高效液相色谱法测定复方蛇补酊剂中蛇床子素的含量

高效液相色谱法测定复方蛇补酊剂中蛇床子素的含量
高培平;苑振亭
【摘要】目的建立HPLC法测定复方蛇补酊剂中蛇床子素的含量.方法采用HPLC法,色谱柱为Diamonsil C18(250 mm ×4.6 mm,5μm)；流动相为甲醇-水(80∶20)；流速为1.0ml· min-1,检测波长为320 nm.结果蛇床子素在1.0～
5.0μg·ml-1浓度范围内线性关系良好(r =0.9997),方法回收率均大于99.96％,日内、日间RSD均小于1.5％.结论 HPLC法准确可靠,简单可行,可用于复方蛇补酊剂中蛇床子素的含量测定.
【期刊名称】《泰山医学院学报》
【年(卷),期】2012(033)003
【总页数】2页(P204-205)
【关键词】蛇床子;蛇床子素;HPLC
【作者】高培平;苑振亭
【作者单位】泰山医学院附属泰山医院,山东泰安271000;中国人民解放军第230
医院,辽宁丹东118000
【正文语种】中文
【中图分类】R943
蛇床子系伞形科蛇床属植物蛇床[cnidium monnieri (L.) cuss]的果实[1],为常用中草药，蛇床子素(osthol)是从中药蛇床子中提取的主要有效成分之一[2]。

蛇床子及
其制剂在临床已应用多年，主要用于止痒[3-6]、治疗湿疹[7-9]等。

因此我们研制了复方蛇补酊剂用于治疗湿疹，采用HPLC法测定复方蛇补酊剂中蛇床子素的含量，现介绍如下。

1 仪器与试剂
高效液相色谱仪(HTTACHI L-7110)；超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；电
子分析天平； T2000P色谱工作站；蛇床子素对照品(中国药品生物制品检定所，批号：110822-200305)；其余试剂均为色谱纯、分析纯。

2 方法
2.1 色谱条件色谱柱：Hypelsil C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：甲醇-水(80︰20)；检测波长：320 nm；流速：1.0 ml·min-1；进样量:20 μl；理论塔板数按蛇床子素计算应不低于1000。

在上述色谱条件下，蛇床子素与杂质峰分离良好。

色谱图见图1。

2.2 对照品溶液精密称取蛇床子素对照品适量(相当于蛇床子素20 mg)，加流动相制成0.1 mg·ml-1的溶液备用。

2.3 标准曲线的制备精密量取对照品溶液用流动相稀释制成每1 ml中含1.0、2.0、
3.0、
4.0、
5.0 μg的标准品溶液，取20 μl进样测定。

图1 高效液相色谱图
A.蛇床子素对照品；
B.供试品；
C.空白对照(不含蛇床子)
3 结果
3.1 标准曲线的线性、最低检测量(LLOD)和最低定量限(LLOQ) 以浓度C对蛇床
子素的峰面积A进行线性回归，得回归方程为A = 706242C+7632.3(r=0.9997)。

结果表明，蛇床子素在1.0～5.0 μg·ml-1范围内，线性关系良好。

最低检测量
(LLOD)和最低定量限(LLOQ)分别是0.2 μg·ml-1和1 μg·ml-1。

3.2 回收率与精密度试验精密量取对照品溶液适量，分别制成浓度为1.0，3.0，5.0 μg·ml-1的样品溶液，取20 μl进样测定，结果见表1。

表1 回收率和精密度试验结果(n = 6)AddedC(μg·ml-1)FoundC(μg·ml-
1)Recovery(%)Inter-dayRSD(%)Intra-
dayRSD(%)1.01.015101.51.251.463.03.012100.41.161.385.04.99899.961.371.
29
3.3 稳定性试验取“3.2”项下3.0 μg·ml-1溶液，室温放置12 h，分别在0，2，4，6，8，12 h进样20 μl，测定蛇床子素峰面积,RSD为1.36%(n=6)，表明该供试品溶液在12 h内稳定。

3.4 样品测定精密量取复方蛇补酊剂适量(约含蛇床子素20 mg)，用流动相定量稀释制成约含2 μg·ml-1的溶液，摇匀；同法制备蛇床子素对照品溶液，取20 μl注入高液相色谱仪，结果见表2。

表2 样品含量测定结果(n=3)NoContent(%)199.722101.2399.41
采用HLPC法测定蛇床子素的含量已有报道[10-11]，本实验采用HPLC方法测定了复方蛇补酊剂中蛇床子素的含量，方法准确可靠，操作简单可行，其它组分不干扰蛇床子素的含量测定，可用于复方蛇补酊剂中蛇床子素的含量测定。

参考文献：
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[11] 苑振亭，徐海燕，王可，等.相反应体系中蛇床子素及其代谢物的测定[J].中国医院药学杂志，2010，30(9)：732-735.。