脑星形细胞肿瘤中Survivin基因的表达及其病理意义共76页
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特征的关系
不同病理分级的脑星形细胞肿瘤，Survivin基因表达的阳性 率分别为：Ⅱ级66.67%（2/3），Ⅲ级85.71%（6/7），Ⅳ级 56.25%（9/16），各病理级别间Survivin基因的表达无显著差 异（P＞0.05）。
不同年龄的患者，Survivin基因表达的阳性率分别为：＞44岁 66.67% （ 12/18 ） ， ≤ 44 岁 62.5% （ 5/8 ） ， 不 同 年 龄 组 间 Survivin基因的表达无显著差异（P＞0.05）。
脑星形细胞肿瘤是中枢神经系统中最为 常见的一类肿瘤，约占颅内肿瘤的30%， 可发生于各个年龄期，尤以30-40岁为高 峰发病年龄[1]。由于脑星形细胞肿瘤无 论分化高低均呈浸润性生长，因此多数 病人远期疗效较差，即使经过标准治疗 （手术+放疗+全身化疗）后，仍难以达 到根治。一般认为其中位生存期不足1年 [2],是一类严重危害人类健康的疾病。
本实验将应用免疫组化和RT-PCR的方法检 测 70 例 脑 星 形 细 胞 肿 瘤 中 Survivin 的 表 达 ， 同时结合临床随访资料，探讨Survivin表 达与脑星形细胞肿瘤的临床因素、肿瘤病 理分级、MVD以及预后之间的关系。
一、材料与方法
㈠标本
人脑星形细胞肿瘤标本70例，分别由南通医学院病 理教研室、南通医学院附属医院病理科、常州市第 一人民医院病理科提供，为2019-2019年常规外检的 病理蜡块。其中男48例，女22例，年龄20-77岁，平 均年龄49.3岁。根据世界卫生组织的年龄分期标准 以44岁为界，将本文病例分为青年组（≤44岁）和中 老年组（＞44岁）两组。
多组数值变量资料间比较用单因素方差分析；
率的比较用χ2检验 ；
等级资料的比较采用秩和检验,两样本比较采用 Wilcoxon法，多个样本比较采用Kruskal-Wallis法,多个 样本两两比较采用t检验；
对随访资料的分析采用Kaplan-Meier法,两组生存率的比 较 用 Wilcoxon-Gehan 检 验 ， 多 组 生 存 率 的 比 较 用 logrank检验。
③MVD观察与计数：以与周围肿瘤细胞和结缔组织 成分明显区别的任何一个棕黄色的内皮细胞或内皮 细胞簇作为一个血管，只要结构不相连，其分枝结 构也作为一个血管计数（管腔结构及内含红细胞并 非计数所必须）。先在显微镜低倍视野（4×10倍） 下选定高MVD处,再在高MVD5个高倍视野（20×10 倍）下，计数MVD，取其平均值作为该标本的MVD。
下游5’ATGACCTCCAGAGGTTTCCA3’ β-actin目的基因产物为495 bps，
其序列：上游5’AAGTACTCCGTGTGGATCGG3’ 下游5’ATGCTATCACCTCCCCTGTG3’
⑷PCR产物的检测和分析
取PCR产物5ul + 6×lodding 1ul混匀后加样,进行1%琼脂 糖凝胶电泳，同时加4ulDL2000 DNA Marker 作为PCR 产物长度对照。电压100V, 30分后将胶板置于紫外灯下 观察，Survivin和β-actin产物条带分别位于377bps和 495bps处。PCR产物条带的密度测定采用四星凝胶图 像分析系统进行，以Survivin带亮度(Ls)、β-actin带亮 度(Lβ)分别与背景亮度(Lb)的差值之比表示该Survivin 的相对表达量,用公式表示为:
检验水准α＝0.05。
二、结果
㈠RT-PCR检测Survivin基因mRNA的表达
1.总RNA的提取与检测 随机取3例进行变性胶电泳检测RNA的质量，结果 见图1，28S、18S条带清晰可见，5S条带很弱，且 28S 条 带 亮 度 远 远 大 于 18S 条 带 ， 说 明 提 取 的 总 RNA完整，没有降解。三条泳道条带亮度基本一致， 说明RNA上样量基本相同。
Survivin基因相对表达量与脑星形细胞肿瘤病理分级的关系
病理分级
例数
Survivin相对表达量
P值
Ⅱ
2
0.855±0.007
Ⅲ
6
1.02±0.08
P=0.0233
Ⅳ
9
1.171±0.175
在脑星形细胞肿瘤的不同病理级别间Survivin基因相对
表达量存在显著差异（P＜0.05），
两两比较显示，Survivin基因相对表达量在Ⅱ级与Ⅳ级
⑵ cDNA第一链的合成（20ul体系）
按以下次序将各成分加入一0.5mlEP管中
5×RT buffer
4.0ul
dNTP Mix（10mM）
2.0ul
Oligo(dT)18Primer(0.5ug/ ul) 1.0ul
Байду номын сангаас
逆转录酶
1.0ul
酶抑制剂
0.5ul
DEPC水
9.5ul
模板链RNA
2ul
总体积
间（P=0.039）存在显著差异，而在Ⅱ级与Ⅲ级间
（P=0.384）、Ⅲ级与Ⅳ级间（P=0.163）无显著差异。
㈡免疫组化染色结果 1.Survivin蛋白在脑星形细胞肿瘤中的表达 2.脑星形细胞肿瘤Survivin蛋白的表达与
MVD的关系 3.脑星形细胞肿瘤Survivin蛋白的表达与 术后生存时间的关系
Survivin的相对表达量=(Ls-Lb)/(Lβ- Lb)。
2.免疫组化染色SP法
Survivin、CD34均需柠檬酸缓冲液高温修复。
免疫组化结果判断
①肿瘤实质细胞中Survivin阳性反应定位于细胞质呈棕 黄色。参照Kawaski[4]等采用半定量积分法判断结果:
阳性细胞数＜5%为0分，6%-25%为1分，26%-50%为2 分，51%-75%为3分，＞75%为4分；
495bps 377bps
495bps 377bps
图2、3，M：DL2000 DNA Marker ；N：正常 脑组织；1-26为星形细胞肿瘤
由图2、3显示，本组脑星形细胞 肿瘤中Survivin基因的阳性检出率 为65%（17/26），正常脑组织中 未检测到Survivin的表达。
⑵Survivin基因表达与脑星形细胞肿瘤临床病理
20ul
42℃，1小时，70℃，10分钟。
⑶PCR操作步骤（20ul反应体系）
按下列次序将各成分加入一0.5ml的离心管中
10×PCR Buffer
2.0ul
Mg2++
1.5ul
dNTP mix（2mM）
2.0ul
Survivin特异性primer（10pmol/ul） 2.0ul
cDNA模板
2.0ul
图1 .RNA变 性胶电泳
2.RT-PCR检测Survivin基因的表达与肿瘤临床 病理因素的关系
⑴RT-PCR检测Survivin基因的表达 Survivin基因的RT-PCR产物为377个碱基， β-actin的RT-PCR产物为495个碱基。 26例脑星形细胞肿瘤中Survivin基因的表达见图2、3。
阳性强度淡黄色为1分，黄色为2分，棕黄色为3分。
两积分相乘，0分为阴性（-），1-4分为弱阳性（＋）， 5-8 分 为 中 等 阳 性 （ ＋ ＋ ） ， 9-12 分 为 强 阳 性 （ ＋ ＋ ＋）。
②CD34：肿瘤间质血管内皮细胞标记物,阳性部位位 于内皮细胞胞膜和胞浆。以CD34标记MV，MV呈棕 黄色。
双蒸水
8.1ul
TaqDNA聚合酶
0.4ul
94℃，3分钟 94℃，45秒（变性） ↙37次↖
50℃1分钟 72℃1分钟 72℃，5min 4℃保存 （褪火） （延伸） （总延伸） 于第8个循环72℃、35秒时按暂停，加入2ulβ-actin特异性引物。 Survivin目的基因产物为377bps， 其序列：上游5’TATCTGCCAGACGCTTCCTA3’
㈣病例随访情况
对30例有确切地址的2000年底前进行手术的星形细 胞肿瘤患者术后进行随访，随访至2019年12月止， 结 果 随 访 到 26 例 ， 失 访 4 例 ， 随 访 率 为 86.67% （26/30）。随访结果显示星形细胞肿瘤患者术后生 存时间为0-40个月不等。
㈤统计学处理
两样本均数比较用t检验；
对肿瘤发生发展的机制研究中越来越多 的证据显示细胞凋亡异常与细胞恶性增 殖和分化受阻一样，在大多数恶性肿瘤 的发病学上起重要作用，涉及到细胞凋 亡信号途径的所有方面。其中，研究最 深入、广泛的是凋亡抑制基因和凋亡活 化基因的异常。
凋 亡 蛋 白 抑 制 因 子 家 族 （ inhibitor of apoptosis proteins ，IAPs）新成员Survivin 可抑制多种凋亡刺激因子引起的凋亡， 是迄今发现的最强的凋亡抑制因子。 Survivin mRNA在大多数正常组织中无表 达[3] ,广泛表达于人类各种肿瘤组织。其 独特的结构，选择性的细胞内分布的特 点，具有明显细胞周期性，只在G2/M期 表达，自2019年被发现以来，Survivin与 肿瘤的关系已成为研究热点。
标本均经过常规病理组织学检查，双盲法根据 瘤细胞多形性、核分裂、肿瘤中出血坏死、肿瘤血 管形成等按照WHO标准进行分级：Ⅱ级10例，Ⅲ级 26例，Ⅳ级34例。其中26例标本同时有新鲜肿瘤组 织保存于－70℃低温冰箱（Ⅱ级3例，Ⅲ级7例，Ⅳ 级16例）。另取1例源于交通事故脑外伤手术患者的 100mg脑新鲜组织、5例非正常死亡的人脑组织蜡块 分别作为正常对照组，由南通医学院附属医院脑外 科及南通医学院法医教研室提供。
㈡主要试剂
1.免疫组化试剂
兔 抗 人 Survivin 多 克 隆 抗 体 （ RAB-0536 ） 、 鼠 抗 人 CD34单克隆抗体（MAB-0034）、超敏SP（鼠/兔）试 剂盒（KIT-9710）、DAB显色试剂盒（DAB-0031）均 为即用型，购自福建迈新生物技术有限公司。
2.RT-PCR试剂
RT-PCR试剂均购于上海生工生物工程技术服务有限公 司，包括Trizol、 RT试剂盒、PCR试剂盒、Survivin引 物合成、β-actin引物合成。DL2000 DNA Marker购于 TaKaRa公司。
㈢方法
1.RT-PCR检测Survivin基因的表达
⑴组织中总RNA的提取
①取保存于-70℃冰箱中的人脑星形细胞肿瘤组织、正常人脑组 织各约50-100mg（相当于1到2粒米粒大小），置于1.5ml玻璃 匀浆器中，加入1mlTrizol充分匀浆。 ②将匀浆液转至1.5ml灭菌EP管中，室温静置5分钟。 ③加入0.2ml氯仿，震荡15秒，静置2分钟。 ④4℃离心，12000g×15分钟，取上清（100μl枪轻轻吸）。 ⑤加入0.5ml异丙醇，将管中液体轻轻混匀，室温静置10分钟。 ⑥4℃离心，12000g×15分钟，弃上清。
⑦ 加 入 1ml75% 酒 精 ， 轻 轻 洗 涤 沉 淀 ， 4℃ 离 心 ， 7500g×5分钟，弃上清。
⑧晾干，根据提取的RNA量加入适量的DEPC水溶 解（65℃促溶15分钟）。
⑨使用蛋白核酸定量仪定量：实际RNA浓度 （mg/ml）=测得的RNA浓度×50/1000。
⑩RNA变性胶电泳，电泳结束后将胶块置紫外灯下， 观察条带，判断组织中的RNA是否降解。
不同性别的患者，Survivin基因表达的阳性率分别为：男性 70%（14/20），女性50%（3/6），不同性别间Survivin基因 表达无显著差异（P＞0.05）。
3.Survivin 基 因 相 对 表 达 量 与 脑 星 形 细 胞 肿 瘤临床病理因素的关系
根据公式Survivin基因的相对表达量=(Ls-Lb)/(Lβ- Lb) 分别计算出各例的Survivin基因相对表达量，进一步 分析，本组有17例脑星形细胞肿瘤表达Survivin基因， Survivin基因相对表达均量为1.08±0.17。
肿瘤的生长、局部浸润及转移依赖血管形成， 因此，肿瘤组织内的微血管形态、分布、数量 等对肿瘤的生长、治疗和预后至关重要。星形 细胞肿瘤分化程度较低时，肿瘤常有出血、坏 死。因而对星形细胞肿瘤中血管生成的研究更 为重要。CD34作为一种公认的血管内皮标记物， 可用于各种肿瘤间质中血管生成的研究，因此 可通过CD34的单克隆抗体标记星形细胞肿瘤中 的微血管（MV），在镜下（10×20倍）计算 MVD,以探究星形细胞肿瘤中血管形成的规律。
不同病理分级的脑星形细胞肿瘤，Survivin基因表达的阳性 率分别为：Ⅱ级66.67%（2/3），Ⅲ级85.71%（6/7），Ⅳ级 56.25%（9/16），各病理级别间Survivin基因的表达无显著差 异（P＞0.05）。
不同年龄的患者，Survivin基因表达的阳性率分别为：＞44岁 66.67% （ 12/18 ） ， ≤ 44 岁 62.5% （ 5/8 ） ， 不 同 年 龄 组 间 Survivin基因的表达无显著差异（P＞0.05）。
脑星形细胞肿瘤是中枢神经系统中最为 常见的一类肿瘤，约占颅内肿瘤的30%， 可发生于各个年龄期，尤以30-40岁为高 峰发病年龄[1]。由于脑星形细胞肿瘤无 论分化高低均呈浸润性生长，因此多数 病人远期疗效较差，即使经过标准治疗 （手术+放疗+全身化疗）后，仍难以达 到根治。一般认为其中位生存期不足1年 [2],是一类严重危害人类健康的疾病。
本实验将应用免疫组化和RT-PCR的方法检 测 70 例 脑 星 形 细 胞 肿 瘤 中 Survivin 的 表 达 ， 同时结合临床随访资料，探讨Survivin表 达与脑星形细胞肿瘤的临床因素、肿瘤病 理分级、MVD以及预后之间的关系。
一、材料与方法
㈠标本
人脑星形细胞肿瘤标本70例，分别由南通医学院病 理教研室、南通医学院附属医院病理科、常州市第 一人民医院病理科提供，为2019-2019年常规外检的 病理蜡块。其中男48例，女22例，年龄20-77岁，平 均年龄49.3岁。根据世界卫生组织的年龄分期标准 以44岁为界，将本文病例分为青年组（≤44岁）和中 老年组（＞44岁）两组。
多组数值变量资料间比较用单因素方差分析；
率的比较用χ2检验 ；
等级资料的比较采用秩和检验,两样本比较采用 Wilcoxon法，多个样本比较采用Kruskal-Wallis法,多个 样本两两比较采用t检验；
对随访资料的分析采用Kaplan-Meier法,两组生存率的比 较 用 Wilcoxon-Gehan 检 验 ， 多 组 生 存 率 的 比 较 用 logrank检验。
③MVD观察与计数：以与周围肿瘤细胞和结缔组织 成分明显区别的任何一个棕黄色的内皮细胞或内皮 细胞簇作为一个血管，只要结构不相连，其分枝结 构也作为一个血管计数（管腔结构及内含红细胞并 非计数所必须）。先在显微镜低倍视野（4×10倍） 下选定高MVD处,再在高MVD5个高倍视野（20×10 倍）下，计数MVD，取其平均值作为该标本的MVD。
下游5’ATGACCTCCAGAGGTTTCCA3’ β-actin目的基因产物为495 bps，
其序列：上游5’AAGTACTCCGTGTGGATCGG3’ 下游5’ATGCTATCACCTCCCCTGTG3’
⑷PCR产物的检测和分析
取PCR产物5ul + 6×lodding 1ul混匀后加样,进行1%琼脂 糖凝胶电泳，同时加4ulDL2000 DNA Marker 作为PCR 产物长度对照。电压100V, 30分后将胶板置于紫外灯下 观察，Survivin和β-actin产物条带分别位于377bps和 495bps处。PCR产物条带的密度测定采用四星凝胶图 像分析系统进行，以Survivin带亮度(Ls)、β-actin带亮 度(Lβ)分别与背景亮度(Lb)的差值之比表示该Survivin 的相对表达量,用公式表示为:
检验水准α＝0.05。
二、结果
㈠RT-PCR检测Survivin基因mRNA的表达
1.总RNA的提取与检测 随机取3例进行变性胶电泳检测RNA的质量，结果 见图1，28S、18S条带清晰可见，5S条带很弱，且 28S 条 带 亮 度 远 远 大 于 18S 条 带 ， 说 明 提 取 的 总 RNA完整，没有降解。三条泳道条带亮度基本一致， 说明RNA上样量基本相同。
Survivin基因相对表达量与脑星形细胞肿瘤病理分级的关系
病理分级
例数
Survivin相对表达量
P值
Ⅱ
2
0.855±0.007
Ⅲ
6
1.02±0.08
P=0.0233
Ⅳ
9
1.171±0.175
在脑星形细胞肿瘤的不同病理级别间Survivin基因相对
表达量存在显著差异（P＜0.05），
两两比较显示，Survivin基因相对表达量在Ⅱ级与Ⅳ级
⑵ cDNA第一链的合成（20ul体系）
按以下次序将各成分加入一0.5mlEP管中
5×RT buffer
4.0ul
dNTP Mix（10mM）
2.0ul
Oligo(dT)18Primer(0.5ug/ ul) 1.0ul
Байду номын сангаас
逆转录酶
1.0ul
酶抑制剂
0.5ul
DEPC水
9.5ul
模板链RNA
2ul
总体积
间（P=0.039）存在显著差异，而在Ⅱ级与Ⅲ级间
（P=0.384）、Ⅲ级与Ⅳ级间（P=0.163）无显著差异。
㈡免疫组化染色结果 1.Survivin蛋白在脑星形细胞肿瘤中的表达 2.脑星形细胞肿瘤Survivin蛋白的表达与
MVD的关系 3.脑星形细胞肿瘤Survivin蛋白的表达与 术后生存时间的关系
Survivin的相对表达量=(Ls-Lb)/(Lβ- Lb)。
2.免疫组化染色SP法
Survivin、CD34均需柠檬酸缓冲液高温修复。
免疫组化结果判断
①肿瘤实质细胞中Survivin阳性反应定位于细胞质呈棕 黄色。参照Kawaski[4]等采用半定量积分法判断结果:
阳性细胞数＜5%为0分，6%-25%为1分，26%-50%为2 分，51%-75%为3分，＞75%为4分；
495bps 377bps
495bps 377bps
图2、3，M：DL2000 DNA Marker ；N：正常 脑组织；1-26为星形细胞肿瘤
由图2、3显示，本组脑星形细胞 肿瘤中Survivin基因的阳性检出率 为65%（17/26），正常脑组织中 未检测到Survivin的表达。
⑵Survivin基因表达与脑星形细胞肿瘤临床病理
20ul
42℃，1小时，70℃，10分钟。
⑶PCR操作步骤（20ul反应体系）
按下列次序将各成分加入一0.5ml的离心管中
10×PCR Buffer
2.0ul
Mg2++
1.5ul
dNTP mix（2mM）
2.0ul
Survivin特异性primer（10pmol/ul） 2.0ul
cDNA模板
2.0ul
图1 .RNA变 性胶电泳
2.RT-PCR检测Survivin基因的表达与肿瘤临床 病理因素的关系
⑴RT-PCR检测Survivin基因的表达 Survivin基因的RT-PCR产物为377个碱基， β-actin的RT-PCR产物为495个碱基。 26例脑星形细胞肿瘤中Survivin基因的表达见图2、3。
阳性强度淡黄色为1分，黄色为2分，棕黄色为3分。
两积分相乘，0分为阴性（-），1-4分为弱阳性（＋）， 5-8 分 为 中 等 阳 性 （ ＋ ＋ ） ， 9-12 分 为 强 阳 性 （ ＋ ＋ ＋）。
②CD34：肿瘤间质血管内皮细胞标记物,阳性部位位 于内皮细胞胞膜和胞浆。以CD34标记MV，MV呈棕 黄色。
双蒸水
8.1ul
TaqDNA聚合酶
0.4ul
94℃，3分钟 94℃，45秒（变性） ↙37次↖
50℃1分钟 72℃1分钟 72℃，5min 4℃保存 （褪火） （延伸） （总延伸） 于第8个循环72℃、35秒时按暂停，加入2ulβ-actin特异性引物。 Survivin目的基因产物为377bps， 其序列：上游5’TATCTGCCAGACGCTTCCTA3’
㈣病例随访情况
对30例有确切地址的2000年底前进行手术的星形细 胞肿瘤患者术后进行随访，随访至2019年12月止， 结 果 随 访 到 26 例 ， 失 访 4 例 ， 随 访 率 为 86.67% （26/30）。随访结果显示星形细胞肿瘤患者术后生 存时间为0-40个月不等。
㈤统计学处理
两样本均数比较用t检验；
对肿瘤发生发展的机制研究中越来越多 的证据显示细胞凋亡异常与细胞恶性增 殖和分化受阻一样，在大多数恶性肿瘤 的发病学上起重要作用，涉及到细胞凋 亡信号途径的所有方面。其中，研究最 深入、广泛的是凋亡抑制基因和凋亡活 化基因的异常。
凋 亡 蛋 白 抑 制 因 子 家 族 （ inhibitor of apoptosis proteins ，IAPs）新成员Survivin 可抑制多种凋亡刺激因子引起的凋亡， 是迄今发现的最强的凋亡抑制因子。 Survivin mRNA在大多数正常组织中无表 达[3] ,广泛表达于人类各种肿瘤组织。其 独特的结构，选择性的细胞内分布的特 点，具有明显细胞周期性，只在G2/M期 表达，自2019年被发现以来，Survivin与 肿瘤的关系已成为研究热点。
标本均经过常规病理组织学检查，双盲法根据 瘤细胞多形性、核分裂、肿瘤中出血坏死、肿瘤血 管形成等按照WHO标准进行分级：Ⅱ级10例，Ⅲ级 26例，Ⅳ级34例。其中26例标本同时有新鲜肿瘤组 织保存于－70℃低温冰箱（Ⅱ级3例，Ⅲ级7例，Ⅳ 级16例）。另取1例源于交通事故脑外伤手术患者的 100mg脑新鲜组织、5例非正常死亡的人脑组织蜡块 分别作为正常对照组，由南通医学院附属医院脑外 科及南通医学院法医教研室提供。
㈡主要试剂
1.免疫组化试剂
兔 抗 人 Survivin 多 克 隆 抗 体 （ RAB-0536 ） 、 鼠 抗 人 CD34单克隆抗体（MAB-0034）、超敏SP（鼠/兔）试 剂盒（KIT-9710）、DAB显色试剂盒（DAB-0031）均 为即用型，购自福建迈新生物技术有限公司。
2.RT-PCR试剂
RT-PCR试剂均购于上海生工生物工程技术服务有限公 司，包括Trizol、 RT试剂盒、PCR试剂盒、Survivin引 物合成、β-actin引物合成。DL2000 DNA Marker购于 TaKaRa公司。
㈢方法
1.RT-PCR检测Survivin基因的表达
⑴组织中总RNA的提取
①取保存于-70℃冰箱中的人脑星形细胞肿瘤组织、正常人脑组 织各约50-100mg（相当于1到2粒米粒大小），置于1.5ml玻璃 匀浆器中，加入1mlTrizol充分匀浆。 ②将匀浆液转至1.5ml灭菌EP管中，室温静置5分钟。 ③加入0.2ml氯仿，震荡15秒，静置2分钟。 ④4℃离心，12000g×15分钟，取上清（100μl枪轻轻吸）。 ⑤加入0.5ml异丙醇，将管中液体轻轻混匀，室温静置10分钟。 ⑥4℃离心，12000g×15分钟，弃上清。
⑦ 加 入 1ml75% 酒 精 ， 轻 轻 洗 涤 沉 淀 ， 4℃ 离 心 ， 7500g×5分钟，弃上清。
⑧晾干，根据提取的RNA量加入适量的DEPC水溶 解（65℃促溶15分钟）。
⑨使用蛋白核酸定量仪定量：实际RNA浓度 （mg/ml）=测得的RNA浓度×50/1000。
⑩RNA变性胶电泳，电泳结束后将胶块置紫外灯下， 观察条带，判断组织中的RNA是否降解。
不同性别的患者，Survivin基因表达的阳性率分别为：男性 70%（14/20），女性50%（3/6），不同性别间Survivin基因 表达无显著差异（P＞0.05）。
3.Survivin 基 因 相 对 表 达 量 与 脑 星 形 细 胞 肿 瘤临床病理因素的关系
根据公式Survivin基因的相对表达量=(Ls-Lb)/(Lβ- Lb) 分别计算出各例的Survivin基因相对表达量，进一步 分析，本组有17例脑星形细胞肿瘤表达Survivin基因， Survivin基因相对表达均量为1.08±0.17。
肿瘤的生长、局部浸润及转移依赖血管形成， 因此，肿瘤组织内的微血管形态、分布、数量 等对肿瘤的生长、治疗和预后至关重要。星形 细胞肿瘤分化程度较低时，肿瘤常有出血、坏 死。因而对星形细胞肿瘤中血管生成的研究更 为重要。CD34作为一种公认的血管内皮标记物， 可用于各种肿瘤间质中血管生成的研究，因此 可通过CD34的单克隆抗体标记星形细胞肿瘤中 的微血管（MV），在镜下（10×20倍）计算 MVD,以探究星形细胞肿瘤中血管形成的规律。