二氧化硅—牛血清白蛋白颗粒制备及用于多西紫杉醇的载药研究

溶液 Ｌ Ｉ １ ，
次。
Ｊ Ｉ ； Ｌ ２ ０ 分钟 ，离心 Ｊ １ １ ｏ ． ５ Ｍ Ｎ ａ Ｃ Ｉ ｉ ＝ ｉ ＝ ； 液洗 ＝ 。 ｉ
由【 皋 】 ｌ 可 以 看 … ，水 解 法 制 备 得 到 的Ｓ ｉ Ｏ 为 网球 形 颗 粒 ，经 人 统 计碱 性 水 解 法 制 备 制 成 的 二 氧 化 硅 的 粒 径 分 布 任 为２ ９ ９±ｌ ０ ｎ ｍ范 围 ，而 包 裹 了牛 血 清 Ｆ ｛ 蛋 门 后 的 ｌ Ｉ 氧 化 硅 仍 保 持 球 形 结 构 如 ２ 所 爪 ，经 统 计 粒 径 为 ３ １ ４± ２ ９ ｎ ｍ范 围 『 人 Ｊ 。从粒 径结 果 来 看 ，包 裹 ｒ 牛 ｍ清 ｆ ｌ Ｉ 蛋
均一的以二氧化硅为核 的牛血清白蛋白纳米颗粒 。
２ 材料 与方法
２ ． １ 材 料 与试 剂
正硅酸乙酯 （ Ｔ Ｅ Ｏ Ｓ ），购 自西格玛公司；牛血清 白 蛋 白，购 自上海生工生物工程有限公 司；氨水 （ ２ ８ ％），
购 自富 宇精细化工；聚乙烯亚胺 （ Ｐ Ｅ Ｉ ），购 自西格玛公
修饰方法 。运用Ｌ Ｂ Ｌ 技术 ，二氧化硅母核表面荷有负电，
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如图科技 信 息 ２ ０ １ ４年第 ｏ ８期 。 Ｃ Ｈ Ｉ Ｎ Ａ Ｓ Ｃ Ｉ Ｅ Ｎ Ｃ Ｅ Ａ Ｎ Ｄ Ｔ Ｅ Ｃ Ｈ Ｎ ＯＬ Ｏ Ｇ Ｙ Ｉ Ｎ Ｆ ＯＲ ＭＡ Ｔ Ｉ ＯＮ Ａｐ ｒ ． ２ ０ １ ４
张一鸣 王元林 刘瑞斯 刘志国
哈 尔滨 １ ５ ０ ０ ４ ０ 东北林 业大 学森林 植物生态 学教育部重 点实验 室，黑龙 江
张 一 鸣
摘 要 本论 文主要 研 究以二氧化硅 为模板制 备均一 的牛血 清 白蛋 白颗 粒的方 法。我 们运 用 了纳米层层 自组装 法 （ Ｌ Ｂ Ｌ ），将牛血 清 白蛋 白逐 层 包裹 于纳米二 氧 化硅 球体 表 面，得 到 了均一 的 以二 氧化硅 为核 的牛血 清 白蛋 白纳米颗粒 。制
ＤＯＩ ：１ ０３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ １ — ８ ９ ７ ２ ． ２ ０ １ ４ ． ０ ８ ． ０ １ ７
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Hale Waihona Puke １ 概述 最 近 的 研 究结 果 显 示 ，新 型 的 白 蛋 白一 紫 杉醇 具 有 很 好 的 活性 和 较 低的 毒性 ，能够 使 用 更 高的 药物 剂 量 ，给 药 所 需 的时 间较短 ，并且 临床操 作 也 很 方便 ，不需 要特 殊 的 输 液 设备 和 提前 服 用抗 过 敏 的药 物 。这 一 重要 发 现 引发 了 研 究者 以 白蛋 白为 载体 载运 其 它抗 癌药 物的 研究 。 抗癌药物 紫杉醇 （ ｐ ａ ｃ ｌ ｉ ｔ ａ ｘ ｅ １ ） 、 多 西 紫 杉 醇 （ ｄ ｏ ｃ ｅ ｔ ａ ｘ ｅ １ ） 已被 广泛 地 应用 在 临床 上 的乳 腺癌 、卵巢 癌 和 非 小细 胞 肺癌 的 治疗 中 。但 由于 紫杉 烷 类药 物 本 身水 溶 性 比较 差 ，在 实际 的应 用 中需 要 制 备为 合 适 的制 剂 。关 于
备得 到 的牛 血 清 白蛋 白颗 粒具有较好 的单 分散 性和稳 定性 。我 们接 着探 索 了 这种牛血 清 白蛋 白颗 粒 用于抗 癌 药物 多西紫杉醇 的载药研 究，使 用高效液相 色谱 法测定 了多西紫杉 醇的浓度 。试验 结 果表明 ，在合 适 的条件下 ，这种牛 血 清 白蛋 白颗粒 对于抗癌 药物 多西紫杉 醇可达 到较 高的 包封 率和 载药率 。 因 而 ，我 们的这种制备方法有 望运 用于新型 的缓释制剂研 发中。 关键词 二氧化硅 ；牛 血清 白蛋 白；层层 自组装 ；多西紫杉 醇； 包封率
（ Ｔ Ｅ Ｍ ）下可观察其形貌 ，并可统计其粒径分布［ １ 】 。接着 我 们 使 用 层 层 组 装 法 将 牛 血 清 白蛋 白交 联 二 氧 化 硅 球 表
面 。层 层 自组装 （ １ ａ ｙ ｅ ｒ — ｂ ｙ — ｌ ａ ｙ ｅ ｒ ｓ ｅ ｌ ｆ — ａ ｓ ｓ ｅ ｍｂ ｌ ｙ ，Ｌ Ｂ Ｌ ） 是上 世纪９ ０ 年代快速发展起来 的一种简易 、多功能的表面
（ ２ ８ ％），反应３ ４ ， 时后，离心 ，用无水乙醇洗三次［ ３ ］ 。 ２ ． ２ ． ２ Ｌ Ｂ Ｌ 法组 装牛 血 清蛋 白于 二氧 化硅 表 面
① １ ２ ０ ｍ ｇ Ｓ ｉ Ｏ ，加入 到 ｌ ｍｇ ／ ｍｌ Ｐ Ｅ Ｉ（ ０ ． ５ Ｍ Ｎ ａ Ｃ １ ）
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中 国利 凌信 息 ２ ０ １ ４年 第 。 ８期 Ｃ ＨＩ Ｎ Ａ Ｓ Ｃ Ｉ Ｅ Ｎ Ｃ Ｅ ＡＮ Ｄ Ｔ Ｅ Ｃ Ｈ Ｎ ＯＬ Ｏ Ｇ Ｙ Ｉ Ｎ Ｆ ＯＲ ＭＡ Ｔ Ｉ ＯＮ Ａｐ ｒ ． ２ ０ １ ４
基础及 前沿
氧化硅一 牛血清 白蛋 白颗粒 制备及用于多西紫杉醇的载药研究
司；戌二醛 （ Ｇ Ａ），购 自 西格玛公司；Ｎ ａ Ｏ Ｈ；无水乙醇
均为 分析 纯 。 ２ ． ２ 实验方 法
２ ． ２ ． １ 水解法制取二氧化硅母核
３ ５ ℃条件 下 ，取 ２ ． ２ ３ ０ ｍｌ 正 硅 酸 乙酯 （ Ｔ Ｅ Ｏ Ｓ ） ，加 入 ￣ １ Ｊ ４ ３ ． ３ ３ ｍｌ 无水 乙醇 中 ，在 搅拌 的条 件 下逐滴 加４ ． ４ ４ ｍｌ 氨水
与带有正电的聚乙烯亚胺 （ Ｐ Ｅ Ｉ ）通过静电作用相结合【 ２ 】 ， 聚 乙 烯 亚胺 外 表 面 的 氨 基 可 与戊 二 醛 （ Ｇ Ａ）中 的醛 基 进
行 反应 ，戊二 醛 的 另外 一个 醛 基 与牛血 清 白蛋 白 中的 氨基 发 生 交联 ［ ３ ］ ，从 而 实 现 层 层组 装 。通过 上 述 方 法可 制 备 出
将抗癌药物紫杉醇 、多西紫杉醇制备为具有缓释型的制剂 是近 来 研究 的一 个 热点 。 在我们的研 究中，使用碱性水解法制备 了纳米二氧化 硅 母 核 。 该 方 法 原 料 简 单 ，实 验 条 件 易 控 制 ，可 以 获 得
粒 径 较 均 一 ，且 形 貌 规 则 的 二 氧 化 硅 母 核 。在 透 射 电 镜