MM FS CNJ 出口禽肉中癸氧喹酯酚残留量检验方法

MM_FS_CNJ_0075出口禽肉癸氧喹酯酚残留量荧光法
MM_FS_CNJ_0075
出口禽肉中癸氧喹酯酚残留量检验方法
1.适用范围
本方法标准适用于出口鸡肉中癸氧喹酯残留量的检验。

2.原理概要
试样在甲醇-三氯甲烷中匀浆，加入偏磷酸后，癸氧喹酯被提取到三氯甲烷中，在弗罗里硅土层析柱上与干扰物质分离，用氯化钙-甲醇溶液洗脱柱上的癸氧喹酯，荧光法测定。

3.主要试剂和仪器
3.1.主要试剂
甲醇：分析纯，重蒸馏，收集64～65℃馏分；
三氯甲烷：重蒸馏；
无水氯化钙；
偏磷酸；
甲醇-三氯甲烷(4＋1)；
洗脱液：将10g无水氯化钙溶解于1L重蒸馏甲醇中，放置24h。

取澄清液备用；
偏磷酸溶液：将50g偏磷酸溶解于1L水中。

在5℃下冷藏，使用冷溶液；
弗罗里硅土：100～200目，层析用。

于130℃烘箱中活化5h，取出，放置干燥器中冷却备用；
癸氧喹酯标准品：纯度≥99%；
癸氧喹酯标准溶液：准确称取适量的癸氧喹酯标准品，用三氯甲烷配成浓度为200μg/mL的标准储备溶液，根据需要再配成适当浓度的标准工作溶液。

3.2.仪器
荧光分光光度计，配有10mm荧光比色皿；
组织捣碎机；
刻度试管：15mL，具塞；
高速匀浆器；
离心管：50mL，具塞；
分液漏斗：250mL；
层析柱：玻璃柱，200mm×10mm(内径)。

柱底部填少量玻璃棉。

柱中加入5mL 三氯甲烷，然后加0.4±0.01g弗罗里硅土。

再加入2mL三氯甲烷并用细玻璃棒搅动，用三氯甲烷冲洗柱壁。

临使用前制备。

4.试样的抽取与制备
4.1.检验批
以不超过2500件为一检验批。

同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。

4.2.抽样数量
批量，件最低抽样数，件
1～25 1
26～100 5
101～250 10
251～500 15
501～1000 17
1001～2500 20
4.3.抽样方法
按规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。

每件取500g(或一袋)作为原始样品，原始样品总量不得少于2kg。

加封后，标明标记，及时送实验室。

4.4.试样制备
将所取原始样品缩分出1kg，取可食部分，经组织捣碎机捣碎，均分成两份，装入洁净容器内，作为试样。

密封，并标明标记。

4.5.试样保存
将试样于－18℃以下冷冻保存。

注：在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

5.过程简述
5.1.提取
称取试样20g(精确到0.1g)于高速匀浆器中，加入80±1g甲醇-三氯甲烷(4＋1)。

匀浆1min后转入离心管中，在约2000r/min下离心5min。

倾出并称取50g 上清液(相当于10g样品)于250mL分液漏斗中。

加入100mL偏磷酸溶液，将分液漏斗颠倒50次，静置分层10min，收集三氯甲烷层，保留水相。

再加入10mL三氯甲烷于分液漏斗中，如前摇动和分层。

合并两次三氯甲烷提取液，加入2mL 甲醇，并用三氯甲烷稀释至25mL。

5.2.净化
将25mL提取液加于层析柱中，用10mL甲醇洗层析柱，弃去流出液。

用15mL 洗脱液进行洗脱，收集15mL流出液，供测定。

5.3.测定
5.3.1.分光荧光条件
激发波长：265nm；
发射波长：390nm。

5.3.2 标准曲线的绘制
在4个250mL的分液漏斗中，分别加入55mL(50g)甲醇-三氯甲烷(4＋1)溶液，再分别加入0.0，0.1，0.3和0.5mL标准工作溶液(10μg/mL)，其中分别含0，1，3和5μg癸氧喹酯。

从“加入100mL偏磷酸溶液……”开始按测定步骤操作。

用荧光强度与对应的癸氧喹酯(μg/mL)绘制标准曲线。

5.3.3.荧光分光测定
测定样液中癸氧喹酯的荧光强度。

样液中癸氧喹酯含量应在仪器检测的线性范围内。

由标准曲线查得样液中癸氧喹酯的浓度(μg/mL)。

5.4.空白试验
除不加试样外，按上述测定步骤进行。

6.结果计算
按下式计算试样中癸氧喹酯残留含量：
X＝c·V m
式中：X——试样中癸氧喹酯残留量，mg/kg；
c——样液中癸氧喹酯的浓度，μg/mL；
V——样液最终定容体积，mL；
m——最终样液所代表的试样量，g。

注：计算结果需扣除空白值。

7.低限、回收率的测定
7.1.测定低限
本方法的测定低限为0.1mg/kg。

7.2.回收率
回收率的实验数据：癸氧喹酯的添加浓度在0.10～0.50mg/kg范围内，回收率为80.0%～106.0%。

8.来源：
SN 0284—93。