磁珠式核酸提取体系
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磁珠捉取与柱提収法比较（数据见下页）
磁珠提取方法与柱提取法及水济液梯嗖稀释样本比u
稀释组
柱提取
磁珠提取
10-°
24.13
24.34
25.28
101
27.15
29.20
28.57
102
31.23
33.34
32.64
10-3
35.34
35.87 品
35.39、
fl
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叫—
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HCV阳性样本10恬稀释梯度:10"，10U 0?, 10\l0u
T
HIV RNA提取HIV阳性样本梯度稀释成1/5, 1/25, 1/50，1/100和1/200 五个浓度，提取RNA，原样本提取后用TE按相同比例稀释 ，匕机比较。
稀释组 磁珠提取1 • 28.881/5 __ 1/5 35.78 33.93 一1/50 \ 37.17 35.591/100 38.83 36.121/200 - 3733
各种提取方式操作比较
提取方式
时间
自动化
酚、氯仿
经典方法 1
长
难
有
玻璃粉法
短
难
没有
离心柱法
短
难
没有
磁粒法
短
容易
没有
磁粒法核酸提取基本步骤
■裂解细胞或病毒颗粒■核酸与磁粒结合■磁分离弃上清■洗涤缓冲液洗涤磁粒■磁分离弃上清■洗脱液将核酸从磁粒洗脱 ■磁分离弃磁粒，收集上摘
磁粒法提取核酸示意图
结
洗涤
洗脱
磁粒提取试剂操作方式
■磁架■பைடு நூலகம்笔■自动提取仪
磁架提取核酸示意图
裂解
M
磁分离
吸i废液
V
洗涤
洗脱
磁笔提取核酸示意图
转移磁粒
洗脱
自动仪器提取
A动提取的原理磁笔提取相Hh H足屮 机器的运转代替手工操作，实现高通带提取 和减少工作量。
磁珠提取方法的优化■裂解：裂解液配方，作用时间和温度等■结合：结合液的选择和用量等■洗涤：洗涤液配方等■洗脱：洗脱时间和温度等
38.16
38.07
38.69
磁珠捉取与忭提法的提取效在低浓嗖样本捉取方a.荧光増踅 与稀什组无苦茇异，此Z/i大在太除样木中抑钊物方而效果良好。
HCV RNA国家标准品检测
Dtfkd Rn ¥£ Lj'Lld
10份阳性琴 铺:Pl PIO
HCVWI性 Ct HCV阳性 Ct 参考品 参考品
二匕2 I■丄
HIV 样本稀择梯度:l/5» 1/25, 150. 1/100和！ 200
HIV核酸国家参考品检测
Cyd* Numb，
HIVRNAW敏嗖和记W:参考品：B2-B5 （至少检出B2-B3）
HIVRNA线性参考品:A2-A5.
蜘，：id Jjbt
HIV RNA荧光定最标准曲线，线形相关系数:0,9907
26.84
32.52
Qiagen kit 平行1
26.70
32.96
Qiagen kit 平行2
26.71
32.28
提取灵敏度实验
■阳性样本梯度稀释 ■闺家灵敏度参考品
HCV RNA提取
Hve J 3|>ex'r^ 7 * yitpll flruTl^r. Plat^ _^rr*—i y^--.-.-Mt^ n y-ry-r \
27.39
Promega体系平行2
27.72
30.84
27.20
Qiagen kit平行 1
27.86
39.00
28.82
Qiagen kit平行2
27.33
33.58
28.55 '
HBV DNA提取比较
方法
HBV 样本1
HBV样本2
Promega体系平行
26.65
32.78
Promega体系平行2
主要实验结果■与其他方法或类似商业化试剂念的比较■核酸提取的灵敏度：HCVRNA, HIVRNA,HBV DNA \
与Qiagen磁珠式核酸提取试剂盘的比较
■ HCV RN A提取比较
Ct值方法
HCV样和1
HCVf丫:本2
HCV样木3
Promega体系平行1
27.60
30.21
Pl 34. P6 ND5-SP218 P3 36. P8 ND、 96P4 34. P9 32,P5 35. PIO 36.44 73
核酸提取的总体要求
■筒质量：纯度尚并且尽可能不破坏核酸 ■高产量：样本量一定时尽可能提取多的核酸■高通量：同时提取多个标本__■自动化：降低劳动量；生物科技的飞速 发展，需要处理的核酸样本迅速增多，自动化提取核酸成为一种迫切需要的选择。
磁粒法核酸提取的特点■步骤：■裂解4核酸结合4洗涤4洗脱■特点：■提取时间短■不使用酚、氯仿f *用磁分离替代离心分离易于自动化，可以实现 髙通景提取前处子市场发抒阶段，是未来发展的方向■主要产品为国外产品：Promega、Roche、 KingFisher、Dynal 3，人 t 嬰 1 j 专用仪器fld 套
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磁珠捉取与柱提収法比较（数据见下页）
磁珠提取方法与柱提取法及水济液梯嗖稀释样本比u
稀释组
柱提取
磁珠提取
10-°
24.13
24.34
25.28
101
27.15
29.20
28.57
102
31.23
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35.87 品
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HCV阳性样本10恬稀释梯度:10"，10U 0?, 10\l0u
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HIV RNA提取HIV阳性样本梯度稀释成1/5, 1/25, 1/50，1/100和1/200 五个浓度，提取RNA，原样本提取后用TE按相同比例稀释 ，匕机比较。
稀释组 磁珠提取1 • 28.881/5 __ 1/5 35.78 33.93 一1/50 \ 37.17 35.591/100 38.83 36.121/200 - 3733
各种提取方式操作比较
提取方式
时间
自动化
酚、氯仿
经典方法 1
长
难
有
玻璃粉法
短
难
没有
离心柱法
短
难
没有
磁粒法
短
容易
没有
磁粒法核酸提取基本步骤
■裂解细胞或病毒颗粒■核酸与磁粒结合■磁分离弃上清■洗涤缓冲液洗涤磁粒■磁分离弃上清■洗脱液将核酸从磁粒洗脱 ■磁分离弃磁粒，收集上摘
磁粒法提取核酸示意图
结
洗涤
洗脱
磁粒提取试剂操作方式
■磁架■பைடு நூலகம்笔■自动提取仪
磁架提取核酸示意图
裂解
M
磁分离
吸i废液
V
洗涤
洗脱
磁笔提取核酸示意图
转移磁粒
洗脱
自动仪器提取
A动提取的原理磁笔提取相Hh H足屮 机器的运转代替手工操作，实现高通带提取 和减少工作量。
磁珠提取方法的优化■裂解：裂解液配方，作用时间和温度等■结合：结合液的选择和用量等■洗涤：洗涤液配方等■洗脱：洗脱时间和温度等
38.16
38.07
38.69
磁珠捉取与忭提法的提取效在低浓嗖样本捉取方a.荧光増踅 与稀什组无苦茇异，此Z/i大在太除样木中抑钊物方而效果良好。
HCV RNA国家标准品检测
Dtfkd Rn ¥£ Lj'Lld
10份阳性琴 铺:Pl PIO
HCVWI性 Ct HCV阳性 Ct 参考品 参考品
二匕2 I■丄
HIV 样本稀择梯度:l/5» 1/25, 150. 1/100和！ 200
HIV核酸国家参考品检测
Cyd* Numb，
HIVRNAW敏嗖和记W:参考品：B2-B5 （至少检出B2-B3）
HIVRNA线性参考品:A2-A5.
蜘，：id Jjbt
HIV RNA荧光定最标准曲线，线形相关系数:0,9907
26.84
32.52
Qiagen kit 平行1
26.70
32.96
Qiagen kit 平行2
26.71
32.28
提取灵敏度实验
■阳性样本梯度稀释 ■闺家灵敏度参考品
HCV RNA提取
Hve J 3|>ex'r^ 7 * yitpll flruTl^r. Plat^ _^rr*—i y^--.-.-Mt^ n y-ry-r \
27.39
Promega体系平行2
27.72
30.84
27.20
Qiagen kit平行 1
27.86
39.00
28.82
Qiagen kit平行2
27.33
33.58
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HBV DNA提取比较
方法
HBV 样本1
HBV样本2
Promega体系平行
26.65
32.78
Promega体系平行2
主要实验结果■与其他方法或类似商业化试剂念的比较■核酸提取的灵敏度：HCVRNA, HIVRNA,HBV DNA \
与Qiagen磁珠式核酸提取试剂盘的比较
■ HCV RN A提取比较
Ct值方法
HCV样和1
HCVf丫:本2
HCV样木3
Promega体系平行1
27.60
30.21
Pl 34. P6 ND5-SP218 P3 36. P8 ND、 96P4 34. P9 32,P5 35. PIO 36.44 73
核酸提取的总体要求
■筒质量：纯度尚并且尽可能不破坏核酸 ■高产量：样本量一定时尽可能提取多的核酸■高通量：同时提取多个标本__■自动化：降低劳动量；生物科技的飞速 发展，需要处理的核酸样本迅速增多，自动化提取核酸成为一种迫切需要的选择。
磁粒法核酸提取的特点■步骤：■裂解4核酸结合4洗涤4洗脱■特点：■提取时间短■不使用酚、氯仿f *用磁分离替代离心分离易于自动化，可以实现 髙通景提取前处子市场发抒阶段，是未来发展的方向■主要产品为国外产品：Promega、Roche、 KingFisher、Dynal 3，人 t 嬰 1 j 专用仪器fld 套