紫外-可见分光光度法
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1.色散元件 2.准直镜 3.狭缝
第三节 紫外可见分光光度计
一、主要部件
(一)光源 (二)单色器
(三)吸收池 (四)检测器
1.光电池 2.光电管 3.光电倍增管 4.光二极管检测器
第三节 紫外可见分光光度计
一、主要部件
(一)光源 (二)单色器 (三)吸收池 (四)检测器 (五)讯号处理与显示器
第三节 紫外可见分光光度计
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第一节 基本概念
第一节 基本概念
一、紫外光谱的产生及表示方法
• 通常以波长（ ，nm）为横坐标；以吸 光度（A）或透光率（T）为纵坐标
• 描述术语 吸收峰、谷、肩峰、末端吸收
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1.化学因素 2.光学因素 3.透光率测量误差
噪音(noise)
暗噪音(dark noise) 讯号噪音(signal shot noise)
第二节 基本原理
二、偏离Beer定律因素
3.透光率测量误差
c A 1 lg 1 1 lgT E•l E•l T E•l
dc 1 • 1 lg e • dT 0.434dT
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第二节 基本原理
一、Beer-lambert定律
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第二节 基本原理
一、Beer-lambert定律
∵ S V / L n V •C ∴ n L•C
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第一节 基本概念
三、紫外光谱的常用术语
• R带: n * 跃迁，弱 • K带: * 跃迁，强 • B带: 苯（芳香环）特征吸收，弱、特征 • E带：苯（芳香环）特征吸收，强、特征 • 电荷转移吸收带 • 配位体场吸收带
第一节 基本概念
四、影响吸收带的因素
• 电子效应
共轭效应：共轭体系越大， max、都大
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(一)杂质检查 (二)杂质的限量检测
第五节 定量分析方法
第五节 定量分析方法
一、单组分样品的定量方法
(一)吸收系数法 (二)标准曲线法 (三)对照法
第五节 定量分析方法
二、多组分样品的定量方法
（1）
（2）
（3）
第五节 定量分析方法
二、多组分样品的定量方法
第（1）种情况，可按单组分的测定方法 分别在λ1处测定a组分，在λ2处测定b组分。
：c为1 mol/L ,l为1cm时的吸光度值
E1% 1cm
：c为1%(w/v)
,l为1cm时的吸光度值
与
E1% 1cm
关系如下：
M 10
E1% 1cm
第二节 基本原理
二、偏离Beer定律因素
1.化学因素
被测物质可因浓度改变而发生离解、 缔合或与溶剂间的作用等原因而发生偏离 Beer定律的现象。
第二节 基本原理
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• 空间效应
位阻效应：如二苯乙烯，顺式max、都小
跨环效应： CH2=
O max=214nm
• 溶剂效应
第二节 基本原理
第二节 基本原理
一、Beer-lambert定律 A= -lgT = E L C
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I
L
第二节 基本原理
一、Beer-lambert定律
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第六节 有机化合物分子结构研究
第六节 有机化合物分子结构研究
一、有机化合物的紫外光谱 二、有机化合物结构研究
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E•l T
E•l •T
第二节 基本原理
二、偏离Beer定律因素
3.透光率测量误差
dc 0.434 dT , C 0.434 T c T lg T C T • lg T
对于暗噪音，T为常数，求出相对误差 的极小值：T=0.368，即A=0.4343
第三节 紫外可见分光光度计
第三节 紫外可见分光光度计
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第一节 基本概念
一、紫外光谱的产生及表示方法 二、跃迁类型
1.* 跃迁 2.* 跃迁 3.n* 跃迁 4.n* 跃迁 5.电荷迁移跃迁 6 配位场跃迁
第一节 基本概念
三、紫外光谱的常用术语
• 发色团 (chromophore) • 助色团 (auxochrome) • 红移 (red shift) • 蓝移 (blue shift) • 增色效应 (hyperchromic effect) • 减色效应 (hypochromic effect)
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第四节 定性分析与纯度检测
第四节 定性分析与纯度检测
一、定性鉴别
(一)对比吸收光谱特征数据
➢ max ➢ sh ➢E
第四节 定性分析与纯度检测
一、定性鉴别
(一)对比吸收光谱特征数据 (二)对比吸光(或吸光系数)的比值 (三)对比吸收光谱的一致性
第四节 定性分析与纯度检测
一、定性鉴别 二、纯度检测
二、光学性能
(一)波长 范围；准确性；重复性
(二)吸光度（透过率） 范围；准确性；重复性
(三)分辨率 (四)杂散光 (五)数据工作站
第三节 紫外可见分光光度计
三、光路类型
(一)单光束分光光度计 (二)双光束分光光度计 (三)光多道二极管阵列检测的分光光度计
四、分光光度计的校正
(一)波长校正 (二)吸光度的校正
二、偏离Beer定律因素
1.化学因素 2.光学因素
（1）非单色光 (non-monochromatic light) （2）杂散光 (stray light) （3）散射光和反射光
(scattering and reflected light)
（4）非平行光
第二节 基本原理
二、偏离Beer定律因素
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第二节 基本原理
一、Beer-lambert定律
定义：透光率 T = I / Ix 吸光度 A =-lgT = E·L·C
透光率 (transmittance) 吸光度 (absorbance) 吸光系数(absorptivity) E
第二节 基本原理
一、Beer-lambert定律
吸光系数 E有两种表示方法：
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一、主要部件
(一)光源 • 钨灯和卤钨灯: >350nm • 氢灯或氘灯: 150nm ~ 400nm
(二)单色器 狭缝、准直镜、色散元件、聚焦透镜
第三节 紫外可见分光光度计
一、主要部件
(一)光源 (二)单色器
1.色散元件 • 棱镜 • 光栅
第三节 紫外可见分光光度计
一、主要部件
(一)光源 (二)单色器
第（2）种情况，可先在在λ1处测定a组分， 在λ2处测定混合溶液的吸光度A2a+b，根据吸 光度的加和性计算出b组分的浓度。
第（3）种情况比较复杂，需要运用计算 分光光度法来解决。下面简介几种常见的方 法。
第五节 定量分析方法
一、单组分样品的定量方法
(一)双波长法 (二)系数倍率法 (三)三波长法 (四)导数光谱法 (五)最小二乘法 (六)卡尔曼滤波法
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第三节 紫外可见分光光度计
一、主要部件
(一)光源 (二)单色器
(三)吸收池 (四)检测器
1.光电池 2.光电管 3.光电倍增管 4.光二极管检测器
第三节 紫外可见分光光度计
一、主要部件
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第一节 基本概念
一、紫外光谱的产生及表示方法
• 通常以波长（ ，nm）为横坐标；以吸 光度（A）或透光率（T）为纵坐标
• 描述术语 吸收峰、谷、肩峰、末端吸收
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1.化学因素 2.光学因素 3.透光率测量误差
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二、偏离Beer定律因素
3.透光率测量误差
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第二节 基本原理
一、Beer-lambert定律
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一、Beer-lambert定律
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第一节 基本概念
三、紫外光谱的常用术语
• R带: n * 跃迁，弱 • K带: * 跃迁，强 • B带: 苯（芳香环）特征吸收，弱、特征 • E带：苯（芳香环）特征吸收，强、特征 • 电荷转移吸收带 • 配位体场吸收带
第一节 基本概念
四、影响吸收带的因素
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第五节 定量分析方法
第五节 定量分析方法
一、单组分样品的定量方法
(一)吸收系数法 (二)标准曲线法 (三)对照法
第五节 定量分析方法
二、多组分样品的定量方法
（1）
（2）
（3）
第五节 定量分析方法
二、多组分样品的定量方法
第（1）种情况，可按单组分的测定方法 分别在λ1处测定a组分，在λ2处测定b组分。
：c为1 mol/L ,l为1cm时的吸光度值
E1% 1cm
：c为1%(w/v)
,l为1cm时的吸光度值
与
E1% 1cm
关系如下：
M 10
E1% 1cm
第二节 基本原理
二、偏离Beer定律因素
1.化学因素
被测物质可因浓度改变而发生离解、 缔合或与溶剂间的作用等原因而发生偏离 Beer定律的现象。
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跨环效应： CH2=
O max=214nm
• 溶剂效应
第二节 基本原理
第二节 基本原理
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第六节 有机化合物分子结构研究
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一、有机化合物的紫外光谱 二、有机化合物结构研究
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二、偏离Beer定律因素
3.透光率测量误差
dc 0.434 dT , C 0.434 T c T lg T C T • lg T
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一、紫外光谱的产生及表示方法 二、跃迁类型
1.* 跃迁 2.* 跃迁 3.n* 跃迁 4.n* 跃迁 5.电荷迁移跃迁 6 配位场跃迁
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三、紫外光谱的常用术语
• 发色团 (chromophore) • 助色团 (auxochrome) • 红移 (red shift) • 蓝移 (blue shift) • 增色效应 (hyperchromic effect) • 减色效应 (hypochromic effect)
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第四节 定性分析与纯度检测
第四节 定性分析与纯度检测
一、定性鉴别
(一)对比吸收光谱特征数据
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第四节 定性分析与纯度检测
一、定性鉴别
(一)对比吸收光谱特征数据 (二)对比吸光(或吸光系数)的比值 (三)对比吸收光谱的一致性
第四节 定性分析与纯度检测
一、定性鉴别 二、纯度检测
二、光学性能
(一)波长 范围；准确性；重复性
(二)吸光度（透过率） 范围；准确性；重复性
(三)分辨率 (四)杂散光 (五)数据工作站
第三节 紫外可见分光光度计
三、光路类型
(一)单光束分光光度计 (二)双光束分光光度计 (三)光多道二极管阵列检测的分光光度计
四、分光光度计的校正
(一)波长校正 (二)吸光度的校正
二、偏离Beer定律因素
1.化学因素 2.光学因素
（1）非单色光 (non-monochromatic light) （2）杂散光 (stray light) （3）散射光和反射光
(scattering and reflected light)
（4）非平行光
第二节 基本原理
二、偏离Beer定律因素
I0
第二节 基本原理
一、Beer-lambert定律
定义：透光率 T = I / Ix 吸光度 A =-lgT = E·L·C
透光率 (transmittance) 吸光度 (absorbance) 吸光系数(absorptivity) E
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一、主要部件
(一)光源 • 钨灯和卤钨灯: >350nm • 氢灯或氘灯: 150nm ~ 400nm
(二)单色器 狭缝、准直镜、色散元件、聚焦透镜
第三节 紫外可见分光光度计
一、主要部件
(一)光源 (二)单色器
1.色散元件 • 棱镜 • 光栅
第三节 紫外可见分光光度计
一、主要部件
(一)光源 (二)单色器
第（2）种情况，可先在在λ1处测定a组分， 在λ2处测定混合溶液的吸光度A2a+b，根据吸 光度的加和性计算出b组分的浓度。
第（3）种情况比较复杂，需要运用计算 分光光度法来解决。下面简介几种常见的方 法。
第五节 定量分析方法
一、单组分样品的定量方法
(一)双波长法 (二)系数倍率法 (三)三波长法 (四)导数光谱法 (五)最小二乘法 (六)卡尔曼滤波法
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