高中生物必修一实验《蛋白质检验》方案

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高中生物实验《蛋白质的检测》方案
黄烜裕、黄琳然
一、实验原理
双缩脲（NH2—CO—NH—CO—NH2）
双缩脲反应原理：
NH2—CO—NH—CO—NH2 +双缩脲试剂（A液：0.1g/mlNaOH溶液；
B液：0.01g/mlCuSO4溶液）==紫色络合物
紫色络合物结构式蛋白质中与双缩脲有类似的结构：肽键—CO—NH—（至少
含有两个肽键才能进行双缩脲反应），因此使用可用双缩脲试剂检测蛋白质。

二、实验器材与试剂
待测实验材料：氨基酸溶液、鸡蛋清稀释液、牛奶
器材：电子天平、称量纸、100mL烧杯2个、50mL烧杯、10mL量筒、5mL量
筒、标签纸若干、试剂瓶2个、吸管2支、玻棒、试管若干
试剂：固态NaOH、无水CuSO4
三、实验步骤
1、配制双缩脲试剂：A液：质量浓度为 0.1g/mL NaOH ，取5g固态NaOH加
蒸馏水溶解，稀释至50ml；B液：质量浓度为0.01g/mL CuSO4，取0.5g无
水CuSO4溶于蒸馏水，稀释至50ml。

2、取4支试管分别贴上标签，分别加入①蒸馏水②氨基酸溶液③鸡蛋清稀释液
④牛奶各2mL。

3、分别向试管①~④试管加入双缩脲试剂A液2mL，振荡摇匀。

4、分别在①~④试管滴入4滴双缩脲试剂B液，振荡摇匀。

5、观察并记录试验现象
四、预期实验结果：
①②号试管溶液呈蓝色（无反应，Cu+溶液呈蓝色）
③④号试管溶液呈紫色（双缩脲反应生成紫色络合物）。