实验室常用培养基的配制方法

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实验室常用培养基的配制方法在实验室中,培养基是微生物生长和繁殖的重要物质基础,正确配
制培养基对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。

不同的微生物对
营养物质的需求有所不同,因此需要根据实验目的和微生物的特性选
择合适的培养基,并掌握正确的配制方法。

接下来,我将为大家详细
介绍几种实验室常用培养基的配制方法。

一、LB 培养基(LuriaBertani 培养基)
LB 培养基是一种常用于培养细菌的通用培养基,其成分包括胰蛋
白胨、酵母提取物和氯化钠。

配制 1L 的 LB 培养基,所需材料如下:
胰蛋白胨 10g
酵母提取物 5g
氯化钠 10g
配制步骤:
1、称取上述成分,将其放入一个干净的 1L 烧杯中。

2、加入约800ml 的去离子水,用玻璃棒搅拌,直至溶质完全溶解。

3、用去离子水将溶液定容至 1L。

4、调节 pH 值至 70(通常使用 1mol/L 的 NaOH 或 1mol/L 的 HCl 进行调节)。

5、将培养基分装到锥形瓶中,每瓶的装液量不要超过锥形瓶体积的三分之二。

6、盖上瓶塞,用报纸或牛皮纸包扎瓶口。

7、放入高压灭菌锅中,在 121℃下灭菌 20 分钟。

二、牛肉膏蛋白胨培养基
牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用的细菌培养基,适用于多种细菌的培养。

配制 1L 该培养基,需要准备以下材料:
牛肉膏 3g
蛋白胨 10g
氯化钠 5g
具体配制步骤如下:
1、称取牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,放入干净的烧杯中。

2、加入适量的去离子水,搅拌溶解。

3、定容至 1L,搅拌均匀。

4、用 1mol/L 的 NaOH 或 HCl 调节 pH 至 72 74 之间。

5、分装、包扎、灭菌,方法同上。

三、马铃薯葡萄糖培养基(PDA 培养基)
PDA 培养基常用于培养真菌,尤其是霉菌。

配制 1L 的 PDA 培养基,材料如下:
马铃薯 200g
葡萄糖 20g
琼脂 15 20g
配制流程:
1、将马铃薯去皮,切成小块,称取 200g,放入锅中,加入约1000ml 去离子水,煮沸 20 30 分钟,直到马铃薯块变软。

2、用四层纱布过滤,取滤液。

3、向滤液中加入葡萄糖和琼脂,继续加热搅拌,直至琼脂完全溶解。

4、定容至 1L,调节 pH 至自然 pH(约 56 60)。

5、分装、灭菌。

四、高氏一号培养基
高氏一号培养基常用于培养放线菌。

配制 1L 该培养基,所需材料有:
可溶性淀粉 20g
硝酸钾 1g
磷酸氢二钾 05g
硫酸镁 05g
氯化钠 05g
硫酸亚铁 001g
琼脂 20g
配制步骤:
1、称取上述成分,放入烧杯中。

2、加入适量去离子水,搅拌均匀。

3、加热煮沸,使琼脂完全溶解。

4、定容至 1L,调节 pH 至 72 74。

5、分装、灭菌。

五、注意事项
1、配制培养基所用的水一般为去离子水或蒸馏水,以避免水中的杂质影响培养基的质量。

2、称取药品时要使用精度合适的天平,确保药品的量准确无误。

3、加热溶解琼脂时要不断搅拌,防止琼脂糊底或溢出。

4、调节 pH 值时要小心操作,避免过度调节。

5、灭菌后的培养基要放置在合适的温度下保存,未使用完的培养基应及时密封保存,防止污染。

总之,正确配制实验室常用培养基是微生物实验的基础,需要我们认真对待每一个环节,以确保实验的顺利进行和结果的准确性。

希望以上介绍的几种培养基的配制方法对大家有所帮助。

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