艾滋病实验室检测技术及职业暴露讲课文档
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
《山东省卫生厅关于进一步加强全省艾滋病检测工作的通 知 》 鲁卫疾控字[2013]28号（2013年5月9日下发）
8
第八页，共84页。
目标3：艾滋病检测点
➢ 1、目前全省尚未建立
➢ 2、目标：2015年底，所有的乡镇卫生院、社区卫生服 务中心和一级医疗机构都建立艾滋病检测点，鼓励具 备条件的乡镇卫生院、社区卫生服务中心和一级医疗 机构建立艾滋病筛查实验室。
➢ 技术角度的考虑包括:
需要快速得到结果、免去试剂和样本的冷链运输 环节、小空间实验室的成本效益、 检测的简单性等。
22
第二十二页，共84页。
快速检测反应模式
➢ 免疫层析实验 ➢ 渗滤实验（间接法/双抗原夹心法）
23
第二十三页，共84页。
免疫层析实验
➢ 样本：血浆/血清/全血（唾液） ➢ 不同部位固定不同抗原可区分HIV-1/HIV-2, ➢ 质控线：抗人IgG ➢ 一般需时15-30min ➢ 弱阳性结果较难判断
的初始反应温度及活性剂的溶解。
15
第十五页，共84页。
(2)加样过程应注意的问题
1.血清或血浆标本分离不好即进行加样。 2. 漏加样品或加样量不足的 3.加液器的校正 4.加样时间过长 5.手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前 等待时间过长 6.洗板机不足，不能及时洗板
16
第十六页，共84页。
➢ S/CO=OD/CUTOFF
➢ 使用双波长的优点可以消除 反应板条上的划痕手印的 干扰。
14
第十四页，共84页。
常见问题原因分析及解决办法
(1)试剂 1.观察外包装，内主份有无漏液，注意效期等。 2.仔细阅读说明书，严格按照试剂说明书进行操作。 3.操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟，保证酶等液体
所以在读数前尽量保证酶标板的底部是清洁的。
20
第二十页，共84页。
酶联免疫吸附试验优缺点
优点 1、价格低 2、一般实验室均可操作 3、不需特殊仪器设备 4、适用于大面积查体 缺点 1、易出假阳性 2、不适用于单个样本测定
21
第二十一页，共84页。
快速检测法 ➢ 优先使用项目包括:
VCT、母婴传播、临床评估、农村血检、术前检 测、紧急事件等。
《山东省卫生厅关于进一步加强全省艾滋病检测工作的通 知 》 鲁卫疾控字[2013]28号（2013年5月9日下发）
7
第七页，共84页。
目标2：艾滋病筛查实验室
➢ 目标：2013年底，皮肤病性病防治机构、妇幼保健机 构、采供血机构（单采浆站）及各类二级以上（含二 级）医疗机构要建立艾滋病筛查实验室。
1、加入样品稀释液
75µl 25µl 25µl
孔号 1
23
2、加入测试样品
25µl
孔号 1
2
3
3、样品倍比稀释
25µl 25µl 25µl
孔号 1 最终稀释倍数
23 1：8 1：16
弃去
46
第四十六页，共84页。
4、加入明胶颗粒
未致敏颗粒
致敏颗粒
25µ l
25µl
孔号
1
最终稀释倍数
2 1：16
3 1：32
正确。 ➢ 阴性结果应当与临床症状和风险因子一起考虑。 ➢ 阳性结果应当用第二种方法证实。结合临床证据对结果做
过评价后才能作出诊断。
27
第二十七页，共84页。
28
第二十八页，共84页。
渗滤实验
➢ 原理：双抗原夹心法 ➢ 样本:血浆/血清（若有过滤装置，则可测全血） ➢ 可将抗原固定于不同位置，区分HIV-1和HIV-2 ➢ 实验需几步：加样本，加洗液，加信号试剂。 ➢ 一般在5-15min完成 ➢ 弱阳性结果较难判断
HIV抗原 HIV特异性抗体
金标HIV抗原
显色
24
第二十四页，共84页。
HIV ½ 使用
试验步骤 将检测条的外包装撕去
血清和EDTA抗凝血浆 加入50 uL样品
EDTA抗凝全血 加入 50 uL样品
过15分钟读结果 最多60 分钟(HIV)
加1滴示踪缓冲液
过15分钟读结果 最多60 分钟(HIV)
25
第二十五页，共84页。
结果解释
15分钟后读结果，对结果的解释不要超过1小时。
阳性
阴性
无效
无效
26
第二十六页，共84页。
检测要注意问题
➢ Determine HIV-1/2 试验只能使用人类血清、血浆和全血， 对其他标本结果可能不准确。
➢ 反应线的强度不一定与标本中的抗体滴度相关。 ➢ 含EDTA以外抗凝剂的全血或血浆标本给出的结果可能不
42
第四十二页，共84页。
免疫层析结果判读记录仪
➢ 优点： 1.检测结果的保存 2.自动生成报告 3.结果可导出
➢ 缺点： 1.不适合批量操作
43
第四十三页，共84页。
快速检测，是艾滋病实验室多了 一种检测方法。
快速检测，是为了更多、更快的的 发现感染者。
快速检测，不是为了取代实验室， 但不能因为有了实验室而放弃使用 快速检测。
44
第四十四页，共84页。
明胶颗粒凝集试验（PA）
➢ 将提纯后的HIV抗原连接到有色明胶颗粒上，制成致敏 颗粒。当加入的检测标本中有HIV抗体存在时，即可使 致敏颗粒凝集，出现肉眼可见的浅色凝集环（斑）； 而若标本中无HIV抗体，致敏颗粒即在重力作用下沉人 U型板底，形成一个深色红点。
45
第四十五页，共84页。
4.反应板过多，不能保证及时洗板，造成洗板等待时间过长，影响结 果。
5.洗板前先将孔内液体甩出包被板。
解决办法
1.禁止手工洗板。 2.保证洗液注满各孔。
3.洗板时注意观察是否有堵孔现象，保持洗板针畅通。 4.合理安排操作（洗板）时间。 5.洗板前不要先将孔内液体甩出包被板，以免酶液沾于孔边缘。
18
第十八页，共84页。
＋
－
±
351
0
0
349
0
0
351
0
0
338
0
0
357
5
0
334
1
0
阳性一致率（%）
100 100 100 100 98.5 99.7
37
第三十七页，共84页。
免疫层析结果判读记录仪
38
第三十八页，共84页。
39
第三十九页，共84页。
自动生成报告
40
第四十页，共84页。
结果导出Excel
41
第四十一页，共84页。
5、混匀，加盖，室温2个小时
6、结果判读
47
第四十七页，共84页。
48
第四十八页，共84页。
优点：
➢ 凝集试验具有操作简便，经一步即可迅速得出结果， 不需任何仪器等优点
➢ 该方法的敏感性及特异性与EL1SA方法相近 ➢ 不需特殊仪器 ➢ 该方法的敏感性及特异性与EL1SA方法相近 ➢ 溶血标本不影响结果 缺点与不足： ➢判定结果用肉眼观察，无法保存。 ➢为了保存试验结果，需配备数码相机。 ➢应选用高质量的U型板
检选择特异性高的试剂； 4.推荐使用临床评估质量好并且近几年连续考评结果稳定
的试剂。
34
第三十四页，共84页。
35
第三十五页，共84页。
三代与四代比较（快速试剂）
➢ 四代试剂不仅可以检测出血清/血浆/全血样本中的HIV1和HIV-2抗体，还可以检测出p24抗原。p24抗原是感 染HIV病毒后产生的一种蛋白质，比HIV抗体出现的要 早，在艾滋病感染初期、窗口期内可以通过检测p24抗 原来判断是否感染HIV。
➢ 2013年4月1日临沂疾控中心艾滋病确证实验室通过验收。
3
第三页，共84页。
我省艾滋病检测实验室 检测能力
➢ 省疾控中心：艾滋病抗体的筛查、确证；CD4淋巴细 胞；病毒载量；耐药；新发感染；婴幼儿早期诊断、 HBV、HCV、TP。
➢ 抗体确证：济南、青岛、淄博、烟台、临沂市CDC （待建潍坊市CDC ）。
(5)显色过程中易出现的问题
1.显色剂配制后放置时间过长或使用已经变色失效的显色 剂
2. 用排枪加A、B混合液时，加样槽不够干净，造成花板 3.不同厂家试剂的显色液混用
19
第十九页，共84页。
(6)终止和读数时的注意事项
1．加完终止后30分钟内读取数据。 2．读板时板底如果不清洁，就会导致所读的数据不准确，
2006
2011
2011
2009
2008
2008
第十二页，共84页。
2004
12
ELISA
13
第十三页，共84页。
➢ OD值 ➢ S/CO值 ➢ 双波长的优点 ➢ CUTOFF值
仔细阅读和理解说明 书,严格按照说明书要
求操作
➢ OD是optical density（光密度）的缩写，表示被检测物 吸收掉的光密度 。
10
第十页，共84页。
二、艾滋病实验室检测技术
（一）HIV (ELISA、金标、PA、化学发光、WB)
（二）TP (ELISA、 TPPA 、 TRUST)
（三）HCV (ELISA、RIBA) （四）BED （ELISA、亲和力)
11
第十一页，共84页。
艾滋病检测工作有关的技术规范和指南
2006
➢ CD4淋巴细胞：济南、青岛、烟台、菏泽、泰安、济 宁、临沂、潍坊市CDC
➢ 艾滋病抗体筛查：610个实验室。
4
第四页，共84页。
省CDC实验室检测能力
➢ 2013年8月2～3日顺利通过资质认定、食品检验机构资 质认定、实验室认可“三合一”现场评审.
➢ 实验室认可项目：
27类1313项
➢ 实验室资质认定（计量认证）项目：22类740项
➢ 目前已验收16个 ➢ 待验收艾滋病筛查实验室2个、确证实验室1个
2
第二页，共84页。
我省艾滋病确证实验室建设情况
➢ 1995年2月6日，山东省卫生防疫站艾滋病确证实验室通过 卫生部验收。
➢ 2005年2月18日，青岛市疾控中心艾滋病确证实验室通过 验收。
➢ 2009年4月8日济南、淄博、烟台市疾控中心艾滋病确证实 验室通过验收。
置测量工具（全自动酶免除外）。
17
第十七页，共84页。
(4)洗板过程中易出现的问题
1.采用手工洗板,孔与孔之间液体容易交叉，切不可随意洗板。
2.采用洗板机洗板时，洗液注入孔中量不足，导致洗板不彻底，造成本底高。
3.由于血液中纤维原蛋白，造成洗板针堵塞，抽吸不完全，造成洗板不 畅，导致洗板效果差，直接影响本底。
➢ 食品检验机构资质认定项目：
5类573项
➢ 艾防所通过项目：艾滋病抗体筛查、确证
CD4T淋巴细胞检测
病毒载量
乙肝、丙肝确证
5
第五页，共84页。
历年筛查实验室考核情况
6
第六页，共84页。
目标1：确证实验室
➢ 目前全部建在疾控系统
➢ 目标：2015年底，17市疾控全部建立，鼓励医疗卫生 系统建立艾滋病确证实验室。
32
第三十二页，共84页。
缺点
➢ 不宜一次检测100份以上的大批量样品 ➢ 比ELISA法价格略高。 ➢ 结果判读不客观，易受主观因素影响
33Байду номын сангаас
第三十三页，共84页。
快速检测试剂选择
1.必须使用经国家食品药品监督管理局注册批准的快速试 剂；
2.试剂必须在有效期内使用； 3.根据检测目的，选择试剂初筛选择敏感性高的试剂，复
(3)孵育过程中出现的问题
1.温箱孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗彻 底；
2.孵育时间人为延长，导致非特异性结合，难以清洗彻底。 3.孵育时温度不符合说明书的规定范围。
（解决办法）
1.按规定加盖封板膜。
2.按说明步骤严格控制孵育时间。 3. 严格控制温育仪器（水箱、温箱、全自动酶免）的温度，建议在仪器内放
HIV抗原 HIV特异性抗体 金标HIV抗原
显色
29
第二十九页，共84页。
免疫渗滤原理的产品构造示意图
30
第三十页，共84页。
结果
31
第三十一页，共84页。
优点：快速、简便、易操作
➢ 可检测100份以内小批量样品 ➢ 需要很少的设备和试剂 ➢ 检测地点可扩展到实验室以外 ➢ 只需对技术人员做适当培训 ➢ 大部分为一步法 ➢ 在短时间(30分钟)内出结果 ➢ 结果易目测判读 ➢ 可在室温下保存
➢ 四代试剂比三代试剂平均提前5天可以检测出HIV感染 者。灵敏度为92.31%，特异性为99.66%。
➢ 目前国内尚未上市
36
第三十六页，共84页。
替代组合
EIA1 +RT1
＋
EIA1 +RT2
＋
RT1+EIA1
＋
RT1+EIA2
＋
RT1+RT2
＋
EIA1+EIA2
＋
复核试验方法选择
WB检测结果
艾滋病实验室检测技术及职业暴露
第一页，共84页。
我省艾滋病检测实验室建设情况
➢ 目前我省艾滋病检测实验室已达630个 1个艾滋病确证中心实验室（省疾控中心） 6个艾滋病确证实验室（济南、青岛、淄博、烟台、临沂疾 控中心、山东出入境检验检疫局国际旅行卫生保健中心） 18个艾滋病筛查中心实验室（含5个艾滋病确证实验室） 610个艾滋病筛查实验室。
《山东省卫生厅关于进一步加强全省艾滋病检测工作的通 知 》 鲁卫疾控字[2013]28号（2013年5月9日下发）
9
第九页，共84页。
目标4：扩大检测
1、肾透析人群 2、医院侵入性诊疗人群 3、计划生育门诊就诊人群 4、单位体检人群 5、无偿献血人群
——五类人群全部进行丙肝检测
《山东省卫生厅关于印发山东省艾滋病扩大检测工作活动 方案的通知 》 鲁卫疾控字[2013]29号（2013年5月9日 下发）
8
第八页，共84页。
目标3：艾滋病检测点
➢ 1、目前全省尚未建立
➢ 2、目标：2015年底，所有的乡镇卫生院、社区卫生服 务中心和一级医疗机构都建立艾滋病检测点，鼓励具 备条件的乡镇卫生院、社区卫生服务中心和一级医疗 机构建立艾滋病筛查实验室。
➢ 技术角度的考虑包括:
需要快速得到结果、免去试剂和样本的冷链运输 环节、小空间实验室的成本效益、 检测的简单性等。
22
第二十二页，共84页。
快速检测反应模式
➢ 免疫层析实验 ➢ 渗滤实验（间接法/双抗原夹心法）
23
第二十三页，共84页。
免疫层析实验
➢ 样本：血浆/血清/全血（唾液） ➢ 不同部位固定不同抗原可区分HIV-1/HIV-2, ➢ 质控线：抗人IgG ➢ 一般需时15-30min ➢ 弱阳性结果较难判断
的初始反应温度及活性剂的溶解。
15
第十五页，共84页。
(2)加样过程应注意的问题
1.血清或血浆标本分离不好即进行加样。 2. 漏加样品或加样量不足的 3.加液器的校正 4.加样时间过长 5.手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前 等待时间过长 6.洗板机不足，不能及时洗板
16
第十六页，共84页。
➢ S/CO=OD/CUTOFF
➢ 使用双波长的优点可以消除 反应板条上的划痕手印的 干扰。
14
第十四页，共84页。
常见问题原因分析及解决办法
(1)试剂 1.观察外包装，内主份有无漏液，注意效期等。 2.仔细阅读说明书，严格按照试剂说明书进行操作。 3.操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟，保证酶等液体
所以在读数前尽量保证酶标板的底部是清洁的。
20
第二十页，共84页。
酶联免疫吸附试验优缺点
优点 1、价格低 2、一般实验室均可操作 3、不需特殊仪器设备 4、适用于大面积查体 缺点 1、易出假阳性 2、不适用于单个样本测定
21
第二十一页，共84页。
快速检测法 ➢ 优先使用项目包括:
VCT、母婴传播、临床评估、农村血检、术前检 测、紧急事件等。
《山东省卫生厅关于进一步加强全省艾滋病检测工作的通 知 》 鲁卫疾控字[2013]28号（2013年5月9日下发）
7
第七页，共84页。
目标2：艾滋病筛查实验室
➢ 目标：2013年底，皮肤病性病防治机构、妇幼保健机 构、采供血机构（单采浆站）及各类二级以上（含二 级）医疗机构要建立艾滋病筛查实验室。
1、加入样品稀释液
75µl 25µl 25µl
孔号 1
23
2、加入测试样品
25µl
孔号 1
2
3
3、样品倍比稀释
25µl 25µl 25µl
孔号 1 最终稀释倍数
23 1：8 1：16
弃去
46
第四十六页，共84页。
4、加入明胶颗粒
未致敏颗粒
致敏颗粒
25µ l
25µl
孔号
1
最终稀释倍数
2 1：16
3 1：32
正确。 ➢ 阴性结果应当与临床症状和风险因子一起考虑。 ➢ 阳性结果应当用第二种方法证实。结合临床证据对结果做
过评价后才能作出诊断。
27
第二十七页，共84页。
28
第二十八页，共84页。
渗滤实验
➢ 原理：双抗原夹心法 ➢ 样本:血浆/血清（若有过滤装置，则可测全血） ➢ 可将抗原固定于不同位置，区分HIV-1和HIV-2 ➢ 实验需几步：加样本，加洗液，加信号试剂。 ➢ 一般在5-15min完成 ➢ 弱阳性结果较难判断
HIV抗原 HIV特异性抗体
金标HIV抗原
显色
24
第二十四页，共84页。
HIV ½ 使用
试验步骤 将检测条的外包装撕去
血清和EDTA抗凝血浆 加入50 uL样品
EDTA抗凝全血 加入 50 uL样品
过15分钟读结果 最多60 分钟(HIV)
加1滴示踪缓冲液
过15分钟读结果 最多60 分钟(HIV)
25
第二十五页，共84页。
结果解释
15分钟后读结果，对结果的解释不要超过1小时。
阳性
阴性
无效
无效
26
第二十六页，共84页。
检测要注意问题
➢ Determine HIV-1/2 试验只能使用人类血清、血浆和全血， 对其他标本结果可能不准确。
➢ 反应线的强度不一定与标本中的抗体滴度相关。 ➢ 含EDTA以外抗凝剂的全血或血浆标本给出的结果可能不
42
第四十二页，共84页。
免疫层析结果判读记录仪
➢ 优点： 1.检测结果的保存 2.自动生成报告 3.结果可导出
➢ 缺点： 1.不适合批量操作
43
第四十三页，共84页。
快速检测，是艾滋病实验室多了 一种检测方法。
快速检测，是为了更多、更快的的 发现感染者。
快速检测，不是为了取代实验室， 但不能因为有了实验室而放弃使用 快速检测。
44
第四十四页，共84页。
明胶颗粒凝集试验（PA）
➢ 将提纯后的HIV抗原连接到有色明胶颗粒上，制成致敏 颗粒。当加入的检测标本中有HIV抗体存在时，即可使 致敏颗粒凝集，出现肉眼可见的浅色凝集环（斑）； 而若标本中无HIV抗体，致敏颗粒即在重力作用下沉人 U型板底，形成一个深色红点。
45
第四十五页，共84页。
4.反应板过多，不能保证及时洗板，造成洗板等待时间过长，影响结 果。
5.洗板前先将孔内液体甩出包被板。
解决办法
1.禁止手工洗板。 2.保证洗液注满各孔。
3.洗板时注意观察是否有堵孔现象，保持洗板针畅通。 4.合理安排操作（洗板）时间。 5.洗板前不要先将孔内液体甩出包被板，以免酶液沾于孔边缘。
18
第十八页，共84页。
＋
－
±
351
0
0
349
0
0
351
0
0
338
0
0
357
5
0
334
1
0
阳性一致率（%）
100 100 100 100 98.5 99.7
37
第三十七页，共84页。
免疫层析结果判读记录仪
38
第三十八页，共84页。
39
第三十九页，共84页。
自动生成报告
40
第四十页，共84页。
结果导出Excel
41
第四十一页，共84页。
5、混匀，加盖，室温2个小时
6、结果判读
47
第四十七页，共84页。
48
第四十八页，共84页。
优点：
➢ 凝集试验具有操作简便，经一步即可迅速得出结果， 不需任何仪器等优点
➢ 该方法的敏感性及特异性与EL1SA方法相近 ➢ 不需特殊仪器 ➢ 该方法的敏感性及特异性与EL1SA方法相近 ➢ 溶血标本不影响结果 缺点与不足： ➢判定结果用肉眼观察，无法保存。 ➢为了保存试验结果，需配备数码相机。 ➢应选用高质量的U型板
检选择特异性高的试剂； 4.推荐使用临床评估质量好并且近几年连续考评结果稳定
的试剂。
34
第三十四页，共84页。
35
第三十五页，共84页。
三代与四代比较（快速试剂）
➢ 四代试剂不仅可以检测出血清/血浆/全血样本中的HIV1和HIV-2抗体，还可以检测出p24抗原。p24抗原是感 染HIV病毒后产生的一种蛋白质，比HIV抗体出现的要 早，在艾滋病感染初期、窗口期内可以通过检测p24抗 原来判断是否感染HIV。
➢ 2013年4月1日临沂疾控中心艾滋病确证实验室通过验收。
3
第三页，共84页。
我省艾滋病检测实验室 检测能力
➢ 省疾控中心：艾滋病抗体的筛查、确证；CD4淋巴细 胞；病毒载量；耐药；新发感染；婴幼儿早期诊断、 HBV、HCV、TP。
➢ 抗体确证：济南、青岛、淄博、烟台、临沂市CDC （待建潍坊市CDC ）。
(5)显色过程中易出现的问题
1.显色剂配制后放置时间过长或使用已经变色失效的显色 剂
2. 用排枪加A、B混合液时，加样槽不够干净，造成花板 3.不同厂家试剂的显色液混用
19
第十九页，共84页。
(6)终止和读数时的注意事项
1．加完终止后30分钟内读取数据。 2．读板时板底如果不清洁，就会导致所读的数据不准确，
2006
2011
2011
2009
2008
2008
第十二页，共84页。
2004
12
ELISA
13
第十三页，共84页。
➢ OD值 ➢ S/CO值 ➢ 双波长的优点 ➢ CUTOFF值
仔细阅读和理解说明 书,严格按照说明书要
求操作
➢ OD是optical density（光密度）的缩写，表示被检测物 吸收掉的光密度 。
10
第十页，共84页。
二、艾滋病实验室检测技术
（一）HIV (ELISA、金标、PA、化学发光、WB)
（二）TP (ELISA、 TPPA 、 TRUST)
（三）HCV (ELISA、RIBA) （四）BED （ELISA、亲和力)
11
第十一页，共84页。
艾滋病检测工作有关的技术规范和指南
2006
➢ CD4淋巴细胞：济南、青岛、烟台、菏泽、泰安、济 宁、临沂、潍坊市CDC
➢ 艾滋病抗体筛查：610个实验室。
4
第四页，共84页。
省CDC实验室检测能力
➢ 2013年8月2～3日顺利通过资质认定、食品检验机构资 质认定、实验室认可“三合一”现场评审.
➢ 实验室认可项目：
27类1313项
➢ 实验室资质认定（计量认证）项目：22类740项
➢ 目前已验收16个 ➢ 待验收艾滋病筛查实验室2个、确证实验室1个
2
第二页，共84页。
我省艾滋病确证实验室建设情况
➢ 1995年2月6日，山东省卫生防疫站艾滋病确证实验室通过 卫生部验收。
➢ 2005年2月18日，青岛市疾控中心艾滋病确证实验室通过 验收。
➢ 2009年4月8日济南、淄博、烟台市疾控中心艾滋病确证实 验室通过验收。
置测量工具（全自动酶免除外）。
17
第十七页，共84页。
(4)洗板过程中易出现的问题
1.采用手工洗板,孔与孔之间液体容易交叉，切不可随意洗板。
2.采用洗板机洗板时，洗液注入孔中量不足，导致洗板不彻底，造成本底高。
3.由于血液中纤维原蛋白，造成洗板针堵塞，抽吸不完全，造成洗板不 畅，导致洗板效果差，直接影响本底。
➢ 食品检验机构资质认定项目：
5类573项
➢ 艾防所通过项目：艾滋病抗体筛查、确证
CD4T淋巴细胞检测
病毒载量
乙肝、丙肝确证
5
第五页，共84页。
历年筛查实验室考核情况
6
第六页，共84页。
目标1：确证实验室
➢ 目前全部建在疾控系统
➢ 目标：2015年底，17市疾控全部建立，鼓励医疗卫生 系统建立艾滋病确证实验室。
32
第三十二页，共84页。
缺点
➢ 不宜一次检测100份以上的大批量样品 ➢ 比ELISA法价格略高。 ➢ 结果判读不客观，易受主观因素影响
33Байду номын сангаас
第三十三页，共84页。
快速检测试剂选择
1.必须使用经国家食品药品监督管理局注册批准的快速试 剂；
2.试剂必须在有效期内使用； 3.根据检测目的，选择试剂初筛选择敏感性高的试剂，复
(3)孵育过程中出现的问题
1.温箱孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗彻 底；
2.孵育时间人为延长，导致非特异性结合，难以清洗彻底。 3.孵育时温度不符合说明书的规定范围。
（解决办法）
1.按规定加盖封板膜。
2.按说明步骤严格控制孵育时间。 3. 严格控制温育仪器（水箱、温箱、全自动酶免）的温度，建议在仪器内放
HIV抗原 HIV特异性抗体 金标HIV抗原
显色
29
第二十九页，共84页。
免疫渗滤原理的产品构造示意图
30
第三十页，共84页。
结果
31
第三十一页，共84页。
优点：快速、简便、易操作
➢ 可检测100份以内小批量样品 ➢ 需要很少的设备和试剂 ➢ 检测地点可扩展到实验室以外 ➢ 只需对技术人员做适当培训 ➢ 大部分为一步法 ➢ 在短时间(30分钟)内出结果 ➢ 结果易目测判读 ➢ 可在室温下保存
➢ 四代试剂比三代试剂平均提前5天可以检测出HIV感染 者。灵敏度为92.31%，特异性为99.66%。
➢ 目前国内尚未上市
36
第三十六页，共84页。
替代组合
EIA1 +RT1
＋
EIA1 +RT2
＋
RT1+EIA1
＋
RT1+EIA2
＋
RT1+RT2
＋
EIA1+EIA2
＋
复核试验方法选择
WB检测结果
艾滋病实验室检测技术及职业暴露
第一页，共84页。
我省艾滋病检测实验室建设情况
➢ 目前我省艾滋病检测实验室已达630个 1个艾滋病确证中心实验室（省疾控中心） 6个艾滋病确证实验室（济南、青岛、淄博、烟台、临沂疾 控中心、山东出入境检验检疫局国际旅行卫生保健中心） 18个艾滋病筛查中心实验室（含5个艾滋病确证实验室） 610个艾滋病筛查实验室。
《山东省卫生厅关于进一步加强全省艾滋病检测工作的通 知 》 鲁卫疾控字[2013]28号（2013年5月9日下发）
9
第九页，共84页。
目标4：扩大检测
1、肾透析人群 2、医院侵入性诊疗人群 3、计划生育门诊就诊人群 4、单位体检人群 5、无偿献血人群
——五类人群全部进行丙肝检测
《山东省卫生厅关于印发山东省艾滋病扩大检测工作活动 方案的通知 》 鲁卫疾控字[2013]29号（2013年5月9日 下发）