一种从大黄中分离纯化蒽醌类化合物和苯乙烯酸的方法[发明专利]

(10)申请公布号
(43)申请公布日 (21)申请号 201510179428.1
(22)申请日 2015.04.16
C07C 46/10(2006.01)
C07C 50/34(2006.01)
C07C 51/42(2006.01)
C07C 66/02(2006.01)
C07C 57/42(2006.01)
(71)申请人聊城大学
地址252059 山东省聊城市东昌府区湖南路
1号
(72)发明人孙爱玲 于琳琳 李爱峰 亢静静
柳仁民
(54)发明名称
一种从大黄中分离纯化蒽醌类化合物和苯乙
烯酸的方法
(57)摘要
本发明提供了一种从大黄提取物中分离纯化
蒽醌类化合物和苯乙烯酸的方法。

大黄药材粉碎，
加入苯-硫酸混合液加热回流提取，将提取液过
滤、减压浓缩得大黄浸膏；将大黄浸膏用甲醇溶
解，经过滤后，进行超临界流体色谱分离，色谱柱
为二醇基色谱柱，流动相为超临界流体，改进剂为
甲醇。

本发明不使用对环境有危害的有机溶剂，生
产过程绿色环保，所得产品无有害物质残留；二
氧化碳回收利用容易，能耗低，生产成本低。

(51)Int.Cl.
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书3页 附图1页
(10)申请公布号CN 104909999 A (43)申请公布日2015.09.16
C N 104909999
A
1.一种从大黄提取物中分离纯化蒽醌类化合物和苯乙烯酸的方法，其特征是，步骤为：
步骤1：大黄药材粉碎，加入苯-硫酸混合液，加热回流提取，将提取液过滤、减压浓缩得大黄浸膏；
步骤2：将大黄浸膏用甲醇溶解，经过滤后，进行超临界流体色谱分离，色谱柱为二醇基色谱柱，流动相为超临界流体，改进剂为甲醇，分离过程由紫外检测器检测，根据检测信号收集目标组分馏分。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤1中的硫酸浓度为10-40%，最优为20%。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤1中苯与硫酸的体积比例为10：1～2：1，最优为5:1。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤1中苯-硫酸混合液与药材的比例是3：1～10：1，最优为6：1。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤1中提取的次数为3次，每次回流时间为0.5-5小时，最优为1.5小时。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤2中过滤所用滤膜为0.45μm滤膜。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤2中超临界流体为超临界二氧化碳，超临界二氧化碳的压力为9~20MPa，最优为13 MPa。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征是，超临界二氧化碳的流速为1-10倍柱体积/分钟，最优为4倍柱体积/分钟。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤2中色谱柱温度为35~55 °C，最优为45 °C。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤2中改进剂甲醇的比例为0%~10%，最优为4%。

一种从大黄中分离纯化蒽醌类化合物和苯乙烯酸的方法
技术领域
[0001] 本发明属于化工与制药领域，具体是涉及一种从大黄提取物中分离纯化蒽醌类化合物和苯乙烯酸的方法。

背景技术
[0002] 大黄为常用中药，具有泻下、抗菌、抗病毒、导滞通便、利水通淋、舒肝利胆、积滞腹痛、抗肿瘤、消炎、止血、止吐、止痛等多种作用，临床上广泛应用于慢性肾功能衰竭、上消化道出血、急性胰腺炎、急性肠梗阻、重症肝炎、尿毒症、痢疾、肺癌、白血病及糖尿病等多种疾病的治疗。

其主要活性成分为蒽醌衍生物，包括大黄酸、大黄素、大黄酚、芦荟大黄素和大黄素甲醚。

[0003] 大黄中有效成分的传统分离纯方法，多采用有机溶剂提取-薄层色谱法、高效液相色谱法等。

虽然薄层色谱法具有操作方便、设备简单等特点，但其分离度不高，且分离度容易受相对湿度和温度的影响。

高效液相色谱法分离度高，应用范围广，但其分离成本高。

发明内容
[0004] 本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种操作简便、分离量大、综合成本低、绿色环保的从大黄中快速纯化制备蒽醌类化合物和苯乙烯酸的方法，通过一步分离纯化即可从大黄提取物中得到高纯度蒽醌类化合物和苯乙烯酸单体化合物。

[0005] 本发明的方案如下：
一种从大黄提取物中分离纯化蒽醌类化合物和苯乙烯酸的方法，步骤为：
步骤1：大黄药材粉碎，加入苯-硫酸混合液，加热回流提取，将提取液过滤、减压浓缩得大黄浸膏。

[0006] 步骤2：将大黄浸膏用甲醇溶解，经过滤后，进行超临界流体色谱分离，色谱柱为二醇基色谱柱，流动相为超临界流体，改进剂为甲醇。

分离过程由紫外检测器检测，根据检测信号收集目标组分馏分。

[0007] 前面所述的方法，优选的方案是，步骤1中的硫酸浓度为10-40%，最优为20%；苯与硫酸的体积比例为10：1～2：1，最优为5:1；苯-硫酸混合液与药材的比例是3：1～10：1，最优为6：1；提取的次数为3次，每次回流时间为0.5-5小时，最优为1.5小时。

[0008] 前面所述的方法，优选的方案是，步骤2中过滤所用滤膜为0.45 μm滤膜。

[0009] 前面所述的方法，优选的方案是，步骤2中超临界流体为超临界二氧化碳，超临界二氧化碳的压力为9~20MPa，最优为13 MPa；超临界二氧化碳的流速为1-10倍柱体积/分钟，最优为4倍柱体积/分钟。

[0010] 前面所述的方法，优选的方案是，步骤2中色谱柱温度为35~55 °C，最优为45 °C。

[0011] 前面所述的方法，优选的方案是，步骤2中改进剂甲醇的比例为0%~10%，最优为4%。

[0012] 本发明一种从大黄中分离纯化蒽醌类化合物和苯乙烯酸的方法，具有如下优势：（1）所得到的大黄提取物中有效成分含量高（从图1可以看出）。

[0013] （2）不需要像已有技术一样对样品进行多次分离纯化，只需要一个分离步骤即可得到高纯度蒽醌类化合物和苯乙烯酸，经过一步分离纯化就可以得到5种蒽醌类化合物和苯乙烯酸。

[0014] （3）纯化过程中使用超临界二氧化碳，不使用对环境有危害的有机溶剂，生产过程绿色环保，所得产品无有害物质残留。

[0015] （4）二氧化碳回收利用容易，能耗低，生产成本低。

[0016] （5）方法操作简单，易于自动化控制，效率高，工艺周期短。

附图说明
[0017] 图1是实施例1超临界流体色谱图。

具体实施方式
[0018] 下面结合实施例和附图详细说明本发明的技术方案，但保护范围不被此限制。

实施例中所用设备或原材料皆可从市场获得。

所用试剂均为分析纯，购自天津试剂四厂，所用二氧化碳为高纯二氧化碳。

[0019] 实施例1
称取大黄100 g，用粉碎机粉碎，放入玻璃容器中，加入600 ml苯-20%硫酸（5:1，V/V）混合液，加热回流提取3次，每次1.5小时，合并提取液，过滤、减压浓缩得大黄浸膏。

[0020] 将大黄浸膏用甲醇溶解，经过滤（所用滤膜为0.45μm滤膜）后，进行超临界流体色谱分离，色谱柱为二醇基色谱柱，色谱柱温度为45 °C。

流动相为超临界二氧化碳，流速为4倍柱体积/分钟，压力为13 MPa。

改进剂为甲醇，其比例为4%。

分离过程由紫外检测器检测，检测波长为254 nm，根据检测信号收集目标组分馏分，分别得到5种蒽醌类化合物和苯乙烯酸。

[0021] 图1是实施例1超临界流体色谱图。

所得各个组分的纯度很高，均在98%以上。

[0022] 实施例2
称取大黄100 g，用粉碎机粉碎，放入玻璃容器中，加入800 ml苯-15%硫酸（5:1，V/V）混合液，加热回流提取3次，每次1小时，合并提取液，过滤、减压浓缩得大黄浸膏。

[0023] 将大黄浸膏用甲醇溶解，经过滤后，进行超临界流体色谱分离，色谱柱为二醇基色谱柱，色谱柱温度为40 °C。

流动相为超临界二氧化碳，流速为3.5倍柱体积/分钟，压力为12 MPa。

改进剂为甲醇，其比例为3%。

分离过程由紫外检测器检测，检测波长为254 nm，根据检测信号收集目标组分馏分，分别得到5种蒽醌类化合物和苯乙烯酸。

[0024] 实施例3
称取大黄100 g，用粉碎机粉碎，放入玻璃容器中，加入500 ml苯-25%硫酸（6:1，V/V）混合液，加热回流提取3次，每次2小时，合并提取液，过滤、减压浓缩得大黄浸膏。

[0025] 将大黄浸膏用甲醇溶解，经过滤后，进行超临界流体色谱分离，色谱柱为二醇基色谱柱，色谱柱温度为35 °C。

流动相为超临界二氧化碳，流速为3倍柱体积/分钟，压力为11 MPa。

改进剂为甲醇，其比例为2%。

分离过程由紫外检测器检测，检测波长为254 nm，根
据检测信号收集目标组分馏分，分别得到5种蒽醌类化合物和苯乙烯酸。

[0026] 经HPLC面积归一化法分析测试，实施例1-3所得到的各个组分的纯度很高，均在98%以上。

[0027] 经NMR、MS鉴定，图1中A、B、C、D、E、F分别代表大黄酚、大黄素甲醚、苯乙烯酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酸，其化学结构如下：
图1。