猪囊尾蚴的实验室诊断

猪囊尾蚴的实验室诊断
董杰
【期刊名称】《现代畜牧科技》
【年(卷),期】2015(000)001
【摘要】1.酶联免疫吸附试验抗原采用猪囊尾蚴的囊液，经亲和层析纯化、浓缩、分装后，于-20℃保存，使用前，用0.1MpH值9.6醋酸盐缓冲液稀释，使蛋白含量为30毫克／分升.酶结合物用兔抗猪IgG免疫血清，经硫酸铵盐析沉淀，再经DEAE-纤维素纯化提取免疫抗猪IgG抗体，用辣根过氧化物酶标记兔抗猪IgG，
经酶活力测定，应用时最适稀释浓度为1：1000。

操作方法为，以40孔聚苯乙烯微量反应为固相载体，每凹孔加稀释抗原液0.2毫升，置于4℃冰箱过夜，或
30℃2小时，用pH值7.4PBS-吐温20洗涤3次，每次3分钟，抽干，加以
PBS-吐温20稀释的被检血清0.2毫升，同份血清同同时试验2孔，置于37℃水
浴箱孵育30分钟，同前洗涤，加1：1000稀释的酶结合物0.2毫升，37℃水浴
箱孵育30分钟，同前洗涤，加底物过氧化氢-邻苯二胺溶液0.2毫升，37℃15分钟后加2M硫酸0.05毫升终止反应。

之后，将微量反应板移入酶标记光度计内，于492纳米波长测定光密度（OD值），每次试验均设置阳性阴性参考血清和PBS-吐温20空白对照。

以参考阳性血清的OD值作0.1.待测血清的OD值大于或等于阳性参考血清的OD值时为阳性，低于此值为阴性。

阳性猪反应液呈鲜明的
橙黄色，阴性猪反应液呈浅的淡黄色，两者眼观对比有明显差别，易于判定。

经反复试验，选定抗原的稀释度为30微克／毫升，血清稀释度为1：50。

【总页数】1页(P64-64)
【作者】董杰
【作者单位】黑龙江省拜泉县长春镇畜牧兽医站,黑龙江拜泉164724
【正文语种】中文
【中图分类】S858.285.9
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