Vit B2测定

250mL容量瓶中，用酸性水稀释至刻度，冷藏备用。
一：负荷尿样的收集
棕色尿瓶洗净、晾干。于尿瓶中加入1g草酸，使尿PH3-5，以保证维 生素不易破坏。尿瓶标签注明姓名、性别、编号、试验日期。晨起 排尿后，吞服维生素B25mg，饮水200~500mL，记录时间。服药四小 时内，小便留于瓶内，且到四小时时再次排尿于尿瓶中。
维生素b2的测定赵敏实验目的及要求?掌握受试者服用5mg维生素b2测定4h内受试者尿液中vitb2的排出量评价维生素b2的营养状况
维生素B2的测定
赵敏
实验目的及要求
掌握受试者服用5mg维生素B2，测定4h内受试者尿液中VitB2的排出量，评价维 生素B2的营养状况。
VitB2又叫核黄素是橘黄色无臭的针状结晶，维生素B2在酸性及中性环境中对热 稳定，在碱性环境中易被热和紫外线破PH至1左右。量筒测量4h收集尿液体积V4h尿(mL)，根据 常识尿负荷试验排出核黄素的量及尿液的体积，估计需要稀 释的倍数。建议稀释2.5倍或10倍，稀释用酸性水稀释。
三：测定
取尿液5ml于50ml棕色瓶中，酸性水稀释定容至刻度混匀， 作为溶液1。
取核黄素标准储备液（10.0μg/mL）1.00mL、2.00mL、 3.00mL、4.00mL、5.00mL分别置于50mL的容量瓶中，各加 入酸性水稀释至刻度，摇匀。得浓度依次为0.2μg/mL、 0.4μg/mL、μg/mL、0.6μg/mL、0.8μg/mL、1.0μg/mL的核 黄素标准溶液，待测。
核黄素溶液在440nm~500nm波长光照射下发出黄绿 色荧光。在稀溶液中，实验条件一定时，荧光强度F 与核黄素的浓度成正比。加入硫代硫酸钠后荧光被 还原。
仪器与试剂
1. 荧光光度计 2. 酸性水 取浓硫酸1.5mL，加蒸馏水至1000mL PH≈1 3. 核黄素标准储备液10.0μg/mL 精密称取25mg核黄素于
结果与分析
5ml尿液中的VB2的ug数为X V
X
A-B
=
X+5
C-D
4h尿液中 VB2的ug数=X* 5
标准曲线方法计算公式：X=C*50*V/5 C是带入标准曲线算出的50ml溶液1中，核黄素 的浓度，V是尿液的总体积
评价标准: 4h尿液中VB2的ug数≤400ug,缺乏 400~799为不足 800~1300为正常。