某大学生物工程学院《普通生物化学》考试试卷(2019)

某大学生物工程学院《普通生物化学》
课程试卷（含答案）
__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试
考试时间：90 分钟年级专业_____________
学号_____________ 姓名_____________
1、判断题（140分，每题5分）
1. 真核细胞中遗传信息的新组合是在减数分裂期间通过染色体的独立分配与同源染色体之间DNA片段的交换而产生的。

（）
答案：正确
解析：
2. 淀粉和糖原的生物合成都需要有引物的存在。

（）
答案：正确
解析：多糖合成时末端需要葡萄糖残基引物存在，以利于多糖链的延长，糖原的合成需要带有寡糖链的多肽作为引物，一般情况下引物是至少含4个葡萄糖残基的α1,4葡聚糖。

3. 辅基与辅酶的区别只在于它们与蛋白质结合的牢固程度不同，并无严格的界限。

（）
答案：正确
解析：
4. 用一个带poly（U）的亲和层析柱，可以方便地从匀浆中分离出真核和原核细胞的mRNA。

（）
答案：错误
解析：
5. 机体在缺乏能源物质的情况下，可以通过将胆固醇氧化成CO2和H2O，产生ATP。

（）
答案：错误
解析：
6. ATP是ATCase的别构抑制剂。

（）
答案：错误
解析：ATP是ATCase的激活剂。

7. Taq DNA聚合酶无校对的功能，故其催化的PCR反应产物出错率较大。

（）[华中农业大学2017研]
答案：正确
解析：Taq聚合酶的缺点之一为催化DNA合成时的相对低保真性。

它缺乏3′→5′核酸外切酶的即时校正机制，出错率为19000。

8. 所有维生素都可以作为辅酶或辅基的前体。

（）
答案：错误
解析：
9. 合成胆固醇的限速酶是HMG还原酶。

（）[中山大学2018研]
答案：错误
解析：合成胆固醇的限速酶是HMGCoA还原酶。

10. 蛋白质变性后，会使大量氨基酸游离出来。

（）[山东大学2016研]
答案：错误
解析：蛋白质变性是指蛋白质的空间结构被破坏，而一级结构仍保持完整，所以不会有氨基酸游离出来，大量氨基酸游离出来的现象称为氨基酸的降解。

11. 胆固醇分子中无双键，属于饱和固醇。

（）
答案：错误
解析：胆固醇分子中的C5与C6间有一个双键。

12. 脂溶性激素的受体实际上是一种反式作用因子。

（）
答案：正确
解析：脂溶性激素的受体与激素结合以后，与DNA分子上被称为HRE的顺式作用元件结合而调节它下游基因的转录，因此它是一种反式作用因子。

13. 琥珀酸脱氢酶是三羧酸循环中唯一掺入线粒体内膜的酶。

（）[南开大学研]
答案：正确
解析：琥珀酸脱氢酶可作为判断线粒体内膜的标志。

14. 在植物体内，蔗糖的合成主要是通过蔗糖磷酸化酶催化的。

（）
答案：错误
解析：
15. 真核生物mRNA的两端都含有3′OH。

（）[山东大学2016研]
答案：错误
解析：真核生物mRNA的两端并非都含有3′OH，3′端要经过多聚腺苷酸化加工修饰。

16. 质膜上糖蛋白的糖基都位于膜的外侧。

（）
答案：正确
17. 胰高血糖素可激活磷酸果糖激酶2（PFK2）。

（）[中国科技大学2008研]
答案：错误
解析：胰高血糖素可抑制磷酸果糖激酶2（PFK2）。

18. 嘧啶核苷酸从头合成途径不涉及天冬酰胺。

（）[浙江大学2018研]
答案：正确
解析：嘧啶核苷酸的从头合成途径中嘧啶环上的各个原子分别来自于CO2、谷氨酰胺和天冬氨酸。

19. RNA分子中含有较多的稀有碱基。

（）
答案：正确
解析：
20. 纤维素中葡萄糖分子以β1,4糖苷键连接，而直链淀粉中葡萄糖分子则是以α1,4糖苷键相连。

（）[中山大学2018研]
答案：正确
21. 联合脱氨基作用是氨基酸脱去氨基的主要方式。

（）
答案：正确
解析：
22. 每一个相应的氨酰tRNA与A位点结合，都需要一个延伸因子参加并消耗一个GTP。

（）
答案：正确
解析：
23. 哺乳动物的激素只能由内分泌腺产生，通过体液或细胞外液运送到特定作用部位，从而引起特殊的激动效应。

（）
答案：正确
解析：
24. 酶原的激活也是一种共价调节。

（）[中山大学2018研]
答案：正确
25. 膜蛋白的二级结构均为α螺旋。

（）
答案：错误
解析：膜蛋白的二级结构多数为α螺旋，也有β折叠形式。

26. 真核生物成熟mRNA的两端均带有游离的3′OH。

（）
答案：正确
解析：成熟的mRNA两端都带有游离的3′OH，防止被降解。

27. 逆转录酶既具有DNA聚合酶活性，也具有RNA聚合酶活性。

（）
答案：错误
解析：
28. 亲缘相近的生物，其DNA碱基组成相似，但不对称比率不一定相似。

（）
答案：错误
解析：
2、名词解释题（65分，每题5分）
1. 弱化子（attenuator）[中山大学研]
答案：弱化子（attenuator）是指原核生物操纵子中能显著减弱甚至
终止转录作用的一段核苷酸序列，该区域能形成不同的二级结构，利
用原核微生物转录与翻译的偶联机制对转录进行调节。

解析：空
2. 氨酰tRNA合成酶
答案：氨酰tRNA合成酶又称氨酰tRNA连接酶，氨基酸活化酶，此酶能专一性地辨认氨基酸的侧链和tRNA，原核生物蛋白质生物合成
的过程，合成氨酰tRNA在ATP存在下使氨基酸活化，并与tRNA
的CCAOH末端结合。

解析：空
3. 极限糊精
答案：极限糊精是指支链淀粉中带有支链的核心部分，该部分在支链
淀粉经水解酶的作用、糖原磷酸化或淀粉磷酸化酶作用后仍然存在。

糊精的进一步降解需要去分支酶催化α（1→6）糖苷键的水解。

解析：空
4. 酸值（acid number）
答案：酸值又称酸价，是中和1g脂质的游离脂酸所需的KOH毫克数，它表示酸败程度的大小。

解析：空
5. 选择性剪接（alternativesp1icing）[中国科学院病毒所2008研]
答案：选择性剪接（alternativesp1icing）又称可变剪接，是指从一个mRNA前体中通过不同的剪接方式（选择不同的剪接位点组合）产生不同的mRNA剪接异构体的过程，而最终的蛋白产物会表现出不同的或者是相互拮抗的功能和结构特性，或者在相同的细胞中由于表达水平的不同而导致不同的表型。

解析：空
6. pI[武汉大学2014研]
答案：pI即等电点，是指使蛋白质或氨基酸在溶液中解离成正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电荷为零时的溶液pH。

解析：空
7. 终止子
答案：终止子是指提供转录停止信号的DNA序列。

解析：空
8. Lactate fermentation（乳酸发酵）[上海交通大学2007研]
答案：lactate fermentation（乳酸发酵）是指某些细菌在无氧情况下分解葡萄糖、产生乳酸的过程。

解析：空
9. 糖异生[武汉大学2014研]
答案：糖异生是指由非糖物质，如乳酸、甘油、氨基酸等转变为葡萄
糖或糖原的过程。

糖异生不是糖酵解过程的简单逆转，虽然由丙酮酸
开始的糖异生利用了糖酵解中的七步近似平衡反应的逆反应，但还必
须利用另外四步糖酵解中不曾出现的酶促反应，绕过糖酵解过程中不
可逆的三个反应。

糖异生保证了机体的血糖水平处于正常水平。

解析：空
10. G蛋白
答案：G蛋白，即GTP结合蛋白，是存在于质膜上的一组信息传递蛋白，它由α、β、γ三个亚基组成。

G蛋白种类很多，有Gs、Gi、Gt 等。

激素、递质与膜受体结合后，经G蛋白将信号传递给效应器，产
生第二信使分子，从而引起细胞效应。

解析：空
11. 古细菌（archaebacteria）
答案：古细菌是指一些生长在极端特殊环境中的“细菌”，其形态结构、遗传装置及其基本生命活动方式虽与原核细胞相似，但16S rRNA序列同源性和其他一些基本分子生物学特点又与真核生物接近。

解析：空
12. 超二级结构[山东大学2016研]
答案：超二级结构是指在多肽链内顺序上相互邻近的二级结构（主要是α螺旋和β折叠）常常在空间折叠中靠近，彼此相互作用，形成规则的二级结构聚集体，在多种蛋白质中充当三级结构的构件。

解析：空
13. nucleosome
答案：nucleosome即核小体，是指真核生物DNA的高级结构，DNA双螺旋以左手螺旋缠绕在H2A、H2B、H3、H4八聚体组蛋白核心上，构成核心颗粒，H1组蛋白位于核心颗粒之间，这种核小体结构是染色体的基本结构。

解析：空
3、填空题（150分，每题5分）
1. 肝脏在氨基酸代谢中的主要作用是。

答案：除去氨基酸脱去的氨
解析：
2. 磷脂是分子中含磷酸的复合脂，若甘油磷脂分子上氨基醇为时为卵磷脂；若甘油磷脂分子上氨基醇为时则为脑磷脂。

[华南理工大学2006研]
答案：胆碱|乙醇胺或胆胺
解析：卵磷脂就是磷脂酰胆碱，其甘油磷脂分子上氨基醇为胆碱；脑
磷脂则为磷脂酰乙醇胺，其甘油磷脂分子上氨基醇为乙醇胺，又称胆胺。

3. 某些RNA病毒入侵宿主细胞后可借助于RNA指导RNA聚合酶进行
病毒RNA的。

[北京师范大学研]
答案：自我复制
解析：
4. 核苷酸被酶水解为核苷和无机磷酸，核苷被酶水解为碱基和RlP。

答案：核苷酸酶|核苷磷酸化酶
解析：
5. 鉴别糖的普通方法为试验，是利用糖在浓酸情况下脱水生成，与
反应，生成颜色的物质。

答案：莫利希（Molish）|糠醛或其衍生物|α萘酚|紫红
解析：
6. 一次三羧酸循环可有次脱氢过程和次底物水平磷酸化过程。

答案：4|1
解析：
7. 脱氧核糖核酸在糖环位置不带羟基。

答案：2′
解析：
8. DNA回旋酶又称拓扑异构酶，其功能是。

[中山大学2009研]
答案：DNA回旋酶属于拓扑异构酶Ⅱ，其功能为引入负超螺旋，消除复制叉前进过程中出现的扭曲张力。

解析：
9. 核酸对紫外线的最大吸收峰在波长附近。

[中山大学2018研]
答案：260nm
解析：
10. 糖苷是指糖的和醇、酚等化合物失水而形成的缩醛（或缩酮）
等形式的化合物。

答案：半缩醛（半缩酮）羟基
解析：
11. 质膜上各种成分的分布具有不对称性，表现为、、的不对称性。

答案：脂|蛋白质|糖脂和糖蛋白
解析：
12. 脱氧核苷酸的生物合成是在的基础上还原生成的。

[北京师范大
学研]
答案：二磷酸核苷
解析：
13. 丙酮酸脱氢酶系的第一个酶称，功能是。

答案：丙酮酸脱氢酶|催化丙酮酸氧化脱羧
解析：
14. 根据国际酶学系统分类法，催化丙酮酸生成草酰乙酸的酶为酶类。

答案：连接（合成）酶类（Ⅵ类）
解析：
15. 基因文库的构建大致可分成5个步骤，即、、、和。

答案：染色体DNA的片段化|载体DNA的制备|体外连接与包装|重组噬菌体感染大肠杆菌|基因文库的鉴定与扩增
解析：
16. 脂蛋白按照密度的不同可分为，，和。

答案：乳糜颗粒（CM）|极低密度脂蛋白（VLDL）|低密度脂蛋白（LDL）|高密度脂蛋白（HDL）
解析：
17. 真核生物RNA聚合酶Ⅲ负责转录生成的产物、和。

答案：5S rRNA|tRNA|snRNA
解析：
18. 胆固醇在体内转换可产生的主要活性物质包括、和等几大类。

答案：胆汁酸|类固醇激素|维生素D
解析：
19. 磷脂可分为和两大类。

[华中农业大学2016研]
答案：甘油磷脂|鞘磷脂
解析：磷脂是分子中含磷酸的复合脂。

由于所含醇的不同，可分为甘油磷脂和鞘氨醇磷脂类，它们的醇物质分别是甘油和鞘氨醇。

20. 不同生物大分子的分解代谢均可大致分为三个阶段：将大分子降解为较小分子的
；将不同的小分子转化为共同的降解产物；经完全氧化。

答案：单体（构造单元）|乙酰CoA|三羧酸循环
解析：
21. 生物体中，寡糖常常与和共价结合而发挥其生物学功能。

[中国科技大学2008研]
答案：脂|蛋白质
解析：
22. 核糖体大亚基上与结合的部位称为A位，与结合的部位称为P 位。

答案：氨酰tRNA|肽酰tRNA
解析：
23. 双螺旋DNA的解链温度（熔解温度）Tm与、及有关。

答案：（G＋C）含量|缓冲溶液的性质|DNA的纯度
解析：
24. 体内核苷酸从头合成的原料主要是和分子物质。

答案：氨基酸|某些小
解析：
25. 一些真核RNA聚合酶Ⅲ的启动子顺序位于基因的，但大部分RNA 转录起始点位于基因的。

答案：内部|上游
解析：
26. 原核生物核糖体小亚基大小为，所含的rRNA为。

答案：30S|16S rRNA
解析：
27. 嘧啶从头合成途径中首先合成的嘧啶核糖核苷酸是。

[中山大学2018研]
答案：乳清苷酸
解析：
28. 细胞内的呼吸链有、和，其中不产生ATP。

答案：NADH|FADH2|细胞色素P450|细胞色素P450
解析：
29. 核苷水解酶可使核糖核苷分解为和。

答案：碱基|核糖
解析：
30. 膜内在蛋白的跨膜区域多为氨基酸，膜的两侧多为氨基酸。

[南
开大学研]
答案：非极性|极性带电荷
解析：
4、简答题（50分，每题5分）
1. 何谓转录？简述转录与复制的异同点。

答案：（1）转录是指生物体内在DNA指导的RNA聚合酶催化下，以DNA为模板，以四种NTP为原料，按碱基配对原则合成
RNA的过程。

（2）转录与复制的异同点
①转录与复制的相同点
RNA的转录合成从化学角度来讲类似于DNA的复制，二者都是酶促的核苷酸聚合过程，都以DNA为模板，都需依赖DNA的聚合酶，多核苷酸链的合成都是以5′→3′的方向，在3′OH末端与加入的核苷
酸形成磷酸二酯键，均遵从碱基配对规律。

②转录与复制的不同点：由于复制和转录的目的不同，二者又各
具特点
a．对于一个基因组来说，转录只发生在一部分基因，而且每个基
因的转录都受到相对独立的控制；而复制则是发生于整个基因组的。

b．RNA的转录合成是以DNA的一条链为模板而进行的，所以这种转录方式又叫不对称转录；而复制则是两条链均作为模板。

c．转录的原料是NTP；而复制则是dNTP。

d．催化转录的是RNA聚合酶，该酶缺乏3′→5′外切酶活性，所以没有校正功能。

复制则是由DNA聚合酶催化的，该酶具有校正功能。

e．转录时不需要引物，而且RNA链的合成是连续的；复制需要引物，且随从链的合成是不连续的。

f．转录的碱基配对为AUTAGC，而复制则是ATGC。

g．转录产物是各种RNA，复制产物为子代双链DNA。

解析：空
2. 什么是一碳单位，简述其来源和去向。

[中山大学2018研]
答案：（1）一碳单位是指某些氨基酸在分解代谢中产生的含有一个碳原子的基团，包括甲基、亚甲基、次甲基、羟甲基、甲酰基及亚氨甲基等。

四氢叶酸是一碳单位的重要载体。

（2）一碳单位的来源有：能生成一碳单位的氨基酸有丝氨酸、色氨酸、组氨酸和甘氨酸。

另外（甲硫氨酸）可通过S腺苷甲硫氨酸提供一碳单位。

（3）一碳单位的去向有用于嘌呤核苷酸从头合成、脱氧尿苷酸5′位甲基化合成胸苷酸以及同型半胱氨酸甲基化再生甲硫氨酸。

解析：空
3. 单脂与复脂在结构上的区别是什么？复脂的分类是根据什么基础？磷脂和糖脂在结构上有无相似之处？试用结构式加以说明。

答案：（1）脂质可分为单脂与复脂两大类，它们在结构上的区别是：
①单脂，即单纯脂质，为脂酸与醇（甘油醇、高级一元醇）所组
成的酯类。

②复脂，即复合脂质，为脂酸与醇（甘油醇，鞘氨醇）所生成的酯，同时含有其他非脂性物质，如糖、磷酸及氮碱等。

（2）复脂的分类基础
复脂是指含磷酸或含糖的脂质，根据其含有的不同非脂性物质，
可分磷脂与糖脂两类。

（3）磷脂和糖脂在结构上的比较
①磷脂是指含磷酸与氮碱的脂质，分甘油醇磷脂和鞘氨醇磷脂两类。

鞘氨醇磷脂不含甘油醇而含鞘氨醇。

②糖脂是指含糖分子的脂质，由鞘氨醇或甘油醇与脂酸和糖所组成，如脑苷脂和神经节苷脂等。

磷脂与糖脂在结构上的差异：磷脂是醇基与磷酸基团形成的脂，
而糖脂是醇基与糖形成的脂。

解析：空
4. 写出辅基TPP的化学名称及其参与的化学反应类型。

[山东大学2016研]
答案：TPP的化学名称是焦磷酸硫胺素。

维生素B1的辅酶形式，参与的化学反应类型是转醛基反应。

解析：空
5. 简要说明糖、脂肪、氨基酸和核苷酸代谢之间的相互联系。

答案：糖、脂肪、蛋白质和核酸等有机物的代谢，它们在生物体内各有独特的代谢过程和途径。

糖是主要能源物质，代谢供能，脂肪是储能物质，氨基酸是组成人体的物质基础，在人体急缺能量时也会代谢供能。

核苷酸是RNA和DNA的组成成分。

但彼此之间也并非互不相干的孤立过程，实际上，各类有机物质的代谢都是错综复杂而又协调统一的完整体系，各个代谢途径之间既相互沟通，各种中间产物也可以相互转变，因此，各个代谢过程及途径既相互依存又相互制约，使生物体内错综复杂的生物化学反应和生理活性都能够有条不紊，井然有序地协调进行。

解析：空
6. 什么是蛋白质变性？哪些环境因素可以造成蛋白质变性？[浙江大学2017研]
答案：（1）蛋白质变性是指蛋白质在某些强烈的物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被改变，但一级结构保持完整，从而导致其理化性质改变和生物活性丧失的现象。

（2）蛋白质变性的环境因素
①化学因素
强酸、强碱、重金属盐、尿素、丙酮、去污剂等。

②物理因素
高温、紫外线或X光照射、超声波、剧烈震荡或搅拌等。

解析：空
7. 在生物合成中往往需要不同的三磷酸核苷酸参与不同物质的合成，写出四种三磷酸核苷酸分别参与哪些物质的生化合成？[山东大学2016研]
答案：四种三磷酸核苷酸分别参与以下物质的生化合成：（1）ATP参与生物体内能量代谢过程以及是第二信使的前体；
（2）GTP参与蛋白质和腺嘌呤的生物合成；
（3）CTP参与磷脂的生物合成；
（4）UTP参与多糖合成糖原的过程。

解析：空
8. 体内NADPH来自哪些代谢？如果缺乏NADPH，主要影响哪些生化
过程？
答案：NADPH主要来自磷酸戊糖途径，总反应可分为两个阶段：（1）氧化阶段由葡萄糖6磷酸开始，经由葡萄糖6磷酸脱氢酶和6磷酸葡萄糖酸脱氢酶连续脱氢脱羧生成核酮糖5磷酸，期间产生两
分子NADPH。

（2）非氧化阶段通过异构酶、转酮酶和转醛酶等催化的分子重排反应将六分子戊糖磷酸转化成五分子己糖磷酸。

NADPH主要是为生
物合成反应提供必需的还原当量，缺乏时将影响多种生物分子的合成
和转化反应，例如：
①脂肪酸、胆固醇及鞘氨醇等脂质的合成；
②葡萄糖及其他非必需氨基酸的合成；
③还原性谷胱甘肽及相关的含巯基蛋白或酶的合成；
④与P450单加氧酶系相关的生物转化及羟化反应等。

解析：空
9. 根据RNA的剪接方式可以将内含子分成几类？它们分别是什么？答案：根据RNA的剪切方式可以将内含子主要分成以下三类：（1）细胞核premRNA，可分为：①GUAG类（主要内含子）：细胞核，premRNA（真核）②AUAG类（次要内含子）：细胞核，premRNA（真核）。

遵循GUAG法则。

RNA剪接多发生在剪接体上。

（2）自剪接内含子
内含子本身具有催化活性，能进行内含子的自我剪接，而无需借
助于形成剪接体。

①Ⅰ型自剪接内含子：细胞核，premRNA（真核），细胞器RNA，少数细菌RNA
②Ⅱ类自剪接内含子：细胞器RNA，部分细菌RNA（主要存在
于真核生物的线粒体和叶绿体rRNA基因中）
③Ⅲ类自剪接内含子：细胞器RNA，Ⅲ类自剪接内含子与Ⅱ类相似，只是边界序列的保守性和次级结构有所不同。

Ⅲ类自剪接内含子
与tRNA前体中的内含子较为罕见。

此外，还有tRNA前体中的内含子，较为罕见。

解析：空
10. TATA box是大多数真核生物基因共有的启动子元件，假如某基
因中该序列突变为能与U1snRNA互补的序列，会不会影响该基因mRNA
前体的拼接？
答案：不会。

因为TATA box位于基因转录起始位点的上游，不被转录，不会出现在该基因mRNA前体中，所以即使突变为U1snRNA
的互补序列也不会影响mRNA前体的拼接。

解析：空
5、计算题（5分，每题5分）
1. 分子式为C5H10O5的开链醛糖和酮糖各有多少个可能的异构体？
如果为环式结构呢？
答案：依据任一单糖的可能异构体数等于2n（n为C数），开链醛戊糖和酮戊糖各有3个C和2个C，故可能的异构体分别为8个和4个，形成环式结构后则分别增加至16个和8个。

解析：空
6、论述题（25分，每题5分）
1. 蛋白质分离纯化的方法有哪些？简单说明其原理。

答案：对蛋白质分离纯化的方法，是根据蛋白质在溶液中的性质、分子大小、溶解度、电荷、吸附性质和对配体分子的生物学亲和力等
确定分离纯化蛋白质的方法。

（1）根据溶解度不同的分离方法
①盐析：在蛋白质溶液中加入大量中性盐，以破坏蛋白质的胶体
性质，使蛋白质从溶液中沉淀析出，称为盐析。

常用的中性盐有：硫
酸铵、氯化钠、硫酸钠等。

盐析时，溶液的pH在蛋白质的等电点处
效果最好。

②等电点沉淀：沉淀出来的蛋白质保持天然构象，能重新溶解于
适当的pH和一定浓度的盐溶液中。

③有机溶剂分级分离：凡能与水以任意比例混合的有机溶剂，如
乙醇、甲醇、丙酮等，均可引起蛋白质沉淀。

④温度影响蛋白质溶解。

（2）根据电荷不同的分离方法
①电泳：蛋白质分子在高于或低于其pI的溶液中带净的负或正电荷，因此在电场中可以移动。

电泳迁移率的大小主要取决于蛋白质分
子所带电荷量以及分子大小。

②离子交换层析：一种用离子交换树脂作支持剂的层析法。

（3）根据相对分子质量不同的分析方法
①透析和超滤：透析是利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合
物分开的方法；超滤法是应用正压或离心力使蛋白质溶液透过有一定
截留分子量的超滤膜，达到浓缩蛋白质溶液的目的。

②密度梯度（区带）离心：利用物质密度的不同，经超速离心后，分布于不同的液层而分离。

超速离心也可用来测定蛋白质的分子量，
蛋白质的分子量与其沉降系数S成正比。

③凝胶过滤，又称分子筛层析，是一种柱层析。

（4）根据对配体的特异生物学亲和力不同的分离方法：亲和层析。

亲和层析是根据蛋白质能与特异的配体相结合而设计的方法，例
如抗原与抗体、激素和受体、酶与底物、酶与抑制剂等都能特异结合，这种特异结合是非共价可逆结合，首先形成蛋白质配体复合物，然后
通过改变溶液的pH、离子强度等使复合物解离，将被分离的物质洗脱下来，从而达到纯化的目的。

解析：空
2. 癌基因异常活化的常见机制有哪些？[中山大学2018研]
答案：癌基因异常活化的常见机制有以下几种：
（1）获得启动子与增强子
逆转录病毒感染细胞后，病毒基因组所携带的长末端重复序列（LTR内含较强的启动子和增强子）插入到细胞原癌基因附近或内部，可以启动下游邻近基因的转录和影响附近结构基因的转录水平，从而
使原癌基因过度表达或由不表达变为表达，导致细胞发生癌变。

如鸡
白细胞增生病毒引起的淋巴瘤，是由于该病毒DNA序列整合到宿主
正常的cmyc的基因附近，其LTR也同时被整合，成为cmyc的启动子。

（2）基因易位
染色体易位在肿瘤组织中非常常见，基因定位研究证明，在染色
体易位的过程中发生了某些基因易位和重排，使原来无活性的原癌基
因移至某些强的启动基因或增强子附近而被活化，因而原癌基因表达
增强，导致肿瘤的发生。

（3）原癌基因扩增
基因扩增是原癌基因数量的增加或表达活性的增强，产生过量的
表达蛋白也会导致肿瘤的发生。

（4）点突变
原癌基因在射线或化学致癌剂作用下，可能发生单个碱基的替换，即点突变，从而改变了表达蛋白的氨基酸组成，造成蛋白质结构的变异。

如ras族的癌基因，在正常细胞Hras中的GGC，在肿瘤细胞中
突变为GTC，由此造成编码的P21蛋白第12为氨基酸由正常细胞的甘氨酸变为肿瘤细胞的缬氨酸。

不同的原癌基因在不同情况下可通过不同的途径被激活，其结果
可以是：
①出现新的表达产物，即原来不表达的基因开始表达，或本不该
在这个时期表达的基因进行表达；
②出现过量的正常表达产物；
③出现异常，截短的表达产物。

解析：空
3. 比较分析基因组DNA文库和cDNA文库。

[北京科技大学2014研]答案：基因组DNA文库和cDNA文库的主要区别如下：（1）构建过程不同
①基因组DNA文库
a．用限制性内切酶切割细胞的整个基因组DNA，制备大小合适
的随机DNA片段。

b．将这些DNA片段与适当的载体连接成重组子。