细胞工程8

第九章转基因植物

第一节植物基因转化受体体系

符合条件：

高效接受外源基因，并稳定插入染色体组

具有脱分化和再生能力，形成新的植物体

稳定地将外源基因遗传给后代

一、叶盘受体体系

转化率高，简单、重复性好，嵌合体多，不适用于所有植物

二、原生质体受体体系

减少嵌合体，可以获得许多来自一个细胞的转化细胞克隆

烟草、矮牵牛、向日葵、胡萝卜

三、悬浮细胞受体体系

四、愈伤组织受体体系

转化率高，扩繁量大，试材广泛

五、胚状体受体体系减少嵌合体（单细胞起源），次生胚

六、活体受体体系

第二节植物基因转化方法

载体介导法：共培养法、病毒介导法

基因直接导入法：

物理法：基因枪法、电击法、超声波

法、显微注射法、激光微束法

化学法：PEG法、脂质体法

种质系统法：花粉管通道法、生殖细胞浸

染法、胚囊和子房注射法

一、根癌农杆菌介导法（主要双子叶植物）

1.根癌农杆菌转化技术

2.发根农杆菌转化技术

二、基因枪转化法（主要单子叶植物）

三、PEG介导法

我国学者高国南首创。PEG引起细胞膜表面电荷紊乱，干扰细胞间的识别，有利于细胞间融合和外源DNA分子进入原生质体。

四、花粉管通道法

又称子房注射法、种质系统法。1983年周光宇建立。使DNA沿花粉管通道进入胚囊，避免组织培养。

五、其他转化方法

电击法

显微注射法

脂质体法

圆球体法

超声波法

激光法

病毒介导的基因转移

第三节转基因个体检测

一、形态特征检测

1.转化细胞的选择性培养

2.转基因植株的生物检测

二、报告基因检测

1.β-葡萄糖酸甘酶基因（GUS）

2.新霉素磷酸转移酶基因

3.氯霉素乙酰转移酶基因（Cat）

4.潮霉素磷酸转移酶基因（Hpt）

三、分子生物学方法检测

（一）Southrn DNA印记杂交

（二）Norther RNA印记杂交

（三）Western蛋白质印记杂交

（四）PCR反应

第四节转基因植物的研究成果及安全性

一、转基因植物的研究成果

1.抗除草剂转基因植物

2.抗虫转基因植物

3.抗病毒转基因植物

4.抗真菌病害转基因植物

5.抗细菌病害转基因植物

6.其他转基因植物

二、转基因植物的安全性