P-97微电极拉制仪说明
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P-97微电极拉制仪说明
P-97微电极拉制仪中⽂说明
P-97拉制仪是在P-80PC和P-87基础上升级⽽来,可编辑100个拉制程序(0-99),并做了以下改进:
加热⽚周围湿度控制,增加了玻璃微管(Micropipettes)拉制的可重复性;
真空液晶显⽰屏;
25%电源功率;
程序控制空⽓压⼒。
⼯作环境要求:
220V交流电压;
⼯作温度5-40°C;
实验室海拔2000⽶以内;
实验室最⼤相对湿度80%(31°C);
禁⽌实验室各个⽅向都有流动空⽓。
操作要求:
加热⽚是⽩⾦材质(化学性能稳定,不易氧化,增加拉制可重复性),质地柔软,操作要⾮常注意不要让玻璃微管碰到加热⽚。
只能使⽤Sutter原⼚的加热⽚,对于使⽤其他加热⽚对拉制仪产⽣对拉制仪的损坏,责任由使⽤者承担。
简单实⽤步骤:
1,打开电源,P-97左侧;
2,选择所需程序(0-99),并按ENTER进⼊;
3,装⼊玻璃微管,并盖好保护罩;
4,按Pull进⾏拉制。
※如果您第⼀次独⽴使⽤或更换加热⽚、玻璃微管时,需要做⼀个RAMP TEST,确定该玻璃微管在这个加热⽚下的熔点值,具体步骤:
开机→按0按ENTER→CLR→0→1→PULL,等待真空液晶屏上上升的数字停⽌,该数字即为该加热⽚对于这种玻璃微管的RAMP值,并记下该值。
注:更换加热⽚时,必须做以上步骤。
页⾯说明:
可操作部分包括:真空液晶显⽰屏、Reset、按键区和电源开关。
Reset:重置按键;
0-9:编辑各个参数数值及选择程序;
CLR:清除某程序数值或功能键(包括做RAMP TEST);
NEXT:移动光标到下⼀⾏;
LAST:移动光标到上⼀⾏;
PULL:开始拉制或RAMP TEST;
STOP:放弃拉制或放弃RAMP TEST。
显⽰区说明
程序(0-99):上图中5的位置代表⽬前选择程序5,每个程序可编辑8⾏参数循环,如果编辑⾏数未拉断玻璃微管,那么循环到第1⾏参数继续加热,直到玻璃微管拉断为⽌;
写保护(LOCK/UNLOCK):上图中UNLOCKED位置代表是否该程序进⾏写保护,写保护后,该程序不能进⾏编辑,直到去掉该写保护选项;
压⼒设置(0-999):上图中P=500位置,控制玻璃微管冷却的空⽓流动速度;
时间/⽇期:上图中JAN 18,2010位置,显⽰⽬前的⽇期和时间;
HEAT(0-999):上图中HEAT=650位置(该值不构成参考),根据RAMP TEST结果进⾏设置,建议在做测试时,加5或者减5进⾏调整,改变5对拉制影响较⼩,总的来说,HEAT值越⼤,得到的玻璃微管尖端越长,越细;
PULL(0-255):上图中PULL=100的位置,拉⼒代表施加在玻璃微管两边加持臂给玻璃微管的拉⼒,总的来说,拉⼒越⼤尖端直径越⼩,肩部越长;
VEL(VELOCITY0-255):上图中VEL=80位置,VEL代表停⽌加热速度,通常来说,VEL 越⼩,拉制出的玻璃微管越短,拉制步数越多,尖端直径越⼩,VEL⼀般只在10-150之间设置,超过150,玻璃微管⼀步拉断,该值对拉制没有影响;TIME(0-255):上图中TIME=200位置,TIME代表冷却时间,该参数有TIME和DELAY 两种模式,当VEL=0时,TIME⼀个单位代表10 ms,当VEL>0时,TIME⼀个单位代表0.5ms,TIME值超过150以上,玻璃微管冷却已经达到室温,所以TIME在150以上的数值对玻璃微管形状影响很⼩;
DELAY(0-255):多部拉制时,第⼀次停⽌加热到第⼆次加热的时间,DELAY模式在这段时间内,冷却空⽓⾃动打开
300ms,DELAY越⼤,玻璃微管肩部越⼩,开⼝直径越⼤。
注:TIME和DELAY两个参数只在多部拉制起作⽤,⼀步拉制,则两个参数对玻璃微管形状没有影响。
特别功能:
VEL=0
当VEL=0并且PULL=0,延迟模式选择TIME模式时,此为抛光模式(FIRE POLISH MODE)TIME=0
当TIME=0或DELAY时,空⽓冷却系统不启动,可以拉制⽐较长的玻璃微管,例如微灌流使⽤
*在程序中输⼊数值时,默认输⼊3位数,如果输⼊数值⼩于<100,输⼊完需要按下ENTER 键完成。
功能区:
RAMP TEST说明:
RAMP TEST测试时,加热⽚上的电流以650mA速度增加;
做RAMP TEST的VELOCITY不能修改;
出⼚时,⼚家会给⼀个RAMP在⼯⼚的测试结果,放在机箱内(原有的加热⽚和⼚家附送的测试⽤玻璃微管)。
⼚家推荐:
T形加热⽚:最⼤HEAT值不要超过Ramp+35,推荐Ramp+15开始操作
⽅形加热⽚:最⼤HEA T值不要超过Ramp+30,推荐Ramp开始操作
空⽓压⼒P,厚壁玻璃微管推荐设置500,薄壁玻璃微管推荐设置300
拉制前空⽓除湿启动默认5秒钟,如果实验室⽐较潮湿,建议调整到20-30秒
P-97的TIME模式相当于P-87的DELAY模式
使⽤⽅法:
拉制较长的玻璃微管建议选择较宽的加热⽚(4.5mm宽,如注射⽤针),拉制较短玻璃微管建议选择较窄的加热⽚(2.5-3mm 宽,如膜⽚钳⽤针)
制备膜⽚钳⽤电极
如:HEAT=Ramp,Pull=0,VEL=40,TIME=250(外径1.5mm,内径1.1mm)P=500
加热⽚加热时间如果⼩于5秒,那么应该减⼩HEAT值
PULL值应该设置较⼩,甚⾄可以为0
VEL值也应该设置⼩⼀些,VEL值越⼩,拉制步数越多
TIME值应该设置为200-250,膜⽚钳⽤针不建议使⽤DELAY模式
具体实验中拉制所需要的玻璃微管,请参考PIPETTE COOKBOOK。