人呼吸道合胞病毒F基因的克隆、真核表达与鉴定

人呼吸道合胞病毒F基因的克隆、真核表达与鉴定
袁媛;何金生;张梅;宋蔚;李栋梁;虞结梅;杨兵
【期刊名称】《免疫学杂志》
【年(卷),期】2006(22)3
【摘要】目的克隆人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial
virus,HRSV)F基因,构建F基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)/F,并进行表达和鉴定。

方法根据编码F蛋白的基因序列设计引物,通过RT-PCR从感染HRSV的HEp-2细胞中扩增获得F蛋白的基因,然后克隆到pGEM-3zf载体中,序列测定正确后,将其亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),行酶切鉴定,脂质体法转染COS-7细胞,应用Western blotting方法分析F基因表达情况。

结果测序证实得到HRSV F基因序列,序列分析显示没有发生无义突变。

转染COS-7细胞后,利用Western blotting方法检测到了F蛋白的特异性条带。

结论成功克隆HRSV F基因,并在真核细胞中获得表达。

【总页数】4页(P330-333)
【关键词】人呼吸道合胞病毒;F基因;真核表达
【作者】袁媛;何金生;张梅;宋蔚;李栋梁;虞结梅;杨兵
【作者单位】安徽医科大学免疫学教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R392.11
【相关文献】
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