BTBD10基因的真核表达载体构建和亚细胞定位

BTBD10基因的真核表达载体构建和亚细胞定位
刘瑜;王宣春;陈凤玲;李春霖;胡仁明
【期刊名称】《中国分子心脏病学杂志》
【年(卷),期】2009(9)1
【摘要】目的构建BTBD10重组真核表达载体,观察BTBD10在HEK293细胞中的定位。

方法利用PCR方法扩增BTBD10全长,经HindⅢ和BamHI酶切后连接入pGFP-C3真核表达载体,构建pGFP-C3-BTBD10重组表达质粒,转染HEK293细胞,利用激光共聚焦显微镜观察BTBD10在细胞中的定位。

结果经双酶切和核酸序列分析证实重组质粒包含有正确编码的BTBD10读码框。

激光共聚焦显微镜观察到空质粒pGFP-C3转染后,整个细胞内弥散绿色荧光,而转染pGFP-C3-BTBD10重组载体后,可见绿色荧光分布于HEK293细胞膜一侧的细胞浆中,提示BTBD10定位于细胞浆中。

结论成功构建人BTBD10真核表达载体,BTBD10定位于哺乳细胞的细胞浆中,可能发挥蛋白之间的相互作用。

【总页数】3页(P16-18)
【关键词】BTBD10;真核表达;转染
【作者】刘瑜;王宣春;陈凤玲;李春霖;胡仁明
【作者单位】中国人民解放军总医院老年内分泌科;复旦大学附属华山医院内分泌科复旦大学内分泌糖尿病研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R780.2;R454.2
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