棘孢木霉几丁质酶基因及其表达棘孢木霉几丁质酶的方法[发明专利]

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专利名称:棘孢木霉几丁质酶基因及其表达棘孢木霉几丁质酶的方法
专利类型:发明专利
发明人:咸洪泉,汤伟,李雅华,夏伟
申请号:CN201210204728.7
申请日:20120619
公开号:CN103305539A
公开日:
20130918
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明属于基因工程领域,具体地说是一种利用毕赤酵母工程菌株表达棘孢木霉几丁质酶的方法。

发明以棘孢木霉(Trichoderma asperellum)为材料获得了1个几丁质酶基因,命名为tachi1,DNA序列为1679bp,含有3个内含子、1个1275bp的ORF,编码424个氨基酸。

构建重组表达载体pPIC9K/tachi1,利用电击法转化Pichia pastoris GS115,工程菌株GS-tachi1-K接种于含BMMY培养基中,在28℃、200 rpm/min振荡培养7.5 d,几丁质酶活达到17.93 U/mL,蛋白表达量为6.19 g/L。

SDS-PAGE检测该蛋白的分子量为44 kDa,酶反应最适的温度和pH分别为50 ℃和5.5,50 ℃以下保持较高的酶活力,在酸性条件下稳定。

该酶活性高、稳定性好,有比较重要的经济价值和社会价值。

申请人:青岛农业大学
地址:山东省青岛市城阳区青岛农业大学生命科学学院生物楼B座325
国籍:CN
代理机构:北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人:汤东凤
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