小鼠2种和人4种精子抗原免疫对小鼠妊娠的影响
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更 好地 进行 实验机 制 研 究 ， 需要 复 制 一 个 较 好 的免
２ ２ １ 制作精 子或 精子 膜 抗原 ： ７ ．． 取 ０日龄 小 鼠 ３ Ｏ 只， 剖 附睾取精 子 。形态 学 、 解 免疫学 及生化 指标 检 查正 常人精 液 ７份 。精 子 或精 液分 别 用 Ｐ Ｓ溶 液 Ｂ 洗涤 ３次 ， 成精 子 悬 液 。精 子 悬 液分 别 用 ＤＴ 制 Ｔ、 Ｎ －０ Ｔｒ ｏ 一 ０ Ｐ ４ 、 ｉ ｎ １ ０提 取人 或 鼠精 子 膜抗 原 ］ ｔ 。因
１ 材 料
２ ２ ２ 免疫 注射 ： 组 注射 ９ ０ ｇ Ｌ氯 化 钠 注射 ． ． Ａ ． ／ 液， Ｂ组 注射用 ＤＴ 提 取 的 人 精 子 膜抗 原 ， Ｔ Ｃ组 注 射 用 ＮＰ ４ 一０提 取 的人 精子 膜 抗原 ， Ｄ组 注 射人 全精 子 抗原 ， Ｅ组 注射 提取精 子 膜抗 原 后 的人精 子 ， Ｆ组
中 图分类号 ： ２ １ ４ ； ６ ８ ２ 文献标 识码 ： Ｒ ７ ．４ Ｒ ９ ． Ａ
文章编 号 ：０ ０ ２ ９ ２ ０ ） １ ０ ３ —０ １ ０ —２ １ （０ ８ ０ － ０ ５ ３
抗精 子抗 体 （ Ａｂ 是 造 成 男 女 生育 障 碍 的 重 Ａｓ ） 要 因素 之 一 ， 占不 育症 的 ９ ～ ３ ［ 。 近 年 来 约 ６ １ ］ 对 Ａｓ Ａｂ的致病 机制及 临床 治疗 的研究 已成 为不 育
不孕 疾病研 究 的热点 之 一 ， 同时 也 为开 发 以精 子 成
组 为人全 精子 抗 原 组 ， Ｅ组 为 提 取膜 抗原 后 的人 精 子组 ， Ｆ组 为 鼠全 精 子 组 ， 组 为 鼠精 子膜 混 合 抗 Ｇ
原组 。
２ ２ 模 型复制 ．
分构建 的免 疫避 孕疫苗 提供 有益 的理论依 据 。 为了
共 ９ｄ 。
２ １ 动物分 组 ．
雌小 鼠按体 质量配 对分 成 ７组 ， 每
组 ｌ ２只。Ａ 组为 正常对 照组 ， Ｂ组 为人 二巯 基 苏糖 醇（ ＴＴ） 抗 原 组 ， 组 为 人 ＮＰ ４ Ｄ 膜 Ｃ 一０膜 抗 原 组 ， Ｄ
疫 动 物 ｌ ］ ２ 。
本课 题组 不但用 同种异 体小 鼠全精 子 抗原 及其
精 子膜抗 原免 疫小 鼠， 还用 人 的全 精 子及 其 精子 膜 抗 原共 ６种抗 原免 疫 小 鼠 ， 比较 各 种 免疫 性 不 育 以 动 物模 型的优 劣 ， 旨在 为免 疫 性 不 育 的发 病 机 制 提 供理 想 的实验材 料 和手段 。
２ 方 法
Ｔｒ ｏ － ０ ｉ ｎ１ ０３种方 法 提取 的 鼠精 子膜 混合抗 原［ 。 ｔ ６ ］ 第 １１ ， ５天注射 抗 原加 完 全 福 氏佐 剂 ， ２ 第 Ｏ天注 射 抗原 加不 完全福 氏佐 剂 ， ２ 第 ５天注 射单纯 抗原 。第
１天每 只 鼠每 次免疫 注 射 ３ ０ ｇ 原 蛋 白 。第 １ ， ０ 抗 ５ ２ ， ５天每 只 鼠每 次免 疫注射 ７ ｇ抗 原蛋 白 。 Ｏ２ ５ ２２ ３ 合 笼 ： ２ ．． 第 ９天每 两 只雌 鼠用 １只雄 鼠合 笼 ，
注 射 鼠 全 精 子 ，Ｇ 组 注 射 用 Ｄ ＴＴ、ＮＰ ４ 、 一０
健康 昆 明种 小 鼠， 由安 徽 医 科 大学 动 物 中心 提
供 。４ Ｏ日龄 ， 体质 量 ２ ～２ ， 性 ８ Ｏ ４ｇ 雌 ４只 ， 性 ４ 雄 ２ 只；０日龄 ， 质量 ２ ～３ ， 性 ３ ７ 体 ８ ７ｇ 雄 Ｏ只。
精子膜 抗 原 在 ２ ５ｎ 处 有 最 大 吸 收 波 长 ， ７ ｍ 故在 该 波 长 处 用 紫 外 分 光 光 度 计 比 色 法 测 定 其 蛋 白
质含量 。
疫 性不 育的 动物模 型 。已有学者 用各 种 实验 动物进 行 其机 制研究 ， 们基 本 上 是使 用 一 种 精 子 抗原 免 他
维普资讯
第 ２ ７卷
第 ｌ期
安
撒
中 医
学
院
学
报
２０ ０ ８年 ２月
Ｊ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＡＮＨ ＵＩ ＴＣＭ ＣＯＬ ＬＥＧＥ
Ｖｏ ． ７ Ｎｏ １ １２ ． Ｆｅ ． ０ ８ ｂ ２ ０
・
实验 研 究 ・
小 鼠 ２种 和人 ４种 精 子 抗 原 对 小 鼠妊 娠 的影 响 免疫
后， 小鼠 精子 混合抗 原免 疫小 鼠效果 最好 ， 妊娠 率 为零 ， ＴＴ提取 的人 精子 膜 抗原和人 全精 子抗 原 Ｄ 免 疫 小鼠效果较 好 ， 妊娠 率为 １ ． ， ６ ７ 显著低 于正 常 对照 组 的 ６ ． ％（ ３ ６ Ｐ＜ ０ ０ ． １或 Ｐ＜ ０ ０ ） ． ５ 。结
王 望 九 ， 沁 园， 尔鑫 ， 戚 高 曹淑 俐 吴 传 云 ， ， 孔 梅 ， 笑梅 ， 明礼 ， 李 汤 刘 茜 ， 陈永 华
（ 徽 中 医学 院 ， 安 安徽 合肥 ２０ ３ ） ３ ０ ８
摘要 ： 目的 ： 察用 小鼠和人 不 同的精 子 抗原免 疫 雌 小鼠对 妊娠 影 响 。 方 法 ： 观 用小 鼠 ２种和 人 ４种 精子抗 原免 疫雌 小鼠 ， 用 酶标 法检 测血 清抗精 子 抗 体 （ Ａｂ ， 察 各组 小 鼠妊 娠 率及 胎 仔 采 Ａｓ ） 观 数 。结 果 ： 随着主 动免疫 的进 行 ， 小鼠 血 清 Ａｓ Ａｂ显 著 升 高（ Ｐ＜０ ０ ） ． １ 。精 子抗 原 免 疫 小鼠 ８周
论： 在人 精子抗 原 中， Ｔ提 取 的人精 子 膜抗 原 和人 全 精 子抗 原 免疫 雌 小 鼠 效果 最好 。在 小鼠 精 ＤＴ 子抗 原 中， ＴＴ、 ＿Ｏ Ｔｒ ｏ 一０ Ｄ ＮＰ ４ 、 ｉ ｎ１ ０提 取 的 小鼠精子 膜 混合抗原 免痴 雌 小鼠 效果 最好 。 ｔ
关 键 词 ： 疫 性 不 孕 ； 育 症 ； 子 ； 原 ； 精 子 抗 体 免 不 精 抗 抗
２ ２ １ 制作精 子或 精子 膜 抗原 ： ７ ．． 取 ０日龄 小 鼠 ３ Ｏ 只， 剖 附睾取精 子 。形态 学 、 解 免疫学 及生化 指标 检 查正 常人精 液 ７份 。精 子 或精 液分 别 用 Ｐ Ｓ溶 液 Ｂ 洗涤 ３次 ， 成精 子 悬 液 。精 子 悬 液分 别 用 ＤＴ 制 Ｔ、 Ｎ －０ Ｔｒ ｏ 一 ０ Ｐ ４ 、 ｉ ｎ １ ０提 取人 或 鼠精 子 膜抗 原 ］ ｔ 。因
１ 材 料
２ ２ ２ 免疫 注射 ： 组 注射 ９ ０ ｇ Ｌ氯 化 钠 注射 ． ． Ａ ． ／ 液， Ｂ组 注射用 ＤＴ 提 取 的 人 精 子 膜抗 原 ， Ｔ Ｃ组 注 射 用 ＮＰ ４ 一０提 取 的人 精子 膜 抗原 ， Ｄ组 注 射人 全精 子 抗原 ， Ｅ组 注射 提取精 子 膜抗 原 后 的人精 子 ， Ｆ组
中 图分类号 ： ２ １ ４ ； ６ ８ ２ 文献标 识码 ： Ｒ ７ ．４ Ｒ ９ ． Ａ
文章编 号 ：０ ０ ２ ９ ２ ０ ） １ ０ ３ —０ １ ０ —２ １ （０ ８ ０ － ０ ５ ３
抗精 子抗 体 （ Ａｂ 是 造 成 男 女 生育 障 碍 的 重 Ａｓ ） 要 因素 之 一 ， 占不 育症 的 ９ ～ ３ ［ 。 近 年 来 约 ６ １ ］ 对 Ａｓ Ａｂ的致病 机制及 临床 治疗 的研究 已成 为不 育
不孕 疾病研 究 的热点 之 一 ， 同时 也 为开 发 以精 子 成
组 为人全 精子 抗 原 组 ， Ｅ组 为 提 取膜 抗原 后 的人 精 子组 ， Ｆ组 为 鼠全 精 子 组 ， 组 为 鼠精 子膜 混 合 抗 Ｇ
原组 。
２ ２ 模 型复制 ．
分构建 的免 疫避 孕疫苗 提供 有益 的理论依 据 。 为了
共 ９ｄ 。
２ １ 动物分 组 ．
雌小 鼠按体 质量配 对分 成 ７组 ， 每
组 ｌ ２只。Ａ 组为 正常对 照组 ， Ｂ组 为人 二巯 基 苏糖 醇（ ＴＴ） 抗 原 组 ， 组 为 人 ＮＰ ４ Ｄ 膜 Ｃ 一０膜 抗 原 组 ， Ｄ
疫 动 物 ｌ ］ ２ 。
本课 题组 不但用 同种异 体小 鼠全精 子 抗原 及其
精 子膜抗 原免 疫小 鼠， 还用 人 的全 精 子及 其 精子 膜 抗 原共 ６种抗 原免 疫 小 鼠 ， 比较 各 种 免疫 性 不 育 以 动 物模 型的优 劣 ， 旨在 为免 疫 性 不 育 的发 病 机 制 提 供理 想 的实验材 料 和手段 。
２ 方 法
Ｔｒ ｏ － ０ ｉ ｎ１ ０３种方 法 提取 的 鼠精 子膜 混合抗 原［ 。 ｔ ６ ］ 第 １１ ， ５天注射 抗 原加 完 全 福 氏佐 剂 ， ２ 第 Ｏ天注 射 抗原 加不 完全福 氏佐 剂 ， ２ 第 ５天注 射单纯 抗原 。第
１天每 只 鼠每 次免疫 注 射 ３ ０ ｇ 原 蛋 白 。第 １ ， ０ 抗 ５ ２ ， ５天每 只 鼠每 次免 疫注射 ７ ｇ抗 原蛋 白 。 Ｏ２ ５ ２２ ３ 合 笼 ： ２ ．． 第 ９天每 两 只雌 鼠用 １只雄 鼠合 笼 ，
注 射 鼠 全 精 子 ，Ｇ 组 注 射 用 Ｄ ＴＴ、ＮＰ ４ 、 一０
健康 昆 明种 小 鼠， 由安 徽 医 科 大学 动 物 中心 提
供 。４ Ｏ日龄 ， 体质 量 ２ ～２ ， 性 ８ Ｏ ４ｇ 雌 ４只 ， 性 ４ 雄 ２ 只；０日龄 ， 质量 ２ ～３ ， 性 ３ ７ 体 ８ ７ｇ 雄 Ｏ只。
精子膜 抗 原 在 ２ ５ｎ 处 有 最 大 吸 收 波 长 ， ７ ｍ 故在 该 波 长 处 用 紫 外 分 光 光 度 计 比 色 法 测 定 其 蛋 白
质含量 。
疫 性不 育的 动物模 型 。已有学者 用各 种 实验 动物进 行 其机 制研究 ， 们基 本 上 是使 用 一 种 精 子 抗原 免 他
维普资讯
第 ２ ７卷
第 ｌ期
安
撒
中 医
学
院
学
报
２０ ０ ８年 ２月
Ｊ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＡＮＨ ＵＩ ＴＣＭ ＣＯＬ ＬＥＧＥ
Ｖｏ ． ７ Ｎｏ １ １２ ． Ｆｅ ． ０ ８ ｂ ２ ０
・
实验 研 究 ・
小 鼠 ２种 和人 ４种 精 子 抗 原 对 小 鼠妊 娠 的影 响 免疫
后， 小鼠 精子 混合抗 原免 疫小 鼠效果 最好 ， 妊娠 率 为零 ， ＴＴ提取 的人 精子 膜 抗原和人 全精 子抗 原 Ｄ 免 疫 小鼠效果较 好 ， 妊娠 率为 １ ． ， ６ ７ 显著低 于正 常 对照 组 的 ６ ． ％（ ３ ６ Ｐ＜ ０ ０ ． １或 Ｐ＜ ０ ０ ） ． ５ 。结
王 望 九 ， 沁 园， 尔鑫 ， 戚 高 曹淑 俐 吴 传 云 ， ， 孔 梅 ， 笑梅 ， 明礼 ， 李 汤 刘 茜 ， 陈永 华
（ 徽 中 医学 院 ， 安 安徽 合肥 ２０ ３ ） ３ ０ ８
摘要 ： 目的 ： 察用 小鼠和人 不 同的精 子 抗原免 疫 雌 小鼠对 妊娠 影 响 。 方 法 ： 观 用小 鼠 ２种和 人 ４种 精子抗 原免 疫雌 小鼠 ， 用 酶标 法检 测血 清抗精 子 抗 体 （ Ａｂ ， 察 各组 小 鼠妊 娠 率及 胎 仔 采 Ａｓ ） 观 数 。结 果 ： 随着主 动免疫 的进 行 ， 小鼠 血 清 Ａｓ Ａｂ显 著 升 高（ Ｐ＜０ ０ ） ． １ 。精 子抗 原 免 疫 小鼠 ８周
论： 在人 精子抗 原 中， Ｔ提 取 的人精 子 膜抗 原 和人 全 精 子抗 原 免疫 雌 小 鼠 效果 最好 。在 小鼠 精 ＤＴ 子抗 原 中， ＴＴ、 ＿Ｏ Ｔｒ ｏ 一０ Ｄ ＮＰ ４ 、 ｉ ｎ１ ０提 取 的 小鼠精子 膜 混合抗原 免痴 雌 小鼠 效果 最好 。 ｔ
关 键 词 ： 疫 性 不 孕 ； 育 症 ； 子 ； 原 ； 精 子 抗 体 免 不 精 抗 抗