肺癌组织和细胞中端粒酶表达的研究
端粒、端粒酶与癌症(一)
端粒、端粒酶与癌症(一)【摘要】端粒和端粒酶是近年来生命科学研究的热点。
细胞分裂过程中，因其染色体末端(端粒)DNA不能完全复制而缩短，使细胞逐渐失去增殖能力而衰老，端粒酶可延长染色体末端DNA，端粒酶的活化使细胞获得无限增殖能力。
在永生细胞系及绝大多数的恶性肿瘤(85%)细胞中有活化的端粒酶。
本文综述了端粒与端粒酶的结构与功能，端粒酶在端粒合成与稳定中的作用，介绍了端粒酶活性的测定方法，并讨论了通过抑制端粒酶活性来治疗癌症的可能性。
【关键词】端粒；端粒酶；癌症端粒(telomere)和端粒酶(telomerase)是近年来生命科学研究的热点之一，正常细胞在分裂过程中，因其染色体末端(端粒)DNA不能完全复制而缩短，细胞经多次分裂后，端粒缩短达到危机点(crisis)，促发某一信号，使细胞逐渐失去增殖能力而衰老死亡。
端粒酶可延长染色体末端DNA，端粒酶的活化使细胞获得无限增殖能力。
基于此，有少数细胞(如永生细胞系)及绝大多数恶性肿瘤细胞(85%)可逃逸这一危机点。
因为在这些细胞中含有活化的端粒酶系统，从而使细胞获得无限增殖能力，使之永生化和恶变，因此，对端粒和端粒酶系统的研究，有助于阐明细胞衰老和恶变机制，对肿瘤的诊断、治疗以及抗衰老都具有重要的理论和实际意义。
一般认为，癌症是由多种突变的积累，破坏了细胞正常的生长调控而引起的，除了一些明确的病因外，有许多实验结果支持这样一种假说，即端粒酶的激活对许多恶性肿瘤细胞的形成是必需的，且肿瘤细胞与端粒酶活动增加之间存在相互激发的关系〔1〕。
这种显著的相关性提示:在肿瘤细胞恶性状态的进展和维持中，端粒酶可能起到关键性的作用。
本文就端粒与端粒酶研究的最新进展作一综述，具体讨论了端粒的结构与功能，端粒酶在端粒合成与稳定中的作用，介绍了端粒酶活性的测定方法，细胞永生与端粒酶激活的关系，提出了通过抑制端粒酶活性来治疗癌症的可能性。
1端粒(telomere)1.1端粒(telomere)的概念端粒是指真核细胞线性染色体末端的蛋白质-DNA特殊结构，即染色体末端DNA序列的多个重复，其作用是保护和稳定染色体的末端，它由2～20kb串联的短片段重复序列(TTAGGG)n 及一些结合蛋白组成。
端粒酶与肺癌的诊断和预后
也有高表达 ， ｈ Ｅ Ｔ则表达接近零 ， 而 ＴＲ 显示出良好 的肿瘤 特 异性 和敏 感 性 ， ｈ Ｅ Ｔ 表 达 水 平 与 端 且 ＴＲ
粒酶 活性 有显著相 关性 Ｈ 。因此 ，Ｔ Ｒ Ｊ ｈ Ｅ Ｔ可被作 为
肺癌 的一个 新的肿瘤 标志 物 。
虽 然端 粒 酶能 在 多种 肿瘤 中表 达 ， 其激 活 机 但
端粒酶 是一种棱 糖 核蛋 白 ， 有 逆转 录酶涟性 ， 其
但 Ｂｌ 表达与端粒酶活性无明显相关性 ， ，ｄ２ ｅ２ － 相反 Ｂ － 更易在分化较 好或 分化 较差 丽端粒 鞴碉 性 的肺 癌 中 表达 。而 Ｊ ８ 等用定量的方法通过对 ４ 例原 ０
发性肺 癌研 究进一 步证 实 Ｐ３蛋 白表达 与端粒 酶活 ５ 性呈显著 相关 。端 粒踌 的激 活 与表 达是 否受 上 述 ｊ 基因的调节 尚须进一步的研究来证实 。
能以自身 Ｒ Ａ为横板合成端粒 Ｄ Ｎ Ａ末端重复序 列 ， 而弥补 细胞分裂 时造 成 的端粒 的不 足 ， 免由 从 避
此引发 的染色体 的 不 稳 定及 端 粒 危 机 ， 免 细胞 的 避 衰老和 死亡。许 多 肿 瘤都 有 端粒 酶 的表 达 ， ｍ 等 Ｋｉ 总结分 析 了 ８５例恶 性肿 瘤 和 ６６例 正常 组 织 ， ９ ４ 发 现端粒 酶在肿檀 组织 中表达 阳性 率 达 ８ ％， ５ 而正 常
制 尚不清楚 。． 研究 显示 ， － 某些 Ｃ ＭＹＣ基 因的过度 表
达可能与肿瘤组鲺端粒酶激活有关 ， 其表达产物为 转录调节因子， 与绑胞 的增殖 和分化有关。端粒酶 的激活 ． Ｅ Ｔ起 着 至 关 重 要 的 作 用 。研 究 表 明 ｝ Ｒ ｒ
ｈ Ｅ Ｔ启 动区存 在大量 ｃＭＹ Ｔ Ｒ Ｃ结 合 位点 ， 与 ｃ 可 ＭＹＣ蛋 白结 合 ， 直接 激 活 ｋ Ｅ Ｔ 的 转 录 ｊ Ｔ Ｒ 。Ｏｈ 等分离 了 ｝ Ｅ Ｔ基 因启 动子 ， ｆ Ｒ ｒ 并确 定其 功能 区 ， 发 现在 正 常细胞启 动 子投 有 激 活 ， 在肿 瘤 细 胞 中则 而
端粒和端粒酶在癌症中的研究进展及意义
端粒和端粒酶在癌症中的研究进展及意义摘要：端粒是位于染色体末端的DNA串联重复序列，对基因组稳定性和完整性起保护作用。
端粒的长度与细胞周期密切相关。
其长度变化机制分为依赖端粒酶活性和端粒重组两类，氧化应激和铅（Pb）与端粒酶的功能蛋白相结合抑制其活性，致使端粒缩短，硒（Se）与二者具有拮抗作用，延缓衰老。
相关数据表明85%肿瘤细胞与端粒酶活性成正相关，以端粒酶活性作为肿瘤治疗靶标称为当代热点之一。
主要对肺癌、乳腺癌等恶性肿瘤与端粒的相关性进行了综述，以期为端粒和端粒酶在癌症治疗研究提供参考依据。
关键词：端粒；端粒酶；肿瘤20世纪30年代，人们开始了解染色体上的一种特殊结构——端粒。
端粒是存在于真核细胞线状染色体末端的一种特殊结构，与端粒结合蛋白一起构成了特殊的“帽状”结构，维持染色体的完整和细胞活性，其实质为一小段DNA-蛋白质复合体。
端粒与有丝分裂有着密切的联系，细胞每分裂一次，端粒就缩短30～200bp，当缩短到2～4kb，会导致细胞复制功能衰退，引起细胞衰老或死亡，被科学家称为“有丝分裂时钟”和“生命时钟”[1，2]。
端粒的延长和重组机制都是通过端粒酶来催化和介导的，端粒酶在保持端粒稳定、基因组完整、细胞活性和潜在的增殖能力等方面发挥重要作用。
鉴于端粒酶在正常组织体细胞中的活性被抑制，而在肿瘤中则被重新激活，可能参与肿瘤恶性转化的机制，成为医学界研究的重点和热点之一。
2009年美国3位科学家因发现端粒和端粒酶结构及其对染色体末端的保护功能，而获诺贝尔生理学或医学奖。
1端粒和端粒酶1.1端粒的结构和功能端粒是位于染色体末端由一个富含G的DNA串联重复序列[3]和端粒结合蛋白组成，每个重复序列一般为5—7bp[4]。
不同物种其重复序列存在l～2个碱基差异，哺乳动物的端粒重复序列为5’-（TTAGGG）n-3’[5]，植物的端粒重复序列为5’一（TTTAGGG）n-3’[6]。
端粒长15～20kb，其重复序列成T环结构，像帽子一样能有效防止染色体间末端重组、融合和染色体退化[7]。
肺癌患者血中循环癌细胞端粒酶活性的表达及意义
ｅｒ ．
【 ｙ ｗ ｒ ｓ ｌｎ ｅ ｐａ ｍ ； ｔ ｏ ｅａｅ ｔｍｏ ａｋ ｒ； ｃｒｕ ｔ ｇｃ ｎ ｅ ｅ Ｋｅ ｏ ｄ 】 ｕ ｇｎ ｏ ｌ ａ ｓ ｅ ｍ ｒｓ ； ｕ ｒ ｒ ｅ ｉ ｌ ｉ ａ ｃ ｒｃ ｌ ｌ ｍ ｓ ｃａｎ ｌ
【 ｂ ｔ ｃ】Ｐ ｒ ｏ ｅ Ｔ ｅｅ ｔ ｈ ｅ ｍｅａｅ ａ ｔ ｉ ｆ ｕ ｇｃ ｎ ｅ ｅｌ ｉ ｅ ｐ ｅａ ｂｏｄ ｂ Ｒ Ｐ Ｍ ｅ ｏ ｓ Ａ ｓｒ ｔ ｕ ｐ ｓ： ｏｄ ｔｃ ｔｅｔｌ ｒｓ ｃ ｖｔ ｏ ｎ ａ ｃ ｒ ｌ ｎ ｐ ｒ ｈ ｒ ｌｏ ｙ Ｔ Ａ ． ｔ ｄ ： ａ ｏ ｉ ｙ ｌ ｃ ｓ ｉ ｌ ｈ
ｔｅ ９ ｃ ｓｓ ５ ３ （ ２ ４ ）ｃ ｓ ｓｓ ｏ ｅ ｉｎｆ ａ ｔ ｃ ａ ｅ ｌｍ ｒｓ ｃｉ ｔ，ａ ｎ ｅｅ ｃ ｓｓｔｅ ｔ ｏ ｅａｅ ｈ ａｅ ，６ ． ％ ３ ／ ９ ａ ｅ ｈ ｗ ｄ ｓ ｉ ｃｎ ｌ ｉ ｒ ｓｄ ｔ ｏ ｅａｅ ａ ｔ ｉ ４ ｇ ｉ ｙｎ ｅ ｅ ｖ ｙ ｍｏ ｇ ｔ ｓ ａｅ ｈ ｌｍ ｒｓ ｈ ｅ
端粒酶作为肿瘤标志物的研究进展
端粒酶通过延长端粒序列来增加染色体稳定性，从而维持细胞寿命。在正常细胞中，随着细胞分裂次数的增加 ，端粒序列逐渐缩短，当端粒缩短至一定程度时，细胞进入复制停滞期或凋亡。而在肿瘤细胞中，端粒酶的表 达水平较高，能够维持端粒序列的长度，使肿瘤细胞逃避正常的细胞衰老和死亡过程。
端粒酶与肿瘤的关系
端粒酶活性可以预测肿瘤的预后，为患者和医生提供参 考。
04
端粒酶作为肿瘤标志物的 前景和挑战
提高检测灵敏度和特异性
总结词
提高端粒酶作为肿瘤标志物的检测灵敏度和特异性是 关键的挑战之一。这需要深入研究端粒酶的生物学机 制和肿瘤细胞中端粒酶的表达调控机制，以发现更特 异和敏感的检测方法。
详细描述
目前，已经有一些基于端粒酶的肿瘤标志物检测方法 ，如端粒酶活性检测、端粒酶RNA检测等。但是，这 些方法的灵敏度和特异性还需要进一步提高。例如， 一些非肿瘤疾病或良性疾病中也可能出现端粒酶活性 升高的情况，这会给诊断带来一定的干扰。因此，开 发出更特异和敏感的检测方法是非常重要的。
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《端粒酶作为肿瘤标志物的 研究进展》
2023-10-29
目 录
• 端粒酶概述 • 端粒酶的检测方法 • 端粒酶作为肿瘤标志物的应用 • 端粒酶作为肿瘤标志物的前景和挑战
01
端粒酶概述
端粒酶的生物学作用
端粒酶的组成
端粒酶是由RNA和蛋白质组成的复合体，其中RNA为模板，提供端粒重复序列，蛋白质为催化酶，促进端粒 DNA合成。
端粒酶研究的历史与现状
端粒酶的发现
20世纪80年代，科学家们发现了端粒酶，并认识到其在维持染色体稳定性和细胞寿命中的重要作用。
端粒酶作为肿瘤标志物的研究
端粒酶控制细胞老化和癌症发展的重要因素
端粒酶控制细胞老化和癌症发展的重要因素细胞老化是生物体经历的一个自然过程，它与生物发育和衰老密切相关。
然而，端粒酶在这个过程中起到了至关重要的作用。
端粒酶是一种酶类蛋白，主要功能是维持染色体的稳定性，防止端粒的缩短。
端粒的缩短与细胞衰老和癌症的发展密切相关。
本文将介绍端粒酶的作用、调控细胞老化和抑制癌症发展的机制。
端粒酶是一种核酸酶，存在于大多数真核细胞中。
它主要由一个RNA分子和一组蛋白质组成。
端粒酶的功能是在每个细胞分裂后，补充和延长端粒的序列，使其保持相对恒定的长度。
端粒是染色体末端的重复序列，它们的主要作用是保护染色体免受异常融合和损伤。
在每次细胞分裂时，DNA 复制不能完全覆盖末端的端粒序列，从而导致端粒长度的缩短。
如果端粒变得过短，细胞将停止分裂并进入老化状态。
这是因为端粒的缩短被认为是细胞老化的重要标志。
细胞老化与功能减退、增生能力下降以及器官衰竭等现象有关。
然而，端粒酶的活性也与癌症的发展有关。
在正常细胞中，端粒酶的活性受到严格控制，以防止细胞不受约束地分裂。
但是，在某些癌细胞中，端粒酶的活性被恢复或过度表达，从而导致端粒长度的延长。
这使得癌细胞能够无限制地分裂和扩散，成为癌症的重要因素之一。
为了更好地理解端粒酶在细胞老化和癌症发展中的作用，科学家进行了大量的研究。
他们发现端粒酶的活性受到多种调节因子的影响，其中包括端粒酶逆转录酶（telomerase reverse transcriptase, TERT）和端粒结合蛋白（telomere bindingproteins）。
这些调节因子通过调控端粒酶的表达和激活，影响端粒长度的维持和调控。
此外，端粒酶还受到其他细胞内外因素的影响。
例如，DNA 损伤和炎症等外界刺激可以促进端粒酶的活化。
与此相反，一些细胞因子和激素可以抑制端粒酶的活性，从而抑制细胞的增殖。
细胞内的信号传导路径也可以调节端粒酶的表达和激活，从而影响细胞生命周期的调控。
端粒酶与肺癌研究进展
ＡＮ，Ｏ。，琵理刚怍。．。址Ｔ能ＡＴ惟町
综述
端粒酶与肺癌研究进展
黄益玲， 黄利鸣１ 胡火军２
湖北宜昌４４３００２）
（１．三峡大学医学院病理学教研室；２．湖北省宜昌市中心人民医院外四科
Ｉ摘要ｌ端粒酶是一种由结构ＲＮＡ和蛋白质构成的逆转录酶，端粒酶的激活可使细胞获得无限增殖的能力而成为永生细胞，它与肺 癌的发生发展关系密切，本文综述端拉酶与肺癌的关系研究进辰。 Ｉ关键词ｌ端粒謦 Ｉ中图分类号ｌ 肺癌 Ｉ文献标识码ｌ
每日观察病人鼻腔情况 如脓性分泌物过多或局部红肿疼痛较明显，立即更换胃管；正
确使用黏膜保护剂和抗生素，长期鼻饲者，根据情况使用１％薄荷 油和呋麻液交替滴鼻，每日２次，可收缩血管，防止黏膜充血水肿， 减轻胃管对黏膜的刺激。
６．６
病人带胃管回家继续鼻饲时，护士应向家属进行详细的健 如掌握检验胃管是否在胃内的方法，预防胃管污染，定期更换
ａｌｌｅｌｉｃ ｌｏｓｓ
【８】Ｙａｎｇ ｃｔ，ｌｅｅ ＭＨ，Ｌａｎ Ｉｔｓ．Ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｐｌｅｕｒａｌ ｅｆｆｕｓｉｏｎｓ
ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ
ｃａｎｃｅｒｆｆ］．ＩＮＴ－ ［９１
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ［Ｊ］．１９９８，１６：５６７～５７３．
ａｃ．
Ｙａｓｈｉｍａ ｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ
Ａ Ｒ７ ３４．２
【文章编号ｌ １６７４一０７４２（２００９）ｌｏ（ａ）一０１６６—０２
端粒酶（ｔｏｌｅｍｅｒａｓｅ）是一种特殊的逆转录酶，它以自身ＲＮＡ为 模板合成端粒，补偿细胞分裂时端粒的缩短，维持染色体的动态 平衡，使细胞具有无限分裂的能力，在肿瘤的发生发展过程中起 着重要的作用。本文就端粒及端粒酶与肺癌关系的研究进展作一 综述。
美国科学家进一步证实癌症与端粒酶的关联性
在癌症领域，许多科学家将他们的整个研究生涯都投入到去寻找一些细胞相似点，希望有可能促成针对许多癌症的单一疗法——然而一个多层面的问题很少有机会获得单一的答案。
1997年，科学家们发现了一个他们认为是细胞不死关键原因的基因。
端粒酶逆转录酶（TERT）是端粒酶的催化亚单位。
尽管细胞永生听起来不错，但实际上它是癌性肿瘤在癌症患者体内生长和繁殖的方式。
在上世纪90年代末，TERT是否是致癌基因是一个尚未解答的问题。
科学家们在接下来的十年时间里一直在搜寻激活它的突变，却没人能够找到TERT突变。
两年前，两个研究小组发现TERT根本没有突变。
与之相反，突变发生在控制这一基因表达的调控区域中，这些突变出现在黑色素瘤、脑癌、肝癌和膀胱癌等许多癌症中。
科罗拉多大学BioFrontiers研究所主任说：“就在那时我意识到我们应投入实验室中所有的工具和专业知识来了解这些突变背后的机制。
我们实验室与科罗拉多大学Anschutz 医学院的合作者们一起，追踪了从DNA到增高的RNA水平，到增高的蛋白质水平，直至增高的端粒酶水平这一突变的效应。
我们在23个膀胱癌细胞系中通过比较有和无突变的癌细胞阐明了这一效应。
”Cech证实这些启动子突变与高水平的mRNA、TERT蛋白、端粒酶酶活性以及端粒长度相关。
他将研究小组的成果发布在了近期的《科学》（Science）杂志上。
膀胱癌细胞系是在Anschutz医学院获得，Cech研究小组和同事们采用这些细胞系，是因为它们的细胞运作方式适用于各种不同的癌症。
膀胱癌本身就是个不小的威胁。
根据美国国立卫生院的报道，仅2014年这种癌症就导致1.5万多人死亡，同年确诊了近7.5万新增病例。
治疗这种癌症并不容易，其包括一些联合化疗、细菌生物疗法或完全切除膀胱。
这一研究小组与科罗拉多大学的两个学院合作，从Anschutz医学院获得了独特的膀胱癌细胞系。
Cech实验室还采用一种方法检测了细胞内的TERT蛋白质分子数量以及酶活性的微小改变。
端粒与癌症的关系研究
端粒与癌症的关系研究近年来，随着人类寿命的延长和生活习惯的改变，癌症已经成为威胁人类健康的重大疾病之一。
对于癌症的研究，科学家们一直在探索其发生的机制和原因，而其中一个引人关注的领域就是端粒与癌症之间的关系研究。
端粒是细胞染色体末端的DNA序列，它的长度随着细胞的分裂而逐渐缩短。
一般情况下，当细胞的端粒长度达到一定程度时，它就无法再正常分裂了，最终导致衰老和死亡。
这就是所谓的“端粒损耗理论”。
然而，现在的研究表明，端粒的缩短不仅仅是细胞寿命的限制因素，还与许多疾病的发生有关，其中就包括癌症。
一般情况下，健康细胞的端粒长度都是相对稳定的，而癌症细胞则往往具有异常的端粒长度。
具体来说，癌症细胞通常具有维持端粒长度的机制，使得它们能够持续不断地分裂。
这种机制称为“端粒酶反转录酶(Telomerase)”活性的增加。
从这个角度来看，端粒在肿瘤的生成和发展中发挥着重要的作用。
因此，科学家们开始研究端粒与癌症之间的关系，并探索如何利用端粒的特性来治疗癌症。
许多重要的研究成果已经在这个领域得到了取得，下面就分别介绍一些具有代表性和重要性的研究进展。
一、端粒缩短与癌症的关系最初，科学家们认为端粒缩短只是细胞寿命的限制因素，但后来发现与它相关的疾病非常多，其中包括多种类型的癌症。
在许多研究中，长时间的慢性炎症和长期的患病状态，如心脏病、糖尿病和高血压等，都与端粒短缩短有关。
特别是黑色素瘤(一种致命的皮肤癌症)，癌细胞的端粒长度比正常细胞更短。
这意味着端粒的缩短和癌症之间的关系已经得到充分的证明。
二、利用端粒的特性治疗癌症在实验室中，已经提出了许多基于端粒的治疗癌症的方法。
以下是一些比较有代表性的方法：1. 端粒酶抑制剂由于端粒酶反转录酶活性的增加，许多科学家认为通过抑制端粒酶的活性来阻止癌细胞的增殖是有效的。
这个方法已经在实验室中获得了巨大的成功。
此外，一些临床试验也获得了一定的成果。
例如，对曾经被证明存在端粒酶异常的患者进行端粒酶抑制实验，发现癌细胞的增殖受到了明显的抑制。
端粒、端粒酶与肺癌的相关性研究进展
细胞肺癌端粒酶 阳性 率约 ６ ２％ ～ ９ ４％ ， 小细胞 肺 癌 的 阳性率 约为 ９ ０％ ～１ ０ ０％ 。卢 敏等 在 ３ ０例 非小细 胞肺癌 患者 的手术切 除的肺组织 中发现端粒 酶阳性率达
组成 以及对端粒 酶 的活性 起到调 控作用 的蛋 白质 ， 一 些具有 Ｈ ／ Ａ Ｃ Ａ ｂ ｏ ｘ的 ｓ ｎ ｏ Ｒ Ｎ Ａ结 合蛋 白、 甘 氨酸 一精 氨 酸富含蛋 白 １ 以及 ｐ ｏ ｔ ｉ ｎ ／ ｒ ｅ ｐ ｔ ｉ ｎ和端粒 酶 Ｃ ａ ｊ ａ ｌ ｂ ｏ ｄ ｙ 蛋白
１ 等 。
在正常人体细胞 中 ， 除了造血细胞 、 干 细胞和生殖 细 胞， 绝大多数体细 胞 中端 粒酶 的活性受 到抑制 。而在癌 细胞进 展过程 中 ， 端粒酶则被激活 ， 因此端粒 酶的激活在 细胞的恶变过程 中起到 重要作 用。研 究表 明 ， 在癌 变细 胞 中端粒酶主要通过 Ｔ Ｅ Ｒ Ｔ催化 Ｔ Ｅ Ｒ Ｃ逆转 录来 维持肿
新 方 法 的热 点 。
成 。其 中 Ｔ Ｅ Ｒ Ｃ含 有 与端粒 互补 的序 列 ， 是 端粒 重 复
序列复制 的模 板 。而 Ｔ Ｅ Ｒ Ｔ作 为端 粒酶 的催 化亚 单 位 ，
其基 因由约 ３ ７ ｋ ｂ大小 的基 因组 Ｄ Ｎ Ａ组 成 ， 包括 ３ ３ ｋ ｂ
的 内含子序列以及共 ４ ｋ ｂ大小的 １ ６个外显 子组成 ， 该基 因起到使 Ｔ Ｅ Ｒ Ｔ基因转录的作用 。端粒酶 的组 成 中含 有多种蛋 白质 ， 如具有保护 Ｔ Ｅ Ｒ Ｃ功能 的蛋 白质复合 物 ， 该蛋 白复 合体 由角 化 不 良蛋 白 、 Ｎ Ｏ Ｐ １ ０ 、 Ｎ Ｈ Ｐ ２和 Ｇ Ａ Ｒ １
ｔ ｏ ｒ １ ， Ｔ Ｒ Ｆ １ ） 、 端 粒重 复序 列结 合 因子 ２ （ Ｔ Ｒ Ｆ ２ ） 、 端 粒保 护蛋 白 １ （ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｅ ｌ ｏ ｍ ｅ ｒ ｅ ｌ ， Ｐ Ｏ Ｔ １ ） 、 Ｔ Ｒ Ｆ １相互 作 用
端粒酶对肿瘤干细胞生长的影响研究
端粒酶对肿瘤干细胞生长的影响研究从癌症的角度来看，肿瘤干细胞是一个非常重要的研究方向。
因为多数癌症的发生，都是由肿瘤干细胞的不良增殖和分化造成的。
因此，寻找一种针对肿瘤干细胞的治疗方法，成为了当前癌症研究中的焦点问题之一。
端粒酶是细胞内的一种酶类物质，对于肿瘤干细胞的不良增殖和分化起着重要的作用。
本文将通过细致的数据分析和文献综述，探讨端粒酶对肿瘤干细胞生长的影响研究。
1.端粒酶的基本结构和功能在讨论端粒酶对肿瘤干细胞的生长影响之前，我们首先需要了解端粒酶的基本结构和功能。
端粒酶是半端体酶，即由RNA和蛋白质两种分子构成的核酶复合物。
它主要存在于真核生物的染色体末端的末端重复序列(TTAGGG)的3'末端，可以保护染色体的稳定性，同时也参与了染色体的复制和修复过程。
它的主要功能是维持染色体末端长度，并且途径催化断裂的多种方式都能够在酶作用下修复。
我们可以看到，端粒酶对于细胞的生长、分化和死亡等方面起着非常重要的调节作用。
2.端粒酶在肿瘤干细胞中的作用针对肿瘤干细胞，端粒酶的作用显得尤为重要。
由于癌细胞具有长时间分裂的特性而难以表现出减少细胞数。
在绝大部分的癌细胞中，端粒酶的表达都会较正常细胞显著增强，从而降低了癌细胞自身的凋亡率，增加了治疗的难度。
此外，端粒酶还与肿瘤干细胞的免疫逃脱相关。
通过引导肿瘤干细胞进入休眠状态，使它们暂时摆脱免疫系统的攻击，从而加速癌症的扩散和恶化。
因此，研究端粒酶在肿瘤干细胞中的作用对于癌症的治疗有着至关重要的意义。
3.端粒酶对肿瘤干细胞的干预研究从现有实验结果来看，干预端粒酶对于肿瘤干细胞生长的影响是显著的。
一些研究结果表明，针对端粒酶的蛋白质或RNA小分子抑制剂，在体外培养条件下可以使肿瘤干细胞停滞生长或进入凋亡状态。
但是，在体内治疗肿瘤干细胞时，由于端粒酶在正常细胞中的作用同样不可忽视，因此，单纯的针对端粒酶的治疗方法并不能达到很好的效果。
目前有一些细胞分享模式的治疗策略，如放射性元素标记与小分子靶标利用等，已经得到较好的应用。
端粒、端粒酶与肺癌研究进展
肺癌是临床常见的恶性肿瘤，其预后较差。诊 断方法主要有影像、各种病理资料检查等。由于种 种原因导致上述检查的阳性率不高。因此，寻找一 种敏感性、特异性更高、既简便、经济、危险性小．患 者又易于接受的诊断方法显得十分迫切。近年来， 国内外有大量研究资料表明：在肿瘤发生的多阶段、 多步骤过程中，端粒酶的再激恬可能参与细胞的癌 变过程；端粒酶几乎在所有类型的肿瘤中均有不同 程度的表达。端粒酶已被公认为目前已知的最为广 谱的肿瘤标记物。端粒酶有望在肺癌诊断、治疗等 方面得到广泛应用。现将近年来有关端粒、端粒酶 与肺癌研究的进展综述如下。 １端粒、端粒酶
端粒是真核细胞线性染色体末端的特殊的蛋白 质一ＤＮＡ结构．是维持染色体结构完整性所必须的， 它由端粒酶以逆转录方式合成。ＭＭＩｅｒ首先发现 染色体末端结构对染色体稳定十分重要，并命名为 端粒。７０年代Ｂｌａｃｋｂｕｒｎ…在四膜虫上初步揭示端 粒的结构是富含Ｇ的核苷酸重复片段；１９８４年 Ｇｒｉｅｄｅｒ和ｂｌａｃｋｂｕｒｎ口３发现四膜虫提取物能使寡聚 核苷酸延长，证实确实有一种酶的存在，并有别于 ＤＮＡ聚合酶，因此命名为“端粒酶”。人体端粒酶 ＤＮＡ是由６个核苷酸重复序列（ＴＴＡＧＧＧ）ｎ组 成，长度有８～１４ｋｂ．端粒和端粒蛋白组成端粒蛋白 ＤＮＡ复合体，给染色体末端提供一个保护“帽”．防 止核酸外切酶和连接酶的攻击．防止染色体末端的 端端融合、重组、降解，保证细胞在有丝分裂时染色 体准确分离，在减数分裂时染色体的配对和运 动”’“。１９８９年Ｍｏｒｉｎ［４：首次发现人癌细胞系端粒 酶，它足由ＲＮＡ和蛋白组成，能以端粒的３’端为引 物，以自身ＲＮＡ片段为模板合成新的ＴＴＡＧ－Ｇ来 修补细胞分裂时端粒的缩短［５ｊ。目前研究表明端粒 酶由二个部分组成：ｈ１、Ｒ、ｈＴＥＲｑ、、ＴＰｌ。其中
肺癌组织和癌性胸液细胞端粒酶活性测定研究.
肺癌组织和癌性胸液细胞端粒酶活性测定研究组织细胞中端粒酶活性高低与细胞分裂和细胞衰老过程密切相关，尤其是在恶性肿瘤组织存在异常高的端粒酶活性［1］。
我们应用端粒重复扩增（TRAP）结合自行设计的萤光素（FITC）－抗萤光素酶偶联微孔板呈色法检测了29例肺癌组织和29例癌性胸液标本中的端粒酶活性，并与非肿瘤肺组织和非癌性胸液细胞中端粒酶活性进行比较。
材料与方法组织标本均来自本院纤维支气管镜活检和手术患者。
其中29例肺癌患者经病理学诊断证实；29例癌性胸液中11例系肺癌经病理学证实，9例经脱落细胞学证实，其余9例经影像学及其它临床辅助检查证实。
18例非肿瘤肺组织均为本院手术切除标本，11例对照组胸液为经临床证实的结核性胸膜炎患者。
取组织100 mg用手术刀片切成薄片，研磨均匀。
组织碎片悬浮于200 μl冷裂解液中，冰水浴30 min，12 000 r/min离心30 min，4℃取上清迅速置-30℃，同时取50 μl上清用考马斯亮蓝法测蛋白含量。
用0.2 ml离心管底加5.75 μmol/L 上游引物（CX）2 μl，加10 μl低熔点石蜡，在石蜡凝固后加46 μl聚合酶链反应液，其终浓度为10倍浓缩反应液5 μl，1.5mmol/L MgCl2，0.1 g/L明胶，200 μmol/L 脱氧三磷酸核苷（dNTP），0.23 μmol/L下游引物（TS），2 U耐热DNA聚合酶（Taq酶）。
测定时加入样本处理上清液2 μl，25℃ 30 min，94℃5 min，94℃ 30 s、50℃ 30 s、72℃ 90 s，30个循环，72℃ 10 min。
将链霉亲和素（Streptavidin）溶于pH 10.0碳酸盐缓冲液中10 mg/L，于微孔板每孔加100 μl，4℃过夜，pH 7.4磷酸盐缓冲液（PBS）洗3次。
取0.6 mol/L NaOH与扩增产物等量混合，室温10 min。
于微孔板中加入100 μl杂交液，25 μl变性混合液，37℃ 1 h，pH 7.4 PBS 洗3次，加入酶标抗体100 μl，37℃ 30 min，洗板3次，加四唑盐（TMB）呈色液100 μl，37℃ 10 min，加2 mol/L H2SO4100 μl，分别于酶标仪450nm与690 nm比色。
端粒酶与肺癌研究进展
端粒酶与肺癌研究进展
宋敏利;卫建平
【期刊名称】《医学综述》
【年(卷),期】2005(011)004
【摘要】自从1989年Morin首次发现人癌症细胞与端粒酶激活有关以来，国内外专家对端粒酶进行了大量研究。
对其结构、功能、分布、表达的情况都有更深人的认识。
端粒酶除表达于正常组织细胞，如胚胎细胞、成人男性生殖细胞、造血干细胞、子宫内膜细胞、活化的淋巴细胞等以及永生化细胞外，几乎在所有类型的肿瘤中均有不同程度的表达，如乳腺癌、肺癌、胃癌等实体肿瘤中端粒酶活性的表达增高，端粒酶有望在肺癌诊断、治疗、预后等方面得到广泛应用，现将端粒酶与肺癌研究的进展综述如下。
【总页数】3页(P338-340)
【作者】宋敏利;卫建平
【作者单位】内蒙古自治区包头市中心医院,内蒙古,包头,014040;内蒙古自治区包头市中心医院,内蒙古,包头,014040
【正文语种】中文
【中图分类】R734.2
【相关文献】
1.端粒、端粒酶与肺癌研究进展 [J], 马吉勇;庞玉英
2.端粒、端粒酶与肺癌的相关性研究进展 [J], 周婉婉;梁冰;胡丙清
3.端粒酶活性检测应用于诊断肺癌的研究进展 [J], 康桂艳;林红伍
4.端粒酶与肺癌研究进展 [J], 黄益玲;黄利鸣;胡火军
5.以端粒酶为靶治疗肺癌研究进展 [J], 季冬梅;洪小南
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人体肺癌端粒酶表达的研究
人体肺癌端粒酶表达的研究刘瑾;杨青;兰亚佳;王绵珍【期刊名称】《现代预防医学》【年(卷),期】2004(31)3【摘要】目的 :研究肺癌端粒酶活性和临床特征的相关性 ,评价端粒酶作为肺癌诊断标记物的可行性 ,初步探讨吸烟和端粒酶激活在肺癌发病机制中的作用。
方法 :组织标本取自 2 0 0 0年 6月～ 2 0 0 1年 1月华西医大附一院胸外科住院手术病人 ,其中原发性肺癌 2 7例 ,结核瘤 2例 ,炎性假瘤 1例。
用 TRAP- EL ISA法检测端粒酶活性。
结果 :2 7例组织病理学确诊的肺癌有 81.4 8% (2 2 / 2 7)端粒酶活性检测阳性。
在不同组织病理学分型中 ,阳性率由高到低依次为 SCL C (小细胞肺癌 )、鳞癌、复合性腺鳞癌、细支气管肺泡腺癌、腺癌。
肺癌组织端粒酶活性明显高于癌旁 (P=0 .0 0 0 )和良性组织 (P=0 .0 13)。
结论 :端粒酶是一种较理想的诊断性肿瘤标志物。
吸烟可能通过端粒酶激活途径促发鳞癌。
【总页数】3页(P317-319)【关键词】肺癌;端粒酶活性;临床特征;发病机制;吸烟【作者】刘瑾;杨青;兰亚佳;王绵珍【作者单位】四川大学华西劳动卫生教研室【正文语种】中文【中图分类】R734.2【相关文献】1.肺癌细胞端粒酶活性表达与肺癌分期关系的研究 [J], 孙春香;李黎;胡学芳;宋满景;刘卓拉;尹卫东2.肺癌磷酸酯酶蛋白与端粒酶逆转录酶表达的相关性研究 [J], 余红缨;黄洁;王珊;彭燕3.端粒酶活性在肺癌患者外周血中的表达研究 [J], 王勇;胡杰贵;江丰收;胡冰4.端粒酶和erbB4基因在非小细胞肺癌中表达的研究 [J], 陈琳;邓在春;王丰民;刘东海5.人端粒酶催化亚单位启动子调控自杀基因HSV-TK靶向性表达治疗肺癌的体内外实验研究 [J], 王艳萍;唐小军;周清华;车国卫;陈小禾;朱大兴因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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正 常 组 织 中 为 ｊ ， 一 发 现 有 可 能 成 为 揭 示 恶 性 肿 眭 这
１３ 端 粒 酶检测 方法 ．
采 用 Ｔ Ａ Ｃ ＬＳ Ｒ Ｐ Ｐ Ｒ Ｅ ＩＡ试 剂盒
进 行 测定 ． 详细 方法参 见文献 ［ ： １ 。细 胞 样本 处理 方法 为取 上述 各堵养 ｔ ， 培养 基 ， Ｂ ｔ 弃 ｉ 胞 Ｐ Ｓ液 漂 洗后 用 细胞 刷 子刮下 细胞离 心 ． 收集 细 胞沉 淀 ｎ ｎ Ｕ Ｔ ｏ ｄ ｉ ｕ ｇ ｍａｉ ａ ｔｔｍＯ￣ ｒ ｇ
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肺 癌组 织 和细 胞 中端 粒 酶 表 达 的研 究
赖 燕 ． 忠 文
： 湖 帝 省 劳 动 ＿ 生 职 业 病 防 清 研 究 所 附 属 医 院 ． 沙 ４００ ； 湖 南 医 科 大 学 湘 雅 版 院 耳 鼻 咽 噍 研 究 室 ） Ｉ １ Ｊ 长 １ｇ７ ２ 摘要 目的 达 结果
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【 著】 论
谍 ¨端 转 酶 在 肺 癌 中 的 表 达 方 法 采用 Ｔ Ａ Ｃ ＬＳ Ｒ ＰＰ ＲＥ ＩＡ试 刑 龠 检 测 肺 癌 组 织 放 其 细 胞 株 中 端 粒 酶 的 表 肺癌 组 蹦 及 Ａ 细 胞 株 和 白 皿 病 Ｈ ６ ［ ０细 腿 株 中 均 存 较 高 的 端 牲 酶 活 ＿ ． 哦 光 度 ｆｄ） 表 示 分 别 为 咤 以 值
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２ 结 果
瘤 发病 的共 同规 律并 对肿瘤 临床 诊 断及治 疗 起 到指导 作 用 。为 了探 讨 肺 癌 【端 粒 酶 的 表 达 抛律 、 ＝ 验采 ｝ Ｊ ４试 用 ’ Ａ Ｃ ＬＳ Ｉ Ｐ Ｐ Ｒ Ｅ ＩＡ法 捡 划 ｒ肺 癌 及其 细胞 株 中 的端 １ Ｒ
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的 ・ 种特 殊 逆转 录酶 ， 依 自身 Ｒ Ａ为 模 板 ． 转 录 能 Ｎ 逆 合成 细胞 染 色体 两 端 的端 粒 ． 而 对 维 持 端牲 长度 及 进 细 胞基 因组 的稳 定性发 挥 重要作 用 ：近年 来的研 究 显 不， 端粒 酶与 细胞 永生化 及 恶 Ｉ 变 ｌ密 切关 系 ． 人体 ｊ 彳 ： Ｊ 在 大 多数恶性 肿 瘤 组 织 及 细胞 株 巾端 粒 酶 高袁 达 ． 】 ｆ 在 ｎ
关键词 端 粒 酶 ； 癌 ； 遮 肺 表
中 国 图 书 资料 分 类 号 ：２ ９８
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文 献 标 识 码 ： Ａ
文 章 编 号 ：０．一１５ 【０２０ —００ ｏ １９ ｝ ２７ ２０ 】３ ０１一 ２
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