紫甘薯花青素对小鼠急性乙醇性肝损伤的预防保护作用

紫甘薯花青素对小鼠急性乙醇性肝损伤的预防保护作用
闫倩倩;周玉珍;张雨青
【摘要】@@%为了探索紫甘薯花青素对乙醇性肝损伤的预防保护作用,将雄性ICR小鼠60只,随机分成正常对照组、急性乙醇肝损伤模型组、水飞蓟宾阳性对照组(90mg/kg)及紫甘薯花青素低、中、高剂量组(90、120、150mg/kg)共6组,测定各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量,肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽转移酶(CST)、过氧化氢酶(CAT)的活性以及谷胱甘肽(GSH)的含量.结果表明,紫甘薯花青素各剂量组均能不同程度降低急性乙醇肝损伤小鼠血清中ALT(P＜0.05)、AST的活性(P＜0.05),升高组织中SOD(P＜0.05)、GST(P＜0.05)、CAT(P＞0.05)的活性及GSH(P＞0.05)的含量.说明紫甘薯花青素对乙醇引起的急性肝损伤具有很好的保护作用.
【期刊名称】《江苏农业科学》
【年(卷),期】2012(040)005
【总页数】2页(P265-266)
【关键词】紫甘薯;花青素;肝损伤
【作者】闫倩倩;周玉珍;张雨青
【作者单位】苏州大学基础医学与生物科学学院应用生物学系,江苏苏州215123;苏州农业职业技术学院园艺中心,江苏苏州215123;苏州大学基础医学与生物科学学院应用生物学系,江苏苏州215123
【正文语种】中文
【中图分类】R285
紫甘薯富含具有显著生理功能的花青素类物质，它是一类天然色素，是以黄酮核为基础的一类糖苷，具有类黄酮的典型结构[1-4]。

动物试验和临床研究表明，紫甘薯花青素具有很强的抗氧化、清除自由基的作用，可以缓解肝功能障碍，抑制高血糖、高血压以及癌细胞的侵入和转移，有很强的免疫保护作用[5-15]。

本试验旨在通过紫甘薯中提取的花青素对乙醇诱导小鼠急性肝损伤模型进行研究，探讨花青素对肝氧化损伤的预防保护作用。

1 材料与方法
1.1 试验材料
紫甘薯品种：日本菱紫，2010年9月26日购自山东金薯薯业有限公司，
1.2 药品及仪器
药品：红星二锅头(56%乙醇)；水飞蓟宾(Sigma公司)；超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽转移酶(GST)、过氧化氢酶(CAT)试剂盒(南京建成生物工程研究所)。

仪器：高速冷冻离心机。

UV-3000紫外可见分光光度计(Hitachi，Ltd.，Tokyo Japan)，BP211D分析天平(Mettler Toledo仪器公司)。

1.3 试验方法
1.3.1 样品制备根据以前相关紫甘薯花青素的提取方法，略加改进后进行提取。

将洗净的紫甘薯置于微波炉微波烘烤10～20 min，待冷却至室温，放入pH值3.0的酸性电解水中萃取，沉淀反复洗涤至基本无色。

离心，上清液经过AB-8大孔树脂吸附，70%乙醇解析，旋转浓缩去除乙醇后冻干制成粉末样品。

1.3.2 动物分组及处理雄性ICR小鼠，体重18～22 g，清洁级，购自苏州大学试验动物中心。

室温18～25 ℃，相对湿度50%～80%，每日光照12 h，摄食、饮水自由。

适应性饲养3 d，随机分成6组，每组10只，分别为空白对照组、阴性
对照组、阳性对照组、花青素低剂量组、花青素中剂量组及花青素高剂量组。

低、中、高剂量组分别用花青素90、120、150 mg/kg灌胃，阳性对照灌胃90
mg/kg的水飞蓟宾，空白和阴性对照组分别灌胃等量的生理盐水。

1 h后，除空
白对照组，其余各组小鼠每天灌胃乙醇(红星二锅头)5 mL/kg，建立小鼠乙醇性肝损伤模型，试验连续进行7 d。

3 h后，小鼠眼球取血，然后3 000 r/min离心
15 min，取上清。

肝脏用冰生理盐水冲洗、滤纸吸湿后，加入预冷的生理盐水制
成10%匀浆，待用。

赖氏法测定血清中ALT、AST水平，分别用SOD、GSH、GST、CAT试剂盒测定SOD、GSH、GST、CAT的水平，蛋白质的测定采用考马斯亮蓝法。

以上各测定方法参照试剂盒说明书进行。

2 结果与分析
2.1 紫甘薯花青素对乙醇性肝损伤小鼠血清ALT、AST活性的影响
乙醇对照组ALT、AST水平与正常对照组比较显著升高，表明小鼠乙醇性肝损伤
模型成立。

花青素低、中、高剂量组与乙醇对照组比较，ALT、AST活性显著降低(P<0.05)，表明花青素对小鼠肝损伤有保护作用(表1)。

表1 紫甘薯花青素对乙醇性肝损伤小鼠ALT、AST水平的影响(n=10)组别
ALT(U/L)AST(U/L)正常组28.2±1.5a78.3±3.9a低剂量组51.5±6.5b83.7±6.9a
中剂量组33.5±3.5a81.3±3.2a高剂量组28.8±1.3a79.0±12.0a阳性对照组
32.1±3.4a80.4±8.9a模型组150.5±9.2c199.3±52.3b
2.2 小鼠肝匀浆中GSH含量和SOD、GST、CAT活性
乙醇对照组GSH含量及SOD、GST、CAT活力与正常对照组比较明显降低
(P<0.05)；花青素低、中、高剂量组与乙醇对照组比较，GSH含量及SOD、GST、CAT活力明显升高(表2)。

表2 花青素对乙醇性肝损伤小鼠GSH、SOD、GST、CAT水平的影响(n=10)组别GSH(mg/g prot)SOD(U/mg prot)GST(U/mg prot)CAT(U/g prot)正常组
2.060±0.005e357.5±37.1f30.57±0.40d506.42±4
3.01e低剂量组
1.190±0.059b28
2.0±15.8d19.88±2.31b332.13±52.37a中剂量组
1.247±0.257b277.7±13.1b25.98±1.10c348.26±29.24b高剂量组
1.367±0.187c306.1±13.3e3
2.60±
3.01e455.84±40.65d阳性对照组
1.576±0.322d279.0±14.2c3
2.20±1.16e370.95±24.76c模型组
1.040±0.045a216.0±15.0a18.95±0.54a331.10±25.00a
3 结论与讨论
本试验结果提示，紫甘薯花青素对试验性乙醇肝损伤有明显的保护作用。

乙醇在体内有3条代谢途径，胞浆内的乙醇脱氢酶系、内质网上的微粒体乙醇氧化系统、
过氧化小体上的触酶。

乙醇在肝脏代谢时可产生大量的自由基，如过量自由基的积累可引起肝细胞膜发生脂质过氧化反应，此外，还有肝脏内大量的酶释放到血液当中去，而且肝脏中与清除自由基有关的酶活力也大大下降，最终使肝功能异常，代谢紊乱[5-15]。

因此，清除自由基是预防肝脏免受来自乙醇损伤的关键。

很多学者对紫甘薯花青素对肝脏的保护作用作了大量研究，日本学者研究了紫甘薯对四氯化碳引起的肝损伤的抑制作用，结果表明紫甘薯能明显抑制鼠血清中GOT
和GPT的上升，并对血清中乳酸脱氢酶、硫代巴比妥酸反应物以及肝脏中的氧化
脂蛋白的增加都有一定的抑制能力，从而减轻由四氯化碳引起的肝损伤[16-17]。

而Choi研究了紫甘薯花青苷对扑热息痛诱导的肝损伤的抑制作用，发现花青素可保护扑热息痛诱导的肝毒性，通过阻断细胞色素P450 2E1介导的扑热息痛的生物活性，上调肝脏GSH水平，并作为自由基的清除剂[18]。

在本试验中，乙醇性肝损伤小鼠，血清中ALT、AST水平明显升高，组织中SOD、GSH、GST、CAT活性明显降低，而灌胃紫甘薯花青素组的小鼠，可以明显抑制
血清中ALT、AST水平的升高以及组织中SOD、GSH、GST、CAT活性的降低，并且具有剂量依赖性。

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