酿酒酵母β-葡聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1表达的影响

酿酒酵母β-葡聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1表达的
影响
张曼;金鑫;王云鹤;魏方;温婧怡;李政忆;杨银凤
【期刊名称】《畜牧兽医学报》
【年(卷),期】2018(049)011
【摘要】为了探索β-葡聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞(ruminal epithelial
cells,RECs)β-防御素-1(sheep β-defensin-1,SBD-1)表达的影响.本研究首先建立绵羊RECs培养体系作为体外试验模型,用不同浓度(0、5、10、20、50和100 μg·mL-1)的β-葡聚糖刺激RECs 8 h后,利用qPCR和ELISA方法检测RECs中SBD-1的表达变化,选出诱导SBD-1表达最高的β-葡聚糖浓度.然后用β-葡聚糖的最佳刺激浓度对RECs分别刺激0、2、4、8、12和24h,同样利用qPCR和ELISA方法对RECs SBD-1的表达变化进行检测,从而筛选出诱导SBD-1表达最高的刺激时间.qPCR和ELISA结果显示,β-葡聚糖(5～100 μg·mL-1)刺激RECs 8 h 后,SBD-lmRNA和蛋白的表达随着β-葡聚糖浓度的升高均呈现先升高后降低趋势,且当β-葡聚糖浓度为10 μg·mL-1时SBD-1mRNA和蛋白的表达量极显著高于对照组(P＜0.01).当用10 μg·mL-1的β-葡聚糖刺激RECs 0～24 h后,qPCR结果显示,10 μg·mL-1的B-葡聚糖刺激RECs 2 h时SBD-1 mRNA的表达量最高(P＜0.01),之后呈下降趋势,而ELISA结果显示,在β-葡聚糖浓度为10 μg·mL-1刺激RECs 4 h后SBD-1蛋白分泌水平达到最高(P＜0.01).MTT测定结果显示,100
μg·mL-1 β-葡聚糖会对绵羊RECs活力产生显著的影响(P＜0.05).本研究结果表明,β-葡聚糖能够提高绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1的表达,且用浓度为10 μg·mL-1的β-葡聚糖分别刺激RECs 2和4h后SBD-1的mRNA和蛋白表达达到最高.
【总页数】9页(P2416-2424)
【作者】张曼;金鑫;王云鹤;魏方;温婧怡;李政忆;杨银凤
【作者单位】内蒙古农业大学兽医学院,呼和浩特010018;农业部动物疾病临床诊疗技术重点试验室,呼和浩特010018;内蒙古农业大学兽医学院,呼和浩特010018;农业部动物疾病临床诊疗技术重点试验室,呼和浩特010018;内蒙古农业大学兽医学院,呼和浩特010018;农业部动物疾病临床诊疗技术重点试验室,呼和浩特010018;内蒙古农业大学兽医学院,呼和浩特010018;农业部动物疾病临床诊疗技术重点试验室,呼和浩特010018;内蒙古农业大学兽医学院,呼和浩特010018;农业部动物疾病临床诊疗技术重点试验室,呼和浩特010018;内蒙古农业大学兽医学院,呼和浩特010018;农业部动物疾病临床诊疗技术重点试验室,呼和浩特010018;内蒙古农业大学兽医学院,呼和浩特010018;农业部动物疾病临床诊疗技术重点试验室,呼和浩特010018
【正文语种】中文
【中图分类】S826.2
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