过柱子我的经验总结
过柱子的经验总结
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过柱子的经验总结 Revised as of 23 November 2020过柱子的经验总结单一溶剂的极性大小顺序为:石油醚(小)→环己烷→四氯化碳→三氯乙烯→苯→甲苯→二氯甲烷→氯仿→乙醚→乙酸乙酯→乙酸甲酯→丙酮→正丙醇→甲醇→吡啶→乙酸(大)混合溶剂的极性顺序:苯∶氯仿(1+1)→环己烷∶乙酸乙酯(8+2)→氯仿∶丙酮(95+5)→苯∶丙酮(9+1)→苯∶乙酸乙酯(8+2)→氯仿∶乙醚(9+1)→苯∶甲醇(95+5)→苯∶乙醚(6+4)→环己烷∶乙酸乙酯(1+1)→氯仿∶乙醚(8+2)→氯仿∶甲醇(99+1)→苯∶甲醇(9+1)→氯仿∶丙酮(85+15)→苯∶乙醚(4+6)→苯∶乙酸乙酯(1+1)→氯仿∶甲醇(95+5)→氯仿∶丙酮(7+3)→苯∶乙酸乙酯(3+7)→苯∶乙醚(1+9)→乙醚∶甲醇(99+1)→乙酸乙酯∶甲醇(99+1)→苯∶丙酮(1+1)→氯仿∶甲醇(9+1)过柱子经验总结1, 选柱子:现在见到的柱子径高比一般在 1:5-10.2, 称量:100-300 目硅胶,称 30-70 倍于上样量;如果极难分,也可以用 100 倍量的硅胶书中写硅胶量是样品量的 30-40 倍,具体的选择要具体分析.如果所需组分和杂质分的比较开(是指在所需组分 Rf 在杂质相差以上) , 就可以少用硅胶.3, 选洗脱剂:一般淋洗剂是采用 TLC 分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂.极性小的用乙酸乙酯:石油醚系统;极性较大的用甲醇:氯仿系统;极性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系统.要使所需点在 Rf 值在左右的比较好.常用溶剂的极性顺序:石油醚<环己烷/己烷<苯乙醚<氯仿<乙酸乙酯 <正丁醇<丙酮<乙醇<甲醇<水. 一般把两种溶剂混合时, 采用高极性/低极性的体积比为 1/3 的混合溶剂. 拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸. 乙酸乙酯/石油醚= 4:1 可用 TLC 分开.乙酸乙酯和石油醚(60-90).4, 搅成匀浆:先把硅胶泡在烧杯中,用干硅胶体积一倍的溶剂泡,用超声波超半个小时,中间看到气泡时用玻璃棒搅一下.如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系,就用石油醚拌;如果洗脱剂是氯仿/醇体系,就用氯仿拌.5, 装柱: A, 用溶剂把柱子饱和一次, 因为溶剂和硅胶饱和时放出的热量可能使产品分解. B,将柱底用棉花塞紧,不必用海沙,加入约 1/3 体积石油醚(氯仿),装上蓄液球,打开柱下活塞,将匀浆一次倾入蓄液球内.随着沉降,会有一些硅胶沾在蓄液球内,用石油醚(氯仿)将其冲入柱中. C,装柱时一定要保证无气泡,同时敲打柱体使柱体更均匀,紧凑,装毕,用洗脱液冲三次.6, 压实:装柱完后,加入更多的石油醚,用双联球或气泵加压,直至流速恒定. 柱床约被压缩至 9/10 体积.无论走常压柱或加压柱,都应进行这一步,可使分离度提高很多,且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂.7, 上样:干法湿法都可以. A,在硅胶上层加少量无水硫酸钠(以免样品被洗脱剂冲散)取适量样溶液上样.上样后,加入一些洗脱剂,再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面.然后就可以放心地加入大量洗脱剂,而不会冲坏硅胶表面. B,用少量的溶剂溶样品加样,加完后将下面的活塞打开,待溶剂层下降至石英砂面时,再加少量的低极性溶剂,然后再打开活塞,如此两三次,一般石英砂就基本是白色的了.加入淋洗剂,一开始不要加压,等溶样品的溶剂和样品层有一段距离(2~4cm 就够了) ,再加压,这样避免了溶剂(如二氯甲烷等)夹带样品快速下行.8, 过柱和收集:柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡.太低的洗脱强度并不好,推荐用梯度洗脱.收集的例子:10mg 上样量,1g 硅胶 H, 收集馏分;1-2g 上样量,50g 硅胶(200-300 目) ,20-50ml 收集馏分.接收瓶一定要用可密封的.柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂,会被淋洗剂带到产品中的.9, 用少量的溶剂溶样品加样,加完后将下面的活塞打开.10,检测.要更多地使用专用喷显剂,如果仅用紫外灯,会损失较多产品,紫外的灵敏度一般比喷显剂底 1-2 个数量级.11, 送谱. 收集的产品旋干, 在送谱前通常需要重结晶. 如果样品太少或为液体, 可过一小凝胶柱,作为送谱前的最后纯化手段.可除去氢谱左右所谓的 "硅胶"峰.过柱子的经验常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。
有机化学实验中关于过柱的实验方法和技巧
![有机化学实验中关于过柱的实验方法和技巧](https://img.taocdn.com/s3/m/7016d71f11661ed9ad51f01dc281e53a58025130.png)
有机化学实验中关于过柱的实验方法和技巧关于过柱的实验方法和技巧(注意:有机溶剂对身体特有害别是心肺;肝脏等所有过柱操作都要在通风橱里进行!!常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。
我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。
由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。
1、柱子可以分为:加压,常压,减压压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。
所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。
减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发(有时在柱子外面有水汽凝结),以及有些比较易分解的东西可能得不到,而且还必须同时使用水泵抽气(很大的噪音,而且时间长)。
以前曾经大量的过减压柱,对它有比较深厚的感情,但是自从尝试了加压后,就几乎再也没动过减压的念头了。
加压柱是一种比较好的方法,与常压柱类似,只不过外加压力使淋洗剂走的快些。
压力的提供可以是压缩空气,双连球或者小气泵(给鱼缸供气的就行)。
特别是在容易分解的样品的分离中适用。
压力不可过大,不然溶剂走的太快就会减低分离效果。
个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。
2、关于柱子的尺寸,应该是粗长的最好柱子长了,相应的塔板数就高。
柱子粗了,上样后样品的原点就小(反映在柱子上就是样品层比较薄),这样相对的减小了分离的难度。
试想如果柱子十厘米,而样品就有二厘米,那么分离的难度可想而知,恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了。
而如果样品层只有0.5厘米,那么各组分就比较容易得到完全分离了。
当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了,不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了(有些不环保的说,不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费)。
现在见到的柱子径高比一般在1:5~10,书中写硅胶量是样品量的30~40倍,具体的选择要具体分析。
柱层析的一些心得
![柱层析的一些心得](https://img.taocdn.com/s3/m/1c30cc6f25c52cc58bd6be51.png)
常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。
我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。
由于柱分离的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。
1.吸附剂常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、氧化镁、碳酸钙和活性炭等:吸附剂一般要经过纯化和活性处理,颗粒大小应当均匀。
对吸附剂来说粒子小、表面积大,吸附能力就高,但是颗粒小时,溶剂的流速就太慢,因此应根据实际分离需要而定。
供柱色谱使用的氧化铝有酸性、中性和碱性3种。
酸性氧化铝是用1%盐酸浸泡后,用蒸馏水洗至氧化铝的悬浮液pH为4,用于分离酸性物质;中性氧化铝的pH约为7.5,用于分离中性物质;碱性氧化铝的pH约为10,用于胺或其它碱性化合物的分离。
因硅胶略带酸性,只能用于对酸不敏感的化合物的分离。
常用300-400目的柱硅胶或H 硅胶。
若化合物的R f值相差较大,则可考虑使用200-300目硅胶以加快层析速度。
另:因吸附剂的比表面较大,天气潮湿时或长期放置中吸附的水分会对分离效果产生极大的影响(相当于大大增加了固定相的极性导致样品分不开),因此应将吸附剂放入90~100度烘箱内烘2小时后,取出在干燥器中冷却后再使用。
使用的硅胶,不用时一定要密封,防止吸潮。
TLC所用的硅胶板一定要保存在干燥器里面,或使用前在红外烘箱里干燥一段时间。
2.溶质的结构与吸附能力的关系化合物的吸附性与它们的极性成正比,化合物分子中含有极性较大的基团时,吸附性也较强,氧化铝对各种化合物的吸附性按以下次序递减:酸和碱>醇、胺、硫醇>酯、醛、酮>芳香族化合物>卤代物、醚>烯>饱和烃3.柱子可以分为:加压,常压,减压。
压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。
所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。
加压柱是一种比较好的方法,与常压柱类似,只不过外加压力使淋洗剂走的快些。
2024年过柱子经验总结样本(2篇)
![2024年过柱子经验总结样本(2篇)](https://img.taocdn.com/s3/m/de86b25bbb1aa8114431b90d6c85ec3a87c28bfa.png)
2024年过柱子经验总结样本柱子经验总结——____年____年,对我而言,是一个充满挑战和机遇的一年。
在这一年里,我经历了许多重要的事情,获得了宝贵的经验和教训。
在过去的365天里,柱子经验成为了我前行的指南,在困难和疲惫的时候给予了我坚持下去的力量。
以下是我对____年柱子经验的总结,希望对以后的我有所帮助。
首先,我学会了坚持。
在____年,我经历了许多困难和挫折。
不论是学习上的压力,还是工作中的困难,我都深刻地体会到了坚持的重要性。
在困难面前,我不再轻易放弃,而是坚持下去,寻求解决问题的方法。
坚持不仅给我带来了更多的机会和成就,还培养了我的毅力和耐力。
其次,我学会了适应。
____年是一个充满变革和不确定的时期。
在这一年里,我遇到了许多新的环境和挑战。
面对这些变化,我迅速适应了新的环境和要求。
我学会了灵活应对,接受新的想法和方法,并且能够迅速调整自己的计划和行动。
适应能力成为我在不确定环境下生存和获得成功的关键。
另外,我在____年学会了团队合作。
团队合作是一项重要的技能,尤其是在工作和学习中。
通过与他人合作,我学会了倾听和理解他人的观点,积极参与组织和协调团队工作。
我也学会了与不同的人合作,充分利用每个人的优势,实现团队的最佳效能。
团队合作不仅让我获得了更好的工作和学习成果,还增强了我与他人的沟通能力。
此外,我在____年明白了自律和计划的重要性。
在面对繁忙的日程和琐碎的任务时,我必须做出选择并优化我的时间。
通过制定合理的计划和设定明确的目标,我更好地管理了我的时间和能量。
我学会了优先处理重要的事情,并且不再拖延。
自律和计划让我更有效率地完成工作和学习任务,也提高了我的时间管理技巧。
最后,我在____年认识到了积极思考的重要性。
积极思考是保持心态的关键。
在面对困难和挑战时,积极思考让我能够看到问题的解决办法和积极的一面。
它还提醒我要珍惜现有的财富和机会,时刻保持感恩之心。
积极思考赋予了我坚定的信念和积极的动力,让我迎接未来的挑战。
过柱子
![过柱子](https://img.taocdn.com/s3/m/8636b51cc5da50e2524d7f66.png)
过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。
我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。
由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。
柱子可以分为:加压,常压,减压。
压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。
所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。
减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发(有时在柱子外面有水汽凝结),以及有些比较易分解的东西可能得不到,而且还必须同时使用水泵抽气(很大的噪音,而且时间长)。
以前曾经大量的过减压柱,对它有比较深厚的感情,但是自从尝试了加压后,就几乎再也没动过减压的念头了。
加压柱是一种比较好的方法,与常压柱类似,只不过外加压力使淋洗剂走的快些。
压力的提供可以是压缩空气,双连球或者小气泵(给鱼缸供气的就行)。
特别是在容易分解的样品的分离中适用。
压力不可过大,不然溶剂走的太快就会减低分离效果。
个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。
关于柱子的尺寸,应该是粗长的最好。
柱子长了,相应的塔板数就高。
柱子粗了,上样后样品的原点就小(反映在柱子上就是样品层比较薄),这样相对的减小了分离的难度。
试想如果柱子十厘米,而样品就有二厘米,那么分离的难度可想而知,恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了。
而如果样品层只有0.5厘米,那么各组分就比较容易得到完全分离了。
当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了,不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了(有些不环保的说,不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费)。
现在见到的柱子径高比一般在1:5~10,书中写硅胶量是样品量的30~40倍,具体择要具体分析。
如果所需组分和杂质分的比较开(是指在所需组分rf在 0.2~0.4,杂质相差0.1以上),就可以少用硅胶,用小柱子(例如200毫克的样品,用2cm×20cm的柱子);如果相差不到0.1,就要加大柱子,我觉得可以增加柱子的直径,比如用3cm的,也可以减小淋洗剂的极性等等。
过柱子经验总结模板
![过柱子经验总结模板](https://img.taocdn.com/s3/m/f80f1650854769eae009581b6bd97f192379bf68.png)
过柱子经验总结模板标题:过柱子经验总结——突破自我,创造未来引言:过柱子是一项古老而又现代的训练方法,它可以帮助人们克服内心的恐惧和困难,突破自我,创造未来。
在过柱子的过程中,我收获了很多宝贵的经验,在此将这些经验总结为以下几个方面,希望能够对其他人有所启发和帮助。
一、克服恐惧的关键——积极心态过柱子是一项需要勇气和决心的挑战,而面对高高耸立的柱子,最重要的是维持一种积极的心态。
在过柱子的训练中,我深刻体会到,只有积极面对困难和挑战,才能克服恐惧,取得成功。
因此,保持积极的心态是克服恐惧的关键。
二、制定合理的目标——突破自我在过柱子的过程中,制定合理的目标非常重要。
合理的目标可以为我们提供一个明确的方向,并激发我们的内在动力。
同时,制定目标也需要考虑自身的实际情况和能力,避免过高或过低的设定,以免造成心理上的挫败感或过于轻松的舒适区。
通过设定合理的目标,我们可以逐步突破自我,不断实现自我超越。
三、坚持训练——形成良好的习惯过柱子并非一蹴而就的事情,它需要我们付出长时间和大量的努力。
在训练过程中,我们要坚持不懈,每天都保持一定的训练时间。
只有坚持训练,才能逐步提高自己的技巧,增强自己的信心。
通过持之以恒的训练,我们可以形成良好的习惯,并养成坚持不懈的品质。
四、与团队合作——共同成长过柱子是一项需要团队合作的训练方法。
在过程中,与队友们互相鼓励、互相配合,共同克服困难,获得成功。
通过与团队合作,我们不仅能够加强彼此之间的关系,还能够共同成长。
团队合作可以帮助我们更好地理解和倾听他人的观点,提高沟通能力和协作能力,让我们在过柱子的训练中收获更多。
五、积极反思和总结经验——持续进步在过柱子的过程中,积极反思和总结经验是十分重要的。
通过反思,我们可以发现自己的不足之处,并寻找改进的途径。
通过总结经验,我们可以汲取教训,吸取经验,不断进步。
反思和总结是一个持续的过程,它可以帮助我们在训练中不断提高自己,并取得更好的成绩。
过柱子经验总结范文(2篇)
![过柱子经验总结范文(2篇)](https://img.taocdn.com/s3/m/5119e770bdd126fff705cc1755270722192e59b9.png)
过柱子经验总结范文框架柱涨模技术交底荥阳市中医院急救综合楼工程,现已完成到主体四层混凝土浇筑工作,在三层混凝土柱模板拆除后,发现在二至三层柱出现胀模现象,胀模主要集中在二层柱顶和三层柱底,胀模大约为1cm-3cm之间,虽然不影响框架柱的结构质量,但影响外装饰及外观质量,为了消除该部分存在的质量缺陷,经项目部分析该部分形成的原因之后,特制订该处理方案。
施工准备:计划修补的柱子采用标记法进行标注清楚,并采用墨线把涨模部分弹出,核对是否正确,并有核对记录。
由于该工程修补需要在外防护架上进行施工,在施工之前,为了保证施工中的安全,必须对操作人员进行安全及技术的交底。
首先检查外防护架体搭设是否合格,是否存在挑头板等安全隐患,对于不合格的部分整改合格后再进行修补。
要求工人必须系安全带、佩戴安全帽。
修补过程中现场施工管理人员应进行现场技术指导和检查监督工作。
等到柱混凝土强度达到____%以上时再进行修补及处理。
施工方法及工艺:施工工艺:标注框架柱涨模部分→涨模部分弹线→加固架体→剔凿涨模部分→清扫松散部分混凝土→浇水湿润→对局部进行水泥砂浆拉毛首先检查涨模部分具____置,找准位置,在平面图上标注上具体部位及标高。
然后进行吊线、弹线找出涨模具____置。
对于存在安全隐患的部位进行整改到位。
剔凿涨模部分的混凝土,剔凿采用人工进行凿除,凿除中禁止裸露钢筋,禁止采用电铲、电锤等电动工具进行剔凿,人工凿除应采用竖向进行剔凿,最后凿除深度为斜纹状,深度不能大于____mm.并保持表面不能有松散的石子和混凝土颗粒。
要求凿除后的混凝土表面观感达到斩假石的效果。
对于凿除后的混凝土部分,用钢刷刷干净,用水进行冲洗干净,使其无松动石子及混凝土浮浆。
剔凿后然后采用801胶素水泥砂浆在需要修补的混凝土表面涂刷一层,以保证新旧混凝土结合牢固。
然后采用1:2水泥砂浆进行凿除面的修补工作,要求表面毛光。
等到水泥砂浆初硬后,应采用塑料薄膜进行养护,以保证修补的混凝土的强度。
HPLC过柱的经验
![HPLC过柱的经验](https://img.taocdn.com/s3/m/a524af49fe4733687e21aa44.png)
HPLC过柱的经验.txt台湾一日不收复,我一日不过4级!如果太阳不出来了,我就不去上班了;如果出来了,我就继续睡觉!过柱的经验之谈过柱的经验之谈从96年开始过柱子,差点就八年抗战了。
常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。
我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。
由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。
柱子可以分为:加压,常压,减压。
压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。
所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。
减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发(有时在柱子外面有水汽凝结),以及有些比较易分解的东西可能得不到,而且还必须同时使用水泵抽气(很大的噪音,而且时间长)。
以前曾经大量的过减压柱,对它有比较深厚的感情,但是自从尝试了加压后,就几乎再也没动过减压的念头了。
加压柱是一种比较好的方法,与常压柱类似,只不过外加压力使淋洗剂走的快些。
压力的提供可以是压缩空气,双连球或者小气泵(给鱼缸供气的就行)。
特别是在容易分解的样品的分离中适用。
压力不可过大,不然溶剂走的太快就会减低分离效果。
个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。
关于柱子的尺寸,应该是粗长的最好。
柱子长了,相应的塔板数就高。
柱子粗了,上样后样品的原点就小(反映在柱子上就是样品层比较薄),这样相对的减小了分离的难度。
试想如果柱子十厘米,而样品就有二厘米,那么分离的难度可想而知,恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了。
而如果样品层只有0.5厘米,那么各组分就比较容易得到完全分离了。
当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了,不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了(有些不环保的说,不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费)。
现在见到的柱子径高比一般在1:5~10,书中写硅胶量是样品量的30~40倍,具体的选择要具体分析。
过柱子经验总结模版(2篇)
![过柱子经验总结模版(2篇)](https://img.taocdn.com/s3/m/0b5fedfbd0f34693daef5ef7ba0d4a7303766c53.png)
过柱子经验总结模版湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后,再填入柱子中,然后再加压用淋洗剂"走柱子",本法最大的优点是一般柱子装的比较结实,没有气泡。
干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶,然后再轻轻敲打柱子两侧,至硅胶界面不再下降为止,然后再填入硅胶至合适高度,最后再用油泵直接抽,这样就会使得柱子装的很结实。
接着是用淋洗剂"走柱子",一般淋洗剂是采用tlc分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。
通常上面加压,下面再用油泵抽,这样可以加快速度。
干法装柱较方便,但最大的缺陷在于"走柱子"时,由于溶剂和硅胶之间的吸附放热(可以用手摸柱子明显感觉到),容易产生气泡,这一点在使用低沸点的淋洗剂时如乙醚,二氯甲烷更为明显。
虽然产生的气泡在加压的情况下不易察觉,但是,一旦撤去压力,如在上样、加溶剂等操作的时候,气泡就会释放出来,严重时,整个柱子变花,样品不可能平整地通过,当然也就谈不上分离了。
解决的办法是:第一、硅胶一定要天结实;第二、一定要用较多的溶剂"走柱子",一定要到柱子的下端不再发烫,恢复到室温后再撤去压力。
也有介绍在硅胶的最上层填上一小层石英砂,防止添加溶剂的时候,使得样品层不再整齐。
但我的感觉是如果小心上样,添加溶剂,则没有这个必要。
上样也有干法和湿法之分:干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。
如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。
干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。
湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶头滴管转移得到的溶液,沿着层析柱内壁均匀加入。
然后用少量芗洗涤后,再加入。
湿法较方便,熟手一般采用此法关于tlc和柱层析之我的体会(转)柱层析和tlc是有机化学工作者必须下苦功夫的两项实验技术。
这两项技术掌握与否,对于提高实验的效率至关重要。
这些合成经验总结超实用
![这些合成经验总结超实用](https://img.taocdn.com/s3/m/85612eed951ea76e58fafab069dc5022aaea46fc.png)
这些合成经验总结超实⽤过柱的实验⽅法和技巧注意:有机溶剂对⾝体特有害别是⼼肺;肝脏等所有过柱操作都要在通风橱⾥进⾏!!常说的过柱⼦应该叫柱层析分离,也叫柱⾊谱。
我们常⽤的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。
由于柱分的经验成分太多,所以下⾯我就⼏年来过柱的体会写些⼼得,希望能有所帮助。
1、柱⼦可以分为:加压,常压,减压压⼒可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱⼦的塔板数。
所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最⾼的,但是时间也最长,⽐如天然化合物的分离,⼀个柱⼦⼏个⽉也是有的。
减压柱能够减少硅胶的使⽤量,感觉能够节省⼀半甚⾄更多,但是由于⼤量的空⽓通过硅胶会使溶剂挥发(有时在柱⼦外⾯有⽔汽凝结),以及有些⽐较易分解的东西可能得不到,⽽且还必须同时使⽤⽔泵抽⽓(很⼤的噪⾳,⽽且时间长)。
以前曾经⼤量的过减压柱,对它有⽐较深厚的感情,但是⾃从尝试了加压后,就⼏乎再也没动过减压的念头了。
加压柱是⼀种⽐较好的⽅法,与常压柱类似,只不过外加压⼒使淋洗剂⾛的快些。
压⼒的提供可以是压缩空⽓,双连球或者⼩⽓泵(给鱼缸供⽓的就⾏)。
特别是在容易分解的样品的分离中适⽤。
压⼒不可过⼤,不然溶剂⾛的太快就会减低分离效果。
个⼈觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是⽐较适⽤的。
2、关于柱⼦的尺⼨,应该是粗长的最好柱⼦长了,相应的塔板数就⾼。
柱⼦粗了,上样后样品的原点就⼩(反映在柱⼦上就是样品层⽐较薄),这样相对的减⼩了分离的难度。
试想如果柱⼦⼗厘⽶,⽽样品就有⼆厘⽶,那么分离的难度可想⽽知,恐怕要⽤很低极性的溶剂慢慢冲了。
⽽如果样品层只有0.5厘⽶,那么各组分就⽐较容易得到完全分离了。
当然采⽤粗⼤的柱⼦要牺牲⽐较多的硅胶和溶剂了,不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了(有些不环保的说,不过溶剂回收重蒸后也就减⼩了部分浪费)。
现在见到的柱⼦径⾼⽐⼀般在1:5~10,书中写硅胶量是样品量的30~40倍,具体的选择要具体分析。
关于过柱的实验方法和技巧
![关于过柱的实验方法和技巧](https://img.taocdn.com/s3/m/fbbf71ed941ea76e58fa045e.png)
无意中找到这个感觉很不错。
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我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。
由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。
1、柱子可以分为:加压,常压,减压压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。
所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。
减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发(有时在柱子外面有水汽凝结),以及有些比较易分解的东西可能得不到,而且还必须同时使用水泵抽气(很大的噪音,而且时间长)。
以前曾经大量的过减压柱,对它有比较深厚的感情,但是自从尝试了加压后,就几乎再也没动过减压的念头了。
加压柱是一种比较好的方法,与常压柱类似,只不过外加压力使淋洗剂走的快些。
压力的提供可以是压缩空气,双连球或者小气泵(给鱼缸供气的就行)。
特别是在容易分解的样品的分离中适用。
压力不可过大,不然溶剂走的太快就会减低分离效果。
个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。
2、关于柱子的尺寸,应该是粗长的最好柱子长了,相应的塔板数就高。
柱子粗了,上样后样品的原点就小(反映在柱子上就是样品层比较薄),这样相对的减小了分离的难度。
试想如果柱子十厘米,而样品就有二厘米,那么分离的难度可想而知,恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了。
而如果样品层只有0.5厘米,那么各组分就比较容易得到完全分离了。
当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了,不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了(有些不环保的说,不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费)。
现在见到的柱子径高比一般在1:5~10,书中写硅胶量是样品量的30~40倍,具体的选择要具体分析。
过柱子经验
![过柱子经验](https://img.taocdn.com/s3/m/d919f8583b3567ec102d8a52.png)
怎样选择展开剂展开剂的选择最近刚进实验室,用TLC对反应进行检测,但是关于展开剂的资料不多,我们实验室大多就是两个体系:石油醚/乙酸乙酯,氯仿/甲醇,其他的就很少了,所以我下决心把这个实验室比较常用的技术搞清楚。
一种简单的办法是根据你产物的溶解性选择一种极性最强的溶剂学(如醇类,乙氰等),再根据你实际展开的情况慢慢加入极性弱的溶剂(如四氯化碳、石油醚、二氯甲烷等)调节体系的极性。
以得到最好的展开效果。
把我的祖传秘方告诉你吧PE(60-90)EtAc/PE=1:2EtAc/PE/AcOH=15:5:1EtAc/AcOH/n-Butanol/H2O=2:1:1:18年来我用这四种体系,没有出现过什么问题我一直在用的是乙酸乙酯:环已烷,不断调节比例,直到有满意的Rf值,有拖尾时可能要加酸或碱,我一般乙酸和三乙胺。
我用了好几年了,都还好。
不妨一试!氨基酸都有专用的展开剂,常用丁醇和水,再加酸碱选择展开剂一般要用混合溶剂:一般要有一种对所要展开样品溶解度较大的溶剂,视样品的极性,再选用相应的体系。
极性小的用乙酸乙酯:石油醚系统极性较大的用甲醇:氯仿系统极性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系统拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸(应该交好)甲醇:氯仿对于胺类比较好我常用的展开剂有:氯仿/甲醇;环已烷/丙酮;醋酸乙酯/石油醚;甲醇/吡啶/水;等.本人用过的展开系统中,苯-丙酮用的最多,通过调节不同比例可以得到较好的效果俺的:EtOAc/HexanesCh2Cl2(EtOAc)/MeOH,0-1% TEA or NH3极性乙酸乙酯和非极性的石油醚按不同比例混合对一般的都能适应人民卫生出版社的《分析化学》(下册)有专门的介绍,很详细。
我一般用乙酸乙酯和石油醚配成不同比例的混合溶剂。
实验时调整至Rf=0.3--------0.5我们做的氨基酸,用的都是丁醇:醋酸:水二氯甲烷:甲醇,调节不同的配比基本解决大多数问题. 用二氯甲烷与甲醇体系非常有用,只要调整好比例。
2024年过柱子经验总结(三篇)
![2024年过柱子经验总结(三篇)](https://img.taocdn.com/s3/m/1a74dca24793daef5ef7ba0d4a7302768f996f7e.png)
2024年过柱子经验总结在____年通过柱子的过程中,我收获了很多宝贵的经验和教训。
这些经验和教训对我个人的成长和未来的发展具有重要的意义。
以下是我对这些经验的总结,总结内容超过____字,但是我会尽量简洁明了地描述每一点。
1. 目标设定的重要性在通过柱子的过程中,我意识到设定明确的目标非常重要。
没有目标,就没有方向和动力。
通过设定明确的目标,我能够更好地规划我的行动和努力。
在设置目标时,我要考虑到它们的可行性和具体性,并且要将它们划分为短期和长期目标,以便更好地追踪和衡量我的进展。
2. 自我反思的价值回顾柱子过程中的经验,我发现自我反思是非常宝贵的。
通过反思,我能够了解自己的各种优点和不足,并从中汲取经验教训,进而改进自己。
自我反思还可以帮助我识别和解决潜在的问题,并找到适合自己的解决方案。
因此,我要养成定期自我反思的习惯,不断调整自己的策略和行动。
3. 坚持不懈的重要性通过柱子的过程中,我体会到了坚持不懈的重要性。
坚持不懈是实现目标的关键,即使在面对困难和挑战时也不能退缩。
坚持不懈需要毅力和决心,而在面临挫折时需要保持乐观和积极的心态。
我要时刻提醒自己坚持下去,不轻易放弃,并为实现目标而努力奋斗。
4. 团队合作的价值通过柱子的经历,我了解到团队合作的价值非常重要。
合作能够将每个人的优点和才能发挥到最大,共同实现更大的目标。
在团队合作中,我学会了倾听和尊重他人的意见,同时也学会了与他人有效地沟通和合作。
团队合作不仅可以提高效率和成果,还可以培养人际关系和建立合作网络。
因此,我要积极主动地参与团队合作,并为团队的成功贡献自己的力量。
5. 灵活应变的能力在____年通过柱子的过程中,我发现灵活应变的能力非常重要。
柱子是一个充满不确定性和变化的环境,需要我们能够迅速适应和应对不同的情况。
灵活应变需要我们具备开放的心态和适应新事物的能力,同时也需要我们有创造性和决断力。
因此,我要培养自己的灵活应变能力,不断学习和适应新的知识和技能,以应对不同的挑战。
2024年过柱子经验总结(三篇)
![2024年过柱子经验总结(三篇)](https://img.taocdn.com/s3/m/689ae2e0970590c69ec3d5bbfd0a79563d1ed445.png)
2024年过柱子经验总结2024年我度过了一个难忘的柱子经验,让我学到了许多宝贵的经验和教训。
以下是我的总结,总共____字。
首先,柱子经验是一个我从未尝试过的挑战。
在2024年开始之前,我决定给自己设定一个目标并迎接这个挑战。
为了准备好这个挑战,我做了很多调查,并阅读了大量的资料来了解柱子经验的要求和技巧。
在挑战开始的第一天,我感到非常迷茫和不知所措。
站在柱子上,我意识到自己没有足够的平衡感和身体力量来保持稳定。
然而,我没有放弃,而是坚持下去,并设定了一个小目标,每天尽量多站立一会儿。
随着时间的推移,我逐渐掌握了站在柱子上的技巧。
我发现保持平衡的关键是集中注意力和放松身体。
在开始时,我经常一失手就摔下来,但我意识到这是一个学习的过程,而我需要不断地尝试和调整自己的动作。
在柱子上度过的时间越长,我越能够获得内心的平静和稳定。
我发现这是一种锻炼耐心和坚持的意志力的绝佳方式。
有时候,我会感到乏味和单调,但我通过专注于自己的呼吸和身体感受来保持动力。
柱子经验也给了我机会认识到自己的身体的潜力。
在挑战的过程中,我发现自己的身体逐渐变得更加灵活和强壮。
通过不断地练习和挑战自己的极限,我能够做到一些我以前认为不可能的事情。
除了身体上的收获,柱子经验还让我明白了团队合作的重要性。
在挑战的过程中,我结识了许多志同道合的人,我们共同努力,互相支持。
我们通过分享经验和技巧,帮助彼此克服困难,并共同成长。
在柱子经验之后,我深深感到自己变得更加坚韧和自信。
这个挑战让我面对了许多困难和挑战,但我学会了从中学习和成长。
我学会了不轻易放弃,坚持不懈地追求自己的目标。
自柱子经验之后,我将这种坚韧和自信运用到了其他方面的生活中。
无论是在学习、工作还是其他挑战中,我都能够更加积极地迎接困难,并不断努力提升自己。
总的来说,2024年是我一生中最具挑战性和有意义的一年之一。
通过柱子经验,我学到了许多宝贵的经验和教训。
我明白了困难和挑战的重要性,也意识到了自己的潜力和能力。
过柱子的经验总结
![过柱子的经验总结](https://img.taocdn.com/s3/m/14d31d20e2bd960590c67749.png)
过柱子的经验总结单一溶剂的极性大小顺序为:石油醚(小)→环己烷→四氯化碳→三氯乙烯→苯→甲苯→二氯甲烷→氯仿→乙醚→乙酸乙酯→乙酸甲酯→丙酮→正丙醇→甲醇→吡啶→乙酸(大)混合溶剂的极性顺序:苯∶氯仿(1+1)→环己烷∶乙酸乙酯(8+2)→氯仿∶丙酮(95+5)→苯∶丙酮(9+1)→苯∶乙酸乙酯(8+2)→氯仿∶乙醚(9+1)→苯∶甲醇(95+5)→苯∶乙醚(6+4)→环己烷∶乙酸乙酯(1+1)→氯仿∶乙醚(8+2)→氯仿∶甲醇(99+1)→苯∶甲醇(9+1)→氯仿∶丙酮(85+15)→苯∶乙醚(4+6)→苯∶乙酸乙酯(1+1)→氯仿∶甲醇(95+5)→氯仿∶丙酮(7+3)→苯∶乙酸乙酯(3+7)→苯∶乙醚(1+9)→乙醚∶甲醇(99+1)→乙酸乙酯∶甲醇(99+1)→苯∶丙酮(1+1)→氯仿∶甲醇(9+1)过柱子经验总结1, 选柱子:现在见到的柱子径高比一般在 1:5-10.2, 称量:100-300 目硅胶,称 30-70 倍于上样量;如果极难分,也可以用 100 倍量的硅胶书中写硅胶量是样品量的 30-40 倍,具体的选择要具体分析.如果所需组分和杂质分的比较开(是指在所需组分 Rf 在 0.2--0.4,杂质相差 0.1 以上) ,就可以少用硅胶.3, 选洗脱剂:一般淋洗剂是采用 TLC 分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂.极性小的用乙酸乙酯:石油醚系统;极性较大的用甲醇:氯仿系统;极性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系统.要使所需点在 Rf 值在 0.2-0.3 左右的比较好.常用溶剂的极性顺序:石油醚<环己烷/己烷<苯乙醚<氯仿<乙酸乙酯 <正丁醇<丙酮<乙醇<甲醇<水. 一般把两种溶剂混合时, 采用高极性/低极性的体积比为 1/3 的混合溶剂. 拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸. 乙酸乙酯/石油醚= 4:1 可用 TLC 分开.乙酸乙酯和石油醚(60-90).4, 搅成匀浆:先把硅胶泡在烧杯中,用干硅胶体积一倍的溶剂泡,用超声波超半个小时,中间看到气泡时用玻璃棒搅一下.如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系,就用石油醚拌;如果洗脱剂是氯仿/醇体系,就用氯仿拌.5, 装柱: A, 用溶剂把柱子饱和一次, 因为溶剂和硅胶饱和时放出的热量可能使产品分解. B,将柱底用棉花塞紧,不必用海沙,加入约 1/3 体积石油醚(氯仿),装上蓄液球,打开柱下活塞,将匀浆一次倾入蓄液球内.随着沉降,会有一些硅胶沾在蓄液球内,用石油醚(氯仿)将其冲入柱中. C,装柱时一定要保证无气泡,同时敲打柱体使柱体更均匀,紧凑,装毕,用洗脱液冲三次.6, 压实:装柱完后,加入更多的石油醚,用双联球或气泵加压,直至流速恒定. 柱床约被压缩至 9/10 体积.无论走常压柱或加压柱,都应进行这一步,可使分离度提高很多,且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂.7, 上样:干法湿法都可以. A,在硅胶上层加少量无水硫酸钠(以免样品被洗脱剂冲散)取适量样溶液上样.上样后,加入一些洗脱剂,再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面.然后就可以放心地加入大量洗脱剂,而不会冲坏硅胶表面. B,用少量的溶剂溶样品加样,加完后将下面的活塞打开,待溶剂层下降至石英砂面时,再加少量的低极性溶剂,然后再打开活塞,如此两三次,一般石英砂就基本是白色的了.加入淋洗剂,一开始不要加压,等溶样品的溶剂和样品层有一段距离(2~4cm 就够了) ,再加压,这样避免了溶剂(如二氯甲烷等)夹带样品快速下行.8, 过柱和收集:柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡.太低的洗脱强度并不好,推荐用梯度洗脱.收集的例子:10mg 上样量,1g 硅胶 H,0.5ml 收集馏分;1-2g 上样量,50g 硅胶(200-300 目) ,20-50ml 收集馏分.接收瓶一定要用可密封的.柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂,会被淋洗剂带到产品中的.9, 用少量的溶剂溶样品加样,加完后将下面的活塞打开.10,检测.要更多地使用专用喷显剂,如果仅用紫外灯,会损失较多产品,紫外的灵敏度一般比喷显剂底 1-2 个数量级.11, 送谱. 收集的产品旋干, 在送谱前通常需要重结晶. 如果样品太少或为液体, 可过一小凝胶柱,作为送谱前的最后纯化手段.可除去氢谱 1.5ppm 左右所谓的 "硅胶"峰.过柱子的经验常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。
过柱的方法和技巧
![过柱的方法和技巧](https://img.taocdn.com/s3/m/c8b40adaaa00b52acfc7ca9c.png)
关于过柱的实验方法和技巧(注意:有机溶剂对身体特有害别是心肺;肝脏等所有过柱操作都要在通风橱里进行!!常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。
我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。
由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。
1、柱子可以分为:加压,常压,减压压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。
所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。
减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发(有时在柱子外面有水汽凝结),以及有些比较易分解的东西可能得不到,而且还必须同时使用水泵抽气(很大的噪音,而且时间长)。
以前曾经大量的过减压柱,对它有比较深厚的感情,但是自从尝试了加压后,就几乎再也没动过减压的念头了。
加压柱是一种比较好的方法,与常压柱类似,只不过外加压力使淋洗剂走的快些。
压力的提供可以是压缩空气,双连球或者小气泵(给鱼缸供气的就行)。
特别是在容易分解的样品的分离中适用。
压力不可过大,不然溶剂走的太快就会减低分离效果。
个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。
2、关于柱子的尺寸,应该是粗长的最好柱子长了,相应的塔板数就高。
柱子粗了,上样后样品的原点就小(反映在柱子上就是样品层比较薄),这样相对的减小了分离的难度。
试想如果柱子十厘米,而样品就有二厘米,那么分离的难度可想而知,恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了。
而如果样品层只有0.5厘米,那么各组分就比较容易得到完全分离了。
当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了,不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了(有些不环保的说,不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费)。
现在见到的柱子径高比一般在1:5~10,书中写硅胶量是样品量的30~40倍,具体的选择要具体分析。
小木虫 分离 过柱子经验
![小木虫 分离 过柱子经验](https://img.taocdn.com/s3/m/13a7417e7e21af45b307a8f2.png)
柱层析浅谈极性小的用乙酸乙酯:石油醚系统极性较大的用甲醇:氯仿系统极性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系统拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸硅胶柱层析下面介绍惯用的方法:匀浆法。
1。
称量。
200-300目硅胶,称30-70倍于上样量;如果极难分,也可以用100倍量的硅胶H。
干硅胶的视密度在0.4左右,所以要称40g硅胶,用烧杯量100ml 也可以。
2。
搅成匀浆。
加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。
如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系,就用石油醚拌;如果洗脱剂是氯仿/醇体系,就用氯仿拌。
如果不能搅成匀浆,说明溶剂中含水量太大,尤其是乙酸乙酯/丙酮,如果不与水配伍走分配色谱的话,必须预先用无水硫酸钠久置干燥。
氯仿用无水氯化钙干燥,以除去1%的醇。
如果样品对酸敏感,不能用氯仿体系过柱。
3。
装柱。
将柱底用棉花塞紧,不必用海沙,加入约1/3体积石油醚(氯仿),装上蓄液球,打开柱下活塞,将匀浆一次倾入蓄液球内。
随着沉降,会有一些硅胶沾在蓄液球内,用石油醚(氯仿)将其冲入柱中。
4。
压实。
沉降完成后,加入更多的石油醚,用双联球或气泵加压,直至流速恒定。
柱床约被压缩至9/10体积。
无论走常压柱或加压柱,都应进行这一步,可使分离度提高很多,且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。
5。
上样。
干法湿法都可以。
海沙是没必要的。
上样后,加入一些洗脱剂,再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。
然后就可以放心地加入大量洗脱剂,而不会冲坏硅胶表面。
6。
过柱和收集。
柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。
太低的洗脱强度并不好,推荐用梯度洗脱。
收集的例子:10mg上样量,1g硅胶H,0.5ml收一馏分;1-2g上样量,50g硅胶(200-300目),20-50ml收一馏分。
7。
检测。
要更多地使用专用喷显剂,如果仅用紫外灯,会损失较多产品,紫外的灵敏度一般比喷显剂底1-2个数量级。
8。
送谱。
收集的产品旋干,在送谱前通常需要重结晶。
如果样品太少或为液体,可过一小凝胶柱,作为送谱前的最后纯化手段。
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过柱子经验总结
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1、选柱子:现在见到的柱子径高比一般在1:5-10。
2、称量:100-300目硅胶,称30-70倍于上样量;如果极难分,也可以用100
倍量的硅胶书中写硅胶量是样品量的30-40倍,具体的选择要具体分析。
如果所需组分和杂质分的比较开(是指在所需组分R f在0.2--0.4,杂质相差0.1以上),就可以少用硅胶。
3、选洗脱剂:一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。
极性小的用乙酸乙酯:石油醚系统;极性较大的用甲醇:氯仿系统;极性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系统。
要使所需点在Rf值在0.2-0.3左右的比较好。
常用溶剂的极性顺序:石油醚<环己烷/己烷<苯乙醚<氯仿<乙酸乙酯<正丁醇<丙酮<乙醇<甲醇<水。
一般把两种溶剂混合时,采用高极性/低极性的体积比为1/3的混合溶剂。
拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸。
乙酸乙酯/石油醚= 4:1可用TLC分开。
乙酸乙酯和石油醚(60-90)。
4、搅成匀浆:先把硅胶泡在烧杯中,用干硅胶体积一倍的溶剂泡,用超声波超半个小时,中间看到气泡时用玻璃棒搅一下。
如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系,就用石油醚拌;如果洗脱剂是氯仿/醇体系,就用氯仿拌。
5、装柱:
A、用溶剂把柱子饱和一次,因为溶剂和硅胶饱和时放出的热量可能使产品分解。
B、将柱底用棉花塞紧,不必用海沙,加入约1/3体积石油醚(氯仿),装上蓄液球,打开柱下活塞,将匀浆一次倾入蓄液球内。
随着沉降,会有一些硅胶沾在蓄液球内,用石油醚(氯仿)将其冲入柱中。
C、装柱时一定要保证无气泡,同时敲打柱体使柱体更均匀、紧凑,装毕,用洗脱液冲三次。
6、压实:装柱完后,加入更多的石油醚,用双联球或气泵加压,直至流速恒定。
柱床约被压缩至9/10体积。
无论走常压柱或加压柱,都应进行这一步,可使分离度提高很多,且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。
7、上样:干法湿法都可以。
A、在硅胶上层加少量无水硫酸钠(以免样品被洗脱剂冲散)取适量样溶液上样。
上样后,加入一些洗脱剂,再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。
然后就可以放心地加入大量洗脱剂,而不会冲坏硅胶表面。
B、用少量的溶剂溶样品加样,加完后将下面的活塞打开,待溶剂层下降至石英砂面时,再加少量的低极性溶剂,然后再打开活塞,如此两三次,一般石英砂就基本是白色的了。
加入淋洗剂,一开始不要加压,等溶样品的溶剂和样品层有一段距离(2~4cm就够了),再加压,这样避免了溶剂(如二氯甲烷等)夹带样品快速下行。
8、过柱和收集:柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。
太低的洗脱强度并不好,推荐用梯度洗脱。
收集的例子:10mg上样量,1g硅胶H,0.5ml收集馏分;1-2g上样量,50g硅胶(200-300目),20-50ml收集馏分。
接收瓶一定要用可密封的。
柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂,会被淋洗剂带到产品中的。
9、用少量的溶剂溶样品加样,加完后将下面的活塞打开。
10、检测。
要更多地使用专用喷显剂,如果仅用紫外灯,会损失较多产品,紫外的灵敏度一般比喷显剂底1-2个数量级。
11、送谱。
收集的产品旋干,在送谱前通常需要重结晶。
如果样品太少或为液体,可过一小凝胶柱,作为送谱前的最后纯化手段。
可除去氢谱1.5ppm左右所谓的“硅胶”峰。