可以很快传播给其它禽类。
本病的特性和严重性受年龄、鸡群的免疫状况、致病毒株的毒力所影响。
应用建立的间接N-ELISA方法检测临床不同血清样品IB抗体的比较及分析
盒并应用于临床检测具有十分重要 的意义 。本实
验 利 用 实 验 室 建 立 的 间 接 Ｎ Ｅ ＩＡ 方 法 ， —ＬＳ 对
收 稿 日期 ：０ ２—０ ０ ２ １ ６— ４
应 检测 Ｉ 体 水平 。 结果 表 明 ， Ｂ抗 间接 Ｎ Ｅ ＩＡ 方 —ＬＳ
Ｎ基 因重组蛋 白作 为包 被 抗原 的 Ｅ ＩＡ诊 断试 剂 ＬＳ
样 品的操 作参 照 商 品试剂 盒 的说 明 书， － Ｎ Ｅ ＩＡ操作 步骤按 照课题 组研 发 的方法 进行 Ｊ ＬＳ 。
２ 结 果 与 分 析
对免 疫 了不 同 Ｉ 苗 的 ４０份 血 清 样 品 ， Ｂ疫 ６ 分
反应 很 弱甚至 根本没 有交叉 反应 性 ， 而且活病 毒纯
公司； ｎ ｏ ２ １ Ａ ｔ ｓ ００酶标 仪及其 分析软 件 ， ｈ 奥地 利
Ａ ｔｏ 公 司 。 ｎｈｓ １ ３ 检测 方 法 ．
化困难且存在散播病毒的危险性及检ｉ 成本 高等 见 ４ 到 问题 ， 这不利 于 Ｉ Ｂ的快速诊 断 与防治 。 因此 ， 研 究利 用序 列相 对 保 守 且具 有 强 的免 疫 保 护性 ＩＶ Ｂ
ＩＶ几个分离株制备的多价灭活油苗的不 同鸡群 Ｂ 血 清样 品 ， 分别 由广西 Ａ、 Ｂ和 ｃ公 司送 检 ； 属 于 用
不 同血清 型广西 地方 ＩＶ分 离 毒 株制 备 的单 价油 Ｂ 苗 免疫鸡 群 后 第 ７ １ 、１ 、４ ２ｄ采集 的血 清 ， 由本 课 题
组 提供 。
１ ２ 主要 试剂及 仪器 ．
等 化学试 剂 ， 为 国产 分 析纯 ；Ｄ Ｘ ＩＶ Ａ ） 均 ＩＥ Ｘ（Ｂ ｂ 抗 体 检测试 剂盒 ， 自北 京爱德 士元 亨生 物科 技有 限 购
禽传染性支气管炎的诊断方法与防控建议
摘要：传染性支气管炎是世界各国养禽业的主要经济上重要的家禽疾病之一。
该病是由传染性支气管炎病毒引起的，可感染多种禽类动物发病。
禽传染性支气管炎造成的经济影响包括蛋鸡产蛋量下降和蛋质量差、肉鸡生长发育迟缓、胴体重低和死亡率。
尽管禽传染性支气管炎主要影响家禽的呼吸道器官，但禽传染性支气管炎病毒表现出广泛的组织趋向性，包括肾脏和生殖系统。
因此，禽传染性支气管炎发病结果可能受所涉及的器官或组织以及感染病毒的病理类型或感染的禽传染性支气管炎病毒毒株的影响。
因此，了解特定地区流行的禽传染性支气管炎病毒毒株的流行病学知识对于指导控制和预防非常重要。
同时，以前的诊断方法，如血清学和病毒分离的检测结果不太敏感和耗时；目前的检测方法可提供高度灵敏、快速和准确的诊断结果，从而能够在尽可能短的时间内对新病毒株进行基因分型时间。
本综述讨论了禽传染性支气管炎的流行病学和诊断方法，为禽传染性支气管炎的诊断和防控提供参考。
禽传染性支气管炎是由禽支气管炎病毒感染引起的一种禽常见传染病，给全世界的家禽业造成了重大的经济损失。
自首次于美国北达科他州发现禽传染性支气管炎以来，禽传染性支气管炎病毒在世界各国的鸡群中被广泛的发现，尤其是在拥有大量商品化禽种群的国家。
除呼吸道感染外，禽传染性支气管炎还会影响家禽的肾脏和生殖道，分别导致肾功能障碍和产蛋量减少。
虽然禽传染性支气管炎最初被认为主要发生在低日龄鸡，但是，所有日龄的鸡均易感染禽传染性支气管炎病毒。
01禽传染性支气管炎的流行病学禽传染性支气管炎病毒主要感染家禽的呼吸系统并引发疾病。
然而，一些病毒变种和一些野外分离物可影响鸡的生殖、肾脏和消化系统。
禽传染性支气管炎的临床症状因所涉及的系统以及病毒株而异。
家禽被认为是禽传染性支气管炎的天然宿主，但在非家禽物种中也发现了禽传染性支气管炎病毒样冠状病毒，包括野鸡、孔雀、火鸡、鹅、鸽子、鹌鹑、鸭子和亚马逊鹦鹉。
火鸡冠状病毒和禽传染性支气管炎病毒之间的抗原相似性也已得到证实。
华南某种鸡场禽白血病病毒感染对4种免疫抗体水平的影响
华南某种鸡场禽白血病病毒感染对4种免疫抗体水平的影响司兴奎1，尹庆亮2，张济培1，陈建红1（1.佛山科学技术学院，广东佛山528231；2.化州市丽岗中学，广东化州525100）摘要：采用ELISA方法对华南某种鸡场4群种鸡直肠拭子进行禽白血病病毒p27（ALV-p27）抗原检测，同时采集相应种鸡血清样品并对新城疫（ND）、禽流感（AI）H5、H9亚型、减蛋综合征（EDS-76）、传染性支气管炎（IB）的免疫抗体水平进行检测，并按照相应标准计算对应免疫抗体合格率。
结果表明：A、B、C、D群种鸡直肠拭子中ALV-p27抗原检出率分别为86％（12/14）、77%（23/30）、37％（11/30）和56％（10/18）；与其它3群种鸡相比ALV-p27抗原检出率最高的A群种鸡其对应的ND、EDS-76、AI H5及H9亚型抗体水平最低，分别为7.26log2、4.74log2、7.32log2及6.21log2；ALV-p27抗原检出率最低的C群种鸡其AIV H5亚型及IB抗体水平最高，分别为8.65log2和7012log2，且C群与其它3群相比AI H5亚型、ND及IB抗体合格率/阳性率最高，分别为90％（18/20）、95％（19/20）和100％（20/20）。
结果表明，ALV感染的严重程度与4种免疫抗体水平呈负相关。
关键词：种鸡；禽白血病病毒感染；免疫抗体水平Effects of Avian Leukosis Virus Infection on Four Immunized Antibody Levels inOne Chicken Breeder Farm in South ChinaSI Xingkui1，YIN Qingliang2，ZHANG Jipei1，CHEN Jianhong1（1.Foshan Science and Technology University，Foshan，Guangdong528231；2.Huazhou Ligang Middle School，Huazhou，Guangdong525100）Abstract：ELISA was used to detect the p27antigen of avian leukosis virus（ALV-p27）in fecal swabs of four flocks in one chicken breeder farm in south China，and serum samples of corresponding flock were collected for detection immunized antibody level and satisfied immunization rate of four infectious diseases i.e.newcastle disease（ND），avian influenza（AI）subtype H5or H9，egg dropping syndrome-76（EDS-76），infectious bronchitis（IB）.The results showed that the detection rate of ALV-p27antigen of A，B，C，D flock was86%（12/14），77%（23/30），37%（11/30）and56%（10/18），respectively.The immunized antibody level of ND，AI（H5），AI（H9）and EDS-76of A flock which had the highest ALV-p27antigen detection rate in comparison with that of the other three flocks was the lowest，which was7.26log2，4.74 log2，7.32log2and 6.2log2，respectively；C flock which had the lowest ALV-p27antigen detection rate had the highest immunized antibooly level of AI（H5）and IB，which was8.65log2and7012log2，and the satisfied immunization rate收稿日期：2008-04-01修回日期：2009-02-24of AI（H5），ND and IB was the highest，i.e.90%（18/20），95%（19/20）and100%（20/20）.The results showed that ALV infection rate was negative corresponding with the four immunized antibody levels.Key words：chicken breeder；avian leukosis virus infection；immunized antibody level禽白血病是由禽白血病病毒（ALV）引起的以造血细胞恶性增生并形成肿瘤为特征的一类多病型的渐进性传染病，包括淋巴细胞白血病、成红细胞白血病、成髓细胞白血病等多种病型，以淋巴细胞白血病最为常见。
鸡肾型传染性支气管炎的诊断及治疗
鸡肾型传染性支气管炎的诊断及治疗作者：陈二红郄振革来源：《农民致富之友》2019年第06期鸡肾型传染性支气管炎是一种病毒性传染性疾病，它是由鸡传染性支气管炎病毒感染引起的一种急性高度接触性物传染性疾病，该种病毒属于冠状病毒，有囊膜，是单股正链的RNA病毒，在鸡群中具有传播速度快，发病率高，致死率高的特点。
鸡传染性支气管炎病毒虽然对鸡养殖产业造成的危害十分严重，但是在自然环境下，该种病毒的抵抗能力较差，56度环境和49度環境下作用15分钟和90分钟就能够将其灭活，同时常用的消毒剂，如1%的来苏儿溶液、1%的福尔马林溶液、2%的氢氧化钠溶液以及70%的乙醇溶液均能够在较短时间内将其灭活。
本文主要分析了鸡肾型传染性支气管炎的流行病学、临床症状、病理学变化、诊断方法和防治对策，现将具体研究内容介绍如下：1、流行病学鸡肾型传染性支气管炎是由鸡传染性支气管炎病毒感染引起的一种急性接触性病毒性传染性疾病，临床上会导致鸡泌尿、生殖道、呼吸道病变，是鸡养殖产业危害十分严重的一类病毒性疾病。
临床上传染性支气管炎病毒感染引起的疾病主要分为了呼吸型、肾型、腺胃型和生殖型四类，其中肾型是危害十分严重的一种类型。
由于鸡传染性支气管炎病毒的血清种类较多，且不同血型之间的交叉保护性能较弱，这就给疾病预防带来不少困难。
任何年龄和品种的鸡均可感染该种疾病，其中对雏鸡造成的危害最为严重，饲养密度过大，鸡舍过于拥挤，湿度温度较高，通风不良，疫苗免疫接种不当，饲料维生素投入不足，饲料营养价值全面等因素，都可以促进该种疾病的流行与发生。
患病鸡和带毒鸡呼出的气体中存在大量病毒，经飞沫传播给易感鸡群，同时也可以经消化道进行传播感染。
2、临床症状鸡肾型传染性支气管炎主要危害2～8周龄的雏鸡，发病主要分为两个阶段。
第一个阶段，发病过程相对较短，发病时间常在1～4天，这个阶段临床症状较轻，主要表现为轻微的呼吸道症状，包括啰音、打喷嚏、咳嗽，某些发病症状，只有在夜间才能够明显听到，如果鸡群中不存在明显的混合感染，很容易被养殖户所忽视，随后几天患病鸡的临床症状逐渐消失，呈现假康复趋势。
鸡传染性支气管炎
鸡传染性支气管炎鸡传染性支气管炎是目前广泛流行的一种高度接触性传染病。
不但会引起鸡只死亡，而且临诊型感染和亚临诊感染（常被忽视）均会致使鸡群生产性能下降，饲料报酬降低。
常继发或并发霉浆体病、大肠杆菌病、葡萄球菌病等，导致死淘率增加，还常被漏诊、误诊。
该病病原的血清型较多，新的血清型不断出现，加上不适当的免疫程序，常导致免疫失败，致使该病不能得到有效控制，给养鸡业造成巨大损失。
一、病原和流行病学鸡传染性支气管炎病毒属冠状病毒科冠状病毒属，为单股正链ＲＮＡ病毒。
有囊膜，囊膜表面有花冠状的纤突。
纤突蛋白Ｓ１片段与诱导产生病毒中和抗体和血凝抑制抗体有关，Ｓ２片段与病毒吸附细胞有关。
鸡传染性支气管炎病毒本身没有血凝特性，但是经胰酶、卵磷脂酶Ｃ、家兔Ａ型魏氏梭菌等处理后具有血凝活性。
传染性支气管炎病毒能干扰新城疫病毒的增殖。
鸡气管上皮细胞对该病毒易感性很高。
鸡传染性支气管炎病毒血清型众多，目前至少有２９种，并且新的血清型和变异株不断出现。
通过Ｓ１基因系列分析，可将病毒株分为５个不同类群：荷兰型、美国型、欧洲型、Ｍａｓｓ型和澳大利亚型。
Ｈ１２０、Ｈ５２、Ｍ４１为Ｍａｓｓ型。
Ｔ株、Ｇｒａｙ株、Ｈｏｔｌｅ株为肾型传支毒株，与呼吸型传支Ｍ４１、Ｈ５２的区别很大。
我国鸡传染性支气管炎流行株为：Ｍａｓｓ、Ｔ、Ｈｏｔｌｅ、Ｇｒａｙ株，以及大量的变异毒株。
鸡传染性支气管炎临诊上分为呼吸型、肾型、肠型等。
幼龄母鸡感染呼吸型鸡传染性支气管炎病毒后可引起输卵管永久性退化性成熟后丧失产蛋能力。
肾型传染性支气管炎病毒可直接损伤肾小管上皮细胞，引起间质性肾炎。
本病传播方式主要为气源性，在集约化鸡群１～２天内很快波及全群。
尚不能证明本病能经鸡胚垂直传播。
我国学者所报道的腺胃病变型传支：多数学者认为是由冠状病毒引起的，为鸡传染性支气管炎的一种病变型。
但有人认为，腺胃传支就是禽流感的代名词。
也有人从相应的病料中分离到新城疫强毒。
吴延功等（１９９９）认为我国学者所报道的腺胃病变型传支的主要病原是禽网状内皮组织增殖病病毒，但冠状病毒、呼肠孤病毒也能在该病的发病中起到重要的协同作用，应将该病定名为传染性腺胃炎。
养殖疾病的病原生物诊断技术
养殖疾病的病原生物诊断技术养殖业是农业中一项重要的产业，而养殖疾病是养殖业中不可忽视的一环。
当养殖场发生疾病时，准确诊断病原生物是解决问题的关键。
本文将介绍几种常见的养殖疾病病原生物的诊断技术。
一、菌落形态观察法菌落形态观察法是一种常用的病原生物诊断技术。
通过对病原菌进行培养，观察其菌落形态、颜色、质地等特征，可初步判断病原菌属于哪一类。
例如，对于养殖场常见的细菌性皮肤病，通过菌落形态观察，可以初步判断是金黄色葡萄球菌感染还是链球菌感染。
二、酶联免疫吸附试验（ELISA）酶联免疫吸附试验（ELISA）是一种常用的免疫学技术，可用于检测病原生物的抗原或抗体。
该技术通常在实验室中进行，通过观察样品与特定抗体的反应情况，可以快速确定病原生物的存在与否。
例如，在禽类养殖中，可以使用ELISA检测鸡传染性法氏囊炎病毒（IBDV）的抗原，以及鸡传染性支气管炎病毒（IBV）的抗体。
三、聚合酶链式反应（PCR）聚合酶链式反应（PCR）技术是一种基因分析技术，可用于检测和扩增病原生物的DNA序列。
这种技术可以高度特异地检测病原生物，并且在数量较少的样品中也能有效运用。
PCR技术的速度快且准确性高，因此在养殖疾病的病原生物诊断中得到广泛应用。
例如，对于鱼类养殖中常见的细菌性疾病，可以使用PCR技术来检测致病菌，如金黄色葡萄球菌和弧菌。
四、核酸杂交技术核酸杂交技术是一种用于检测和鉴定病原生物的基因分析技术。
该技术利用特定的探针（寡核苷酸序列）与待检测样品中的目标序列结合，从而可以准确识别目标病原生物。
核酸杂交技术在检测病原生物的亚型、毒力因子和耐药性等方面有着广泛的应用。
例如，在畜牧业中，可以使用核酸杂交技术来检测禽流感病毒的基因型，以及猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的亚型。
五、电子显微镜观察法电子显微镜观察法是一种高分辨率的显微镜技术，可用于观察病原生物的形态特征。
通过电子显微镜观察，可以识别并区分病原微生物，如病毒和细菌。
2021年兽医专业英语练习题
第一某些: 单词英译汉1.cytokines （细胞因子）2.polymerase chain reaction（聚合酶链反映（=PCR）3.hormone（荷尔蒙）4.loose connective tissue（疏松结缔组织）5.highly pathogenic avian influenza virus（高致病性禽流感病毒）6.general anesthesia （全身麻醉）7、author index（作者索引）8、morbidity（发病;发病率）9、chick embryo（鸡胚）10、monoclone antibody（单克隆抗体）11.polyavitaminosis（各种维生素缺少症）12.pulmonary artery（肺动脉）13.mortality（死亡数;死亡率[S1]）14.cross-protection（交叉保护）15.lymphocyte（淋巴球,淋巴细胞）16.myocardium（心肌）17、target cell（靶细胞）18、serum （浆液;血清）19、the infected blood （血液感染）20、inflammation（炎症;发炎）21.metabolism（新陈代谢）22.sulfonamide antimicrobials（磺胺抗生素）23.intravenous（静脉内）24.mastitis（乳腺炎）25.interleukins（白细胞介素）26.streptococcosis suis （猪链球菌病）27、drug interactions（药物互相作用）28、gentamicin（庆大霉素）29、Science Citation Index( SCI)) （科学引文索引）30、sandwich ELISA（夹心酶联免疫吸附实验）第二某些: 请将下列句子中下画线某些译成汉语1、In this paper, we report the effect of plasma change in a ewe with this syndrome.（并发症状）2、Co-infection and interaction of different immunosuppressive viruses（抑制免疫力）3、Co-infection and interaction of different immunosuppressive viruses（混合感染）4.Twenty-one Merino sheep which had been drenched with anthelmintics wereused in this study. （驱虫药）5.Drug interactions may occur in vitro when incompatible drugs are mixed in the same syringe or vial or when drugs are mixed in incompatible solvents.（在试管内）6.Avian influenza virus is shed in high concentrations in the feces and survives for long periods, especially in water at low temperature.（浓度）7、The featherless broiler is ready to go to market.（炙肉）8、Paramyxovirus I and infectious bronchitis virus A-6 were used as control antigens.（抑制）9、Frequently, concurrent administration of more than one drug is needed to achieve therapeutic goals.（管理部门;行政机构,政府）10、18 (46%) of the flocks gave positive tests.（拟定;的确）第三某些: 句子英译汉1、Detection of antibodies against infectious bronchitis virus by enzyme linked immunosorbent assay in the serum of fowls from non-vaccinated flocks.抗体检测鸡传染性支气管炎病毒酶联免疫测定血清中禽未接种疫苗羊群。
鸡H120疫苗3种接种方法
雏鸡尽管有较高母源抗体，但根据最新的调查报告表明鸡新城疫是发病率最高的传染病之一，因此为了不影响传染性支气管炎的免疫效，在雏鸡4日龄时通过点眼的方式进行鸡新城疫Ⅱ系疫苗免疫接种。
雏鸡三种途径免疫
3.2.1试验鸡群
选用鸡场提供的活泼好动，腿部结实，行动自如，眼有神，脐部愈合良好的健康3日龄雏鸡20只进行试验。
S/P值=样品PCX(650) - NCX(650)/PCX- NCX，
终点抗体滴度(1：500)与S/P的关系式:Log10滴度=(Log10S/P)+
表1采血时间及检测结果
采血时间
点眼
滴鼻
饮水
空白组
一免前
3 d
6 d
9 d
12 d
19 d
26 d
33 d
表2IBV血清抗体检测结果统计
接种方法
血清份数
3.2.2供试材料
供试疫苗 鸡新城疫Ⅱ系疫苗，鸡传染性支气管炎活疫苗（H120），杭州荐量兽用生物制品有限公司。
供试试剂ELISA试剂盒-进口IB抗体检测试剂盒。包括IBV抗原包被板, IBV阴性对照血清、阳性对照血清、酶标抗体、(山羊)抗鸡抗体-辣根过氧化物酶(HRPO)结合物、样品稀释液、TMB底物、终止液。由北京爱德士元亨生物科技有限公司(中美合作) 生产，批号:0926-CB472。
[3]杨增歧,赵余放,张淑霞.鸡传染性支气管炎的诊断方法[J].辽宁畜牧兽医,1996,16(12):22～23
供试器材 精确移液管、多道移液管、吸头、96孔读数仪、样品稀释用试管、洗液吸移装置。
3.2.3免疫前母源抗体检测
免疫前从所有鸡中随机取5只采血，分离血清，测血清中的抗体水平，计算平均值并记录于表1中。
鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白原核表达载体的构建
鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白原核表达载体的构建刘云霞1，仇微红1，叶贺佳1，梁昭平1，2*（1.广州市华南农大生物药品有限公司，广东广州511300；2.华南农业大学，广东广州510642）摘要∶本研究旨在构建鸡传染性支气管炎病毒（IBV ）原核表达体系，制备其S1目的蛋白，为建立IBV ELISA 检测方法奠定基础。
以IBV QX 型基因为模板，PCR 扩增出S1蛋白基因，连接至pET⁃32a 原核表达载体，获得重组质粒pET （32a ）⁃S1，将重组质粒转入大肠杆菌BL21感受态细胞后进行IPTG 诱导表达。
SDS⁃PAGE 分析结果表明，重组S1蛋白在大肠杆菌BL21中获得表达，分子量约为60kDa 。
Western⁃blot 分析表明，重组蛋白能与Anti⁃His 标签抗体发生特异性反应。
利用Kcl 染色法，成功纯化S1目的蛋白。
本研究成功构建了pET （32a ）⁃S1重组原核表达质粒，并在大肠杆菌中获得表达，为进一步制备S1蛋白抗体奠定了基础。
关键词∶鸡传染性支气管炎病毒；原核表达；S1蛋白；蛋白纯化中图分类号∶S852.65文献标识码∶A文章编码∶1005⁃8567（2021）03⁃0069⁃05收稿日期：2021⁃04⁃08作者简介：刘云霞，女，硕士。
E⁃mail ：******************通讯作者：梁昭平，男，高级兽医师，学士，主要从事生物制品的生产与经营工作。
E⁃mail ：****************鸡传染性支气管炎（Avian Infection Bronchitis ，IB ）是由鸡传染性支气管炎病毒（Avian infectionsbronchitis virus ，IBV ）引起的鸡的一种急性、高度接触性传染病。
主要引起呼吸系统疾病，如：咳嗽、打喷嚏、气管啰音等，临床症状为呼吸困难、肾炎、产蛋及蛋品质下降［1，2］。
可感染各日龄的鸡，以1～4周龄雏鸡为重。
鸡传染性支气管炎症状表现有哪些
鸡传染性支气管炎症状表现有哪些鸡传染性支气管炎是鸡的一种急性、接触性传染病，临床上有多种表现形式，可分为呼吸道型、肾型、产蛋下降型等，以呼吸道型发生最为普遍。
下面我们了解一下鸡传染性支气管炎症状表现有哪些。
一、鸡传染性支气管炎的症状表现(1)呼吸道型：呼吸困难，有啰音或喘鸣音。
雏鸡感染可引起死亡，青年鸡和产蛋鸡感染后，可引起产蛋鸡停产或产蛋下降。
(2)产蛋下降型：产蛋鸡产蛋下降，产软皮蛋、砂壳蛋或畸形蛋，蛋清稀薄如水。
(3)肾型：病鸡排白色稀粪，脱水，死亡率高。
(4)其他临床型：ibv感染腺胃可引起腺胃炎，病鸡因消化不良而生长受阻；ibv感染肠道，可引起病鸡腹泻。
二、鸡传染性支气管炎的流行特点(1)本病仅感染鸡，除野鸡外，各种日龄的鸡均易感，但雏鸡发病最严重。
(2)2 -6周龄的鸡最易感染肾型ib．并可引起严重的死亡。
(3)青年鸡和产蛋鸡感染后，可引起产蛋鸡停产或产蛋下降。
三、鸡传染性支气管炎的剖检(1)呼吸道型：气管下段有黄白色痰状栓子堵塞。
(2)肾型：双肾肿大、苍白，肾小管困聚集尿酸盐使肾脏呈槟榔样花斑；两侧输尿管因沉积尿酸盐而变的明显扩张增粗。
(3)产蛋下降型：坠卵性腹膜炎，腹腔内有成形的卵。
输卵管变细，输卵管中u3影响较严重。
(4)其他类型：ibv感染腺胃可引起腺胃肿大。
ibv感染免疫器官可引起法氏囊、胸腺萎缩。
ibv感染肌肉可引起肌肉坏死。
四、鸡传染性支气管炎的实验室诊断(1)临床症状的诊断意义不大，确诊须进行病毒的分离或采用其他手段证明病原的存在，也可以用血清学方法诊断。
(2)实验室诊断通常采用鸡胚或气管环组织培养进行病毒分离，还可以采用免疫荧光试验、电镜技术、血凝抑制试验( hi)和酶联免疫吸附试验(elisa)作为辅助诊断手段。
此外，纤突蛋白基因序列的测定如基因分型，也可用于诊断。
(3)常用的病原学诊断程序。
采集剖检所见典型的病料，可直接采用rt-pcr方法快速诊断。
采集剖检所见典型的病料，利用鸡胚分离病毒，将含有病毒的尿囊液电镜观察是否含有典型的冠状病毒颗粒。
研制的间接N—ELISA试剂盒对血清样品IBV抗体的检测和分析
行性 ， 本研究继续应用此试剂盒对 ３ ９ ３ 份临床血清
样 品进 行 Ｉ Ｂ Ｖ抗 体 检 测 ， 并 与 商 品试 剂 盒 检 测 结 果 进行 对 比分析 ， 旨为鸡群 免疫 监测 和 免疫效 果 的 评 价提 供科 学依 据 。
盒； 商 品试 剂盒 ； 抗体滴度 ； 免疫效果
２ 材 料 与 方 法 １ 前 言
鸡传染性 支气管炎 （ Ａ ｖ ｉ ａ ｎ ｉ ｎ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｕ ｓ ｂ ｒ ｏ ｎ ｃ ｈ ｉ — ｔ ｉ ｓ ， Ｉ Ｂ ） 是 由传染 性 支气 管 炎病 毒 （ Ａ ｖ ｉ ａ ｎ ｉ ｆ ｎ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｕ ｓ ｂ ｒ ｏ ｎ ｃ ｈ ｉ ｔ ｉ ｓ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ， Ｉ Ｂ Ｖ） 引起 的一 种 高 度 接 触 性 传 染 病， 不 同品种 和 日龄 鸡 群 均 易 感 ， 给 世 界 养 禽 业 造
中图分类号 ： ￥ ８ ５ １
文献标识码 ： Ｂ
文章编 号： １ ０ ０ ２－ ５ ２ ３ ５ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ５— ０ ２ ５ ９— ０ ４
摘要 ： 采用课 题组研 制 的间接 Ｎ — Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ试 剂 盒与 商 品 试剂 盒对 来 自广西不 同鸡群 的 ３ ９ ３份 临床 血清样 品进
步 证 明 自行 研制 的试 剂 盒在 实 际生 产 中应 用 的可
剂盒 与商 品试 剂盒 Ｉ Ｂ Ｖ抗 体检 测结果 高度 吻合 ， 而且
检测结 果能很好地反映不 同 Ｉ Ｂ Ｖ疫苗 免疫后抗 体产生 的规 律 ， 对实 际生产 中鸡 群 Ｉ Ｂ Ｖ疫 苗免疫 效果 的监测 具有 重要的指导意义 。 关键 词 ： 鸡传染性 支气 管炎病毒 ； 间接 Ｎ — Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ试剂
国内兽用诊断试剂情况汇总及注册方法
国内兽用诊断试剂情况汇总及注册方法向昭颖，杨佳颖／本刊诊断试剂是指采用免疫学、微生物学、分子生物学等原理或方法制备的、在体外用于对人类或动物疾病的诊断、检测及流行病学调查等的诊断试剂。
常用的检测方法有酶联免疫/酶免法（ELISA），免疫荧光法，PCR 等等。
1 注册方法为进一步加强兽医诊断制品(以下简称诊断制品)注册评审工作，满足动物疫病诊断、监测、检疫和评估等工作需要，2015年12月农业部发布中华人民共和国农业部公告第2335号，对兽医诊断制品注册要求规定如下。
1）严格执行诊断制品注册分类的规定。
凡与我国已批准上市销售、检测方法和检测标的物相同的同类诊断制品比较，在敏感性、特异性、稳定性和便捷性等方面无根本改进的诊断制品不作为新兽药审批。
2）体外诊断制品应在注册资料中提供临床检测数据和总结报告，不再要求进行临床试验审批。
3）对无国家标准的试验用动物，研制者应当制定动物质量标准和检测方法，可不提供实验动物合格证和实验动物使用许可证等证件的复印件。
4）诊断制品的中试应在GMP 车间或符合生物安全要求的实验室进行。
5）加强诊断制品生产及检验用菌（毒、虫）种和细胞等主要原材料的管理。
申请人提出兽药注册申请时，应提交菌（毒、虫）种基础种子批的制备和鉴定记录、菌（毒、虫）种的标准、鉴定报告，以及基础细胞种子批的制备和鉴定记录、细胞种子的标准、鉴定报告等资料。
6）加强诊断制品所用对照品（包括标准抗原、标准血清等质控标准物质）以及成品的敏感性、特异性和重复性检验用样品盘的制备、检验、标定管理。
必要时，标定工作由研究单位委托中国兽医药品监察所进行。
7）加强诊断制品的比对试验研究。
应在不少于3家实验室进行诊断制品的比对试验。
承担比对试验的实验室应为农业部考核合格的省级以上兽医主管部门设置的兽医实验室。
有国家兽医参考实验室或农业部指定的专业实验室的，应至少选择1家国家参考实验室或农业部指定的专业实验室实施比对试验。
鸡传染性喉气管炎的诊断及治疗
鸡传染性喉气管炎的诊断及治疗
鸡传染性喉气管炎是由传染性支气管炎病毒引起的一种急性呼吸道传染病，通常在冬
春季节易发。
该病主要发生在肉鸡和蛋鸡中，对鸡群的健康和生产造成了严重威胁。
本文
将就鸡传染性喉气管炎的诊断及治疗进行介绍。
一、病因病理
鸡传染性喉气管炎主要为传染性支气管炎病毒引起，该病毒对0～6周龄的鸡群危害最大。
感染后，病毒可在呼吸道上皮细胞内大量复制，引起细胞脱落，形成上皮细胞坏死和
变性，导致气管粘膜水肿、充血、坏死，形成灰白色假膜，造成气管阻塞，影响气道通畅，严重时可导致窒息死亡。
二、临床症状
1. 急性期症状：患鸡突然出现喘鸣、呼吸急促、喉鸣、流涎、头颈部肿胀、倦怠、
食欲不振、体温升高等症状，气管内可见灰白色假膜。
2. 慢性期症状：患鸡出现喉鸣、轻度喘鸣、进食困难、精神萎靡、生长迟缓、产蛋
量降低等症状。
三、诊断
2. 病原学诊断：通过气管活检或尸检的方式，采集气管黏膜组织进行病原学检测，
发现传染性支气管炎病毒即可确定诊断。
3. 免疫学诊断：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）、补体结合试验（CFT）等方法检测患鸡的血清抗体水平，对鸡传染性喉气管炎进行诊断。
四、治疗
1. 药物治疗：常用抗生素、消炎药等药物进行治疗，如红霉素、头孢噻肟等，以抑
制细菌的生长，减轻气管粘膜水肿和充血，帮助患鸡快速康复。
2. 支持治疗：及时给予患鸡足够的水和营养，保持温暖、干燥的环境，减少应激，
加速患鸡康复。
3. 预防控制：加强饲养管理，保持饲养环境的清洁和通风，提高鸡群的免疫力，预
防和控制鸡传染性喉气管炎的传播。
外源病毒检验用抗鸡传染性支气管炎病毒特异性血清的制备与检定
２０１８年第３５卷第 ２ 期外源病毒检验用抗鸡传染性支气管炎病毒特异性血清的制备与检定毛娅卿，吴 涛，王 嘉，王 哲，孔冬妮，李 岭，李慧姣，蒋桃珍，李俊平（中国兽医药品监察所，北京 100081）摘 要：为制备外源病毒检验用抗鸡传染性支气管炎病毒（IBV）特异性血清，对300只3~4周龄的SPF鸡进行基础免疫和加强免疫；最后一次免疫21 d后，采血并分离血清；对血清经混合、分装、冷冻、真空干燥后，进行无菌检验、外源病毒检验、剩余水分测定、中和效价测定和特异性检验。
结果表明：本研究制备的抗IBV 特异性血清的无菌检验、外源病毒检验和剩余水分测定结果均符合现行《中华人民共和国兽药典》规定；血清中和效价为1:800，与IBV H120种毒株的中和指数为106.3，与鸡传染性法氏囊病毒B87 株、鸡新城疫病毒La Sota 株、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡痘病毒、禽呼肠孤病毒 S1133 株的中和指数均不大于10；通过 AGP、ELISA、HI 等试验，确定该血清中不含其他禽源外源病毒抗体。
本研究为鸡传染性支气管炎活疫苗或毒种的外源病毒检验提供了具有良好特异性和高效价的中和用血清。
关键词：鸡传染性支气管炎病毒；特异性血清；检验中图分类号：S858.31 文献标识码：B 文章编号：1005-944X（2018）02-0073-04DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2018.02.020Preparation and Identification of Specific Antiserumagainst Infectious Bronchitis Virus Used for Exogenous Virus TestMao Yaqing，Wu Tao，Wang Jia，Wang Zhe，Kong Dongni，Li Ling，Li Huijiao，Jang Taozhen，Li Junping（China Institute of Veterinary Drug Control，Beijing 100081，China）Abstract：In order to prepare the specific antiserum against Infectious bronchitis virus（IBV）for exogenous virus test，basic and strengthened immunization were conducted towards 300 SPF chickens at the age of 3~4 weeks. Twenty-one days after the last immunization，the blood were collected and serum samples were isolated. After being mixed，packaged，frozen and dried up by vacuum，the serum samples were examined by sterility test，exogenous virus test，residual moisture test，neutralization titer determination and specificity test. The data results of sterility test，exogenous virus test and residual moisture test complied with the specifications of China Veterinary Pharmacopoeia.The neutralization titer of the serum was 1:800，and the neutralization index of the antiserum neutralizing with IBV H120 could reach to 106.3，while the values were below 10 when neutralizing with Infectious bursal disease virus（B87 strain），Newcastle disease virus（La Sota），Avian infectious laryngotracheitis virus，Fowlpox virus，and Avian reovirus. Besides，there was no antibody against other avian disease viruses in this serum according to APG，ELISA and HI test. In conclusion，antiserum samples with high specificity and neutralization titer were successfully prepared for detecting the exogenous virus mingled in IBV live vaccines and seed virus.Key words：Infectious bronchitis virus；specific antiserum；test基金项目：国家重点研发计划项目（2017YFF0208600、2017YFF0208603）同等贡献作者：毛娅卿、吴涛通信作者：蒋桃珍鸡传染性支气管炎（Infectious bronchitis，IB）是一种由传染性支气管炎病毒（IBV）引起的鸡的常见急性、高度传染性，并具有重大经济意义的病毒病。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
关键词 ： 传染性 支气管 炎 ；ＩＳ 鸡 Ｅ＿ Ａ试 剂 盒 ； Ｊ 抗体 中图分 类号 ：８ １ ￥３ 文献标 识码 ： 文章编 号 ：０６—８９ （０ ７ ０ ０ ５ —０ Ａ １０ ９６ ２０ ）６— ０ ７ ３ Ｔｈｅ ａ ｔｂ ｄ ｅｅ ｔ ｎ ｏ ｖａ ｎ ｅ ｔｏ ｓ ｎ ｉ ｏ ｙ ｄ ｔｃ ｏ ｆａ ｉ ｉ ｆｃ ｕ ｉ ｎ ｉ ｂ ｏ ｈｉｉ ｉｕ ｙ ＥＬＩ Ａ ｅ ｔｋｔ ｒ ｎｃ ｔｓｖ ｒ ｓｂ Ｓ ｔｓ ｉ
Ａｂ ｔａ ｔ ３ ４ ｓ １ ｑ ｓｎ ｔ ｅ ｓ ｅ ｔｄ ｆｒ ｎ ｉｏ ｙ ｏ ａ ｉ ｆ ｔ ｕ ｒｎ ｈ ｔ ｉ ｓｂ Ｌ Ｓ ｔｓ ｓ ｒ ｃ ： ４ ｅ］ ｌ ａ ｐｅ ｗ ｒ ｉ ｐ ｃｅ ｔ ｄ ｖａ ｉ ｅ ｉ ｓｂ ｏ ｃ ｉ ｓｖｒ ｙＥ ＩＡ ｔ Ｌ ｓ ｅ ｎ ｏ ａ ｂ ｆ ｎ ｎｃ ｏ ｉ ｕ ｅ ｋｔｉ ｎ ｎ ｄ Ｌ ｄ ｏｌ ｔ ． ｈ ｅ ｕ ｓ ｓ ｏ ｅ ａ ｐ ｓ ｖ ａ ｅ ｗ ｓ ９ 。 ６ ， ｄ ａ ｔ ｏ ｙ ｔ ｒ ｉ ｎ Ｘｉｉｇ ａ ｅ ｕ ｅ ｔ ｙ Ｔ ｅ ｒｓ ｈ ｈ ｗ ｄ ｔ ｔ ｏ ｉ ｅ ｒ ｔ ａ ７ ９ ％ ａ ｉ ｄ ｉ ｅ ｏ ｎ ｎ ｈ ｉ ｔ ｎ ｎ ｂ ｔ ｆ ３ ３ ｓ 砌 ＝ ｅ ｅｗ ｅ ０ ３ ｅ ｎ ｗ ｒ ｂ ｔ ｅ ｎ ５ ０— １ ｏ Ｏ ｅ ｓ 砌 ＝ ａ ｌｗ ５ ０ ａ ｄ ｔ ｅ ｏ ｅｓｗ ｒ ｂ ｖ ５ ０ ０ ｓ ｅ ５ ０ ０； ｎ ｅ ｎ Ｗ Ｓ ｂ ｏ ０ ， ｎ ｔ ｒ ｅ ａ ｏ ｅ １ ｏ ． ｓ ｅ ｈ ｈ ｅ Ｋｅ ｏ ｄ ： ｖａ ｎ ｅ ｔ ｕ ｒｎ ｈ ｔ ；Ｅ Ｉ Ａ ｔｓ ｋｔ ｎ ｔ ｏ ｙ ｙ ｗ ｒ ｓ ａ ｉ ｉ ｃ ｉ ｓｂ ｏ ｃ ｉ ｓ Ｌ Ｓ ｔ ｉ ｎ ｆ ｏ ｉ ｅ ；ａ ｉ ｄ ｂ
对 西 宁市 （ 下辖西 宁市 区 、 中县 、 湟 湟源 县 、 通县 ） 乐都 县鸡 场送 检 的血 清样 品 的抗体 水 平进 行 了检 大 及 测， 现报 道 如下 。
１ 材 料 与 方 法
１ １ 试 验材 料 ．
１１１ Ｅ Ｉ ．． Ｌ Ａ试剂盒 进 口 Ｉ 抗体检测试剂盒 。包括 ＩＶ抗原包被板 ， Ｖ阴性对照血清、 Ｓ Ｂ Ｂ Ｉ Ｂ 阳性对照 血清、 酶标抗体 、山羊） （ 抗鸡抗体 一 辣根过氧化物酶（ 脚）） Ｈ Ｏ 结合物 、 样品稀释液、Ｍ 底物 、 ＴＢ 终止液。由 北京 爱德 士元 亨生 物科技 有 限公司 （ 中美 合作 ） 生产 ， 批号 ：９ ６ Ｂ７ 。 ０２ 一Ｃ ４２ １１２ 待检血清 各地区养鸡场送检的血清样品， ４ ．． 置 ℃冰箱备用。 １１３ 器材 精确 移液 管 、 道移 液管 、 头 、６ Ｌ ．． 多 吸 ９ 孑 读数 仪 、 品稀 释用试 管 、 液吸移 装置 。 样 洗 １２ 检 测步骤 ．
， ＥＮ ｎ ＇ ＹＡＮＧ ｅ ｇ ｑ ” Ｙｉ ｇ Ｚ ｎ —ｉ
。
（ 。ｏ ｅｅ ｆ ｇｉ ｌ ｒ ａｄＡ ｉ ａ Ｈ ｓａｄ ， ｉｇａ Ｕ ｉ ｒ ｔ，Ｘｎｎ １０３ Ｃ ｉ ； １Ｃｌ ｇ Ａ ｒ ｕｔ ｅ ｎ ｎｍ ｌ ｕｂｎ ｒ Ｑｎｈｉ ｎｖ ｓｙ ｉｉ ８ ００ ， ｈ ａ ｌ ｏ ｃ ｕ ｙ ｅｉ ｇ ｎ ２ Ｎ ｒ ｗ ｓ Ａ ｒ ｕ ｕｅａｄＦｒｓ ｕｉ ｒ ｔ， ａｇｎ７２ Ｏ ，ｈｎ ） ．ｏｔ ｅｔ ｇ ｃｌ ｒ ｎ ｏ ｔ ｎ ｅ ｉ Ｙ ｎｌ １１０ Ｃ ｉａ ｈ ｉ ｔ ｅ ｖｓ ｙ ｉ
２ｃ 年 ｌ ０ｒ ７ ２月
应 用 Ｅ ＩＡ试 剂盒 检 测 鸡 传 染 性 支 气 管 炎 抗 体 ＬＳ
文 英 ， 增 岐 ２ 杨
（． １ 青海 大学农牧学院 ， 青海 西宁 ８００ ； ． １０３ ２ 西北农林科技大学 ， 陕西 杨凌 ７ ２０ ） １１０
摘要 ： 应用 Ｅ Ｉ Ｌ Ａ试剂盒对西宁市及乐都县 ３４份血 清样品进行 了鸡传染性 支气管炎抗体水 Ｓ ４ 平检 测 ， 结果 阳性率 达 ９ ．６ ， 中 ３３份样 品抗 体 滴度 在 ５０—１ ０ 之 间 ； 份 样品 的抗体 ７９ ％ ｔｕ ｒ ｃｉｓＩ） 由传 染性 支气 管 炎 病毒 （ ｅｔｕ ｒ ｃｉｓｖ ｓｍｖ） ｉｅｉ ｓｂｏ ｈｔ，Ｂ 是 ｆ ｏ ｃ ｎ ｉ ｉｃ ｉ ｓｂｏ ｈｔ ｉ ， ｆ ｎ ｏ ｎ ｉ ｒ ｅ 引起鸡 的一种 高 度接触 性 、 死 性 呼 吸道 疾 病 ， 严 重 危 害 我 国乃 至 世 界 养鸡 业 的重 要 疾 病 之一 【 】 致 是 １。
临床上主要呈现呼吸道 、 生殖道、 肾脏病变和腺 胃肿大等。ＩＶ属于冠状病毒属的冠状病毒， Ｂ 具有高度 变 异性 ， 血清 型众 多 ， 且各 血清 型之 间 的交叉较 少 ， 因而 临床上 很 难控 制 【 ， 统 的 ＩＶ主要 引起 呼 吸 ２ 传 “】 Ｂ 道病变， 但近年来报道的 ＩＶ主要 以嗜 肾脏型和嗜腺 胃型为主 ， Ｂ 虽然至今嗜腺 胃型 ＩＶ还未能成功地复 Ｂ 制 出临床 病 例 ， 至少 已证 明 ＩＶ是 引起 腺 胃病 变 的重要 病 原 因 子之 一 】 但 Ｂ 。因 此 ， 了解 该病 的流行 为 及免疫情况 ， 应青海省农牧厅全省疫病调查项 目要求 ， 笔者于 ２０ 年 ７ ０６ 月应用进 口 Ｉ Ｂ抗体检测试剂 盒
维普资讯
ｊ
第２ ５卷
第 ６期
青 海 大 学 学 报 （自 然 科 学 版 ） Ｊｕｎｌ ｆ ｉｇａ Ｕ ｉ ｒｔ（ ａ ｒ ｃ ｎｅ ｏｒａ ｏ Ｑ ｎｈｉ ｎ ｅ ｉ Ｎ ｔ ｅＳ ｉ ｃ） ｖ ｓｙ ｕ ｅ
Ｖ０ ． ５ Ｎｏ ６ Ｉ２ ． Ｄｅ ２ ０ ｃ．０ ７