家兔胃液分泌的调节
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机能学实验
家兔胃液分泌的 调节
一、实验目的
本实验采用麻醉状态下家兔灌流方法，测定 胃酸排除量，观察各种因素对胃酸分泌的影 响并掌握其作用途径。
实验原理
胃上皮和胃底腺立体模式图
胃底腺 （泌酸腺）
•胃底腺由壁 细胞、主细 胞、颈粘液 细胞、内分 泌细胞和干 细胞组成。
胃液分泌的神经调节机制
副交感神经 （迷走神经）
实验步骤
•用手指轻轻触摸 胃，检查胃内是否 有食物残渣，若胃 内有固体物，则要 在胃大弯侧切开胃 体，取出胃内食物 团，并用蘸有温热 生理盐水的棉签将 胃内食物残渣清除 干净，然后缝合胃 切口。 •用少许37℃生理 盐水从食管插管注 入胃内，用手指轻 压胃体，观察幽门 插管出口是否通畅、 流出液有无食物残 渣和血液，如出口 通畅即手术成功。 •分离腹腔神经节和 迷走神经，分离后 分别在各神经节下 方穿不同颜色的线 以备用。 将家兔体位由仰卧 位改为侧卧位，在 手术后20～30min 后开始测定胃酸分 泌情况
（ +）
Ach
壁细胞M3受体
胃酸分泌
（ +）
促进释放组胺、 促胃泌素分泌
交感神经 （腹腔神经节）
NE
(-)
胃酸分泌
α受体
实验对象
• 取经12h禁食不禁水的家兔一只，体重 2.0~3.0kg，雌雄不拘。
实验器材和药品
• 兔手术台，哺乳动物手术器械1套，食管插 管，气管插管，幽门插管，静脉插管，三 通管，输液架，输液瓶及输液管，微量滴 管，三角瓶，棉签，缝合针及缝合线，有 色丝线，注射器（20ml）及针头，一次性 使用外周神经丛刺激针，生理盐水，1g/L阿 托品，10g/L酚妥拉明，20%乌拉坦， 0.01mol/ L NaOH溶液，1%酚红。
观察项目
• （3）连续收集5个样品并测定其排酸量作为实验对照，再 静脉推注1g/L的阿托品0.1ml/kg，连续收集5个样品，测 定其胃酸排出量。 • （4）在收集对照样品后，静脉推注10g/L酚妥拉明 0.1ml/kg，连续收集5个样品，测定其胃酸排出量。 • （5）在收集对照样品后，用一次性使用外周神经丛刺激 针刺激腹腔神经节，连续收集5个样品，测定其胃酸排出 量。 • （6）在收集对照样品后，用一次性使用外周神经丛刺激 针刺激迷走神经节，连续收集5个样品，测定其胃酸排出 量。
多→促进胃液分泌，与对照样品相比胃酸排出增加。
注意事项
• （1）麻醉剂注射应缓慢，为保证胃液分泌，家兔不宜麻 醉太深。 • （2）食管插管插入胃时插管前端不能尖锐，以免损伤食 管和胃粘膜。 • （3）幽门插管时，应注意切勿损伤胃和十二指肠周围的 神经和血管。 • （4）滴定终点以样品刚好变红，摇之能维持10s以上不退 色为准。每次滴定颜色要一致，滴定结果由同一个同学判 定为宜。 • （5）因家兔的迷走神经很细，容易拉断，分离时要非常 细心。 • （6）手术过程中应注意保持家兔体温和环境温度稳定， 切忌用力牵拉大小网膜和肠胃。
• 注：每组学生在上述观察项目第（2）至 （7）项中，可选择第（2）项与其他另外 一两项进行实验，然后将各组结果汇总并 进行比较分析。
预期结果与分析
• （1）注射阿托品：M 受体阻断，乙酰胆碱不能与壁细胞 上的 M3 受体特异性结合，胃酸分泌抑制，与对照样品相 比胃酸排出减少。 • （2）注射酚妥拉明：α受体阻断，去甲肾上腺素不能与α 受体特异性结合，抑制胃液分泌作用减弱或消失，胃液 分泌增加，与对照样品相比胃酸排出增加。 • （3）刺激腹腔神经节：交感神经兴奋→去甲肾上腺素释 放增多→抑制胃的兴奋，抑制胃液分泌，与对照样品相 比胃酸排出减少。 • （4）刺激迷走神经：副交感神经兴奋→乙酰胆碱释放增
观察项目
• （1）用注射器将37℃生理盐水10 ml从食管插管注入胃内， 同时用三角瓶收集幽门插管流出的液体，每10min注入一 次并收集样品。在每个样品中加入酚红1~2滴，用 0.01mol/ L NaOH溶液滴定至刚好变色，按下式即可计算 出每10min胃酸排出量： • 10min胃酸排出量（μmol/10min）=中和胃酸用去NaOH 量（ml）×浓度（mol/L）×10 • （2）基础胃酸分泌量测定：收集并测定3个以上胃酸样品， 待连续3个样品数值接近后，即可进行下列实验。
实验步骤
• （4）食管插管
• 钝性分离气管下方的食管（切勿损伤颈部神经），剪开食 管并插入食管插管至胃，用丝线固定食管插管。
• （5）幽门插管
• 沿剑突下方正中线切开腹部皮肤肌肉（切口长约2cm，打 开腹腔，轻轻拉出十二指肠），在距胃幽门约1.5cm处结 扎十二指肠幽门端的丝线，打一个松结备用。在两线之间 剪开十二指肠，并将幽门插管插入胃内，立即结扎固定， 尽量不要用插管刺激胃壁。实验步骤• Nhomakorabea1、手术操作
• （1）麻醉与固定
近心端
耳廓
耳
慢！
耳缘静脉
面
廓
背
进针位置
远心端
实验步骤
• （2）气管插管
倒“T”形切 口
实验步骤
• （3）右颈外静脉插管
• 将气管两旁的肌肉拉开，用左手拇指和食指捏住颈部左侧 缘皮肤切口，其余三指从皮肤外向上顶起外翻，可清晰的 看见位于颈部皮下，胸骨乳突肌外缘的颈外静脉。沿血管 走向，用玻璃分针钝性分离颈外静脉二侧的皮下筋膜，仔 细分离3～5cm长，在血管的远心端穿丝线，在靠近锁骨 端用动脉夹夹闭颈外静脉的近心端，待血管内血液充盈后 用手术线结扎颈外静脉的远心端。靠远心端结扎线处用眼 科剪向心方向呈45度角在静脉上剪一“V”型小口（约为管 径的1/3或1/2），用弯型眼科镊挑起血管切口，向心插入 导管2.5cm。用线将血管和插管结扎在一起，此线在导管 固定处打一活结，绕导管二圈打结固定。 缓慢输生理盐 水，以维持体液量。注意插管前应排空管道中气泡，插管 前端须安置三通管供注射药物。
家兔胃液分泌的 调节
一、实验目的
本实验采用麻醉状态下家兔灌流方法，测定 胃酸排除量，观察各种因素对胃酸分泌的影 响并掌握其作用途径。
实验原理
胃上皮和胃底腺立体模式图
胃底腺 （泌酸腺）
•胃底腺由壁 细胞、主细 胞、颈粘液 细胞、内分 泌细胞和干 细胞组成。
胃液分泌的神经调节机制
副交感神经 （迷走神经）
实验步骤
•用手指轻轻触摸 胃，检查胃内是否 有食物残渣，若胃 内有固体物，则要 在胃大弯侧切开胃 体，取出胃内食物 团，并用蘸有温热 生理盐水的棉签将 胃内食物残渣清除 干净，然后缝合胃 切口。 •用少许37℃生理 盐水从食管插管注 入胃内，用手指轻 压胃体，观察幽门 插管出口是否通畅、 流出液有无食物残 渣和血液，如出口 通畅即手术成功。 •分离腹腔神经节和 迷走神经，分离后 分别在各神经节下 方穿不同颜色的线 以备用。 将家兔体位由仰卧 位改为侧卧位，在 手术后20～30min 后开始测定胃酸分 泌情况
（ +）
Ach
壁细胞M3受体
胃酸分泌
（ +）
促进释放组胺、 促胃泌素分泌
交感神经 （腹腔神经节）
NE
(-)
胃酸分泌
α受体
实验对象
• 取经12h禁食不禁水的家兔一只，体重 2.0~3.0kg，雌雄不拘。
实验器材和药品
• 兔手术台，哺乳动物手术器械1套，食管插 管，气管插管，幽门插管，静脉插管，三 通管，输液架，输液瓶及输液管，微量滴 管，三角瓶，棉签，缝合针及缝合线，有 色丝线，注射器（20ml）及针头，一次性 使用外周神经丛刺激针，生理盐水，1g/L阿 托品，10g/L酚妥拉明，20%乌拉坦， 0.01mol/ L NaOH溶液，1%酚红。
观察项目
• （3）连续收集5个样品并测定其排酸量作为实验对照，再 静脉推注1g/L的阿托品0.1ml/kg，连续收集5个样品，测 定其胃酸排出量。 • （4）在收集对照样品后，静脉推注10g/L酚妥拉明 0.1ml/kg，连续收集5个样品，测定其胃酸排出量。 • （5）在收集对照样品后，用一次性使用外周神经丛刺激 针刺激腹腔神经节，连续收集5个样品，测定其胃酸排出 量。 • （6）在收集对照样品后，用一次性使用外周神经丛刺激 针刺激迷走神经节，连续收集5个样品，测定其胃酸排出 量。
多→促进胃液分泌，与对照样品相比胃酸排出增加。
注意事项
• （1）麻醉剂注射应缓慢，为保证胃液分泌，家兔不宜麻 醉太深。 • （2）食管插管插入胃时插管前端不能尖锐，以免损伤食 管和胃粘膜。 • （3）幽门插管时，应注意切勿损伤胃和十二指肠周围的 神经和血管。 • （4）滴定终点以样品刚好变红，摇之能维持10s以上不退 色为准。每次滴定颜色要一致，滴定结果由同一个同学判 定为宜。 • （5）因家兔的迷走神经很细，容易拉断，分离时要非常 细心。 • （6）手术过程中应注意保持家兔体温和环境温度稳定， 切忌用力牵拉大小网膜和肠胃。
• 注：每组学生在上述观察项目第（2）至 （7）项中，可选择第（2）项与其他另外 一两项进行实验，然后将各组结果汇总并 进行比较分析。
预期结果与分析
• （1）注射阿托品：M 受体阻断，乙酰胆碱不能与壁细胞 上的 M3 受体特异性结合，胃酸分泌抑制，与对照样品相 比胃酸排出减少。 • （2）注射酚妥拉明：α受体阻断，去甲肾上腺素不能与α 受体特异性结合，抑制胃液分泌作用减弱或消失，胃液 分泌增加，与对照样品相比胃酸排出增加。 • （3）刺激腹腔神经节：交感神经兴奋→去甲肾上腺素释 放增多→抑制胃的兴奋，抑制胃液分泌，与对照样品相 比胃酸排出减少。 • （4）刺激迷走神经：副交感神经兴奋→乙酰胆碱释放增
观察项目
• （1）用注射器将37℃生理盐水10 ml从食管插管注入胃内， 同时用三角瓶收集幽门插管流出的液体，每10min注入一 次并收集样品。在每个样品中加入酚红1~2滴，用 0.01mol/ L NaOH溶液滴定至刚好变色，按下式即可计算 出每10min胃酸排出量： • 10min胃酸排出量（μmol/10min）=中和胃酸用去NaOH 量（ml）×浓度（mol/L）×10 • （2）基础胃酸分泌量测定：收集并测定3个以上胃酸样品， 待连续3个样品数值接近后，即可进行下列实验。
实验步骤
• （4）食管插管
• 钝性分离气管下方的食管（切勿损伤颈部神经），剪开食 管并插入食管插管至胃，用丝线固定食管插管。
• （5）幽门插管
• 沿剑突下方正中线切开腹部皮肤肌肉（切口长约2cm，打 开腹腔，轻轻拉出十二指肠），在距胃幽门约1.5cm处结 扎十二指肠幽门端的丝线，打一个松结备用。在两线之间 剪开十二指肠，并将幽门插管插入胃内，立即结扎固定， 尽量不要用插管刺激胃壁。实验步骤• Nhomakorabea1、手术操作
• （1）麻醉与固定
近心端
耳廓
耳
慢！
耳缘静脉
面
廓
背
进针位置
远心端
实验步骤
• （2）气管插管
倒“T”形切 口
实验步骤
• （3）右颈外静脉插管
• 将气管两旁的肌肉拉开，用左手拇指和食指捏住颈部左侧 缘皮肤切口，其余三指从皮肤外向上顶起外翻，可清晰的 看见位于颈部皮下，胸骨乳突肌外缘的颈外静脉。沿血管 走向，用玻璃分针钝性分离颈外静脉二侧的皮下筋膜，仔 细分离3～5cm长，在血管的远心端穿丝线，在靠近锁骨 端用动脉夹夹闭颈外静脉的近心端，待血管内血液充盈后 用手术线结扎颈外静脉的远心端。靠远心端结扎线处用眼 科剪向心方向呈45度角在静脉上剪一“V”型小口（约为管 径的1/3或1/2），用弯型眼科镊挑起血管切口，向心插入 导管2.5cm。用线将血管和插管结扎在一起，此线在导管 固定处打一活结，绕导管二圈打结固定。 缓慢输生理盐 水，以维持体液量。注意插管前应排空管道中气泡，插管 前端须安置三通管供注射药物。