肠道病毒71型真核双基因表达载体的构建

肠道病毒71型真核双基因表达载体的构建
姚相杰;何雅青;蔡春林;杨洪;冼慧霞;张海龙;罗敏;张仁利
【期刊名称】《检验医学与临床》
【年(卷),期】2012(000)023
【摘要】目的通过克隆肠道病毒71型结构前体蛋白P1和非结构蛋白3CD ，构
建共表达P1前体蛋白和非结构蛋白3CD的真核双基因表达载体.方法设计合成脑
心肌炎病毒(EMCV )IRES序列的特异性引物，克隆至真核表达载体pcDNA3.0上，命名为pc-IRES.从手足口病重症患者分离 EV71病毒株，经逆转录聚合酶链式反
应(RT-PCR)技术分别扩增出EV71病毒的 P1前体蛋白区与3CD区的片段，并将
其定向克隆至真核表达载体 pc-IRES载体中IRES序列的上游和下游，随后转化到大肠埃希菌DH5α中，最后经PCR和双酶切鉴定转化菌落.结果通过重组质粒p-IRES-P1-3CD进行酶切和DNA序列分析，重组真核双基因表达载体p-IRES-P1-
3CD构建成功.结论成功构建共表达EV71病毒P1前体蛋白和非结构蛋白3CD真核双基因表达载体，这将为下一步制备基于DNA载体的EV71病毒的类病毒颗粒疫苗打下基础.%10.3969/j.issn.1672-9455.2012.23.002
【总页数】3页(P2916-2918)
【作者】姚相杰;何雅青;蔡春林;杨洪;冼慧霞;张海龙;罗敏;张仁利
【作者单位】广东省深圳市疾病预防控制中心微生物检验科 518055;广东省深圳
市疾病预防控制中心微生物检验科 518055;广东省深圳市罗湖区疾病预防控制中
心微生物检验科 518020;广东省深圳市疾病预防控制中心微生物检验科 518055;
广东省深圳市疾病预防控制中心微生物检验科 518055;广东省深圳市疾病预防控
制中心微生物检验科 518055;广东省深圳市疾病预防控制中心微生物检验科518055;广东省深圳市疾病预防控制中心微生物检验科 518055
【正文语种】中文
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