早产儿血液中Notch3的变化对支气管肺发育不良早期诊断价值的研究

早产儿血液中Notch3的变化对支气管肺发育不良早期诊断价值的研究目的探讨早产儿血液中Notch 3的变化对支气管肺发育不良（BPD）的早期诊断价值。

方法回顾性分析佛山市妇幼保健院2016年1月～2017年2月接收的胎龄27～32周，存活28 d以上的患儿78例，其中患有BPD 23例，非BPD 患儿55例，将BPD患儿组设定为观察组，将同期在新生儿科诊治的、与BPD 组患者胎龄性别相匹配、未诊断BPD的患儿设为对照组。

测定两组患儿体内Notch 3表达情况。

结果观察组患儿在第7、14、21天体内Notch 3值逐渐增加，且显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。

结论BPD的发病过程中存在Notch 3高表达，Notch 3值对BPD有较高的早期诊断价值。

[Abstract]Objective To investigate the value of Notch 3 in the blood of preterm infants in the early diagnosis of bronchopulmonary dysplasia （BPD）.Methods A total of 78 patients with gestational age of 27 to 32 weeks received in Maternal and Child Health Hospital of Foshan City from January 2016 to February 2017 were recorded.There were 23 patients with BPD and 55% of non-BPD children.The BPD group was set as the observation group，and the children who had not been diagnosed with BPD were matched with the gestational age of BPD group in the neonatal department.The expression of Notch 3 in the two groups was measured.Results The values of Notch 3 in the observation group were significantly higher than those in the control group，and the difference between the observation group and the control group was statistically significant （P＜0.05）.Conclusion Notch 3 is highly expressed in the pathogenesis of BPD，and Notch 3 has a high early diagnostic value for BPD.[Key words]Bronchopulmonary dysplasia；Premature children；Notch 3；Early diagnosis随着新生儿重症监护技术的迅速发展，越来越多的早产儿和极低出生体质量儿（very low birth weight infant ）得以存活，支气管肺发育不良（BPD）成为引起早产儿疾病和死亡的重要原因，是早产儿最常见的远期并发症之一[1]。

在存活者中BPD延长了住院时间，增加了再入院和神经发育障碍的风险。

在BPD放置肺表面活性物质（pulmonary surfactant）替代治疗、新的机械通气策略、限制液体输入和利尿劑的使用、最优化的营养支持及对动脉导管未闭（patent ductus arteriosus）的积极处理均已取得共识，糖皮质激素的使用仍是目前最具争议的领域[2]。

探寻BPD的早期预测因子，适时阻断BPD的发病进程，减少BPD的发生发展尤为重要。

早产儿出生后正常的肺泡发育程序被打乱，最终可导致肺泡组织学上的单一化及同质异构性，肺组织从囊泡期向肺泡期的发育受到阻滞，从而出现BPD的新特征肺发育停滞[3]。

Notch家族由一组高度保守蛋白质组成。

Notch 信号参与胚胎发育、血管损伤修复、血管重构，在肺发育过程中动态表达。

有研究提示Notch3与肺微血管形态异常相关。

本研究对早产儿不同时段血液中Notch 3含量进行测定，分析其对BPD早期诊断的价值，为BPD早期干预提供理论依据，现报道如下。

1资料与方法1.1一般资料回顾性分析我院2016年1月～2017年2月接收的胎龄27～32周，存活28 d 以上的患儿共78例，其中患有BPD 23例，非BPD患儿55例，将BPD患儿设定为观察组，将同期在新生儿科诊治的、与BPD组患者胎龄性别相匹配、未诊断BPD的患儿设为对照组。

BPD诊断标准参照《实用新生儿学》3版：1 min阿氏评分8～10分，不伴有先天性心脏病、气漏、肺动脉高压、ARDS、缺氧缺血性脑病、BPD等其他病变[4]，任何氧依赖（>21%）超过28 d的新生儿。

排除情况：①先天明显畸形，合并先天性心脏病等，神经系统与呼吸系统发育明显畸形；②遗传有先天性代谢疾病；③重要资料缺失；④染色体明显异常；⑤其他器官功能障碍。

入组所有患儿均不在排除条件之内，所有受试者监护人对本研究知情，本研究经我院医学伦理委员会批准。

1.2方法标本采集及测量：所有患儿在出生后的第7、14、21天留取血液样本，使用ELISA方法检测Notch 3含量。

治疗方案：使用经鼻持续气道正压通气（NCPAP）或呼吸机进行辅助通气，并应用PS，逐渐变为低流量吸氧，最后停止吸氧，适当限制液体入量，感染者根据药敏试验及用药经验选择合适的抗生素，对出现呼吸暂停的患儿使用氨茶碱（石药集团欧意药业有限公司，国药准字H13021033）或咖啡因，输红细胞悬液纠正贫血等综合治疗手段[5]。

1.3观察指标及标准对患儿出生后第7、14、21 d体内的Notch 3值进行测量。

1.4统计学方法数据采用SPSS l6.0统计软件包处理，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验；计数资料以率表示，采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2结果观察组患儿在7、14、21 d体内Notch 3值逐渐增加，且显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表1）。

3讨论早产儿的肺部发育往往正处于管道形成期结束和囊泡期的开始，且体内抗氧化酶活性低下，对于活性氧代谢产物清除不足，出生后也更容易暴露于高氧浓度、炎症反应、感染、气压伤等不利的生长环境中，各种因素导致急性肺损伤后果，且损伤后修复过程同样出现异常[6]。

肺组织从囊泡期向肺泡期的发育受到阻滞，从而出现BPD的新特征肺发育停滞[7]。

新型BPD病理改变以肺泡和肺微血管发育不良为主要特征，表现为肺泡数目减少、体积增大、肺泡结构简单化，肺微血管形态异常，并可见持续炎症反应，而肺泡和气道损伤以及纤维化较轻[8]。

Notch家族是由一组高度保守的蛋白质组成，其信号途径通过局部细胞间相互作用，实现细胞间通讯、胞浆内的信号转导以及核内转录，从而控制细胞的增殖、分化、凋亡、迁移及黏附等，在机体的整个生长发育过程的调控中发挥着重要的作用[9]。

Notch信号参与胚胎发育、血管损伤修复、肿瘤生长过程中的血管重构，在肺发育过程中呈动态表达，并可能在调控肺泡上皮、血管内皮细胞的分化、发育中起关键作用[10]。

有研究报道应用γ分泌酶抑制剂DPAT抑制Notch 信号通路后，能抑制血管紧张素Ⅱ诱导的肺血管重构，降低肺动脉压力，为肺动脉高压的治疗提供了新思路[11]。

有学者的研究表明：肺动脉高压小鼠的肺动脉血管平滑肌細胞内Notch 3蛋白过度表达，且肺动脉高压病情的严重程度与肺内Notch 3蛋白表达量具有正相关性；通过对基因敲除Notch 3的小鼠模型研究后发现缺失Notch 3的小鼠不会罹患肺动脉高压；使用γ分泌酶抑制剂阻断Notch 3活化，可逆转小鼠肺动脉高压[12]。

这些研究都说明Notch 3信号与肺动脉高压的发生关系密切，也提示Notch 3与肺微血管形态异常相关。

肺动脉高压是发生肺血管疾病的重要环节，主要特征为动脉平滑肌的细胞增殖，血管阻力升高等。

在肺部发育的关键时期，肺部循环的各类损伤容易导致肺动脉高压[13-14]。

通过动物实验发现，Notch 3通过Hes 5等方式参与肺部动脉平滑肌的增殖和肺部血管重构，肺部血管中Notch 3活化程度与蛋白质的表达量和肺部动脉高压严重程度成正相关关系[15-16]。

本研究观察组患儿Notch 3的表达情况在整个病程中动态变化，从第7天开始持续升高，第21天仍处于高值。

Notch 3的动态变化过程与BPD疾病的发病过程相符，推测随着Notch 3表达的升高，肺动脉压力相对高，肺部动脉平滑肌增殖和肺部血管重构，肺泡发育受阻。

BPD组第7天Notch 3即已高表达，提示该组患儿出生后不久即有BPD发病倾向。

因此，在胎龄较小的早产儿早期通过检测Notch 3预判BPD发生，采取有效的综合防治措施，降低疾病发生风险。

本研究仅检测血液中Notch 蛋白高表达，组织病理学等方面的研究尚存在较大的局限性，有待于多中心、大样本的研究论证。

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