鸡肠道芽孢杆菌的分离鉴定及产蛋白菌株的筛选
鸡源益生菌的分离、筛选、鉴定与特性研究
华南理工大学硕士学位论文鸡源益生菌的分离、筛选、鉴定与特性研究姓名：陈琼申请学位级别：硕士专业：生物化工指导教师：杨汝德20040501摘要摘要本研究课题来源于广东省农业攻关项目“安全高效无残留的新型畜禽用微生态制剂的研制与应用”，文件编号为粤科技字［２００２］１４１号。
本实验内容是该项目的一部分，主要研究了从鸡的肠道中分离筛选出五种肠道菌，初步鉴定为肠道益生菌，在此基础上对各菌株的发酵特性进行探讨，并对各菌株拮抗致病菌和抗生素进行了探讨。
同时也探讨了筛选出的菌株间的拮抗性及相容性。
选用Ｂｓ培养基，从１５天龄小鸡的盲肠中分离筛选出双歧杆菌。
选用ｓＬ培养基，从ｌＯ天龄小鸡的小肠中分离筛选出乳酸杆菌。
选用Ｅｃ培养基，从３０天龄小鸡的盲肠中分离筛选出屎肠球菌。
选用ＢＬＩ培养基，从３０天龄小鸡的盲肠中分离筛选出地衣芽孢杆菌。
选用麦芽汁培养基，从成年鸡的盲肠中分离筛选出酵母菌。
对分离筛选获得的五种菌株进行初步鉴定：菌株Ｂ１７ｌ是双歧杆菌，菌株Ｍ１６是嗜酸乳杆菌，菌株ｗ０１９是屎肠球菌，菌株ＹＢ０２是地衣芽孢杆菌，菌株Ｂ１２ｌ是酵母菌。
双歧杆菌ＢＬ７１为革兰氏阳性严格厌氧菌，最佳培养条件是初始ｐＨ值７．０，最适培养温度为４０℃。
采用正交实验方法，确定最佳培养基配方为酵母膏０．９％．胰蛋白胨０．６％，大豆蛋白胨０．６％，葡萄糖２．５％，双歧因子０．２％，生氏因子ｌＯ％。
发酵培养时间１８ｈ。
在最佳培养条件下，Ｂ１７１的增殖菌数可达６．２×１０８个／ｍＬ。
嗜酸乳杆菌Ｍ１６为革兰氏阳性兼性厌氧菌，发酵培养时间１６ｈ，增殖菌数可达７。
ｌ×１０８个／ｍＬ。
屎肠球菌ｗＯｌ９为革兰氏阳性兼性厌氧菌，发酵培养时间１６ｈ，增殖菌数可达８．３×１０ｓ／ｍｌ。
地衣芽孢杆菌ＹＢ０２为革兰氏阳性好氧菌，其最佳培养条件为初始ｐＨ值６．５，最适培养温度３０～３２℃。
采用正交实验方法，确定最优培养基为酵母膏１．５％，玉米淀粉２．０％，Ｎａｉｌ２Ｐ０４＋Ｎａ２ＨＰＯ４０．２％＋Ｏ．２％，玉米浆２．０％。
鸡源抗腹泻芽孢益生菌J-4菌株的筛选、鉴定、发酵条件优化及动物饲喂试验的开题报告
鸡源抗腹泻芽孢益生菌J-4菌株的筛选、鉴定、发酵条件优化及动物饲喂试验的开题报告一、研究背景随着养殖业的发展和规模化生产的推广，鸡腹泻等肠道疾病已成为养殖业的主要问题之一。
腹泻病原微生物通过排泄物的方式在鸡舍环境中传播，而鸡舍环境又是肠道微生物群落的主要来源，因此，合理调控环境微生物群落结构是防治鸡腹泻等肠道疾病的关键。
芽孢益生菌是一类能够在厌氧环境下生长并形成孢子的益生菌，能够在鸡的肠道内生存，产生有益的代谢产物，发挥多种功能，如降低肠道pH值、抑制致病菌和提高饲料利用率等。
因此，向鸡饲料中添加芽孢益生菌已成为改善肠道微生物群落结构、预防和治疗鸡腹泻等肠道疾病的有效途径。
本研究旨在筛选、鉴定一株适合应用于鸡饲料中的芽孢益生菌，优化其发酵条件并进行动物饲喂试验，为鸡腹泻等肠道疾病的防治提供理论依据和实验基础。
二、研究内容和方案1. 菌株的筛选和鉴定挑选常见的芽孢益生菌进行初始筛选，通过筛选后选取菌落形态规整、色泽浅黄、大小和形态相同、孢子产率高的菌株进行鉴定。
使用分子生物学技术重测鉴定菌株种属、确定菌株是否有其他致病菌。
2. 发酵条件的优化对选出的菌株进行发酵条件的优化试验，确定最适合菌株生长的pH、温度、碳源、氮源等发酵条件，并考虑工程应用的可行性。
3. 动物饲喂试验将优化后的菌株添加到鸡的饲料中，进行在实验室和实地等条件下的动物饲喂试验，研究菌株对鸡体生长、免疫功能和肠道微生物群落结构的影响。
三、预期结果本研究预计筛选出适合鸡饲料添加的芽孢益生菌，确定最佳的发酵条件，并通过动物饲喂试验探索其对鸡体生长、免疫功能和肠道微生物群落结构的影响。
为鸡腹泻等肠道疾病的防治提供理论依据和实验基础。
1株鸡肠源益生芽孢杆菌的分离_鉴定及其耐受特性研究
作者简介 收稿日期
王焕( 1982- ) , 女, 河北石家庄人, 硕士研究 生, 研究方向: 生物制药。* 通讯作者。 2008 10 20
1. 1. 4 DNA 提取和 16S rDNA 基因扩增所用试剂。TE 缓冲 液: 10 mmol/ L Tris HCl ( pH 值为 8. 0) ; 1 mmol/ L EDTA ( pH 值 为 8. 0) 。CTAB 提取缓冲 液: 100 mmol/ L Tris HCl ( pH 值为
摘要 从人工饲养的健康仔鸡的盲肠和大肠中分离出 1 株对大肠杆菌有较强拮抗作用的芽孢杆菌菌株 Y 1, 对该菌株进行了菌落形态、
培养特征观察和生理生化特性鉴定及 16S rDNA 序列的分析。以 16S rDNA 序列为基础构建了包括 11 株相关种属细菌在内的系统发育 树, 其中与 11 个芽孢杆菌属的菌株的 16S rDNA 序列的同源性为 94. 63% ~ 99. 35% , Y 1 被鉴定为侧孢短芽孢杆菌。模拟体内高胆盐环
environment of high bile salt in vivo(with bile salt content of 0. 3% ) was stimulated to monitor the tolerance of Y 1. The survival number of bacteria after being inoculated in artificial gastric juice and intestinal environment for different time was determined. The test results showed that Y 1 showed stronger tol
鸡源益生芽孢杆菌的筛选、发酵工艺优化及益生特性的开题报告
鸡源益生芽孢杆菌的筛选、发酵工艺优化及益生特性的开题报告一、研究背景和目的随着人们对健康的关注不断提高，益生菌的市场需求也不断增加。
其中，益生芽孢杆菌作为一种强效的益生菌，在肠道健康、免疫调节等方面具有显著的作用。
因此，对于益生芽孢杆菌的筛选、发酵工艺优化及益生特性研究具有重要的实际应用价值。
本研究的目的是通过对益生芽孢杆菌的筛选和发酵工艺优化，探索获得高品质、高产量的益生菌。
同时，通过分析益生芽孢杆菌的生存能力和对肠道菌群的影响，研究其益生特性，为益生菌的研发和应用提供科学依据。
二、研究内容和方法1. 益生芽孢杆菌的筛选本研究将采用物理、化学和生物三种方法，对多种菌株中的益生菌进行筛选。
首先采用高温和低温等物理方法对菌株进行筛选，然后通过酸、碱、高盐等化学方法进行进一步筛选，最后通过实验室的体外条件下养殖肠道菌群来鉴定益生菌的功效。
最终通过对筛选出的菌株进行DNA测序，确认其是否为益生芽孢杆菌，并采用经济的代步优化方法来提高其益生活性。
2. 益生芽孢杆菌的发酵工艺优化本研究将通过响应表面法，对益生芽孢杆菌的发酵工艺参数进行优化。
首先确定影响菌株产量和生长速度的主要因素，然后通过设计实验矩阵和响应参数，对菌株的生产效率和质量进行优化。
在此过程中，应确保益生菌的生产过程不会对菌株的生存能力和活性产生负面影响，并且能够保证产品的质量稳定和安全。
3. 益生芽孢杆菌的益生特性研究本研究将采用宿主动物实验和体外模拟实验，研究益生芽孢杆菌对肠道菌群的影响和其生存能力。
具体包括饲喂实验动物，观察其肠道菌群的组成变化；通过模拟肠道内环境，评估益生菌的生存率和对肠道微生态平衡的影响。
同时，还将通过分析体内的免疫指标，评估益生菌对免疫系统的调节作用。
三、研究意义和预期结果本研究将针对益生芽孢杆菌的筛选、发酵工艺优化和益生特性进行综合研究，具有以下意义：1. 筛选出高品质、高产量的益生芽孢杆菌，为益生菌的研发和应用提供优质的菌株资源。
芽孢杆菌的筛选和鉴定的一般流程
芽孢杆菌的筛选和鉴定的一般流程下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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毕业论文：鸡大肠杆菌病病原的分离与鉴定及药敏试验
毕业论文：鸡大肠杆菌病病原的分离与鉴定及药敏试验河南科技学院2013届本科毕业论文（设计）鸡大肠杆菌病病原的分离与鉴定及药敏试验学生姓名：时科所在院（系）：动物科学学院所学专业：动物医学导师姓名：常新耀完成时间：2013年5月鸡大肠杆菌病病原的分离与鉴定及药敏试验摘要鸡大肠杆菌感染是危害养鸡业的主要细菌性传染病，无菌采取南阳市唐河县某鸡场中疑似大肠杆菌病死雏鸡肝、脾、肺等脏器病料，通过结合综合流行病学、临床学、病理学、生物化学和传染病学，进行分离与鉴定，最终确诊为鸡大肠杆菌病。
从部分养鸡场分离出的细菌进行药敏试验，通过药敏试验筛选出敏感药物，为治疗与预防提供理论依据和实际应用参数。
关键词：大肠杆菌，分离，鉴定，药敏试验The Separation,Identification And Antimicrobial SusceptibilityTest Of Chicken ColibacillosisAbstractChicken colibacillosis infection is the major infectious diseases in poultry industry. Sterilely resorting to visceral organs, such as livers ,spleens, lungs of illness, chicklings that are suspected colibacillosis of each large chicken places in Shanxian,by the means of combing with epidemiology,clinical, pathology, biochemistry and epidemiology,we can separate and identificate to diagnose whether it is colibacillosis or not. By the means of form dyeing and Biochemical tests and then antimicrobial susceptibility test on bacterium that is separated from part chicken places,we can screen some Sensitive drugs and find more effective proprietary to Provide theoretical basis and practical parameters of treatment and prevention.Key words: Colibacillosis，Separation，Identification，Antimicrobial Susceptibility Test目录前言 01 材料与方法 01.1 材料 0病料来源 0仪器及设备 0培养基与试剂 0试验动物 (1)1.2试验方法1病理剖检 (1)大肠杆菌的分离鉴定 (1)病料采集 (1)分离培养 (1)镜检 (2)生化鉴定 (2)致病性试验 (2)药敏试验 (2)2结果与分析 (2)2.1病理剖检 (2)2.2大肠杆菌的分离培养 (3)2.3形态学观察 (3)2.4生化鉴定 (4)2.5致病性试验 (5)2.6药敏试验 (5)3讨论 (6)3.1注意种蛋卫生 (7)3.2加强卫生管理 (7)3.3适当添加维生素和微生态制剂，增强机体抵抗力 (7)3.4免疫预防接种 (7)4结论 (8)参考文献 (8)致谢 (10)前言鸡大肠杆菌病是由大肠埃希氏杆菌(Escherichiacoli，E.coli)某些血清型菌株引起的一类疾病的总称[1]。
鸡肠道菌的分离、鉴定和微生态制剂的研制
大 豆 、雏 鸡 、双歧杆 菌 。
收 稿 日期 ：２０ － ２ １ ０ ８０—３ －
盐 溶 液 成 分 ：无 水 Ｃ Ｃ ． ｇ ａ １ ０２ 、ＭｇＯ ・Ｈ２ Ｓ ７ ０
０４ ．８ ｇ、 Ｋ２ ＨＰＯａ１０ ．ｇ、 ＫＨ２ ０４１０ ｇ、 Ｎａ Ｐ ． ＨＣ０３１ ． ００ ｇ、
氨 ２０ｇ ． 、葡萄糖 ２ ． ｇ ０ 、吐温一 ０１ｍ 、琼脂 １ 、 ０ ８ Ｌ ５ｇ 蒸馏 水 １ ０ 。ｐ ． ６ ，１ １ 灭 菌 ２ ｉ。 ０ｍＬ Ｈ ６２ ， ２ ０ ～４ ０ｍ ｎ
增殖 培养 基为 牛乳培 养基 ：调整 固形 物含 量为
１． ２５ ％、蔗糖 ８ ，１ ５℃灭 菌 １ ｉ。 ％ １ ５ｍ ｎ
营养和防治理论 ，利用动物体内正常微生物成员及 其代 谢产 物或生 长促进 物 ，经培 养 、发酵 、干燥 等
特 殊加工 工艺 而制成的 生 物制剂 或活 菌剂 。其 通过 增 强动 物对肠 内有 害微生 物 的抑制作 用 或增强 非特
Ｌ Ｚ 自动 立式 电热压力 蒸气灭菌器 、２Ｐ ＤＸ ２Ｃ
本 研究着 重对雏 鸡 小肠 黏膜 内容物 中的主要微 生 物菌 群 进 行 分 离 、鉴 定 ，并 与 双歧 杆 菌 进 行 配 伍 ，以期 为正确 选择合 适 的菌种 以及研 制 更好 的禽
溴 甲酚紫等。 ２
ＭＲ Ｓ培养基 ：蛋 白胨 １．ｇ ００ 、乙酸钠 ５０ｇ ． 、牛 肉 膏 １． ｇ ００ 、酵 母 浸 膏 ５０ｇ ． 、四水硫 酸锰 ０２ 、 ． ｇ ５ 磷 酸氢 二钾 ２０ｇ ． 、Ｍｇ０ ＂Ｈ００５ 、柠 檬 酸 三 Ｓ ４７ ．８ｇ
类微 生态 制剂提 供基础 。
１ 材料与方法
１ ． 材料 、仪 器和试 剂 １
鸡肠道致病菌的分离鉴定试验设计
鸡肠道致病菌的分离鉴定试验设计鸡肠道致病菌种类：大肠杆菌与沙门氏菌实验内容：阶段一：大肠杆菌与沙门氏菌的形态培养特性的观察，实验材料的增菌与直接分离培养。
阶段二：识别菌落、做纯培养及三糖铁琼脂接种阶段三：菌种纯度检查及生化培养基接种阶段四：生化反应结果观察与沙门氏菌血清学诊断。
阶段一：1、材料实验菌种混合菌液甲（大肠杆菌和沙门氏菌），混合菌液乙（产气肠杆菌与普通变形杆菌）观察材料四种细菌的融通培养物、琼脂平板、麦康凯或SS琼脂平板的培养物、三糖铁琼脂培养物。
培养基亚硒酸盐亮绿增菌液或四磺酸钠增菌液；SS琼脂平板、麦康凯、琼脂平板等选择与鉴别培养基。
2、内容与方法培养特性观察对大肠杆菌、沙门氏菌、产气肠杆菌、普通变形杆菌在常用培养基上的培养特性作仔细观察并相互比较。
形态观察以无菌接种环分别挑取上述四种细菌在麦康凯等琼脂平板上生长的单个菌落。
在玻片上制成涂片，待自然干燥后，以火焰固定，用革兰氏染色法染色，镜检。
观察没在细菌的形态、大小与排列方式，并作比较。
这四种细菌都是革兰氏阴性而两端钝圆的杆菌，无芽孢和荚膜，大小差异不显著。
增菌培养用无菌2ml刻度吸管吸取混合菌液甲2ml，分别加入亚硝酸盐亮绿增菌液100ml 的试管与四磺酸钠增菌液10ml的试管中各1ml。
换另一支无菌吸管，以同样的方法将混合菌液乙接种到两种增菌液中，接种后轻轻摇匀，置37摄氏度恒温箱内培养18---24h。
直接分离培养每种混合菌液用常规划线方法，接种麦康凯琼脂平板和SS琼脂平板各一个。
置37摄氏度恒温箱内培养24h后取出，观察每种平板上两种细菌的生长情况，单个菌落的形态，并比较之。
保留活动单个菌落的平板培养物，待阶段二使用。
阶段二1、材料普通琼脂斜面、三糖铁琼脂等。
2、内容与安排纯培养从经24h培养的麦康凯琼脂平板上，分别选出4种不同的细菌的单个菌落。
然后，用无菌接种环在四个单个菌落的中央表面轻轻取培养物少许，各移植至普通琼脂斜面一管，置37摄氏度恒温箱中培养24后，取出后在冰箱内或室温保存备用。
产蛋鸡粪肠球菌的分离鉴定及药敏试验
产蛋鸡粪肠球菌的分离鉴定及药敏试验路振香;李鹏;郭伟娜;刘畅;马世堂【摘要】目的:对安徽省明光市某蛋鸡养殖场3次送检的病死产蛋鸡进行病原菌的分离鉴定及药敏试验,为该病的微生物学诊断提供参考资料,为养殖户用药提供指导.方法:将3次送检的病死鸡肝脏组织进行致病菌的分离培养、生化鉴定、药敏试验、16SrRNA基因PCR扩增、序列测定、同源性分析.结果:从3次送检的病死鸡肝脏组织中分离到3株均为革兰阳性球菌,它们在麦康凯琼脂平板上均为淡红色圆形光滑湿润隆起半透明小菌落.药敏试验结果显示,该3株分离菌对多种抗菌药物均呈较强的耐药性,每株分离菌只对1种或2种药物敏感,让养殖户使用后疫情很快得到控制.对3株分离菌同源性分析结果显示,3株分离菌与粪肠球菌同源性都在98％以上.结论:该蛋鸡场3次送检的病死产蛋鸡均为感染粪肠球菌而引起的.【期刊名称】《安徽科技学院学报》【年(卷),期】2017(031)005【总页数】4页(P6-9)【关键词】粪肠球菌;16SrRNA序列;PCR;同源性分析;产蛋鸡【作者】路振香;李鹏;郭伟娜;刘畅;马世堂【作者单位】安徽科技学院动物科学学院,安徽凤阳 233100;安徽科技学院动物科学学院,安徽凤阳 233100;安徽科技学院动物科学学院,安徽凤阳 233100;安徽科技学院动物科学学院,安徽凤阳 233100;安徽科技学院动物科学学院,安徽凤阳233100【正文语种】中文【中图分类】S855.1粪肠球菌属于链球菌科肠球菌属，为兼性厌氧的革兰阳性球菌，大量存在于自然界和动物粪便中，为机会感染菌，已成为院内感染的第二大病原。
粪肠球菌在土壤、植物、乳制品中普遍存在，为人、犬、禽、猪等动物胃肠道正常菌群成员之一。
该菌可引起群体致病和医院交叉感染，临床上表现为尿路感染、菌血症、心内膜炎等[1]。
近年在临床上由粪肠球菌引起的感染有逐年上升趋势，已成为呼吸系统、泌尿系统、伤口感染、院内感染的常见菌，且该菌对多种抗菌药物表现出较强的耐药性[2-3]。
鸡源益生芽胞杆菌的筛选
关 键 词 芽胞 杆 菌 ； 选 ； 菌活 性 ； 生 茵 筛 抑 益
中 图分 类 号 ９ ９ １９ ３ ．２ 文 献 标 识 码 Ａ 文章 编 号 １ ０ ７ ２ （ ０ ８ ０ ０ ７ ０ ０ ５— ０ １ ２ ０ ） ６— ０ ５— ４
ｓ ｇ ｅ ｔ ｄ ｔｅ ｓｅ ｓ ｄ ｔ ｖ ｌ ｐ ｅ ｏ ｅ ｔａ ｓ ｐ ｏ ｉ ｔｃ ． Ｍ ｏ ｐ ｌｇｃ ｌ ｈｙ ｉｌ ｇｃ ｌ ｎ ｏ ｈ ｍｉ ａ ｅ ｔ ｕ ｇ ｓｅ ｈ ｙ ｐｏ ｓ ｓ ｅ ｈｅｄｅ ｅ ｏ ｍ ｎｔｐ ｔ ｎ ｉｌａ ｒ ｂ ｏｉｓ ｒ ｈｏｏ ｉａ ，ｐ ｓｏ ｏ ｉａ ，ａ ｄ ｂｉｃ ｅ ｃ ｌｔｓｓ
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鸡肠道乳酸菌的分离与鉴定
现代农业研究Modern Agriculture Research第26卷乳酸菌是一种无芽孢的革兰氏阳性细菌，这些细菌在自然界中极其广泛，其中大多数是人与动物一种重要的微生物群，具有必要的生理功能，主要存在于人与动物的肠道内在道中，它有助于消化和吸收各种肠道内的营养物质，并调节肠道内的pH 值。
鸡肠粘膜上皮细胞表面及周围黏附较大乳酸菌的数量。
本试验主要通过选取鸡肠道中的菌种并对其进行筛选、培养和鉴定，以进一步确定其归属，对于研究鸡肠道乳酸菌的功能有重要意义。
1材料与方法1.1试验材料10-15日龄的鸡五只购自吉林市九站街；酵母膏、牛肉膏、胰蛋白胨由北京奥博星生物技术有限公司提供；其他试验仪器设备及试剂均由吉林农业科技学院生物技术实验室提供。
1.2试验方法1.2.1乳酸菌的分离在超净工作台中，解刨分离鸡盲肠内黏膜表面附着的内容物，将其融于无菌水中，保持试管中肠道内容物稀释度为10-1，取此试管中的1mL 加入到装有9mL 生理盐水的试管中，依次进行梯度稀释为10-1~10-6。
然后取出稀释度为10-4、10-5、10-6稀释浓度的200ul 内容物悬液加于MRS-CaCO 3选择固体培养基上，涂布器将其均匀平布。
带培养基充分吸收菌悬液后，编号为S-1、S-2放入CO 2培养箱中5%CO 2浓度下，37℃倒置培养至平皿上有乳白色菌落。
1.2.2菌株革兰氏染色鉴定结晶紫进行初染1min，用蒸馏水进行冲洗→碘液再媒染1min，用蒸馏水进行冲洗→乙醇再脱色30s，用蒸馏水进行冲洗并用吸水纸吸取水分→番红复染1min，用蒸馏水进行冲洗，用吸水纸干燥后，观察菌体形态与菌体染色情况。
若为蓝紫色则为G+菌，若为红色则为G-菌。
由于乳酸杆菌为G+菌，则可以判断可能为乳酸杆菌。
1.2.3菌种各项能力指标测定产酸能力：将纯化的菌株划线接种于MRC-CaCO 3培养基上，放入CO 2培养箱中培养，每日测定MRC-CaCO 3培养基上透明圈的直径，记录相应培养天数，乳酸菌产酸能力=透明圈直径/天数，以比值的数值大小来判断菌株产酸的能力。
微生物实验设计 产蛋白酶菌株的筛选
产蛋白酶菌株的筛选级分离一、实验原理自能够产生胞外蛋白酶的菌株在牛奶平板上生长后，其菌落周围可形成明显的蛋白水解圈，水解圈与菌落直径的比值，常被作为判断该菌株蛋白酶产生能力的初筛依据。
将腐烂的大豆浸泡液中的细菌接种在含有酪素的培养基上进行培养。
由于产蛋白酶菌株能在干酪素的培养基上形成无色透明圈，因此能将产蛋白菌株分离出来，分离出来的菌株经再次培养，就可获得纯种产蛋白酶的菌株。
二、实验器材1.菌种：从大豆浸泡液中获得2.培养基:(1)PDA斜面培养基：马铃薯200g，蔗糖20g,琼脂20g,水1000ml.马铃薯去皮，切成块，煮沸半小时后用纱布过滤，再加糖及琼脂，溶化后补水至1000ml，121℃灭菌30min备用。
（2）干酪素琼脂培养基：干酪素4.0g，用20ml 0.1mol/L NaOH溶液溶解后再加20g琼脂，加蒸馏水煮沸加水至1000ml 121℃灭菌30min备用。
3.试剂：无菌水。
4.仪器：天平，电磁炉，烧杯，无菌试管，无菌培养皿，高压灭菌锅，锥形瓶，接种环，涂布棒，酒精灯，恒温培养箱。
三、实验步骤1.将腐烂的大豆放入无菌水中浸泡，制成细菌悬浮液。
2.用涂布棒蘸取菌液接种于PAD培养基中，26℃培养48h。
3.倒置于酪素琼脂培养基平板上，37℃培养24h。
4.挑取培养好的菌落接种于平板上，28℃培养48h。
5.观察各菌落周围形成的透明圈的情况。
6.选取透明圈较大的三个菌落分别接种在干酪素琼脂培养基上，28℃培养48h。
7.观察受否为单菌落，若为单菌落且有透明圈，则为纯种产蛋白酶菌株。
若有杂菌，则需要重复步骤6，直到培养出纯菌为止。
参考文献[1]代玉梅.蛋白酶高产菌株的筛选鉴定及酶学性质研究[D].青岛:青岛大学,2008.[2]黄志强,林白雪,谢联辉.产碱性蛋白酶海洋细菌的筛选与鉴定[J].福建农林大学学报:自然科学版,2006,35(4):416-420.。
鸡肠源芽胞杆菌的分离_鉴定和抗菌活性_张红英
=收稿日期>2007-07-05=作者简介>张红英(1968-),女,博士,从事微生物与免疫学研究,Em ai:l hongy i ngnd @163.co m;崔保安,通讯作者文章编号:1005-376X(2007)06-0504-03=论 著>鸡肠源芽胞杆菌的分离、鉴定和抗菌活性张红英1,杨霞1,金钺1,方丽云1,赵旭阳2,李金磊2,崔保安1(1.河南农业大学牧医工程学院,河南郑州 450002;2.河南农业大学牧医工程学院04级生物工程专业)=摘要> 从人工饲养的健康三黄肉鸡的盲肠和大肠中分离出10株芽胞杆菌,对其进行菌落形态观察、革兰染色、芽胞染色和生理生化特性鉴定,确定为枯草芽胞杆菌、地衣芽胞杆菌、蜡状芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌、球形芽胞杆菌、短小芽胞杆菌、凝结芽胞杆菌。
同时测定了它们对动物病原性大肠埃希菌和链球菌的抑菌活性。
其中有9株芽胞杆菌对大肠埃希菌有抑制作用,8株芽胞杆菌对链球菌有抑制作用。
结果表明芽胞杆菌分离株Y2、Y3、Y4、Y 5、Y 6、Y 7、Y 8具有作为益生菌开发的潜力。
=关键词> 芽胞杆菌;分离鉴定;抗菌活性;益生菌=中图分类号>Q 939 =文献标识码>AIsolation ,initial identification of ant-i pathogenic bacillus strains fro m chicken intes -tineZ HANG H ong -yi n g 1,YANG X i a 1,JI N Yue 1,F ANG L-i yun 1,Z HAO Xu -yang 2,LI Ji n -le i 2,C U I Bao -an1(1.T echnolog ical Co llege of A ni malH usbandry and V eterinary M e d ici ne ,H enan A gricult ural Universit y,Zhengzhou 450002,China;2.G rade 04B io-eng ineering in T echnological Co llege of A ni malH usbandry and V eterinary M e d ici ne ,H enan Agr icul -tural Universit y,Zhengzhou 450002,Ch i na)=Ab stract > T en G ram -positi ve bacillus strains were isolated and se l ected fro m healthy Sanhuang pou ltry cecu m and co lon as probiotic cand i dates .T hrough the phys i o l og ical and bioche m ica l tests ,they w ere B.subtilis ,B.licheni form is,B.ce -reus ,B.m e gateri um,B.s p haer ic u s ,B.pum ilus and B coagulans .T he an ti biotic activ it y o f bacill us w ere analyzed by i nhi b iti on g row th tests in v itro aga i nst ani m a l pat hogen ic bacteria e .g .E.co li and S trep tococcus suis .Am ong the m,nine strains s howed the i nhibiti on aga i nst E.coli ,e i ght stra i ns aga i nst Strep tococcus suis .T he results m eans that the iso l a ted bac illus stra i ns Y2,Y 3,Y 4,Y 5,Y 6,Y 7,Y8possess t he po tentia l o f to develop as probiotic bacter i a .=K ey w ords > Bacillus spp 1;Iso lation and i dentificati on ;A nti b i otic acti v ity ;P rob i otic bac teria近年来随着我国畜牧业的迅速发展,生产上滥用抗生素的现象越来越严重,其后果严重威胁着食品安全和人类的健康。
鸡源蛋白酶产生菌 P-98菌株的筛选与鉴定
鸡源蛋白酶产生菌 P-98菌株的筛选与鉴定李卓伟;袁洪水;李佳;许净净;朱宝成【摘要】通过初筛从健康青年鸡肠道内容物中分离到67株产蛋白酶菌株，采用酪蛋白平板法进行复筛，并对P-98菌株进行形态特征观察、生理生化试验和16S rDNA基因的序列分析。
将该菌株的形态特征和生理生化特性鉴定结果与相应种、属模式菌的性状比对，菌株P-98与芽孢杆菌的相应性状相近。
根据16 S rDNA 基因序列相似性分析，此菌株与Bacillus methylotrophicus标准菌株FZ42相似度达99．78％，因此鉴定该菌株P-98为Bacillus methylotrophicus。
%This experiment was conducted to get a strong vitality of the bacterium strain producing protease . Through screening from healthy young chicken intestinal contents were isolated from 67 strains of protease producing strain,and complex sieve used casein plate method .Then the strain P-98 was characterized by morphological and culture featuresobservation ,physiological and biochemical experiments ,and 16S rDNA gene sequence analysis .As the morphology characteristics and physiological and biochemical of the stain were similar to Bacillus and the simi-larity of the 16S rDNA gene sequences between strain P-98 and the type strain was up to 99.78%,the strain P-98 was initially identified as Bacillus methylotrophicus.【期刊名称】《华北农学报》【年(卷),期】2013(000)006【总页数】5页(P199-203)【关键词】蛋白酶;筛选;16S rDNA;鉴定;Bacillus methylotrophicus【作者】李卓伟;袁洪水;李佳;许净净;朱宝成【作者单位】河北农业大学生命科学学院，河北保定 071001;河北农业大学生命科学学院，河北保定 071001;河北农业大学生命科学学院，河北保定 071001;河北农业大学生命科学学院，河北保定 071001;河北农业大学生命科学学院，河北保定 071001【正文语种】中文【中图分类】S816.3蛋白酶是一类重要的水解酶，其在饲料生产等众多领域中得到了广泛的应用。
成年饲料鸡肠道正常菌群的检测-生物科学本科生毕业论文
成年饲料鸡肠道正常菌群的检测-生物科学本科生毕业论文成年饲料鸡肠道正常菌群的检测本科生毕业论文(设计)题目：成年饲料鸡肠道正常菌群的检测学生姓名： xx学号： xx专业班级：生物科学10103班指导教师： xx老师完成时间： 2014年5月1日成年饲料鸡肠道正常菌群的检测目录1 引言 (3)2 材料和方法 (4)2.1 实验材料 (4)2.1.1 实验动物 (4)2.1.2 实验菌株 (4)2.1.3 实验试剂与药品 (4)2.1.4 实验器材 (4)2.2 实验方法 (5)2.2.1培养基的配方 (5)2.2.2配制培养基 (5)2.2.3 菌体分离与纯化 (6)2.2.4 革兰氏染色 (7)2.2.5 菌株筛选 (8)2.2.5.1产蛋白酶菌株的筛选 (8)2.2.5.2产脂肪酶菌株的筛选 (8)2.2.5.3产淀粉酶菌株的筛选 (8)2.2.5.4产纤维素酶菌株的筛选 (8)3结果与分析 (9)3.1 菌种分离纯化与革兰氏染色 (9)3.2 产蛋白酶菌株的筛选 (14)3.3 产脂肪酶菌株的筛选 (17)3.4 产纤维素酶菌株的刷选 (21)3.5 产淀粉酶菌株的筛选 (23)4 讨论与小结 (26)5 参考文献 (28)6 致谢 (29)成年饲料鸡肠道正常菌群的检测生物科学专业：xx指导老师：xx摘要：从健康的成年饲料鸡肠道前段、中段、后段分离细菌30株。
革兰氏染色结果表明：24株为革兰氏阴性菌，6株为革兰氏阳性菌。
研究了他们产蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和纤维素酶的能力。
结果表明：本次实验从健康的成年饲料鸡肠道分离得到的30株菌中，21株都产蛋白酶，占菌株总数的75%，产脂肪酶的有18株，占总数的60% ，产淀粉酶的有12株，占总数的40%，产纤维素酶的有9株，占总数的30%。
其中产4种酶的有1株，产3种酶的有8株，产2中酶的有13株。
产一种酶的有6株。
关键词：鸡肠道，蛋白酶，脂肪酶，纤维素酶，淀粉酶Adult chicken feed detection of intestinalnormal floraStudent :Liu HengjiaAdvisor:Li NaAbstract：From healthy adult chicken feed front,middle, after a period of separation of intestinal bacteria 30 strains.Gram staining results showed that 24 strains of gram-negative bacteria, 6 strains of gram-positive bacteria.They produce protease, amylase, lipase and cellulase.Results show that this experiment from the healthy adult in intestinal 30 strains of bacteria were isolated from feed chicken, 21 strains producing protease, accounting for 75% of the total number of strains, there are 18 strains of lipase production, accounting for 60% of the total, there were 12 strains produce amylase, accounting for 40% of the total, produce cellulase has 9 strains, 30% of the total.Among them one of four kinds of enzyme production, eight strains of the three kinds of enzyme production, have 13 of 2 enzyme production.To produce an enzyme has 6strains. Keywords:Chicken intestine,protease,lipase, cellulase ,amylase1 引言鸡(Chicken)属鸡形目雉科原鸡属红原鸡亚属。
1株边鸡源产蛋白酶枯草芽孢杆菌的分离鉴定与生物学特性研究
1株边鸡源产蛋白酶枯草芽孢杆菌的分离鉴定与生物学特性研
究
孙丽萍;胡馨元;钮慧晶;王琴;裴彩霞;李毅;夏呈强
【期刊名称】《现代畜牧科技》
【年(卷),期】2024()2
【摘要】该试验旨在筛选具有高产蛋白酶能力的益生芽孢杆菌,扩大微生态制剂候选菌株资源。
以边鸡直肠内容物为分离来源,经脱脂奶粉平板初筛获得16株产蛋白酶菌株,液体发酵复筛后,选取1株蛋白酶活力高达119.7 U/mL的芽孢杆菌FRE76进行后续研究。
通过16S rRNA基因测序与进化树分析,并结合形态学与生理生化鉴定,判定该菌株为枯草芽孢杆菌。
病原菌抑制试验表明,该菌对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有明显的抑制作用。
耐酸和耐胆盐检测发现,在pH值3.0和4.0时该菌株存活率均为50%以上,在胆盐浓度为0.1%和0.3%时菌株存活率均能达到60%以上。
该试验筛选获得的枯草芽孢杆菌FRE76,具有优良的蛋白酶生产性能、较好的致病菌抑制能力和较强的抗逆性,是一株潜在的益生菌菌株。
【总页数】6页(P33-38)
【作者】孙丽萍;胡馨元;钮慧晶;王琴;裴彩霞;李毅;夏呈强
【作者单位】山西农业大学动物科学学院;山西农业大学生命科学学院
【正文语种】中文
【中图分类】S831.5
【相关文献】
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2.一株兔源枯草芽孢杆菌的分离鉴定及产酶能力研究
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鸡肠道枯草芽孢杆菌的分离鉴定及生物特性研究
鸡肠道枯草芽孢杆菌的分离鉴定及生物特性研究王彬;曹允考;魏亚松;常淑伟;胡倩;温建新【期刊名称】《饲料博览》【年(卷),期】2014(000)002【摘要】为研究和开发动物新型微生态制剂,最大程度的提高经济效益,改变抗生素滥用、药物残留等现状,从健康鸡肠道中分离出1株芽孢杆菌,并命名为W,且对其进行形态观察、生化试验鉴定和16S rRNA序列分析及同源性比较.结果表明,本菌株与Bacillus subtilis strain CICC 10023 (GU980947.1)的同源性达99.5％,最终确定该菌株为枯草芽孢杆菌,对该菌株进行药敏试验和安全性试验.结果表明,该菌对青霉素、杆菌肽耐药,对小鼠无致病性.【总页数】6页(P1-6)【作者】王彬;曹允考;魏亚松;常淑伟;胡倩;温建新【作者单位】东北农业大学动物医学学院,哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,哈尔滨150030【正文语种】中文【中图分类】S831;Q939.122【相关文献】1.枯草芽孢杆菌J4制剂对肉鸡肠道酶活力及消化性能的影响 [J], 刘涛;张冬冬;姜军坡;朱宝成;王世英2.蛋鸡肠道嗜酸乳杆菌的分离鉴定及益生特性研究 [J], 李春红3.枯草芽孢杆菌对SPF鸡肠道菌群的影响 [J], 赵效南;叶超群;常维山4.猪源枯草芽孢杆菌的分离鉴定及其生物特性研究 [J], 袁林; 涂熠坤; 曾静; 郭建军5.枯草芽孢杆菌及饲料粗蛋白质水平对肉鸡生长性能和肉鸡肠道形态的影响 [J], Mahmoud K Z;Obeidat B S;Al-Sadi M Z;Hatahet Sh R因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鸡源性益生芽孢杆菌的筛选鉴定、固体发酵的优化及其应用效果的研究的开题报告
鸡源性益生芽孢杆菌的筛选鉴定、固体发酵的优化及其应用效果的研究的开题报告
1.研究背景和意义：
随着人们对食品安全和营养需求的提高，益生菌的应用已经成为当
今食品工业的热点研究领域。
益生菌是指滋生于人类和动物肠道内能够
帮助维持肠道菌群平衡，进而增强身体健康的有益菌种。
其中，鸡源性
益生芽孢杆菌因其生长速度快、耐高温、酸碱度范围广、产生有机酸等
优势，而成为了研究重点之一。
然而，仍有许多问题有待解决，如鸡源
性益生芽孢杆菌的筛选鉴定、固体发酵的优化及其应用效果等。
为此，本研究旨在筛选鉴定鸡源性益生芽孢杆菌，优化其固体发酵
工艺，并考察其在食品中的应用效果，为开发新型的益生菌产品提供有
效的理论和实验基础。
2.研究内容和方案：
2.1 筛选鉴定鸡源性益生芽孢杆菌
采用不同的筛选方法、不同的培养基和生理生化特性的测定，对鸡
源性益生芽孢杆菌进行筛选和鉴定，确定最佳的鉴定方法和菌株。
2.2 优化固体发酵工艺
采用单因素试验和正交试验等方法，研究不同因素对鸡源性益生芽
孢杆菌发酵的影响，优化其固体发酵工艺。
2.3 考察应用效果
将优化后的鸡源性益生芽孢杆菌应用于食品中，考察其对食品口感、营养价值和保健功效的影响。
3.研究预期结果：
本研究将筛选鉴定出具有优异性状的鸡源性益生芽孢杆菌菌株，并优化出其最佳的固体发酵工艺，同时探究其在食品中的应用效果，为开发新型的益生菌产品提供有效的理论和实验基础，从而为推动我国的食品工业发展做出贡献。
鸡肠道乳酸菌分离鉴定及其功能研究的开题报告
鸡肠道乳酸菌分离鉴定及其功能研究的开题报告一、研究背景和意义鸡肠道是一个复杂的微生物生态系统，其中乳酸菌是其中的一类重要微生物。
其能够产生有益的代谢产物，如酸和抗菌物质，并参与肠道健康的维护。
因此，研究鸡肠道乳酸菌的分离鉴定及其功能具有重要意义。
目前，关于鸡肠道乳酸菌的研究仍处于初级阶段，特别是在乳酸菌菌群多样性和功能方面的研究还比较有限。
因此，通过对鸡肠道乳酸菌的分离鉴定和功能研究，不仅可以深入了解其菌群多样性和代谢功能，还能为鸡的肠道保健及鸡肉品质改良提供科学依据。
二、研究内容和思路（一）研究内容1.鸡肠道乳酸菌的分离和筛选；2.鸡肠道乳酸菌的菌群多样性和物种鉴定；3.鸡肠道乳酸菌代谢产物的分析及功能评价。
（二）研究思路1.鸡肠道样品的采集及处理；2.鸡肠道乳酸菌的分离和鉴定；3.鸡肠道乳酸菌的菌群多样性分析；4.鸡肠道乳酸菌代谢产物分析及功能评价。
三、预期结果1.成功分离和鉴定出鸡肠道乳酸菌；2.了解鸡肠道乳酸菌的菌群多样性和物种组成；3.探究鸡肠道乳酸菌的代谢功能和功能评价。
四、研究方法1.鸡肠道样品采集及处理；2.菌落计数和传统鉴定法、分子生物学技术等方法进行鸡肠道乳酸菌的分离和物种鉴定；3.高通量测序技术进行鸡肠道乳酸菌的16S rRNA基因测序和物种多样性分析；4.代谢产物分析及功能评价。
五、研究进度安排1.前期工作准备：3个月；2.鸡肠道乳酸菌的分离和鉴定：6个月；3.鸡肠道乳酸菌的菌群多样性分析：3个月；4.鸡肠道乳酸菌代谢产物分析及功能评价：6个月；5.数据分析和论文撰写：4个月。
六、主要研究人员主持人：XXX；协助人员：XXX。
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１ ． 培养基 ．１ １
Ｌ Ｂ培养基 ： 升含酵母提取物 ５ ， 每 ｇ
蛋 白胨 １ｇＮ Ｃ ０ ，Ｈ ．。Ｌ ０ ， ａ １１ｇｐ ７０ Ｂ琼 脂培 养基 ： 每升 含 酵母 粉 提 取 物 ５ ， 白胨 １ｇＮ Ｃ １ｇ 琼 脂 粉 ｇ蛋 ０，ａ１ ０， １ｇｐ ７０ Ｔ 琼 脂培 养 基 ： 升含 蛋 白胨 １ｇ 牛 肉 ５ 。Ｈ ．。 ２ 每 ０， 膏 ５， ｇ酵母 粉 ２ ， 萄糖 １ｇ琼脂 粉 １ｇｐ ７０ 淡 ｇ葡 ０， ０ ，Ｈ ．。 薄 培养 基 ： 升 含酵 母 提 取物 ０７ ， 白胨 １ ｇ 葡 每 ． 蛋 ｇ ． ， ０
展 。 由于其 具有 蛋 白分 泌 能力 强 的特性 ， 孢 杆菌 芽
的生 长特 性 和生理 学 性质 被广 泛 深入 研究 。
本研 究 从鸡 肠道 中分 离到 多 株 芽 孢杆 菌 ， 并初 步 分 析 了其 理 化 特 性 、 养 特 性 ， 鸡肠 道 内 芽孢 培 为 杆 菌 的研究 打 下基 础 。 同时通 过 产 蛋 白菌 株 的筛 选 试验 。 为芽 孢杆 菌 作 为宿 主 菌提 供 了实 践基 础 。
收 稿 日期 ： ０ ７ Ｉ ３ ２ ０ ～Ｉ 一
的 产酸试 验 。７ ３℃培 养 ２ ～ ８ 。 ４ ４ｈ １２２３ 芽孢 生 成 试 验 ．．． 芽 孢 的 生 成 是 枯 草 芽 孢
杆 菌 的重 要 特 征 。也是 微 生 物 鉴 定分 类 的 重 要 指
标 。为 了确 定 待 测菌 株 是 否产 生 芽孢 ， 进行 了芽 孢 生成 试 验 。用 淡 薄培 养 基 培养 筛 选 菌株 ７ｈ后 ， ２ 用
１０ ｐＨ７． ．ｇ， ０。
芽孢 杆 菌广 泛存 在 于 自然 界 中 ， 能 形 成 内生 它
孢 子 ， 很 强 的 可 逆 性 ， 且 能在 肠 道 内产 生 多种 有 而
消化 酶 和为 动物 机体 提 供 多种 维 生 素 等营 养 物 质 ， 可 明显提 高 动物 生 长速 度 和饲 料 利 用率 ， 长期 生产
３７
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家禽科 学 ２ ０ ． ０８ ２
无菌小管分装 ３０ ｌ ０ｍ 菌液 。分别于 ８ ℃水浴保温 ５ ｌ、０２ ｍｎ 再 将 菌 液 接 种 于 平 板 ， 养 过 夜 ， ５２ 、５ ｉ， 培 进 行 芽孢 染 色 。
各类糖 发酵培养基（ 如葡 萄糖 ， 芽 糖 ， 糖 ， 麦 乳
蔗糖 ） 。
１１２ 试 剂 ．．
１２ 方 法 ．
５ ％高 氯 酸 ， 兰 氏染 色 Ｐ试 剂 ， 哚试 剂 。 Ｖ 吲
１ ． 菌株 的 筛选 ．１ ２
从 刚 宰 杀 的健 康 鸡 的肠 道 中
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Ｐ ｕ ｔｙ Ｓ ｉ ｎ ｅ ｏ ｌｒ ｃ ｅ ｃ
鸡 曰 道 芽孢 轩面 的 蓠鉴 定 严蛋 １菌株 的筛选 Ｉ Ｉ
海洋 赵玉军 陈晓月 邹伟 张立鹏 金苗苗 ， ， ， ， ， （． １ 沈阳农业大学畜牧兽 医学院 ， 宁 沈 阳 １０ ６ ； 沈阳正大畜牧 有限公 司， 辽 １ １１２． 辽宁 沈阳 １０６ ） １１１ 摘 要 ： 实验从鸡肠道分 离出５ 本 ０株菌种 ， 通过对菌种 菌落培养特性 、 态观察 、 形 生理生化 实验 ， 初 步 鉴 定 出 ８株 为 芽孢 杆 菌。 通过 产 蛋 白 菌株 的 筛选 试验 筛选 出 １ 能 够 分泌 蛋 白的 芽孢 杆 菌， 菌 株 该
１ 材料和 方 法
１ 材 料 ． １
片， 用接 种 环取 一环 生理 盐水 于玻 片上 ， 而后 挑选 在
Ｌ Ｂ培 养基 平板 上呈 圆形 、 面湿 润 、 缘 列齿 、 透 表 边 不 明 的菌 落均 匀涂 于玻 片上 ，等干燥 后进 行革 兰 氏染
色 ， 光学显 微镜 下观察 菌体 形态 及染 色结果 。 于 １２２２ 生理 生化 试 验 ．．． 根 据 以 上 结果 。 选 出革 筛 兰 氏 阳性 菌 株 ， 行 Ｍ． 试 验 、 Ｐ试 验 、 进 Ｒ． Ｖ．． 吲哚 试 验
采 集 一小 段 肠 管 。 分别 置 于含 ５ ｌ 菌 水 的大 试 管 ｍ无 中 ，Ｏ￣沸水 浴 １ｍｉ，然后 吸上 清 １０ １ 布 在 Ｉ０Ｃ ０ ｎ ０￣ 涂 Ｌ Ｂ琼脂 平 板上 ， ３ ℃培养 箱 中培养 至 长 出菌 落 。 于 ７
１２２ 菌株 的 鉴定 ．． １ ．． 革 兰 氏 染 色 及 菌 体 形 态 特 征 ． ２１ ２ 取 干 净 玻
株 可 望 成为 外 源蛋 白高效 分 泌表 达 的 宿主 。
关键词 ： 肠道 ； 鸡 芽孢 杆 菌 ； 离鉴 定 ； 分 产蛋 白菌株 的 筛 选 中图分 类号 ：８ ２６ ￥ ５ ．１ ６ 文献标 识码 ： Ｂ 文 章编 号 ： ６ ３ １ ８ （ ０ ８ ２ ０ ３ — ３ １７— ０ ５２ ０ ）— ０７ ０ 萄 糖 １ ｇ Ｍｇ Ｏ ．Ｈ Ｏ ．ｇ Ｎ ４Ｓ ４． ， ２ Ｏ ． ， Ｓ ４ ２ ０２ ，（ Ｈ ） ００２ ＫＨＰ ４ ０ ７ ２ ｇ
实 践及 大量 实验 研 究 表 明 。 多种 芽孢 杆 菌 对 动 物 的 生 长繁 殖 和正 常生 理 状态 的维 持 都 有 重要 意 义 ， 作 为 益生 菌开 发 的潜 力 很 大 。因此 ， 对鸡 肠 道 芽 孢杆 菌 的研究 日益 加深 。 同时 ， １５ 自 ９ ８年 Ｓ ｉｉ ｎｊ ｐｘｚ ［ ｅ 发现 枯草 杆菌 １ ８菌株 能 摄取 外源 基 因 以后 ， ６ 随着 Ｄ Ａ Ｎ 重组 技术 的发 明 。 芽孢 杆 菌基 因工 程 的工 作 迅 速 发