人教版高中生物选修一专题3课题1《菊花的组织培养》 课件 (共30张PPT)

愈伤组织:
细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成 无定形状态的薄壁细胞
脱分化： 由高度分化的植物组织或细胞产 生愈伤组织的过程。也叫去分化
再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养， 又可以重新分化成根或芽等器官的过程
人参的愈伤组织
菠萝的愈伤组织
2、影响植物组织培养的因素 （1）植物材料的选择 A、植物材料的选择直接关系到实验的成败
（3）普遍性：
④结果： 形成不同的细胞和组织
⑤原因： 基因在特定的时间和空间条件下的选 择性表达的结果
（2）细胞的全能性
①定义：已经分化的细胞，仍然具有发育成完整 个体的潜能
②原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所 特有的全套遗传物质，都有发育成为完 整个体所必需的全部基因
③实例 已分化的植物细胞，仍具有全能性 高度特化的动物细胞，从整个细胞来说，全能 性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性， 这是因为细胞核内含有该物种遗传性所需要的 遗传物质
幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情 况，适时浇水、施肥，直至开花
烟草和胡萝卜的组织培养较为容易 枸杞愈伤组织的芽诱导比较难
B、同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影 响实验结果
菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎 上部新萌生的侧枝
（2）不同的离体组织和细胞对营养、环境等条 件的要求相对特殊，需配置适宜的培养基 MS培养基主要成分包括：
A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等
4、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法
二、实验操作 （一）制备MS固体培养基
MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般使 用4。C保存配制好的培养基母液来制备
1、配置各种母液
①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓 缩100倍，常温保存
②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一 般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液
赤霉素类： 赤霉酸（GA3）
②生长素和细胞分裂素作用
植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、 脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在 的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势
使用顺序
先使用生长素，后使用 细胞分裂素
先使用细胞分裂素后使 用生长素
同时使用
实验结果 有利于细胞分裂，但不 利分化 细胞既分裂也分化
思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实 验吗？
答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。 设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养 基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养， 用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。
（四）培养
接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养。培养 期间应定期消毒。培养温度18~22℃，每日用 日光灯光照12h
分化频率高
③生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例 对植物细胞发育方向的影响 生长素 > 细胞分裂素： 有利于根的分化
生长素 < 细胞分裂素： 有利于芽的分化，抑 制根的分化
生长素 ＝ 细胞分裂素： 促进愈伤组织生长
（4）pH、温度、光照
pH控制在5.8左右，温度控制在18－22。C,每日 用日光灯照射12h
专题3 植物组织培养技术
课题1： 菊花的组织培养 一、基础知识
1、植物的组织培养的基本过程 （1）细胞的分化
①概念：在个体发育中， 由一个或一种 细胞增殖产生 的后代，在形 态、结构、生 理功能上发生 稳定性差异的
②过程：过程
③特点： （1）持久性：
一般来说，分化了的细胞将一直保持分化 后的状态，直到死亡 （2）稳定性：
③用母液配制培养基时，需要根据各种母液 的浓缩倍数，计算用量
2、配置培养基
① 配制培养液
② 调PH
③培养基的分装 分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml 由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必 添加植物激素
3、灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸 汽灭菌 （二）外植体消毒
1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝 2、消毒
（五）移栽
1、打开封口膜 移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养 瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日
2、清洗转移 用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过 毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间
珍珠岩：固体基质型，含水量高、蓄水性强、 透性好，适合栽培 3、移栽
幼苗长壮后，移栽到土壤中
（六）栽培
①流水冲洗
菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷 轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右
② 酒精处理 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体 积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－ 7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗
③消毒液处理
取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分， 放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min， 取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液
3、植物组织培养过程:
植物细胞培养
细胞分裂
离
素>生长素
体 组
脱分化
愈 伤 再分化
芽
织 或 细
细胞分 裂素≈
组 织
根 细胞分裂
植 物 体
胞 生长素
素<生长素
不需要光
需要光
4、植物组织培养的应用：
1、培育无病毒植株
2、 培养紫草愈伤组织,提取紫草素（治疗烫 伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料）
3、诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力 的胚状结构，包裹上人造种皮，制成人工种子， 可以解决有些作物品种繁殖能力差，结子困难 或发芽率低等问题
B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、 Co等
C、有机物、植物激素
（3）植物激素的影响
①常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和 赤霉素
生长素类：2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、 吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、 吲哚丁酸（IBA）
细胞分裂素类： 激动素（KT）、6－苄基嘌呤 （ 6－BA）、玉米素（ZT）
①每接种一块外植体前，镊子需放入体积分 数为70％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒 精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种
②外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体 数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜3－4 块，菊的茎或叶6－8块，也不要太少，以充分 利用培养基中的营养成分和光照条件
③插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖 基部插入培养基利于吸收水分和养分
13、He who seize the right moment, is the right man.谁把握机遇，谁就心想事成。21.8.1221.8.1221:57:0221:57:02August 12, 2021 • 14、谁要是自己还没有发展培养和教育好，他就不能发展培养和教育别人。2021年8月12日星期四下午9时57分2秒21:57:0221.8.12 • 15、一年之计，莫如树谷；十年之计，莫如树木；终身之计，莫如树人。2021年8月下午9时57分21.8.1221:57August 12, 2021 • 16、教学的目的是培养学生自己学习，自己研究，用自己的头脑来想，用自己的眼睛看，用自己的手来做这种精神。2021年8月12日星期四9时57分2秒21:57:0212 August 2021 • 17、儿童是中心，教育的措施便围绕他们而组织起来。下午9时57分2秒下午9时57分21:57:0221.8.12
（三）接种 1、接种室消毒 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种 室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空 气消毒， 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫 外线照射20分钟
2、无菌操作要求 操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后， 都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。
3、材料的切取和接种
4、接种注意事项
•
You have to believe in yourself. That's the secret of success. 人必须相信自己，这是成功的秘诀。
•
（3）植物组织培养 细胞离体
①必要条件： 一定的营养物质、激素和其他
外界条件
②原理:
细胞的全能性

③相关概念: 外植体：离体的器官、组织、细胞
④全能性的比较: 受精卵>生殖细胞>体细胞
• 9、要学生做的事，教职员躬亲共做；要学生学的知识，教职员躬亲共学；要学生守的规则，教职员躬亲共守。21.8.1221.8.12Thursday, August 12, 2021 • 10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。21:57:0221:57:0221:578/12/2021 9:57:02 PM • 11、只有让学生不把全部时间都用在学习上，而留下许多自由支配的时间，他才能顺利地学习……（这）是教育过程的逻辑。21.8.1221:57:0221:57Aug-2112-Aug-21 • 12、要记住，你不仅是教课的教师，也是学生的教育者，生活的导师和道德的引路人。21:57:0221:57:0221:57Thursday, August 12, 2021