乳酸脱氢酶（LDH）测定-标准操作程序

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生效日期：
目的：建立乳酸脱氢酶（LDH）测定标准操作规程。

范围：适用于乳酸脱氢酶（LDH）测定的标准操作。

职责：生化部检验人员对本规程的实施负责。

规程：
1 测定方法：乳酸脱氢酶在催化乳酸生成丙酮酸的同时将NAD+还原成NADH。

通
过测定NADH在340nm处吸光度增加的速度可求得乳酸脱氢酶的活力。

LDH
L-乳酸+ NAD+─────→丙酮酸+ NADH + H+
2 仪器设备
GS200全自动生化分析仪
3 试剂
3.1 乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒，包括试剂1（R-1）、试剂2(R-2)。

试剂成份含量
R-1 L-乳酸锂≥76mmol/L
R-2 NAD+≥31mmol/l
3.2 分析用人基质质控血清（RANDOX）、血清
3.3 试剂稳定性与贮存
乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒在2-8℃避光保存可稳定一年；试剂R-1、R-2开启后在2-8℃避光保存可稳定一个月。

3.4 样本稳定性与贮存
3.4.1 分析用人基质质控血清：该血清自生产之日起，在2-8℃下保持可稳定4年；
该血清一旦复融，在25℃下可稳定24小时，在2-8℃下可稳定7天，在-20℃可稳定1个月。

3.4.2 待测血清：2-8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定3个月。

样本不可反复冻
融。

不可使用已被污染的样本。

4 操作步骤
4.1 打开全自动生化仪，按照GS200全自动生化分析仪操作维护保养程序，完成普
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准操作程序第3页共3页
生效日期：通测试流程。

4.2 检验方法
分析方法：速率A；主波长：340nm；副波长：405nm；样品量：8.0ul；R-1：320ul，R-2：80ul；校准方式：K因子；反应方向：上升；测定温度：37℃。

样本与R-1混匀后反应5分钟，加入R-2混合后延迟53秒，测定104秒。

样本8.0ul 主波长340nm
R-1 320ul R-2 80ul 副波长405nm
测光测光
K=8199
0 5 6 8 min
4.3 计算
△A/min×Vt×1000
ALT（U/L）= ─────────────
6.22×Vs×d
△A/min = 每分钟吸光度变化率Vt = 反应液总体积（ml）
1000 =U/ml到U/L的转换系数 6.22 = NADH的毫摩尔吸光系数
Vs = 样本体积（ml） d = 比色杯光径（cm）
5 检验结果的解释
抗坏血酸≤50mg/dl、游离胆红素≤684umol/L（40mg/dl），结合胆红素≤855umol/L （50mg/dl）、乳糜微粒≤2500浊度单位对测定无影响。

6 注意事项
6.1 高度溶血可导致正的误差。