GC法测定复方水杨酸樟碘溶液中樟脑、薄荷脑、苯酚的含量

２０２０年第３７卷第４期
［基金项目］　国家药品标准提高研究项目（食药监办药化管［２０１７］１３９号）［作者简介］　王鹏，男，初级药师，研究方向：药物分析。

Ｅ ｍａｉｌ：４４５７９４９８１＠ｑｑ ｃｏｍ
［通讯作者］　程奇珍，女，主任药师，研究方向：药物分析。

Ｅ ｍａｉｌ：ｃｑｚ１１０＠ｓｉｎａ ｃｏｍ
ＧＣ法测定复方水杨酸樟碘溶液中樟脑、
薄荷脑、苯酚的含量
王鹏１，钟振华１，刘彭浩邦３，陈雨萍１，２，程奇珍１
（１．江西省药品检验检测研究院，国家药品监督管理局中成药质量评价重点实验室，
江西省药品与医疗器械质量工程技术研究中心，江西南昌３３００２９；
２．江西中医药大学药学院，江西南昌３３０００４；
３．广东药科大学，广东广州５１０００６）
［摘要］　目的：建立气相色谱（ＧＣ）法测定复方水杨酸樟碘溶液中樟脑、薄荷油和苯酚的含量，为修订现行国家药品标准中的含量测定方法提供参考和依据。

方法：采用色谱柱为ＫＢ ＷＡＸ３０ｍ×０ ５３０ｍｍ×３ ００μｍ毛细管色谱柱；检测器：ＦＩＤ检测器；进样口温
度：２２０℃；升温程序：初始温度为１２０℃，维持１５ｍｉｎ，以５０℃·ｍｉｎ－１
的速率升温至２２０℃，维持１５ｍｉｎ；检测器温度：３００℃；载气流速：
３ ０ｍＬ·ｍｉｎ－１；进样体积：１μＬ。

结果：樟脑在０ ０７５１７～４ ５１０ｍｇ·ｍＬ－１、薄荷脑在０ ００６１３～０ ２４５３ｍｇ·ｍＬ－１
、苯酚在０ ０７５１７～４ ５１０ｍｇ·ｍＬ－１
范围内，线性关系良好（ｒ＞０ ９９９）平均回收率分别为９９ １％（ＲＳＤ＝０ ８％）、９９ ４％（ＲＳＤ＝１ ０％）和
９９ ６％（ＲＳＤ＝０ ９％）。

结论：本方法灵敏、准确、重现性好，可用于复方水杨酸樟碘溶中樟脑、薄荷油和苯酚的测定。

［关键词］　复方水杨酸樟碘溶液；樟脑；薄荷脑；苯酚；气相色谱；含量测定
［中图分类号］　Ｒ９２７ ２ ［文献标志码］　Ｂ ［文章编号］　２０９５－３５９３（２０２０）０４－０２７６－０３
ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＣａｍｐｈｏｒＭｅｎｔｈｏｌａｎｄＰｈｅｎｏｌｉｎＣｏｍｐｏｕｎｄＳａｌｉｃｙｌｉｃ
ＡｃｉｄＩｏｄｉｎｅＳｏｌｕｔｉｏｎｂｙＧＣ
ＷＡＮＧＰｅｎｇ１，ＺＨＯＮＧＺｈｅｎ ｈｕａ１，ＬＩＵＰｅｎｇ ｈａｏ ｂａｎｇ３，ＣＨＥＮＹｕ ｐｉｎｇ１，２，ＣＨＥＮＧＱｉ ｚｈｅｎ
１
（１．ＪｉａｎｇｘｉＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ，ＮＭＰＡＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＱｕａｌｉｔｙＥｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＰａｔｅｎｔＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＪｉａｎｇｘｉＰｒｏｖｉｎｃｅＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒｏｆＤｒｕｇａｎｄＭｅｄｉｃａｌＤｅｖｉｃｅＱｕａｌｉｔｙ，ＪｉａｎｇｘｉＮａｎｃｈａｎｇ３３００２９，Ｃｈｉｎａ；２．ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙｏｆＪｉａｎｇｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＪｉａｎｇｘｉＮａｎｃｈａｎｇ３３０００４，Ｃｈｉｎａ；
３．ＧｕａｎｇｄｏｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＧｕａｎｇｄｏｎｇＧｕａｎｇｚｈｏｕ５１０００６，Ｃｈｉｎａ）
［
Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈＧＣｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＣａｍｐｈｏｒＭｅｎｔｈｏｌａｎｄＰｈｅｎｏｌｉｎＣｏｍｐｏｕｎｄｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｉｏｄｉｎｅｓｏｌｕ ｔｉｏｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＧＣｗａｓｕｓｅｄｂｙＫＢ ＷＡＸ３０ｍ×０ ５３０ｍｍ×３ ００μｍＣａｐｉｌｌａｒｙｃｏｌｕｍｎ ＴｈｅｄｅｔｅｃｔｏｒｗａｓＦＩＤＩｎｌｅｔｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ２２０℃．Ｔｈｅｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｐｒｏｇｒａｍｗａｓａｓｆｏｌｌｏｗｓ：ｔｈｅｉｎｉｔｉａｌｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ１２０℃，ｋｅｐｔｆｏｒ５ｍｉｎ，ａｎｄｔｈｅｎｒｉｓｅｎｔｏ２２０℃ｗｉｔｈａｒａｔｅｏｆ５０℃
·ｍｉｎ－１ａｎｄｋｅｐｔｆｏｒ１５ｍｉｎ．Ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｏｒｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ３００℃．Ｔｈｅｆｏｌｌｏｗｒａｔｅｗａｓ３ ０ｍＬ·ｍｉｎ－１
ａｎｄｔｈｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎｖｏｌｕｍｅｗａｓ１μＬ
Ｒｅｓｕｌｔｓ：ＴｈｅｌｉｎｅａｒｅｑｕａｔｉｏｎｓｏｆＣａｍｐｈｏｒＭｅｎｔｈｏｌａｎｄＰｈｅｎｏｌｗｅｒｅｉｎｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅ（ｒ＞０ ９９９） ＴｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｙｏｆＣａｍｐｈｏｒＭｅｎｔｈｏｌａｎｄＰｈｅｎｏｌｗａｓ９９ １％（ＲＳＤ＝０ ８％）、９９ ４％（ＲＳＤ＝１ ０％）ａｎｄ９９ ６％（ＲＳＤ＝０ ９％） Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｉｓｓｅｎｓｉｔｉｖｅａｎｄａｃｃｕｒａｔｅｗｉｔｈｇｏｏｄｓｔａｂｉｌｉｔｙ，ｗｈｉｃｈｃａｎｂｅｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆＣａｍｐｈｏｒ、ＭｅｎｔｈｏｌａｎｄＰｈｅｎｏｌｉｎｃｏｍｐｏｕｎｄｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｉｏｄｉｎｅｓｏｌｕｔｉｏｎ．［ＫｅｙＷｏｒｄｓ］　Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｉｏｄｉｎｅｓｏｌｕｔｉｏｎ；Ｃａｍｐｈｏｒ；Ｍｅｎｔｈｏｌ；Ｐｈｅｎｏｌ；ＧＣ；Ｃｏｎｔｅｎｔｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
复方水杨酸樟碘溶液为苯甲酸、水杨酸、樟脑、碘酊、甘油、薄荷油、苯酚等成分组成的一种强效外科消毒剂，主要用于治疗手、足癣、体癣和股癣，也用于皮肤杀菌、止痒及中耳炎的治疗。

该品种现行质量标准收载于国家药品标准化学药品地方标准上升国家标准第十一册中，缺乏部分主成分含量测定项。

气相色谱法具有高灵敏度、高选择性、高效能、速
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２０２０，Ｖｏｌ．３７，Ｎｏ ４评价技术与方法
度快、应用范围广及所需试样用量少等特点。

氢火焰检测器由于结构简单、性能优异、稳定可靠、操作方便，几乎对所有挥发性的有机化合物均有响应，且具有基流小（１０～１０Ａ），线性范围宽（１０～１０），死体积小（≤１μＬ），响应快（１ｍｓ），可以和毛细管柱直接联用，其具有对气体流速、压力和温度变化不敏感等优点，成为应用最广泛的气相色谱检测器之一。

为了更好地控制该产品的质量，保证用药疗效，本文参考《中国药典》和相关文献［１ ８］建立了ＧＣ法同时测定该制剂中樟脑、薄荷脑和苯酚的含量，以证实该方法选择性好、灵敏度高。

１　仪器与试药
１ １　仪器
安捷伦７８９０Ｂ气相色谱仪；火焰离子化检测仪检测器；ＫＢ ＷＡＸ型毛细管色谱柱（３０ｍ×０ ５３０ｍｍ×３ ００μｍ）；ＭＳ１０５型电子天平（ＭＥＴＴＬＥＲＴＯＬＥＤＯ）。

１ ２　试剂
樟脑（含量：９８ ７％；批号：１１０７４７ ２０１４０９；中国食品药品检定研究院）；苯酚（含量：９９ ９％；批号：１００５０９ ２００９０２；中国食品药品检定研究院）；薄荷脑（批号：１１０７２８ ２００５０６；中国食品药品检定研究院）；水杨酸甲酯（分析纯；批号：Ｈ６８２５７；西亚试剂）；无水乙醇（分析纯；批号：２０１７１０１６；国药集团化学试剂有限公司）；正丙醇（分析纯；批号：２０１０１１３０；江苏永华精细化学品有限公司）。

２　方法与结果
２ １　色谱条件
色谱柱：ＫＢ ＷＡＸ毛细管柱（３０ｍ×０ ５３０ｍｍ×３ ００μｍ）；载气：Ｎ
２
；载气流速：３ｍＬ·ｍｉｎ－１；升温程序：初始温度为１２０℃，维持１５ｍｉｎ，以５０℃·ｍｉｎ－１的速率升温至２２０℃，维持１５ｍｉｎ；进样口温度：２２０℃；检测器温度：３００℃；分流比２∶１；检测器：氢焰离子化检测器（ＦＩＤ）；进样体积：１μＬ。

２ ２　溶液制备
２ ２ １　内标溶液的制备　取水杨酸甲酯适量，精密称定，加无水乙醇溶解并定量稀释制成每１ｍＬ中含１ ０ｍｇ的溶液，作为内标溶液。

２ ２ ２　混合对照品溶液的制备　取樟脑、薄荷脑和苯酚对照品适量，精密称定，精密加入内标溶液，加无水乙醇制成每ｌｍＬ含樟脑１ ５ｍｇ、薄荷脑０ ２５ｍｇ、苯酚０ ０４ｍｇ和内标溶液０ １ｍｇ的混合溶液，摇匀，即得。

２ ２ ３　供试品溶液的制备　精密量取１ｍＬ，置５０ｍＬ量瓶中，精密加入内标溶液５ｍＬ，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，经０ ４５μｍ微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

２ ２ ４　阴性样品溶液的制备　按处方比例取阴性样品适量，精密称定，加无水乙醇溶解，精密加入适量的内标溶液制成不含主药的溶液，经０ ４５μｍ微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

２ ３　色谱图
分别精密吸取混合对照品溶液与供试品溶液及阴性对照品溶液各１μＬ，注入气相色谱仪，即得。

见图１。

Ａ 混合对照品溶液色谱图；Ｂ 供试品溶液色谱图；
Ｃ 阴性空白溶液色谱图
图１　复方水杨酸樟碘溶液气相色谱图
３　方法学考察
３ １　线性关系
取薄荷脑对照品、樟脑和苯酚原料药适量，精密称定，加无水乙醇分别制成每ｌｍＬ含樟脑１５ ０３４ｍｇ的储备溶液，薄荷脑０ ４９０６ｍｇ和苯酚０ ４０７８ｍｇ的混合储备溶液，摇匀。

精密吸取樟脑储备溶液０ １、０ ２、１、２、３、４、６ｍＬ和混合储备溶液０ ２５、０ ５、１、２、４、８、１０ｍＬ，分别置同一２０ｍＬ量瓶中，精密加入内标溶液２ｍＬ，加无水乙醇溶液稀释至刻度，摇匀，精密吸取１μＬ，注入气相色谱仪，测定。

对照品峰面积与内标物峰面积之比对应的浓度作回归方程分别为：樟脑：Ａｉ／Ａｓ＝１５ ２９Ａ－０ １３７，Ｒ２＝０ ９９９；线性范围：０ ０７５１７～４ ５１０ｍｇ·ｍＬ－１。

薄荷脑：Ａｉ／Ａｓ＝１４ ９０Ａ－０ ０１６，Ｒ２＝０ ９９９；线性范围：０ ００６１３～０ ２４５３ｍｇ·ｍＬ－１。

苯酚：Ａｉ／Ａｓ＝１４ ７８Ａ－０ ００２，Ｒ２＝０ ９９９；线性范围：０ ０７５１７～４ ５１０ｍｇ·ｍＬ－１。

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２
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２０２０年第３７卷第４期
３ ２　精密度试验
线性关系试验项下的混合对照品溶液１μＬ，注
入气相色谱仪，连续进样６次，计算樟脑、薄荷脑和苯
酚与内标水杨酸甲酯的峰面积比，分别求得ＲＳＤ为
樟脑０ ２％，薄荷脑１ ０％，苯酚０ ３％。

结果表明，仪
器的精密度良好。

３ ３　稳定性试验
将同一份供试品分别放置０、４、１２、２４、４８ｈ，吸取
１μＬ，注入气相色谱仪，测定。

计算ＲＳＤ为樟脑
０ ２％，薄荷脑０ ８％，苯酚０ ７％。

结果表明，供试品
溶液４８ｈ内定。

３ ４　重复性试验
分别精密量同一批号样品，按供试品溶液制备方
法制备，精密吸取１μＬ，注入气相色谱仪，测定峰面
积并计算樟脑、薄荷脑和苯酚含量，ＲＳＤ分别为
０ ６％、０ ４％、０ ７％。

结果表明，方法重复性良好。

３ ５　回收率试验
按处方称取苯甲酸、水杨酸、甘油、碘、碘化钾、乙
醇和水适量，作为空白样品。

精密称取樟脑原料药
７４０ ９０、７３８ ３６和７４９ ７５ｍｇ，分别置５０ｍＬ量瓶中，
加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液
（１）；精密称取薄荷脑对照品２５ ２０、２５ ９９、２４ ５３ｍｇ
和苯酚原料药２０ ９２、１９ ５９、２０ ６２ｍｇ，分别置５０ｍＬ
量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储
备液（２）；精密量取储备液（１）和（２）０ ８、１ ０、１ ２
ｍＬ，分别置同一１０ｍＬ量瓶中，分别加入空白样品适
量和内标液１ｍＬ，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，制
成供试品溶液，测得峰面积并计算含量。

结果显示樟
脑的平均回收率为９９ １％，ＲＳＤ＝０ ８％（ｎ＝９），薄
荷脑的平均回收率为９９ ４％，ＲＳＤ＝１ ０％（ｎ＝９），
苯酚的平均回收率为９９ ６％，ＲＳＤ＝０ ９％（ｎ＝９）。

实验结果表明回收率良好。

表１　６批样品的含量测定结果
批号
含量（ｍｇ·ｍＬ－１）
樟脑薄荷脑苯酚
２０１８０３００１７４ ５５２ ９４１ ９６２０１８０３００２６９ ２３２ ７８１ ８１２０１８０５００２７１ ７０２ ９３１ ８８２０１８０５００３７１ ７８２ ８５１ ８９２０１８０６００１７１ ４８２ ８８１ ８９２０１４０５００５６８ ８５３ ８９１ ７９３ ６　样品测定结果
取６批样品，按“２ ２ ３”项下的方法制备溶液，按“２ １”项下的色谱条件测定测定结果见表１。

４　讨论
参考药典标准中樟脑、薄荷油和苯酚气相测定条件，选用聚乙二醇２０Ｍ（或极性相近）为固定液的色谱柱，本实验分别选用了ＫＢ ＷＡＸ和ＨＰ ＩＮＮＯＷＡＸ为色谱柱，进行程序升温测定复方水杨酸樟碘溶液。

结果：ＫＢ ＷＡＸ和ＨＰ ＩＮＮＯＷＡＸ色谱柱对主峰和内标峰的分离效果良好，与相邻杂质峰之间的分离度均符合要求。

本次实验的方法学研究选用ＫＢ ＷＡＸ色谱柱。

根据参考文献，分别选用环己酮、水杨酸甲酯、正十六烷作为内标物，经实验考察显示，供试品溶液气相色谱图中含有与环己酮、正十六烷相同时间峰干扰，故不宜选用环己酮与正十六烷作为内标。

选用水杨酸甲酯作为内标物，与样品中各峰有较好分离，且水杨酸甲酯与相邻成分分离度良好。

因此，选用水杨酸甲酯作为内标物。

复方水杨酸樟碘溶液现行质量标准收载于国家药品标准化学药品地方标准上升国家标准第十一册中，该标准无主要成分樟脑、薄荷脑和苯酚的含量测定方法，故本文对上述３个主要成分进行含量测定方法学研究。

结果表明，本方法的线性范围广、精密度良好、准确度高，适用于复方水杨酸樟碘溶液中樟脑、薄荷脑和苯酚的含量测定。

参考文献
［１］　熊颍，吴雪茹，涂兴明，等 樟脑的药学研究进展［Ｊ］．检验医学与床，２００９，９（１２）：２６ ２７．
［２］　兰文，刘雁鸣，石笑戈 气相色谱法测定樟脑酊中樟脑及苯酚的含量［Ｊ］．中南药学，２０１３，１１（１２）：９３１ ９３３．
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［４］　徐道华，张红伟 气相色谱法测定复方薄荷脑苯酚酊中薄荷脑和苯酚的含量［Ｊ］．西北药学杂志，２０１１，２６（６）：４２７ ４２９．
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［６］　刘吉金，王晓炜，黄服喜，等 气相色谱法测定菊花挥发油中桉油精、樟脑、龙脑、醋酸龙脑酯［Ｊ］．中草药，２００６，３７（９）：１３５２ １３５３
［７］　国家药典委员会 中华人民共和国药典（二部）［Ｓ］．北京：中国医药科技出版社，２０１５：４１９ ４２１．
［８］　国家药典委员会 中华人民共和国药典（二部）［Ｓ］．北京：中国医药科技出版社，２０１５：１５１３ １５１４．
（收稿日期：２０２０ ０３ ０２）
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