演示文稿-培养基及其制备技术.
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A. 对于其它渠道有可能带入的过多的某种无机离子和 微量元素在发酵过程中必须加以考虑
例：铁离子 青霉素发酵中，铁离子的浓度要小于20μ g/ml 发酵罐必须进行表面处理
B、使用时注意盐的形式（pH的变化） 例：黑曲酶NRRL-330,生产α-淀粉酶，pH对酶活的影响
不加 加 K2HPO4 加 KH2PO4
NaNO3 + 4H2 → NH3 + 2H2O + NaOH
无机氮源被菌体作为氮源利用后，培养液中就留下了酸 性或碱性物质，这种经微生物生理作用（代谢）后能形成酸 性物质的无机氮源叫生理酸性物质，如硫酸胺，若菌体代谢 后能产生碱性物质的则此种无机氮源称为生理碱性物质，如 硝酸钠。正确使用生理酸碱性物质，对稳定和调节发酵过程 的pH有积极作用。
2、半固体培养基(semi-solid medium) 液体培养基中加入少量的凝固剂而使之呈半固体状态
的一类培养基。(0.2～0.7％琼脂)。常用于观察细菌运动 特征，噬菌体效价鉴定以及厌氧菌培养等。 3、液体培养基(liquid medium)
不含任何凝固剂，其组分均匀，呈液体状态，用途广 泛。常用于微生物生理代谢的各种研究，也是大规模工业 发酵生产上普遍采用的培养基。
4、产物抑制剂 在发酵过程中加入抑制剂会抑制某些代谢途径的进行，同
时刺激另一代谢途径活跃，以致可以改变微生物的代谢途 径，从而获得人们所需的某种产物或使正常代谢的某一代 谢中间物积累起来。
2ATP 葡萄糖
2ATP
亚硫酸氢钠
2ADP
2ADP
3-磷酸甘油醛
1,6-二磷酸果糖
NAD+
丙酮酸 NADH+H+
什么叫 做流加？
用法：前体使用时普遍采用流加的方法
前体一般都有毒性，浓度过大对菌体的生长不利 苯乙酸，一般基础料中仅仅添加0.07%。
前体相对价格较高，添加过多，容易引起挥发和氧化， 流加也有利于提高前提的转化率
3、产物促进剂
所谓产物促进剂是指那些非细胞生长所必须的营养物， 又非前体，但加入后却能提高产量的添加剂。
富含B类维生素,也含有有机氮 化合物和碳水化合物
2、合成培养基(synthetic medium)
定义：采用已知化学成分的纯试剂所配成的培养基，也称 组合培养基(chemically defined medium)。
特点：这类培养基成分明确，重复性强。 用途：适用于做分类鉴定，生物测定、选种育种等方面的
pH
酶活
4.25
120分钟
5.45
30分钟
4.62
75分钟
四、生长因子、前体和产物促进剂、抑制剂
1、生长因子
从广义上讲，凡是微生物生长不可缺少的微量的有机 物质，如氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等均称生长因子。
如以糖质原料为碳源的谷氨酸生产菌均为生物素缺陷 型，以生物素为生长因子,生长因子对发酵的调控起到重 要的作用 。
子情境：培养基及其制备技术
微生物细胞的化学组成及胞外代谢产物
微生物营养物质的确定主要依据微生物细胞及其代谢 产物的化学组成。
一、微生物细胞的化学组成
细胞化学成分
水（70%-90%） 干物质 有机物(蛋白质、多糖、脂、核酸——占干重96%
维生素、有机酸及它们的降解物） 无机物（盐）
细胞含水量=（湿重-干重）/湿重×100%
对于常规发酵，可靠、持久，能提供大量成分一致清洁的 水。
第三节 培养基类型
一、根据物理状态划分 1、固体培养基(solid medium)
天然固体基质制成的固体培养基，如马铃薯块、麸皮 培养基；二是在液体培养基中添加凝固剂而制成的固体培 养基。三是在营养基质上覆盖滤膜制成的滤膜培养基。
用于微生物分离、鉴定、计数、测定、保藏等，生产 上固体种子培养，某些产品的发酵培养基。
动的进行。如生物素、硫胺素、肌醇等，但需要量是极少 的。 水：营养物质必须溶解于水中，才能透过细胞膜被微生物 利用。 诱导剂、前体和促进剂：胞外酶合成需要诱导物、有些需 要促进剂，抗生素需要前体。
一、碳源
1、作用
提供微生物菌种的生长繁殖所需的能源和合成菌体所必需 的碳成分 提供合成目的产物所必须的碳成分 2、来源
工业发酵培养基
碳源：供给菌体生命活动所需的能量和构成菌体细胞以及 代谢产物的基础。
氮源：主要构成菌体细胞物质和代谢产物，即蛋白质、氨 基酸等之类的含氮代谢物。功能：构成菌体成分；作为酶 的组成分或维持酶的活性；调节渗透压、pH值、氧化还原 电位等。
无机盐：铅、镁、硫、磷、钾、钠、氯、锌、钴、锰。 特殊生长因子：其功能是构成辅酶的组成分，促进生命活
伊红-美兰培养基（EMB）
2、选择培养基(selective medium)
根据某类微生物的特殊营养要求或对某种物理化学因 子的抗性而设计出来的一类培养基。即根据被分离微生物 的特性，采用“投其所好、取其所抗”的原则设计的培养 基。
② 淀粉、糊精
使用条件：微生物必须能分泌水解淀粉、糊精的酶类
缺点：难利用、发酵液比较稠、一般>2.0%时加入一定的 α -淀粉酶成分比较复杂，有直链淀粉和支链淀粉等等。 优点：来源广泛、价格低
难利用，可以解除葡萄糖效应 葡萄糖或某些容易利用的碳源，其分解代谢产物阻遏某 些诱导酶体系编码的基因转录的现象。
二、按培养基营养物质的来源划分
1、天然培养基(complex medium) 定义：指利用动植物、微生物或其它天然来源的难以确切
知道其化学成分的原料所配成的培养基。 特点：培养基化学成分复杂，营养丰富，原料来源充足，
价格低廉。 用途：适宜于实验室和大生产之用。 举例：培养酵母和霉菌的麦芽汁培养基属于此类。
二、微生物胞外代谢产物
1、代谢副产物 伴随正常代谢作用所产生的一些小分子化合物，包括气体
（CO2、H2、CH4）和乙醇、丙酮、丁醇、丙酸、乳酸等低分 子质量的醇类、酮类和脂肪酸类。 2、中间代谢产物 在代谢途径中产生的一些小分子物质，如氨基酸、核苷酸、 有机酸和单糖的衍生物，主要用于合成蛋白质，核酸、类 脂和多糖等细胞物质。一般不分泌到微生物细胞外，只有 在微生物细胞生物合成受阻或外源碳源浓度较高的情况下， 才会大量积累和分泌于细胞外。
研究。 举例：培养放线菌的高氏一号培养基，培养真菌的查氏培
养基。
3、半合成培养基(semi-synthetic medium)
定义：主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些天然 成分的培养基，也称半组合培养基。即在合成培养基中加 入某种天然成分而制成的培养基。
特点：培养基中部分成分清楚，部分成分不清楚。 用途：适合于大多数微生物的培养。大多数培养基都属此
苯乙酸:分子量136
作用：前体有助于提高产量和组分
用量：前体的用量可以按分子量衡算，具体使用有个转化 率的问题
例：6000单位/ml的青霉素G，需要多少苯乙酸 青霉素＝6000*0.6（微克）＝36mg/ml 苯乙酸＝（36*136）/356=13.8mg/ml=1.38%
实际使用时的转化率在46-90%之间
有机氮源是这些生长因子的重要来源，多数有机氮源 含有较多的B簇维生素和微量元素及一些微生物生长不可缺 少的生长因子
2、前体
前体指某些化合物加入到发酵培养基中，能直接被微生 物在生物合成过程中合成到产物物分子中去，而其自身的结 构并没有多大变化，但是产物的产量却因加入前体而有较大 的提高。
青霉素：分子量356
培养基是提供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物所 需要的、按一定比例配制的的多种营养物质的混合物。
培养基是人工配制的供微生物生长、繁殖、代谢，产生人 们所需产物的营养物质和原料。同时，培养基还应提供微 生物生长所必需的环境条件，如一定的pH。培养基的组成 和配比是否恰当对微生物的生长、产物的形成、提取工艺 的选择、产品的质量和产量都有很大的影响。
二、微生物胞外代谢产物
次级代谢产物由微生物细胞合成，既不参与细胞的 组成，又不是酶的活性基团，也不是细胞的贮存物质。 次级代谢产物种类很多，通常有抗生素、激素、毒素、 色素等。分泌于微生物细胞外。
4、胞外水解酶类 淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、果胶酶、纤维素酶、葡萄糖糖 化酶、葡萄糖异构酶等。
第二节 培养基组成
糖类、油脂、有机酸、正烷烃
3、工业上常用的糖类
① 葡萄糖
所有的微生物都能利用葡萄糖 但是会引起葡萄糖效应 工业上常用淀粉水解糖,但是糖液必须达到一定的质
量指标
② 糖蜜
糖蜜是制糖生产时的结晶母液，它是制糖工业的副产物。
糖蜜主要含有蔗糖，总糖可达50%～75%。一般糖蜜分甘 蔗糖蜜和甜菜糖蜜葡萄糖蜜。
所以选择合适的无机氮源有两层意义：
满足菌体生长
稳定和调节发酵过程中的pH
2、有机氮源
来源：工业上常用的有机氮源都是一些廉价的原料，花生饼 粉、黄豆饼粉、棉子饼粉、玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、 酵母粉、鱼粉、蚕蛹粉、尿素、废菌丝体和酒糟。
成分复杂：除提供氮源外，有些有机氮源还提供大量的无机 盐及生长因子。
实验室常用的天然营养物质
营养物质 牛肉浸膏 蛋白胨
酵母浸膏
来源 瘦牛肉组织浸出汁浓缩而 成的膏状物质 将肉、酪素或明胶用酸或 蛋白酶水解后干燥而成的 粉末状物质 酵母细胞的水溶性提取物 浓缩而成的膏状物质
主要成份 富含水溶性碳水化合物、有机 氮化合物、维生素、盐等 富含有机氮化合物、也含有一 些维生素和碳水化合物
CO2 乙醛
Pi
乙醛亚硫 酸氢钠加 成物
磷酸二羟丙酮
α -磷酸甘油
甘油
NADH+H+ NAD+
H2O
五、水
对于发酵工厂来说，恒定的水源是至关重要的，因为在 不同水源中存在的各种因素对微生物发酵代谢影响甚大。
水源质量的主要考虑参数包括pH值、溶解氧、可溶 性固体、污染程度以及矿物质组成和含量。
对于酿造行业，水的重要性不言而喻
例 玉米浆： ①可溶性蛋白、生长因子（生物素）、苯乙酸 ②较多的乳酸 ③硫、磷、微量元素等
有机氮源成分复杂可以从多个方面对发酵过 程进行影响，而另一方面有机氮源的来源具有不 稳定性。所以在有机氮源选取时和使用过程中， 必须考虑原料的波动对发酵的影响。
三、无机盐的微量元素
1、作用：各种不一样 2、来源：C、N源，以盐的形式补充 3、用量：根据具体的产品，以实验决定 4、使用注意点
一、微生物细胞的化学组成
细胞化学元素
主要元素：碳、氢、氧、氮、磷、硫（占细胞干重
97%）、钾、
镁、钙、铁；
微量元素：锌、锰、钠、氯、钼、硒、钴、铜、钨、 镍、硼等
细胞的化学成分的作用为：遗传连续性、通透性和生 化活性。
注：微生物细胞的化学组成不是绝对不变的，往往与 菌龄、培养条件、环境及生理特性相关。
二、氮源
氮源主要用于构成菌体细胞物质（氨基酸，蛋白质、 核酸等）和含氮代谢物。常用的氮源可分为两大类：有机 氮源和无机氮源。
1、无机氮源
种类：氨盐、硝酸盐和氨水 特点：微生物对它们的吸收快，所以也称之为迅速利 用的氮源。但无机氮源的迅速利用常会引起pH的变化 如：
(NH4)2SO4 → 2NH3 + 2H2SO4
二、微生物胞外代谢产物
3、次级代谢产物
初级代谢：是指微生物从外界吸收各种营养物质，通过 分解代谢和合成代谢，生成维持生命活动所需要的物质 和能量的过程。这一过程的产物，如糖、氨基酸、脂肪 酸、核苷酸以及由这些化合物聚合而成的高分子化合物， 如多糖、蛋白质、脂类和核酸等。
次级代谢：次级代谢是指微生物生长到一定时期，以初 级代谢产物为前体物质，合成一些对微生物的生命活动 无明显功能的物质的过程，这一过程的产物即次级代谢 产物。次级代谢产物大多是一类分子结构比价复杂的含 有苯环的化合物，如抗生素、激素、毒素、色素等。
类。
举例：营养琼脂（NA）中除含有天然的牛肉膏和蛋白胨外， 还有成分明确的氯化钠。
三、按培养基的用途划分
1、鉴别培养基(differential medium) 一类含有某种代谢产物指示剂的培养基。微生物
在这类培养基上生长后，分泌的代谢产物与指示剂起反 应产生某种明显的特征性变化，根据这种变化将该种微 生物与其它微生物区分开来。 伊红-美兰培养基（EMB）：可用于鉴别大肠杆菌、沙门 氏菌、志贺氏菌等肠道微生物。大肠杆菌能强烈分解乳 糖而产生大量的混合酸，使菌体表面带H+，染上酸性染下呈绿色金属光泽。
例：铁离子 青霉素发酵中，铁离子的浓度要小于20μ g/ml 发酵罐必须进行表面处理
B、使用时注意盐的形式（pH的变化） 例：黑曲酶NRRL-330,生产α-淀粉酶，pH对酶活的影响
不加 加 K2HPO4 加 KH2PO4
NaNO3 + 4H2 → NH3 + 2H2O + NaOH
无机氮源被菌体作为氮源利用后，培养液中就留下了酸 性或碱性物质，这种经微生物生理作用（代谢）后能形成酸 性物质的无机氮源叫生理酸性物质，如硫酸胺，若菌体代谢 后能产生碱性物质的则此种无机氮源称为生理碱性物质，如 硝酸钠。正确使用生理酸碱性物质，对稳定和调节发酵过程 的pH有积极作用。
2、半固体培养基(semi-solid medium) 液体培养基中加入少量的凝固剂而使之呈半固体状态
的一类培养基。(0.2～0.7％琼脂)。常用于观察细菌运动 特征，噬菌体效价鉴定以及厌氧菌培养等。 3、液体培养基(liquid medium)
不含任何凝固剂，其组分均匀，呈液体状态，用途广 泛。常用于微生物生理代谢的各种研究，也是大规模工业 发酵生产上普遍采用的培养基。
4、产物抑制剂 在发酵过程中加入抑制剂会抑制某些代谢途径的进行，同
时刺激另一代谢途径活跃，以致可以改变微生物的代谢途 径，从而获得人们所需的某种产物或使正常代谢的某一代 谢中间物积累起来。
2ATP 葡萄糖
2ATP
亚硫酸氢钠
2ADP
2ADP
3-磷酸甘油醛
1,6-二磷酸果糖
NAD+
丙酮酸 NADH+H+
什么叫 做流加？
用法：前体使用时普遍采用流加的方法
前体一般都有毒性，浓度过大对菌体的生长不利 苯乙酸，一般基础料中仅仅添加0.07%。
前体相对价格较高，添加过多，容易引起挥发和氧化， 流加也有利于提高前提的转化率
3、产物促进剂
所谓产物促进剂是指那些非细胞生长所必须的营养物， 又非前体，但加入后却能提高产量的添加剂。
富含B类维生素,也含有有机氮 化合物和碳水化合物
2、合成培养基(synthetic medium)
定义：采用已知化学成分的纯试剂所配成的培养基，也称 组合培养基(chemically defined medium)。
特点：这类培养基成分明确，重复性强。 用途：适用于做分类鉴定，生物测定、选种育种等方面的
pH
酶活
4.25
120分钟
5.45
30分钟
4.62
75分钟
四、生长因子、前体和产物促进剂、抑制剂
1、生长因子
从广义上讲，凡是微生物生长不可缺少的微量的有机 物质，如氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等均称生长因子。
如以糖质原料为碳源的谷氨酸生产菌均为生物素缺陷 型，以生物素为生长因子,生长因子对发酵的调控起到重 要的作用 。
子情境：培养基及其制备技术
微生物细胞的化学组成及胞外代谢产物
微生物营养物质的确定主要依据微生物细胞及其代谢 产物的化学组成。
一、微生物细胞的化学组成
细胞化学成分
水（70%-90%） 干物质 有机物(蛋白质、多糖、脂、核酸——占干重96%
维生素、有机酸及它们的降解物） 无机物（盐）
细胞含水量=（湿重-干重）/湿重×100%
对于常规发酵，可靠、持久，能提供大量成分一致清洁的 水。
第三节 培养基类型
一、根据物理状态划分 1、固体培养基(solid medium)
天然固体基质制成的固体培养基，如马铃薯块、麸皮 培养基；二是在液体培养基中添加凝固剂而制成的固体培 养基。三是在营养基质上覆盖滤膜制成的滤膜培养基。
用于微生物分离、鉴定、计数、测定、保藏等，生产 上固体种子培养，某些产品的发酵培养基。
动的进行。如生物素、硫胺素、肌醇等，但需要量是极少 的。 水：营养物质必须溶解于水中，才能透过细胞膜被微生物 利用。 诱导剂、前体和促进剂：胞外酶合成需要诱导物、有些需 要促进剂，抗生素需要前体。
一、碳源
1、作用
提供微生物菌种的生长繁殖所需的能源和合成菌体所必需 的碳成分 提供合成目的产物所必须的碳成分 2、来源
工业发酵培养基
碳源：供给菌体生命活动所需的能量和构成菌体细胞以及 代谢产物的基础。
氮源：主要构成菌体细胞物质和代谢产物，即蛋白质、氨 基酸等之类的含氮代谢物。功能：构成菌体成分；作为酶 的组成分或维持酶的活性；调节渗透压、pH值、氧化还原 电位等。
无机盐：铅、镁、硫、磷、钾、钠、氯、锌、钴、锰。 特殊生长因子：其功能是构成辅酶的组成分，促进生命活
伊红-美兰培养基（EMB）
2、选择培养基(selective medium)
根据某类微生物的特殊营养要求或对某种物理化学因 子的抗性而设计出来的一类培养基。即根据被分离微生物 的特性，采用“投其所好、取其所抗”的原则设计的培养 基。
② 淀粉、糊精
使用条件：微生物必须能分泌水解淀粉、糊精的酶类
缺点：难利用、发酵液比较稠、一般>2.0%时加入一定的 α -淀粉酶成分比较复杂，有直链淀粉和支链淀粉等等。 优点：来源广泛、价格低
难利用，可以解除葡萄糖效应 葡萄糖或某些容易利用的碳源，其分解代谢产物阻遏某 些诱导酶体系编码的基因转录的现象。
二、按培养基营养物质的来源划分
1、天然培养基(complex medium) 定义：指利用动植物、微生物或其它天然来源的难以确切
知道其化学成分的原料所配成的培养基。 特点：培养基化学成分复杂，营养丰富，原料来源充足，
价格低廉。 用途：适宜于实验室和大生产之用。 举例：培养酵母和霉菌的麦芽汁培养基属于此类。
二、微生物胞外代谢产物
1、代谢副产物 伴随正常代谢作用所产生的一些小分子化合物，包括气体
（CO2、H2、CH4）和乙醇、丙酮、丁醇、丙酸、乳酸等低分 子质量的醇类、酮类和脂肪酸类。 2、中间代谢产物 在代谢途径中产生的一些小分子物质，如氨基酸、核苷酸、 有机酸和单糖的衍生物，主要用于合成蛋白质，核酸、类 脂和多糖等细胞物质。一般不分泌到微生物细胞外，只有 在微生物细胞生物合成受阻或外源碳源浓度较高的情况下， 才会大量积累和分泌于细胞外。
研究。 举例：培养放线菌的高氏一号培养基，培养真菌的查氏培
养基。
3、半合成培养基(semi-synthetic medium)
定义：主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些天然 成分的培养基，也称半组合培养基。即在合成培养基中加 入某种天然成分而制成的培养基。
特点：培养基中部分成分清楚，部分成分不清楚。 用途：适合于大多数微生物的培养。大多数培养基都属此
苯乙酸:分子量136
作用：前体有助于提高产量和组分
用量：前体的用量可以按分子量衡算，具体使用有个转化 率的问题
例：6000单位/ml的青霉素G，需要多少苯乙酸 青霉素＝6000*0.6（微克）＝36mg/ml 苯乙酸＝（36*136）/356=13.8mg/ml=1.38%
实际使用时的转化率在46-90%之间
有机氮源是这些生长因子的重要来源，多数有机氮源 含有较多的B簇维生素和微量元素及一些微生物生长不可缺 少的生长因子
2、前体
前体指某些化合物加入到发酵培养基中，能直接被微生 物在生物合成过程中合成到产物物分子中去，而其自身的结 构并没有多大变化，但是产物的产量却因加入前体而有较大 的提高。
青霉素：分子量356
培养基是提供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物所 需要的、按一定比例配制的的多种营养物质的混合物。
培养基是人工配制的供微生物生长、繁殖、代谢，产生人 们所需产物的营养物质和原料。同时，培养基还应提供微 生物生长所必需的环境条件，如一定的pH。培养基的组成 和配比是否恰当对微生物的生长、产物的形成、提取工艺 的选择、产品的质量和产量都有很大的影响。
二、微生物胞外代谢产物
次级代谢产物由微生物细胞合成，既不参与细胞的 组成，又不是酶的活性基团，也不是细胞的贮存物质。 次级代谢产物种类很多，通常有抗生素、激素、毒素、 色素等。分泌于微生物细胞外。
4、胞外水解酶类 淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、果胶酶、纤维素酶、葡萄糖糖 化酶、葡萄糖异构酶等。
第二节 培养基组成
糖类、油脂、有机酸、正烷烃
3、工业上常用的糖类
① 葡萄糖
所有的微生物都能利用葡萄糖 但是会引起葡萄糖效应 工业上常用淀粉水解糖,但是糖液必须达到一定的质
量指标
② 糖蜜
糖蜜是制糖生产时的结晶母液，它是制糖工业的副产物。
糖蜜主要含有蔗糖，总糖可达50%～75%。一般糖蜜分甘 蔗糖蜜和甜菜糖蜜葡萄糖蜜。
所以选择合适的无机氮源有两层意义：
满足菌体生长
稳定和调节发酵过程中的pH
2、有机氮源
来源：工业上常用的有机氮源都是一些廉价的原料，花生饼 粉、黄豆饼粉、棉子饼粉、玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、 酵母粉、鱼粉、蚕蛹粉、尿素、废菌丝体和酒糟。
成分复杂：除提供氮源外，有些有机氮源还提供大量的无机 盐及生长因子。
实验室常用的天然营养物质
营养物质 牛肉浸膏 蛋白胨
酵母浸膏
来源 瘦牛肉组织浸出汁浓缩而 成的膏状物质 将肉、酪素或明胶用酸或 蛋白酶水解后干燥而成的 粉末状物质 酵母细胞的水溶性提取物 浓缩而成的膏状物质
主要成份 富含水溶性碳水化合物、有机 氮化合物、维生素、盐等 富含有机氮化合物、也含有一 些维生素和碳水化合物
CO2 乙醛
Pi
乙醛亚硫 酸氢钠加 成物
磷酸二羟丙酮
α -磷酸甘油
甘油
NADH+H+ NAD+
H2O
五、水
对于发酵工厂来说，恒定的水源是至关重要的，因为在 不同水源中存在的各种因素对微生物发酵代谢影响甚大。
水源质量的主要考虑参数包括pH值、溶解氧、可溶 性固体、污染程度以及矿物质组成和含量。
对于酿造行业，水的重要性不言而喻
例 玉米浆： ①可溶性蛋白、生长因子（生物素）、苯乙酸 ②较多的乳酸 ③硫、磷、微量元素等
有机氮源成分复杂可以从多个方面对发酵过 程进行影响，而另一方面有机氮源的来源具有不 稳定性。所以在有机氮源选取时和使用过程中， 必须考虑原料的波动对发酵的影响。
三、无机盐的微量元素
1、作用：各种不一样 2、来源：C、N源，以盐的形式补充 3、用量：根据具体的产品，以实验决定 4、使用注意点
一、微生物细胞的化学组成
细胞化学元素
主要元素：碳、氢、氧、氮、磷、硫（占细胞干重
97%）、钾、
镁、钙、铁；
微量元素：锌、锰、钠、氯、钼、硒、钴、铜、钨、 镍、硼等
细胞的化学成分的作用为：遗传连续性、通透性和生 化活性。
注：微生物细胞的化学组成不是绝对不变的，往往与 菌龄、培养条件、环境及生理特性相关。
二、氮源
氮源主要用于构成菌体细胞物质（氨基酸，蛋白质、 核酸等）和含氮代谢物。常用的氮源可分为两大类：有机 氮源和无机氮源。
1、无机氮源
种类：氨盐、硝酸盐和氨水 特点：微生物对它们的吸收快，所以也称之为迅速利 用的氮源。但无机氮源的迅速利用常会引起pH的变化 如：
(NH4)2SO4 → 2NH3 + 2H2SO4
二、微生物胞外代谢产物
3、次级代谢产物
初级代谢：是指微生物从外界吸收各种营养物质，通过 分解代谢和合成代谢，生成维持生命活动所需要的物质 和能量的过程。这一过程的产物，如糖、氨基酸、脂肪 酸、核苷酸以及由这些化合物聚合而成的高分子化合物， 如多糖、蛋白质、脂类和核酸等。
次级代谢：次级代谢是指微生物生长到一定时期，以初 级代谢产物为前体物质，合成一些对微生物的生命活动 无明显功能的物质的过程，这一过程的产物即次级代谢 产物。次级代谢产物大多是一类分子结构比价复杂的含 有苯环的化合物，如抗生素、激素、毒素、色素等。
类。
举例：营养琼脂（NA）中除含有天然的牛肉膏和蛋白胨外， 还有成分明确的氯化钠。
三、按培养基的用途划分
1、鉴别培养基(differential medium) 一类含有某种代谢产物指示剂的培养基。微生物
在这类培养基上生长后，分泌的代谢产物与指示剂起反 应产生某种明显的特征性变化，根据这种变化将该种微 生物与其它微生物区分开来。 伊红-美兰培养基（EMB）：可用于鉴别大肠杆菌、沙门 氏菌、志贺氏菌等肠道微生物。大肠杆菌能强烈分解乳 糖而产生大量的混合酸，使菌体表面带H+，染上酸性染下呈绿色金属光泽。