绒毛膜癌实验报告

一、实验目的
本研究旨在通过体外培养绒毛膜癌细胞，观察其生物学特性，为绒毛膜癌的病理生理学研究提供实验基础。

二、实验材料
1. 绒毛膜癌组织样本：由某医院妇产科提供。

2. 细胞培养试剂：DMEM培养基、胎牛血清、青霉素、链霉素、胰蛋白酶等。

3. 实验仪器：CO2培养箱、倒置显微镜、超净工作台、离心机、细胞计数板等。

三、实验方法
1. 细胞分离与培养
（1）将绒毛膜癌组织样本置于超净工作台，用眼科剪剪成约1mm×1mm×1mm的小块。

（2）将组织块放入含有双抗的DMEM培养基中，用胰蛋白酶消化处理10-15分钟。

（3）用吸管轻轻吹打组织块，使细胞脱落。

（4）将消化后的细胞悬液过滤，收集细胞。

（5）将收集到的细胞悬液用细胞计数板计数，调整细胞密度为1×10^5个/mL。

（6）将细胞悬液接种于培养瓶中，放入CO2培养箱中培养。

2. 细胞传代与纯化
（1）待细胞贴壁生长后，用胰蛋白酶消化处理，收集细胞。

（2）将细胞悬液接种于新的培养瓶中，继续培养。

（3）定期观察细胞生长情况，当细胞融合度达到80%时，进行传代。

3. 细胞生物学特性观察
（1）细胞形态观察：采用倒置显微镜观察细胞形态变化。

（2）细胞生长曲线：通过定时收集细胞悬液，测定细胞数量，绘制生长曲线。

（3）细胞集落形成实验：将细胞悬液接种于琼脂平板上，培养一段时间后，观察
集落形成情况。

（4）细胞凋亡检测：采用Annexin V-FITC/PI双重染色法检测细胞凋亡。

四、实验结果
1. 细胞分离与培养：经过3-5次传代后，成功获得绒毛膜癌细胞株，细胞呈梭形，细胞核大，染色质深。

2. 细胞形态观察：绒毛膜癌细胞呈梭形，细胞核大，染色质深，细胞质丰富。

3. 细胞生长曲线：绒毛膜癌细胞呈指数生长，生长速度较快。

4. 细胞集落形成实验：绒毛膜癌细胞在琼脂平板上形成圆形、大小不一的集落。

5. 细胞凋亡检测：绒毛膜癌细胞在培养过程中，凋亡率较低。

五、实验结论
本研究成功培养出绒毛膜癌细胞株，并对其生物学特性进行了观察。

绒毛膜癌细胞呈梭形，生长速度快，凋亡率较低。

本研究为绒毛膜癌的病理生理学研究提供了实验基础。

六、实验讨论
1. 绒毛膜癌是一种高度恶性的肿瘤，其发生与妊娠密切相关。

本研究通过体外培
养绒毛膜癌细胞，为研究其生物学特性提供了实验基础。

2. 绒毛膜癌细胞呈梭形，细胞核大，染色质深，细胞质丰富，这与文献报道相符。

3. 绒毛膜癌细胞生长速度快，凋亡率较低，提示其具有较强的增殖能力和抗凋亡
能力。

4. 本实验中，绒毛膜癌细胞在琼脂平板上形成圆形、大小不一的集落，表明其具
有较强的集落形成能力。

5. 绒毛膜癌细胞的培养成功，为后续研究其分子机制、药物治疗等方面提供了实
验基础。

七、实验展望
1. 进一步研究绒毛膜癌细胞的分子机制，为寻找新的治疗靶点提供理论依据。

2. 探索新的绒毛膜癌细胞治疗方法，提高绒毛膜癌患者的生存率。

3. 开展绒毛膜癌细胞与其他肿瘤细胞的联合培养，研究肿瘤细胞间的相互作用。