艾滋病患者感染新型隐球菌的MLST分型及临床特点分析

艾滋病患者感染新型隐球菌的ＭＬＳＴ分型
及临床特点分析
徐新民１，张媛媛２，杜鹏程２，李　敏１，王慧珠１，王雅杰１
（首都医科大学附属北京地坛医院，１．检验科，２．传染病研究所，北京１０００１５）
ＤＯＩ：１０．１１７４８／ｂｊｍｙ．ｉｓｓｎ．１００６－１７０３．２０２０．０５．０２４收稿日期：２０２０ ０３ ０４；修回日期：２０２０ ０４ ０７
基金项目：新发突发传染病研究北京市重点实验室开放课题（编号：ＤＴＫＦ２０１８０１）通讯作者：王雅杰。

摘要：目的　了解艾滋病患者感染新型隐球菌的基因分型情况。

方法　收集我院５０例艾滋病合并新型隐球菌感染患者的分离菌株，采用ＰＣＲ测序的方法对分离的新型隐球菌的７个管家基因（ＣＡＰ５９、ＧＰＤ１、ＬＡＣ１、ＰＬＢ１、ＳＯＤ１、ＵＲＡ５和ＩＧＳ１）进行ＰＣＲ扩增和测序，将序列上传至ＦｕｎｇａｌＭＬＳＴＤａｔａｂａｓｅ得到序列类型（ｓｅｑｕｅｎｃｅｔｙｐｅ，ＳＴ），最后通过ＢｉｏＮｕｍｅｒｉｃｓ４．０软件对ＳＴ分型结果进行最小生成树分析。

结果　５０例艾滋病患者中，８８．０％（４４／５０）的为男性，其中３１～５０岁之间患者占５６．０％（２８／５０），６０％患者有中枢神经系统感染，从５０例患者的不同部位分离出５３株新型隐球菌，其ＭＬＳＴ分型分析结果显示，共分离出９种基因型，８１．１％（４３／５３）的菌株为ＳＴ５型，ＳＴ３１和ＳＴ２９６分别有２株，ＳＴ６３、ＳＴ２８９、ＳＴ２９５、ＳＴ２９８、ＳＴ３２４和ＳＴ３３７分别有１株。

结论　艾滋病患者感染新型隐球菌以男性为主，北京地区ＭＬＳＴ基因分型主要是ＳＴ５型，为新型隐球菌的研究提供分子流行病学依据。

关键词：艾滋病；　新型隐球菌；　ＭＬＳＴ分型中图分类号：Ｒ５１２．９１ 文献标识码：Ａ
ＭＬＳＴＴｙｐｉｎｇａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＣｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆＮｅｗＣｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ
ＩｎｆｅｃｔｉｏｎｓｉｎＡＩＤＳＰａｔｉｅｎｔｓ
ＸＵＸｉｎｍｉｎ１，ＺＨＡＮＧＹｕａｎｙｕａｎ２，ＤＵＰｅｎｇｃｈｅｎｇ２，ＬＩＭｉｎ１，ＷＡＮＧＨｕｉｚｈｕ１，ＷＡＮＧＹａｊｉｅ
１
（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，２．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓＤｉｓｅａｓｅ，ＢｅｉｊｉｎｇＤｉｔａｎＨｏｓｐｉｔａｌ，ＣａｐｉｔａｌＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００１５）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｔｈｅｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇｏｆＣｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓｎｅｏｆｏｒｍａｎｓｉｎＨＩＶｐａｔｉｅｎｔｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＷｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄｉｓｏｌａｔｅｓｏｆ５０ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈＡＩＤＳａｎｄＣｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓｎｅｏｆｏｒｍａｎｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎｆｒｏｍｏｕｒｈｏｓｐｉｔａｌ，ａｎｄｕｓｅｄＰＣＲ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｍｅｔｈｏｄｔｏｐｅｒｆｏｒｍＰＣＲａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｆｏｒｓｅｖｅｎｈｏｕｓｅｋｅｅｐｉｎｇｇｅｎｅｓ（ＣＡＰ５９，ＧＰＤ１，ＬＡＣ１，ＰＬＢ１，ＳＯＤ１，ＵＲＡ５ａｎｄＩＧＳ１）ｏｆＣｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ，ｔｈｅｎｕｐｌｏａｄｅｄｔｈｅｓｅｑｕｅｎｃｅｔｏＦｕｎｇａｌＭＬＳＴｄａｔａｂａｓｅｔｏｏｂｔａｉｎｔｈｅｓｅｑｕｅｎｃｅｔｙｐｅ（ＳＴ），ａｎｄｆｉｎａｌｌｙｐｅｒｆｏｒｍｔｈｅｍｉｎｉｍｕｍｓｐａｎｎｉｎｇｔｒｅｅａｎａｌｙｓｉｓｏｎｔｈｅＳＴｔｙｐｉｎｇｒｅｓｕｌｔｓｂｙＢｉｏＮｕｍｅｒｉｃｓ４．０ｓｏｆｔｗａｒｅ．ＲｅｓｕｌｔｓＯｆｔｈｅ５０ＡＩＤＳｐａｔｉｅｎｔｓ，８８．０％（４４／５０）ｗｅｒｅｍａｌｅ，５６．０％（２８／５０）ｗｅｒｅｂｅｔｗｅｅｎ３１ａｎｄ５０ｙｅａｒｓｏｌｄ，ａｎｄ６０％ｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｈａｄｃｅｎｔｒａｌｎｅｒｖｏｕｓｓｙｓｔｅｍｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ．Ａｔｏｔａｌｏｆ５３ｓｔｒａｉｎｓｏｆＣｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓｎｅｏｆｏｒｍａｎｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｐｅｃｉｍｅｎｓｏｆ５０ｐａｔｉｅｎｔｓ．ＴｈｅＭＬＳＴｔｙｐｉｎｇａｎａｌｙｓｉｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ９ｇｅｎｏｔｙｐｅｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄ，ｉｎｗｈｉｃｈ８１．１％（４３／５３）ｏｆｔｈｅｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅＳＴ５ｔｙｐｅ，ａｌｓｏＳＴ３１ａｎｄＳＴ２９６ｈａｄ２ｓｔｒａｉｎｓ，ａｎｄＳＴ６３，ＳＴ２８９，ＳＴ２９５，ＳＴ２９８，ＳＴ３２４ａｎｄＳＴ３３７ｈａｄ１ｓｔｒａｉｎ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅｍａｊｏｒｉｔｙｏｆｎｅｗＣｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓｉｎＡＩＤＳｐａｔｉｅｎｔｓａｒｅｍａｌｅ，ａｎｄｔｈｅＭＬＳＴｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇｉｓｍａｉｎｌｙＳＴ５ｔｙｐｅ，ｗｈｉｃｈｐｒｏｖｉｄｅｓａｍｏｌｅｃｕｌａｒｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃａｌｂａｓｉｓｆｏｒｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｏｆｎｅｗｌｙｄｅｖｅｌｏｐｅｄＣｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＡＩＤＳ；　Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ；　ＭＬＳＴｔｙｐｅ
９
２８标记免疫分析与临床　２０２０年５月第２７卷第５期
新型隐球菌感染是艾滋病患者最常见的机会性真菌感染，极易侵犯中枢神经系统［１］。

近年来，国内也有研究针对我国新型隐球菌的分子流行病学研究，但多分离自免疫功能正常患者，艾滋病患者来源的基因型分型数据较少［２］，本研究采用多位点序列分型（ｍｕｌｔｉｌｏｃｕｓｓｅｑｕｅｎｃｅｔｙｐｉｎｇ，ＭＬＳＴ）方法对我院５０例艾滋病合并新型隐球菌感染患者的分离菌株进行分型，了解北京地区的新型隐球菌分子流行病学特点，为新型隐球菌的研究提供更加科学的分子流行病学依据。

材料和方法
１　研究对象
收集２０１６年至２０１８年在我院确诊的艾滋病患者，并且经脑脊液或血液或肺泡灌洗液培养出的新型隐球菌。

２　方法
２．１　新型隐球菌的培养和鉴定　①脑脊液标本：墨汁染色初筛，即脑脊液标本离心后，取管底的脑脊液一滴进行墨汁染色，显微镜下观察呈圆形或卵圆形，菌体外有宽厚荚膜的菌株即初步鉴定为新型隐球菌；然后脑脊液标本直接接种在沙氏琼脂培养基上，经３７℃的ＣＯ
２
温箱２４～７２ｈ孵育后可见菌落生长。

培养后挑取可疑菌落进行革兰氏染色，镜检见到酵母样真菌孢子后，配置２．０浊度的悬浊液，采用ＡＰＩ２０ＣＡＵＸ酵母菌试剂条进一步鉴定。

②血液标本：抽取患者静脉血８～１５ｍＬ，注入需氧瓶和厌氧瓶，血培养瓶报阳后，涂片进行革兰氏染色，镜下见圆形或卵圆形大小不一的真菌孢子，然后抽取少量液体接种在沙氏琼脂培养基上，后面的培养和鉴定方法同上。

③肺泡灌洗液标本：取５μＬ样本接种在沙氏琼脂培养基上进行定量培养，后面的培养和鉴定方法同上。

２．２　核酸提取及ＰＣＲ扩增　按照北京索莱宝科技有限公司专业生产的真菌基因组ＤＮＡ提取试剂盒提取新型隐球菌的核酸，保证各菌株ＤＮＡ浓度为５０～２００ｎｇ／ｍＬ，然后进行ＰＣＲ扩增（日本Ｔａｋａｒａ公司）。

ＰＣＲ反应体系为３０μＬ，内含１ＥｘＴａｑ缓冲液，ＴａｑＤＮＡ聚合酶０．５Ｕ，上下游引物０．２μｍｏｌ／Ｌ，５０ｎｇ基因组ＤＮＡ。

ＰＣＲ扩增条件主要参考ＦｕｎｇａｌＭＬＳＴ数据库（ｈｔｔｐ：／／ｍｌｓｔ．ｍｙｃｏｌｏｇｙｌａｂ．ｏｒｇ），７个管家基因的扩增条件如下，ＣＡＰ５９：９４℃，３ｍｉｎ；（９４℃，３０ｓ，５６℃，３０ｓ）３０循环；７２℃，１ｍｉｎ。

ＧＰＤ１：９４℃，３ｍｉｎ；（９４℃，４５ｓ，６３℃，１ｍｉｎ）３５循环；７２℃，２ｍｉｎ。

ＬＡＣ１：９４℃，３ｍｉｎ；（９４℃，３０ｓ，５８℃，３０ｓ）３０循环；７２℃，１ｍｉｎ。

ＰＬＢ１：９４℃，３ｍｉｎ；（９４℃，４５ｓ，６１℃，４５ｓ）３０循环；７２℃，１ｍｉｎ。

ＳＯＤ１：９４℃，３ｍｉｎ；（９４℃，３０ｓ，５２℃，３０ｓ）３５循环；７２℃，１ｍｉｎ。

ＵＲＡ５：９４℃，３ｍｉｎ；（９４℃，４５ｓ，６３℃，１ｍｉｎ）３５循环；７２℃，２ｍｉｎ。

ＩＧＳ１：９４℃，３ｍｉｎ；（９４℃，３０ｓ，６０℃，３０ｓ）３５循环；７２℃，１ｍｉｎ。

２．３　ＭＬＳＴ（ｍｕｌｔｉｌｏｃｕｓｓｅｑｕｅｎｃｅｔｙｐｉｎｇ）基因分型　基于已达成共识的多位点序列分型方案，设计针对新生隐球菌格鲁比变种关于７个管家基因（ＣＡＰ５９、ＧＰＤ１、ＬＡＣ１、ＰＬＢ１、ＳＯＤ１、ＵＲＡ５和ＩＧＳ１区域）的特异性引物。

采用ＰＣＲ测序的方法对临床分离的新型隐球菌中的７个管家基因进行扩增和测序，将测序后的序列上传至ＦｕｎｇａｌＭＬＳＴＤａｔａｂａｓｅ网站，根据每个菌株各个位点的等位基因数值，得到序列类型（ｓｅｑｕｅｎｃｅｔｙｐｅｓ，ＳＴｓ）结果，再采用ＢｉｏＮｕｍｅｒｉｃｓ４．０软件进行最小生成树分析。

结 果
１　患者基本临床资料及菌株分离情况
５０例艾滋病患者中，男性占８８％（４４／５０），３１～５０岁之间的患者居多，占５６％（２８／５０），合并有中枢神经系统感染者占６０％（３０／５０），详细资料见表１。

５０例艾滋病患者中共分离出５３株新型隐球菌，分别是肺泡灌洗液５株，血液１６株，脑脊液３２株，其中有３例患者从血液和脑脊液中都培养出新型隐球菌。

表１　５０例艾滋病患者临床资料分析
项目例数比例（％）
性别男４４８８．０
女６１２．０年龄（岁）≤３０７１４．０
３１～５０２８５６．０
≥５１１５３０．０科室来源感染一科３６７２．０
中西医结合二科５１０．０
感染二科４８．０
ＩＣＵ４８．０
神经外科１２．０中枢神经系统感染是３０６０．０
否２０４０．０
０
３
８ＬａｂｅｌｅｄＩｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ＆ＣｌｉｎＭｅｄ，Ｍａｙ．２０２０，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．５
２　ＭＬＳＴ分型结果
我们采用ＰＣＲ测序的方法对分离的５３株新型隐球菌的７个管家基因（ＣＡＰ５９、ＧＰＤ１、ＬＡＣ１、ＰＬＢ１、ＳＯＤ１、ＵＲＡ５和ＩＧＳ１）进行ＰＣＲ扩增和测序，扩增及测序引物见表２。

最后分离出９种基因型，４３株为ＳＴ５型，占８１．１％，ＳＴ３１和ＳＴ２９６分别有２株，ＳＴ６３、ＳＴ２８９、ＳＴ２９５、ＳＴ２９８、ＳＴ３２４和ＳＴ３３７分别有１株，详细结果见表３。

根据菌株来源的不同标本类型（血清、脑脊液、肺泡灌洗液）进行ＭＬＳＴ分析，最小生成树结果见图１。

表２　７个扩增基因的染色体位置及引物序列
位点位点名称染色体位置引物序列碱基（ｂｐ）测序引物
ＣＡＰ５９荚膜相关蛋白１Ｆ５′ＣＴＣＴＡＣＧＴＣＧＡＧＣＡＡＧＴＣＡＡＧ３′
Ｒ５′ＴＣＣＧＣＴＧＣＡＣＡＡＧＴＧＡＴＡＣＣＣ３′
５５９
５′ ＡＣＧＧＴＡＣＧＣＧＣＣ
ＧＧＡＧＡＣＡＧＡＡＴＧ ３′
ＧＰＤ１甘油醛 ３ 磷酸脱氢酶７Ｆ５′ＣＣＡＣＣＧＡＡＣＣＣＴＴＣＴＡＧＧＡＴＡ３′
Ｒ５′ＣＴＴＣＴＴＧＧＣＡＣＣＴＣＣＣＴＴＧＡＧ３′
５４３
５′ ＧＧＴＴＴＣＧＧＴＡＣＧ
ＧＧＡＣＣＣＴＧＣＣＡＡ ３′
ＬＡＣ１漆酶８Ｆ５′ＡＡＣＡＴＧＴＴＣＣＣＴＧＧＧＣＣＴＧＴＧ３′
Ｒ５′ＡＴＧＡＧＡＡＴＴＧＡＡＴＣＧＣＣＴＴＧＴ３′
４６９
５′ ＧＴＡＡＧＴＡＴＣＡＧＣ
ＴＣＡＡＧＣＴＡＡＡＣＡ ３′
ＰＬＢ１磷脂酶１２Ｆ５′ＣＴＴＣＡＧＧＣＧＧＡＧＡＧＡＧＧＴＴＴ３′
Ｒ５′ＧＡＴＴＴＧＧＣＧＴＴＧＧＴＴＴＣＡＧＴ３′
５３２
５′ ＴＧＴＴＡＣＴＴＧＧＡＴ
ＴＣＴＧＧＡＡＣＡＴＣＧ ３′
ＳＯＤ１铜锌超氧化物歧化酶５Ｆ５′ＴＣＴＡＡＴＣＧＡＡＡＴＧＧＴＣＡＡＧＧ３′
Ｒ５′ＣＧＣＡＧＣＴＧＴＴＣＧＴＣＴＧＧＡＴＡ３′
５３５
５′ ＡＴＣＧＣＴＣＡＣＣＧＣ
ＴＧＣＣＣＡＴＴＧＴＣＡ ３′
ＵＲＡ５乳清酸磷酸焦磷酸化酶８
Ｆ５′ＡＴＧＴＣＣＴＣＣＣＡＡＧＣＣＣＴＣＧＡＣ３′
Ｒ５′ＴＴＡＡＧＡＣＣＴＣＴＧＡＡＣＡＣＣＧＴＡＣＴＣ３′
６０１
５′ ＴＴＴＴＣＧＧＣＡＡＣＴ
ＣＴＴＧＧＡＡＡＧＣＴＣ ３′
ＩＧＳ１核糖体ＲＮＡ基因间隔子２Ｆ５′ＡＴＣＣＴＴＴＧＣＡＧＡＣＧＡＣＴＴＧＡ３′
Ｒ５′ＧＴＧＡＴＣＡＧＴＧＣＡＴＴＧＣＡＴＧＡ３′
７２３
５′ ＴＡＡＧＣＣＣＴＴＧＴＴ
ＡＡＡＧＡＴＴＴＡＴＴＧ ３′
表３　５３株新型隐球菌的ＭＬＳＴ分型分析结果
ＭＬＳＴ分型ＳＴ序列号例数比例（％）ＳＴ５１３１５２１１４３８１．１ＳＴ３１１１１０３２１１２３．８ＳＴ６３７１１１８１１１１１．９
ＳＴ２８９１１１１８１１１１１．９
ＳＴ２９５４０３２３６２７１４３１１．９
ＳＴ２９６１３１５２４３１２３．８
ＳＴ２９８１３３４５２１１１１．９
ＳＴ３２４７１１９１１１１１．９
ＳＴ３３７１３１４２１１１１．９总计５３１０
０图１　不同标本类型中新型隐球菌ＭＬＳＴ分型的
最小生成树
讨 论
流行病学显示，新型隐球菌感染呈全球分布，主要引起免疫缺陷患者感染，如ＨＩＶ／ＡＩＤＳ和ＣＤ４Ｔ细胞少于５０个／μＬ［３］。

尽管我国已确诊相当多数量的ＡＩＤＳ患者，但我国新型隐球菌病患者中，大部分无免疫缺陷或其他基础疾病，ＣＨＥＮ等［４］收集了１２９株临床感染者的新型隐球菌，只有１１株（８．５％）分离自ＡＩＤＳ患者，这与欧美超过８０％，非洲超过６９％隐球菌病感染者为艾滋病患者的报道不同［５ ６］，而且，目前很多关于新型隐球菌的研究大部分来自环境中［７］，对ＡＩＤＳ患者这一特殊群体中感染的新型隐球菌进行基因型分布的研究较少。

目前隐球菌分子分型的方法很多，ＰＣＲ指纹技术（ＰＣＲｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｉｎｇ）、限制性片段长度多态性分型技术（ＲＦＬＰ）、扩增片段长度多态性分析（ＡＦＬＰ）、多位点序列分型技术（ＭＬＳＴ）、随机扩增多态性ＤＮＡ分型技术（ＲＡＰＤ）及多位点微卫星分型技术（ＭＬＭＴ）等，不同的分型方法可以得出不同的亚群以及衍生出对这些亚群的多种命名。

由于缺乏对不同分型结果的交叉研究，使得对众多数据的分析比较成为一个难题。

２００７年，ＩＳＨＡＭ隐球菌工作组决定将具有较高分辨力和良好可重复性的
１
３
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标记免疫分析与临床　２０２０年５月第２７卷第５期
ＭＬＳＴ作为隐球菌分子分型的金标准，选取７个管家基因（ＣＡＰ５９、ＧＰＤ１、ＬＡＣ１、ＰＬＢ１、ＳＯＤ１、ＵＲＡ５和ＩＧＳ１）作为全球共识方案的基因位点［８］。

基于此，我们从５０例艾滋病患者的不同标本类型中分离出５３株新型隐球菌，对其进行ＭＬＳＴ分型，结果共分离出９种基因型（ＳＴ５、ＳＴ３１、ＳＴ２９６、ＳＴ６３、ＳＴ２８９、ＳＴ２９５、ＳＴ２９８、ＳＴ３２４和ＳＴ３３７），其中ＳＴ５型为主要基因型，占８１．１％（４３／５３）。

这与广东地区的结果一致，但其研究的是ＨＩＶ阴性患者，结果也是以ＳＴ５型为主［２］，ＫＨＡＹＨＡＮ等［９］采用ＭＬＳＴ方法对８个亚洲国家的４７６株新型隐球菌进行基因分型，结果在ＨＩＶ阴性患者中新型隐球菌临床株以ＳＴ５型为主，而ＨＩＶ阳性患者中以ＳＴ４、ＳＴ６和ＳＴ５型居多，分别占３１．６％、２９．８％和１１．８％。

这与我们的研究结果有些区别，这也可能与选取的患者来源有关，我们选取的研究对象是北京地区，他们的是中国上海，香港，日本东京，印度尼西亚等。

基于全世界的分子流行病学研究，隐球菌可分为８种分子类型（基因型），即ＶＮⅠ～ＶＮⅣ和ＶＧⅠ～ＶＧⅣ。

基因型与变种和血清型的关系为：ＶＮⅠ、ＶＮⅡ（格鲁比变种，Ａ型），ＶＮⅢ（ＡＤ杂合体，ＡＤ型），ＶＮⅣ（新生变种，Ｄ型），ＶＧⅠ～ＶＣⅣ（格特变种，Ｂ、Ｃ型），主要基因型的地域分布和致病特点存在明显差异［１０ １１］。

马来西亚、我国台湾地区的隐球菌分型以ＶＮⅠ型基因型为主［１２］，国内其他地区，如冯晓博等［１３］对国内１１０株隐球菌临床株的研究中，也是以基因型ＶＮⅠ型最多，华中、华北及西南地区分离的菌株均为ＶＮⅠ型，本研究中的５３株新型隐球菌也均是ＶＮⅠ型。

本研究的５０例艾滋病患者中，男性居多，３１～５０岁之间的患者居多，这也与艾滋病患者的流行病学资料相关，本研究显示６０％患者合并有中枢神经系统感染，我们前期研究显示ＡＩＤＳ合并新型隐球菌感染患者的临床表现以头痛、发热为主，脑脊液压力大部分偏高，临床一般根据不同的疾病阶段采取不同的联合用药方案［１４］。

综上所述，艾滋病患者感染新型隐球菌以男性为主，约６０％患者合并有中枢神经系统感染，虽然我们菌株相对较少，可能会存在一些偏差，但基本明确了我国北京地区艾滋病感染的新型隐球菌是以ＳＴ５型为主，这为新型隐球菌的研究提供分子流行病学依据。

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