人血液制品中糖及糖醇测定法

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2005 年版《中国药典》三部勘误表

2005 年版《中国药典》三部勘误表

2005 年版《中国药典》三部勘误/ 修订内容

页品名误正

7 生物制品包装规程五、药品说明书

“3. 治疗类生物制品说明书内容应包括:…、有效期、批准文号、…”五、药品说明书

“3. 治疗类生物制品说明书内容应包括:…、有效期、执行标准、批准文号、…”

50 皮内注射卡介苗2.4.3 规格

“…含菌数应不低于…”2.4.3 规格

“…含活菌数应不低于…”

3.2.3 . 活菌数测定

“应不低于1.0×10 6 CFU/ml。”3.2.3 . 活菌数测定

“应不低于1.0×10 7 CFU/mg”

3.3 成品检定

“除水分测定外,按…”3.3 成品检定

“除水分测定、活菌数测定和热稳定性试验外,按…”

3.3.8 热稳定性试验

“…,且不低于2.0×10 5 CFU/mg 。”3.3.8 热稳定性试验

“…,且不低于2.5×10 5 CFU/mg 。”

68 吸附白喉疫苗(成人及青少年用)3.1.3 纯度

“应不低于1500 Lf/mg 蛋白氮。”3.1.3 纯度

“应不低于2000 Lf/mg 蛋白氮。”

118 重组乙型肝炎疫苗(CHO 细胞)2.1.3 .1 细胞外源因子检查

“细菌和真菌(附录XII A )、支原体(附录XII B )、细胞病毒外源因子检查(附录XII C )均应为阴性。

”2.1.3 .1 细胞外源因子检查

“细菌和真菌、支原体、细胞病毒外源因子检查均应为阴性。”

159 抗炭疽血清3.3.1 .1 动物中和试验或特异沉淀反应、3.3.5 效力测定

“按3.1.1 项….”3.3.1 .1 动物中和试验或特异沉淀反应、3.3.5 效力测定

2015版《中国药典》关于《通则和指导原则》第四部(1)

2015版《中国药典》关于《通则和指导原则》第四部(1)

2015版《中国药典》关于《通则和指导原则》的内容(以下红色标记的内容更需要关注)

序号编码目录

10100 制剂通则

2 0101 片剂

3 0102 注射剂

4 0103 胶囊剂

5 0104 颗粒剂

6 0105 眼用制剂

7 0106 鼻用制剂

8 0107 栓剂

9 0108 丸剂

10 0109 软膏剂乳膏剂

11 0110 糊剂

12 0111 吸入制剂

13 0112 喷雾剂

14 0113 气雾剂

15 0114 凝胶剂

16 0115 散剂

17 0116 糖浆剂

18 0117 搽剂

19 0118 涂剂

20 0119 涂膜剂

21 0120 酊剂

22 0121 贴剂

23 0122 贴膏剂

24 0123 口服溶液剂口服混悬剂口服乳剂

25 0124 植入剂

26 0125 膜剂

27 0126 耳用制剂

28 0127 洗剂

29 0128 冲洗剂

30 0129 灌肠剂

31 0181 合剂

32 0182 锭剂

33 0183 煎膏剂(膏滋)

34 0184 胶剂

35 0185 酒剂

36 0186 膏药

37 0187 露剂

38 0188 茶剂

39 0189 流浸膏剂与浸膏剂

400200 其他通则

41 0211 药材和饮片取样法

42 0212 药材和饮片检定通则

43 0213 炮制通则

44 0251 药用辅料

45 0261 制药用水

46 0291 国家药品标准物质通则

470300

48 0301 一般鉴别试验

49 0400 光谱法

50 0401 紫外-可见分光光度法

51 0402 红外分光光度法

52 0405 荧光分光光度法

木糖和木糖醇检测方法

木糖和木糖醇检测方法

木糖和木糖醇检测方法

木糖和木糖醇的检测方法主要是高效液相色谱法。这种方法采用的是高效液相色谱仪对样品进行分析,具有操作简单、重现性好、结果准确等优点,因此被广泛应用于食品中木糖醇含量的测试。

具体来说,高效液相色谱法的检测步骤如下:

1.样品制备:将待测样品加入适量水中,用离心机进行离心(10000转/分,5min),然后将上清液过0.45μm过滤器过滤即可。

2.样品注射:将制备好的样品注入进样器。

3.分离:样品进入高效液相色谱仪进行分离,待所有样品分离结束后,可得到相应的结果。

在实验中,还需要注意选择合适的色谱柱、流动相和流速等条件,以及准确称取和稀释标准品,绘制标准曲线,以便对样品进行定量分析。

此外,检测过程中还需要注意避免干扰物质的影响,如可能存在的其他糖类物质等。因此,在实际操作中,需要根据具体情况对方法进行适当的优化和改进,以确保结果的准确性和可靠性。

请注意,以上步骤仅供参考,实际操作可能因实验条件和仪器设备的不同而有所差异。因此,在进行木糖和木糖醇的检测时,建议参考相关的专业文献和实验操作手册,以获取更准确和详细的信息。

《中国药典》2015年版通则目录-推荐下载

《中国药典》2015年版通则目录-推荐下载

0101 0102 0103 0104 0105 0106 0107 0108 0109 0110 0111 0112 0113 0114 0115 0116 0117 0118 0119

0120 0121 0122 0123 0124 0125 0126 0127 0128 0129 0181 0182 0183 0184 0185 0186 0187 0188 0189

0261

0400 0401 0402 0405 0406 0407 0411 0412 0421 0431 0441 0451 X

0501

0502

0512 0513 0514

0531 0532 0541 0542

0611 0612 0613 0621

0631 pH 0632 0633

0702

0704 0711

0731 0806

0831 0832

0871

0901 0902 0903 0904 0921

0931 0941 0942 0951

0952 0983

1101 1105 1106 1107 1121 1141 1142 1143 1144

1146 1148

1205

1208 1209 1210

1216 1217 1218

2301

2322 2331 2341 2351

3104 硫酸铵测定法

3105 亚硫酸氢钠测定法

3106 氢氧化铝(或磷酸铝)测定法

3107 氯化钠测定法

3108 枸橼酸离子测定法

3109 辛酸钠测定法

3110 乙酰色氨酸测定法

3111 苯酚测定法

3112 间甲酚测定法

3113 硫柳汞测定法

3114 对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯含量测定法3115 O-乙酰基测定法

磺酸型聚苯乙烯与二乙烯苯共聚体H型阳离子交换柱

磺酸型聚苯乙烯与二乙烯苯共聚体H型阳离子交换柱

磺酸型聚苯乙烯与二乙烯苯共聚体H型阳离子交换柱添加日期:2010年05月07日 10:36阅读:81次

·USP L17,BP-100,6%交联度的磺化苯乙烯-二乙烯基苯树脂,H型,粒径9μm;

·稀酸做流动相;

·应用于UV检测器、RI检测器和电导率检测器;

·分离碳水化合物、有机酸、醇类;

·应用:酒类、乳品加工业、生物反应、医疗科技。

BP-100,H+色谱柱,交联和磺化的优化不仅能够分离样品中的碳水化合物,而且能够分离有机酸和醇。常温下仅用稀酸作为流动相。从分析葡萄酒和果汁中的有机酸及碳水化合物过程中可得出发酵过程和产品质量信息。有机酸峰洗脱次数受pH值和温度的影响,质子化的物质能更好地被保留,稀释溶剂改性剂如乙腈能引起反压增加,从而减少大部分物质的洗脱时间,尤其是那些具有高树脂反应性能的组分如邻苯二甲酸。

操作条件

色谱柱:BP-100 H+

柱型号:300 mm x 7.8 mm

检测器:RI

进样量:20μL

流速:0.4ml/min

温度:环境温度

洗脱:2.5 mM H2SO4

操作条件

色谱柱:BP-100 H+

柱型号:300 mm x 7.8 mm

检测号:RI

进样体积:20μL

流速:0.4ml/min

温度:60 C

洗脱:2.5 mM H2SO4

2010年中国药典标准检测甘油果糖氯化钠注射液推荐色谱柱BP-100,H+色谱柱色谱条件:照高效液相色谱法(附录VD)试验,用磺酸型聚苯乙烯-二乙烯苯共聚体阳离子交换树脂H型为填充剂,以磷酸溶液为流动相,柱温50℃,出峰顺序为氯化钠、果糖、甘油。(中国药典二部P84)

2020年版《中国药典》目录四部目录

2020年版《中国药典》目录四部目录

附件4

2020年版《中国药典》目录

四部目录

通用技术要求目次

通则

制剂通则

1 片剂

2 注射剂

3 胶囊剂

4 颗粒剂

5 眼用制剂

6 鼻用制剂

7 栓剂

8 丸剂

9 软膏剂乳膏剂

10 糊剂

11 吸入制剂

12 喷雾剂

13 气雾剂

14 凝胶剂

15 散剂

16 糖浆剂

17 搽剂18 涂剂

19 涂膜剂

20 酊剂

21 贴剂

22 贴膏剂

23

口服溶液剂口服混悬剂口

服乳剂

24 植入剂

25 膜剂

26 耳用制剂

27 洗剂

28 冲洗剂

29 灌肠剂

30 合剂

31 锭剂

32 煎膏剂(膏滋)

33 胶剂

34 酒剂

35 膏药

36 露剂

37 茶剂

—1 —

38 流浸膏剂与浸膏剂

其他通则

39 药材和饮片取样法

40 药材和饮片检定通则

41 炮制通则

42 药用辅料

43 制药用水

44 国家药品标准物质通则

45 一般鉴别试验

光谱法

46 紫外-可见分光光度法

47 红外分光光度法

48 荧光分光光度法

49 原子吸收分光光度法

50 火焰光度法

51 电感耦合等离子体原子发射光谱法

52 电感耦合等离子体质谱法

53 拉曼光谱法

54 质谱法

55 核磁共振波谱法

56 X射线衍射法

57 X射线荧光光谱法

色谱法

58 纸色谱法

59 薄层色谱法

60 柱色谱法

61 高效液相色谱法

62 离子色谱法

63 分子排阻色谱法

64 气相色谱法

65 超临界流体色谱法

66 临界点色谱法

67 电泳法

68 毛细管电泳法

物理常数测定法

69 相对密度测定法

70 馏程测定法

71 熔点测定法

72 凝点测定法

73 旋光度测定法

74 折光率测定法

75 pH值测定法

76 渗透压摩尔浓度测定法

77 黏度测定法

血糖定义及常见食物升糖指数(GI)值

血糖定义及常见食物升糖指数(GI)值

血糖定义及常见食物升糖指数(GI)值

一、血糖

(一)血糖定义

血液中的葡萄糖,称为血糖(blood sugar)。体内血糖浓度是反映机体内糖代谢状况的一项重要指标。正常情况下,血糖浓度是相对恒定的。正常人空腹血浆葡萄糖糖浓度为 3.89~6.11mmol/L(葡萄糖氧化酶法)。

(二)血糖代谢

血糖的来源:

①食物中的糖是血糖的主要来源;

②肝糖原分解是空腹时血糖的直接来源(肝脏相关);

③非糖物质如甘油、乳酸及生糖氨基酸通过糖异生作用生成葡萄糖,在长期饥饿时作为血糖的来源。

血糖的去路:

①在各组织中氧化分解提供能量,这是血糖的主要去路(人体正常能量消耗和运动等);

②在肝脏(占总体大约1/3)、肌肉(占总体大约2/3)等组织进行糖原合成(胰岛素相关);

③转变为其他糖及其衍生物,如核糖、氨基糖和糖醛酸等(胰岛素相关);

④转变为非糖物质,如脂肪、非必需氨基酸等(胰岛素相关);

⑤血糖浓度过高时,由尿液排出。血糖浓度大于8.9~10.00mmol/(160-180mg/dl),超过肾小管重吸收能力,出现糖尿。将开始出现糖尿时的血糖浓度称为肾糖阈。糖尿病在理想情况下出现,常见于糖尿病患者。

(三)胰岛素定义

胰岛素是由胰脏内的胰岛β细胞受内源性或外源性物质如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一种蛋白质激素。胰岛素是机体内唯一降低血糖的激素,同时促进糖原、脂肪、蛋白质合成。外源性胰岛素主要用来糖尿病治疗。

二、高血糖

(一)高血糖标准

高血糖标准:空腹血糖一般超过6.1mmol/L,餐后血糖一般超过7.8mmol/L。

糖化血红蛋白检测方法学

糖化血红蛋白检测方法学

糖化血红蛋白检测方法学

1. 原理,糖化血红蛋白检测的原理是利用血液中糖化血红蛋白

的含量来反映血糖水平。在高血糖的情况下,血液中的葡萄糖会与

血红蛋白发生非酶催化的糖化反应,形成HbA1c。因此,测量血液

中HbA1c的含量可以间接反映出过去2-3个月内的平均血糖水平。

2. 样本采集,进行糖化血红蛋白检测需要抽取静脉血样本。通

常情况下,患者需要空腹抽血,以确保结果的准确性。血样采集后,需要立即送至实验室进行检测。

3. 实验方法,常见的糖化血红蛋白检测方法包括离心法、离子

交换色谱法、免疫测定法等。离心法是通过离心机将血液离心,分

离出血浆,然后测定血浆中的糖化血红蛋白含量。离子交换色谱法

则是利用离子交换色谱柱将血液中的HbA1c与其他成分分离开来,

再进行定量分析。免疫测定法则是使用特异性抗体与HbA1c结合,

然后测定抗原-抗体复合物的含量来确定HbA1c的含量。

4. 结果解读,糖化血红蛋白检测结果通常以百分比的形式呈现,反映出血液中HbA1c的含量。根据国际标准,正常人群的HbA1c水

平应该在4%-6%之间。超过6.5%的HbA1c水平可能意味着患者存在

糖尿病或者血糖控制不佳。

总之,糖化血红蛋白检测方法学涉及到原理、样本采集、实验方法和结果解读等多个方面。通过这种检测方法,可以更全面地评估患者的血糖控制情况,为临床诊断和治疗提供重要参考依据。

下面我们来看下常见品种甘露醇、山梨醇和利巴韦林颗粒的分

下面我们来看下常见品种甘露醇、山梨醇和利巴韦林颗粒的分

特色色谱柱应用介绍之二----2015版中国药典中甘露醇、山梨醇和利巴韦林颗粒的分析上期我们分享了常见糖和糖醇类化合物的分析,用的是碳水化合物分析专用色谱柱,也是俗称的糖柱,这类色谱柱除了分析糖和糖醇,还能分析什么呢?这期我们来看看它在制药领域的应用吧!

在2015版中国药典中,山梨醇/注射液、甘露醇/注射液、利巴韦林注射液/片/颗粒/胶囊、甘氨酸冲洗液、甘油果糖氯化钠注射液、海藻糖人血液制品中糖及糖醇测定等品种都规定使用磺化交联的苯乙烯-二乙烯基苯共聚物为填充剂的强阳离子氢/钙/钠型交换柱。Thermo的HyperREZ XP色谱柱也是符合这个标准的。

下面我们来看下常见品种甘露醇、山梨醇和利巴韦林颗粒的分析吧~

色谱图一:甘露醇和山梨醇的分析,结果:甘露醇峰与山梨醇峰之间的分离度为5.5(要求大于2.0)。

色谱条件:

色谱柱:HyperREZ Ca2+(P/N69208-307780)

流动相:水

流速:0.5ml/min

检测器:RI

检测温度:50℃

柱温:65℃

进样量:20µl

色谱图二:利巴韦林颗粒的分析,结果:利巴韦林色谱峰理论板数16048(要求不低于2000)。

色谱条件:

色谱柱:HyperREZ H+(P/N: 69008-307780)

流动相:水(用稀硫酸调节p H 值至2.5±0. 1)

流速:0.6ml/min

检测器:VWD

检测波长:207nm

进样量:20ul

这两期带大家看了这么多的应用,大家对碳水化合物分析专用色谱柱一定有所好奇,这类色谱柱到底是什么基质和原理的,如何使用维护呢?敬请关注下期~

磺酸型聚苯乙烯与二乙烯苯共聚体H型阳离子交换柱

磺酸型聚苯乙烯与二乙烯苯共聚体H型阳离子交换柱

磺酸型聚苯乙烯与二乙烯苯共聚体H型阳离子交换柱添加日期:2010年05月07日 10:36阅读:81次

·USP L17,BP-100,6%交联度的磺化苯乙烯-二乙烯基苯树脂,H型,粒径9μm;

·稀酸做流动相;

·应用于UV检测器、RI检测器和电导率检测器;

·分离碳水化合物、有机酸、醇类;

·应用:酒类、乳品加工业、生物反应、医疗科技。

BP-100,H+色谱柱,交联和磺化的优化不仅能够分离样品中的碳水化合物,而且能够分离有机酸和醇。常温下仅用稀酸作为流动相。从分析葡萄酒和果汁中的有机酸及碳水化合物过程中可得出发酵过程和产品质量信息。有机酸峰洗脱次数受pH值和温度的影响,质子化的物质能更好地被保留,稀释溶剂改性剂如乙腈能引起反压增加,从而减少大部分物质的洗脱时间,尤其是那些具有高树脂反应性能的组分如邻苯二甲酸。

操作条件

色谱柱:BP-100 H+

柱型号:300 mm x 7.8 mm

检测器:RI

进样量:20μL

流速:0.4ml/min

温度:环境温度

洗脱:2.5 mM H2SO4

操作条件

色谱柱:BP-100 H+

柱型号:300 mm x 7.8 mm

检测号:RI

进样体积:20μL

流速:0.4ml/min

温度:60 C

洗脱:2.5 mM H2SO4

2010年中国药典标准检测甘油果糖氯化钠注射液推荐色谱柱BP-100,H+色谱柱色谱条件:照高效液相色谱法(附录VD)试验,用磺酸型聚苯乙烯-二乙烯苯共聚体阳离子交换树脂H型为填充剂,以磷酸溶液为流动相,柱温50℃,出峰顺序为氯化钠、果糖、甘油。(中国药典二部P84)

血糖的定量测定(葡萄糖氧化酶法)

血糖的定量测定(葡萄糖氧化酶法)
酶试剂:葡萄糖氧化酶(GOD)过氧化物 酶(POD) 4-氨基安替吡啉(4-AAP)
酚试剂:苯酚 标准葡萄糖溶液:100 mg/dL (5.55 mmol/L)
实验步骤
按下表加入各反应物:
加入物 (ml)
空白管
葡萄糖标准 —— 液
血清样品 ——
酶试剂
1.50
酚试剂
1.50
标准管
0.020
—— 1.50 1.50
测定管 ——
1.50 1.50
混匀,37℃保温15min,以空白管调零, 505nm波长处测定各管吸光度值。
计算 血糖含量=A样/A标×标准溶液浓度
[实验注意事项]
1 分离血清要求使用未溶血样品,否则测定 结果偏大。
2要求在30 min内分离血清,糖酵解在全血 中以7%/h进行。
血糖的定量测定(葡萄糖 氧化酶法)
实验目的wk.baidu.com要求
掌握葡萄糖氧化酶法测定血糖含量的原理 和方法。
学会取液器及自外可见分光光度计的使用
实验原理
D-葡糖糖
GOD
D-葡萄糖酸
+ H2O2
H2O2+4-AAP+苯酚POD红色醌化物+H2O
实验仪器及试剂
试管 移液管 UNICO-2000型分光光度计 恒 温水浴锅
3 样本在4℃-8℃可稳定24h,样本放置时间过 长会使结果偏低。

血液制品的质量控制和安全性

血液制品的质量控制和安全性

中国医药集团
原料血浆检疫期
◆ 2008年6月31日后建立原料血浆投料前的 “检疫期”制度.
◆血浆采集复检合格后放置90天等献浆员第 二次献浆检测合格后投产。减少窗口期传 染。
◆若用NAT/PCR 检测,“窗口期”可由90天 缩短至60天.
中国医药集团
三种病毒的窗口期平均天数
HCV HIV HBV
合格? NO
拒绝
合格供浆员 YES
* 血浆采集 入浆站血浆库房
运输至血液制品厂家
* 血清检验 NO
合格? YES
新供浆员注册
家)
中国医药集团
No 不合格血浆
SFDA监督下销毁
•检测试剂SFDA放行 •检测试剂使用前蓉生确 认
原料血浆管理(血液制品生产厂
验收
合格? YES
血浆抽样
保留样品 血浆 样品
生物制品批签发管理办法
其他原辅料
管理
药品经营质量管理规范
药品经营质量管理规范实施细则 药品流通监督管理办法
药品生产管理
药品经营管理
中国医药集团
二、血液制品的分离纯 化技术和生产工艺
中国医药集团
血液制品的分离纯化技术
大体上可以分为5类:
1、利用蛋白质的亲水性和疏水性即溶解度不 同进行分离的方法,包括:盐析法、有机溶剂 沉淀法、疏水层析法、冻融法、等电点沉淀法 等。

实验五、血液葡萄糖测定概论

实验五、血液葡萄糖测定概论

混匀,置沸水浴中煮8min。取出用流动自来水冷却3min
磷钼酸试剂
2.0
2.0
混匀后放置2min
1:4磷钼酸溶液 加至
12.5
12.5
2.0 12.5
3、比色测定
将各管颠倒混匀后,用空白管调零,在420nm处 测定吸收度。
四、操作注意
1、等水沸腾后,才能放入血糖管。加热要准确8分钟。 2、冷却时切不可摇动血糖管,以免还原的氧化亚铜被 空气中的氧再氧化,降低实际结果。
试剂: ①10%钨酸钠溶液;②0.333mol/L硫酸溶液。 仪器与器材:锥形瓶、吸管、奥氏吸管、滤纸、
漏斗或离心管及离心机。
方法与步骤: ①取50ml锥形瓶1只,加入蒸馏水7份;②用奥
氏吸管吸取抗凝血l份,擦去管壁外血液,将吸管 插人锥形瓶中水的底部,缓慢地放出血液。放完 血液后,将吸管提高吸取上清液再吹人,反复洗 管3次。充分混合,使红细胞完全溶解; ③加入 0.333mol/L硫酸溶液1份,随加随摇,充分混 匀。此时血液由鲜红变成棕色,静置5~10min, 使其酸化完全;④加入10%钨酸钠溶液1份,边 加边摇,血液由透明变成凝块状。当振摇到不再 产生泡沫为止;⑤放置数分钟后用定量滤纸过滤 或离心除去沉淀,即得完全澄清的无蛋白血滤液, 供测定用。 用此法制得的无蛋白血滤液为10倍稀释的血滤液。 即每毫升血滤液相当于全血0.ml,适用于葡萄糖、 非蛋白氮、尿素氮、肌酸酐和氯化物等的测定。

2020年版《中国药典》目录三部

2020年版《中国药典》目录三部

附件3

2020年版《中国药典》目录

三部目录

生物制品通则目次

1生物制品通用名称命名原则

2生物制品生产用原材料及辅料质量控制

3生物制品生产检定用菌毒种管理及质量控制

4生物制品生产检定用动物细胞基质制备及质量控制5血液制品生产用人血浆

6生物制品国家标准物质制备和标定

7生物制品病毒安全性控制

8生物制品分包装及贮运管理

总论目次

9人用疫苗总论

10人用重组DNA蛋白制品总论

11人用重组单克隆抗体制品总论

12人用聚乙二醇化重组蛋白及多肽制品总论13人用基因治疗制品总论

14螨变应原制品总论

15人用马免疫血清制品总论

16微生态活菌制品总论

各论目次

Ⅰ预防类

17伤寒疫苗

18伤寒甲型副伤寒联合疫苗

19伤寒甲型乙型副伤寒联合疫苗

20伤寒Vi多糖疫苗

21重组B亚单位/菌体霍乱疫苗(肠溶胶囊)22A群脑膜炎球菌多糖疫苗

23A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗

24A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗

25ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗

2623价肺炎球菌多糖疫苗

27b型流感嗜血杆菌结合疫苗

28吸附白喉疫苗

29吸附白喉疫苗(成人及青少年用)

30吸附破伤风疫苗

31吸附白喉破伤风联合疫苗

32吸附白喉破伤风联合疫苗(成人及青少年用)33吸附百日咳白喉联合疫苗

34吸附百白破联合疫苗

35吸附无细胞百白破联合疫苗

36无细胞百白破b型流感嗜血杆菌联合疫苗

37皮上划痕用鼠疫活疫苗

38皮上划痕人用炭疽活疫苗

39皮上划痕人用布氏菌活疫苗

40皮内注射用卡介苗

41钩端螺旋体疫苗

42乙型脑炎减毒活疫苗

43冻干乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)

44森林脑炎灭活疫苗

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附录ⅥP人血液制品中糖及糖醇测定法

本法系用高效液相色谱法测定人血液制品中糖及糖醇含量。

照高效液相色谱法(附录ⅢB)测定。

色谱条件与系统适用性试验用苯乙烯-二乙烯基苯共聚物为基质的阳离子交换色谱柱(H+),粒度9μm或8μm,内径7.8 mm,柱长300 mm;柱温50℃(测定蔗糖含量时,柱温为20~30℃);流动相为0.004mol/L硫酸溶液,流速为每分钟0.8 ml;示差折光检测器。取2%麦芽糖1ml和1.5%磺基水杨酸1ml的混合物20μl,注入色谱柱,记录色谱图,麦芽糖与磺基水杨酸两峰间的分离度应大于1.5,拖尾因子按麦芽糖峰计算应为0.95-1.50。

对照品溶液的制备(1)麦芽糖对照品溶液分别取经减压干燥至恒重的麦芽糖对照品1.0g、2.0g、3.0g,精密称定,各置100ml量瓶中,分别加水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。

(2)葡萄糖对照品溶液分别取经减压干燥至恒重的葡萄糖对照品0.5g、1.0g、1.5g,精密称定,各置100ml量瓶中,分别加水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。

(3)山梨醇对照品溶液分别取经减压干燥至恒重的山梨醇对照品0.5g、1.0g、1.5g,精密称定,各置100ml量瓶中,分别加水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。

(4)蔗糖对照品溶液分别取经减压干燥至恒重的蔗糖对照品1.0g、2.0g、3.0g,精密称定,各置100ml量瓶中,分别加水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。

供试品溶液的制备精密量取供试品1ml,加1.5%磺基水杨酸4.0ml,混匀,室温放置至少2小时,以每分钟3000 转离心10分钟,取上清液,即得。

测定法精密量取对照品溶液与供试品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图;进样量为20μl。

以各对照品溶液浓度(g/L)对峰面积作直线回归,求得回归方程,计算出供试品溶液中糖或糖醇含量(A),再按下列公式计算

供试品糖或糖醇含量(g/L)=A×n

式中A为供试品溶液中糖或糖醇含量;

n为供试品稀释倍数。

【附注】(1)根据供试品的糖含量,对照品和供试品的取量可作适当调整。

(2)直线回归相关系数应不低于0.999。

(3)不同厂家的阳离子交换色谱柱(H+)的流速、流动相、柱温等会有所不同,可根据色谱柱说明书对色谱条件进行适当调整。

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