罗非鱼皮胶原蛋白的提取条件优化及性质

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酸法和酶法提取罗非鱼鱼皮胶原蛋白特性分析

酸法和酶法提取罗非鱼鱼皮胶原蛋白特性分析

罗非鱼是世界第三大养殖品种,在我国养殖量居第二[1].目前,其主要用来生产冷冻鱼肉片,因此会留下60%~70%下脚料,包括鱼皮、鱼头、鱼鳍和鱼骨,其中鱼皮中含有丰富的胶原蛋白[3],对其进行有效利用,避免浪费的同时还可减少环境污染[2].胶原蛋白是哺乳动物体内含量最多、分布最广的功能性蛋白质,它构成了动物皮的支持组织,具有增强机体皮肤组织细胞储水能力、增强肌肤弹性、保持皮肤柔软、使皮肤细嫩等生理功能,其理化性质和生物学特性优良,在医学、食品工业和化妆品等领域应用广泛.胶原蛋白的提取分离方法包括热水提法、酸提法、酶提法等[4].醋酸酸法和胃蛋白酶酶法提取胶原蛋白,通过紫外光谱、红外光谱以及吸油性、保水性、溶解性测定对两者理化特性进行分析比较,以期为胶原蛋白的提取及应用提供理论依据.1材料与方法1.1试验材料与试剂罗非鱼鱼皮产自江苏连云港飞凡水产公司;羟脯氨酸购于Sigma 公司;氯化钠、异丙醇、胃蛋白酶、正丙醇、无水乙酸钠、乙酸、硫酸铜、柠檬酸购于上海国药,均为分析纯.1.2试验仪器SC-3612离心机(江苏金坛市荣华仪器制造有限公司)、ST3100酸度计(奥豪斯仪器有限公司)、SP-723分光光度计(光谱仪器有限公司)、Nicolet IS50傅立叶变换红外光谱仪(赛默飞世尔科技有限公司)等.1.3试验方法1.3.1鱼皮预处理将鱼皮烘干,粉碎,5%氯化钠浸泡6h,蒸馏水洗涤数次并沥干水分,置于异丙醇、乙醚与蒸馏水体积比为2:2:8的溶液中浸泡6h,蒸馏水洗涤数次后沥干水分并在55℃恒温干燥箱中烘干备用[5].1.3.2酸溶性胶原蛋白(ASC)的制备按料液比1:20加入预处理所得鱼皮和0.5mol/L 乙酸,磁力搅拌24小时,离心得到上清,加入氯化钠使得浓度至0.9mol/L,静置过夜.6000r/min 离心20min,舍弃上清,沉淀加入10倍体积0.1mol/L 的乙酸进行溶解,并在10倍体积的0.1mol/L 乙酸溶液中透析12h,每4h 换一次透析液,蒸馏水透析至中性,得到酸溶性胶原蛋白提取液,冷冻干燥得到酸溶性胶原蛋白(ASC)[6].1.3.3酶溶性胶原蛋白(PSC)的制备将预处理后的鱼皮按料液比1:20加入0.5mol/L 乙酸中,并加入鱼皮质量2%的胃蛋白酶.磁力搅拌提取24h,离心取上清,加入一定质量的氯化钠至上清液氯化钠溶液最终浓度为0.9mol/L,静置过夜.6000r/min 离心20min,弃上清,加入10倍体积的0.1mol/L 的乙酸中溶解沉淀,并在10倍体积的0.1mol/L 乙酸溶液中透析12h,每4h 换一次透析液,蒸馏水透析至中性,得到酶溶性胶原蛋白提取液,冷冻干燥得到酶溶性胶原蛋白(PSC)[6].1.3.4胶原蛋白得率计算胶原蛋白得率/%=冻干胶原蛋白粗品质量提取用鱼皮质量×100(1)Vol.35No.9Sep.2019赤峰学院学报(自然科学版)JournalofChifengUniversity (NaturalScienceEdition )第35卷第9期2019年9月收稿日期:2019-07-03基金项目:宿州学院科研平台开放课题项目(2017ykf05);安徽高校自然科学研究重点项目(KJ2017A441);宿州学院、宿州市农业科学院实践教育基地(szxy2018xxhz02);宿州学院教授(博士)科研启动基金项目(2016jb02)酸法和酶法提取罗非鱼鱼皮胶原蛋白特性分析王晴,曹稳根,钱玉梅,李红侠,汪慧文(宿州学院生物与食品工程学院,安徽宿州234000)摘要:以罗非鱼鱼皮为材料,利用醋酸和胃蛋白酶分提取胶原蛋白,通过紫外光谱、红外光谱、吸油性、保水性、溶解性等对其理化特性进行比较分析.结果表明两者在230nm 左右出现最大紫外吸收峰,均属典型的胶原蛋白;红外显示两种蛋白结构相似;酶溶性胶原蛋白吸油性优于酸溶性胶原蛋白,且两者都有很好的保水性和溶解性.以期为胶原蛋白的提取及应用提供理论依据.关键词:罗非鱼;提取;胶原蛋白;特性中图分类号:TS201.2文献标识码:A文章编号:1673-260X (2019)09-0090-0390--图2酸溶性提取液和酶溶性提取液紫外扫描图谱1.3.5紫外吸收光谱分析将酸溶性胶原蛋白提取液和酶溶性胶原蛋白提取液,以0.5mol/L 的醋酸作为对照,在200~400nm 波长范围内用紫外可见分光光度计测定其吸光度,得到胶原蛋白紫外吸收曲线[7].1.3.6红外光谱分析采用傅里叶红光谱仪对ASC 和PSC 进行红外扫描,分别将适量的ASC 和PSC 与KBr 混合压片,在400~4000cm -1波数区间扫描,分辨率4cm -1[8,16].1.3.7溶解性测定取一定质量ASC、PSC 溶于0.5mol/L 醋酸中,使得浓度为5mg/mL.取5mL 分别调至pH 为4、5、6、7、8、9,保持pH 值不变,蒸馏水定容至10mL,4000r/min 离心15min,双缩脲法测定上清液蛋白质含量,并同时将样品溶于0.5mol/L 醋酸溶液采用双缩脲法测定样品总蛋白含量,用公式(2)计算溶解性[7].溶解性%=上清液蛋白含量总蛋白含量×100(2)1.3.8吸油性测定取两份10mL 精炼油,分别加入0.1g ASC 和PSC,振荡器震荡1min,静置半小时,于200r/min 离心25min,按公式(3)计算吸油性[7].X=10.0-V f m(3)式中:X 为吸油性/(mL/g);V f 为游离油的体积/mL;m 为0.1g.1.3.9保水性测定量取50mL 蒸馏水,加入ASC 和PSC 0.05g,搅拌,置于1000r/min 条件下离心5min,弃分离水,称量残留物质量,并置于25℃干燥箱中,每隔20min 测一次质量,按公式(4)计算水分残存率[7],以其衡量两者保水性强弱.Y%=m 0-m m 0-0.05×100(4)式中:Y 表示水分残存率%;m 0表示离心剩余物质量/g;m 表示每隔一段时间剩余物质量/g.2结果与分析2.1不同提取液胶原蛋白得率在酸性条件下,蛋白质分子之间离子键遭到破坏,发生胶原纤维膨胀、溶解现象,因而可利用酸法提取胶原蛋白;酶法提取是利用蛋白酶使胶原溶解[9].由图1可得,酶法提取胶原蛋白得率较酸法提取高,且提高近2倍.2.2紫外吸收光谱分析对酸溶性胶原蛋白提取液和酶溶性胶原蛋白提取液在紫外光区进行全波长扫描测试,得到的紫外扫描曲线如图2所示,由于胶原蛋白共轭氨基酸含量较少,在280nm 波长处无吸收峰,而在225nm 左右有最大吸收峰,试验结果符合胶原蛋白的吸收特征[10],且杂峰较少,表明提取胶原蛋白纯度较高.2.3红外光谱分析如图3所示,ASC 和PSC 产生的吸收峰形状和位置基本一致,在4000~3000cm -1范围内,ASC 和PSC 均有一个较宽的峰,分别在3450cm -1和3440cm -1处,是由酰胺A 带所产生[11];PSC 在2000~1000cm -1波数内出现三个强而窄的吸收峰,其中1640cm -1处吸收峰是由胶原蛋白酰胺I 带产生,在1550cm -1(ASC)和1560cm -1(PSC)处的吸收峰是由胶原蛋白酰胺II 带产生,1390cm -1处为酰胺III 带吸收峰,综上表明PSC 和ASC 主体结构均保留比较完整.2.4溶解性溶解度指物质在特定溶剂中溶解的最大限度,其在天然蛋白质提取、分离和纯化时起到重要作用,蛋白质变性程度也可通过蛋白质的溶解行为的变化作为评价指标,此外蛋白质在饮料中的应用也与其溶解性能有直接的关系[12].如图4所示,随着pH 值的上升,PSC 和ASC 的溶解性先快速下降又逐渐趋于平缓.pH=4时PSC 和ASC 的溶解性最好,ASC 可达80%,PSC 达63%,而pH 在7~9时胶原蛋白的溶解性较差,在图1酸提取液和酶提取液胶原蛋白得率图3罗非鱼鱼皮ASC 和PSC 红外光谱图91--30%左右.胶原蛋白溶解性随pH 的变化跟其等电点位置有关,当处于等电点,两性离子达到电荷平衡,溶解度达到最低[13-14],因此结果表明罗非鱼鱼皮胶原蛋白等电点位于7附近.2.5吸油性图5可见,ASC 和PSC 的吸油能力约为30mL/g 和49mL/g.PSC 的吸油性更佳,可能与胃蛋白酶作用于酶切位点使得较多疏水基团暴露,使得酶溶性胶原蛋白吸油能力增加,且研究表明,蛋白质吸油性跟其结构密切相关[15].2.6保水性保水性指当蛋白质受到外力作用时其保持水分的能力,受浓度、离子种类以及环境等影响[7].ASC 和PSC 在25℃条件下随时间改变保水性的变化如图6所示,水分残存率随时间增加逐渐下降,但ASC 保水性较PSC 下降缓慢,可能由于醋酸和胃蛋白酶对亲水基团的作用差异,使得暴露的亲水基团不同360min 后,ASC 和PSC 的水残存率仍然在90%作用,保水性均优良.3结论与讨论酸法和酶法提取罗非鱼鱼皮胶原蛋白并比较其理化性质,两种方法提取得到的胶原蛋白主体结构基本一致,均保留较完整;但从得率、溶解性和吸油性的角度,酶法提取得到的胶原蛋白更优,而酸法提取的胶原蛋白保水性较好,因此,醋酸法和胃蛋白酶法提取的胶原蛋白可应用于不同的领域.———————————————————参考文献:〔1〕巩育军,郭先霞,李瑞伟,等.罗非鱼营养成分研究进展[J].中国食物与营养,2009(11):50-52.〔2〕Zheng S K,Zheng C H,Lin H,et al.Isola⁃tion and cliaracterization of acid -solubilised collagen from the skin of Nile tilapia (Ore⁃ochromis niloticus)[J].Food Chemistry,2009,116:879-883.〔3〕倪娜.羊血浆蛋白-肌原纤维蛋白复合凝胶形成的作用力分析[D].中国农业科学院,2014.27-30.〔4〕郅慧,于慧,张辉,等.动物源胶原蛋白提取及应用研究进展[J].吉林中医药,2019,39(02):225-227.〔5〕田宏,张春华,陈山乔,等.罗非鱼头磷脂组成及其化学特性[J].赤峰学院学报(自然科学版),2016,32(24):11-14.〔6〕王晓军,吴婷,贾伟,等.酸法和酶法提取牦牛骨胶原蛋白的特性分析[J].食品科学,2018,39(12):101-106.〔7〕包玉龙,陈孙福,罗永康.酸法和酶法提取鳄鱼皮胶原蛋白及性质研究[J].肉类研究,2012,26(07):1-4.〔8〕Z ·elechowska E,Sadowska M,Turk M.Isola⁃tion and some properties of collagen from the backbone of Baltic cod (Gadus morhua)[J].Food Hydrocolloids,2010,24(4):325-329.〔9〕张敏.酸法和酶法提取齐口裂腹鱼皮胶原蛋白及鉴定性质研究[D].四川农业大学,2014.〔10〕辛菲.鲅鱼皮胶原蛋白的提取及分子特性的初步研究[D].新疆农业大学,2012.〔11〕黄石溪,陈桂平,罗灿,等.酸法和酶法提取鮰鱼皮胶原蛋白的工艺研究[J].农产品加工(学刊),2013(16):51-54.〔12〕Zhenying H,Liang Q,Yong S,et al.Im⁃provement of the solubility and emulsifying properties of rice bran protein by phosphory⁃lation with sodium trimetaphosphate [J].Food Hydrocolloids,2019(96):288-299.〔13〕王碧,贾冬英,罗红平,等.皮边角废料提取胶原蛋白的功能特性[J].中国皮革,2002(15):13-16.〔14〕肖桂华,朱蓓薇,董秀萍,等.鲍鱼腹足不同部位的质构特性及组织结构研究[J].食品科技,2010,35(11):155-159.〔15〕孙冰玉,石彦国.微波对醇提大豆浓缩蛋白吸油性的影响[J].中国食品学报,2006(05):97-100.图6罗非鱼鱼皮ASC 和PSC保水性随时间的变化图4pH 值对罗非鱼鱼皮ASC 和PSC 溶解性的影响图5罗非鱼鱼皮ASC 和PSC 的吸油性92--。

三酶法制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽及活性研究

三酶法制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽及活性研究

三酶法制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽及活性研究夏光华;申铉日;蔡锦红;徐克寒;张诚【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2012(033)023【摘要】为了探索制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽的最佳工艺,在碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶解的基础上,以酶解温度、酶解时间、酶解pH值和酶与底物质量比([E]/[S])为试验因素,以水解度和DPPH自由基清除率为响应值,采用响应面分析法优化Orientase 20A酶的酶解条件。

结果表明:最优工艺参数为:酶解温度为41.74℃、pH3.97、酶解时间为6h、[E]/[S]为1.5%,酶解液水解度和DPPH自由基清除率的预测值分别为9.42%和35.01%,验证值分别为9.57%和35.21%。

响应面对酶解法制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽的酶解条件的优化是可行的,可以用于实际预测。

抗氧化活性实验表明,酶解肽具有较强的清除DPPH自由基和ABTS +.能力,其IC50值分别为10.78mg/mL和8.26mg/mL。

【总页数】5页(P175-179)【作者】夏光华;申铉日;蔡锦红;徐克寒;张诚【作者单位】海南大学食品学院,海南海口570228;海南大学食品学院,海南海口570228;海南大学食品学院,海南海口570228;海南大学食品学院,海南海口570228;海南大学食品学院,海南海口570228【正文语种】中文【中图分类】TS254.4【相关文献】1.罗非鱼鱼皮胶原蛋白降血压酶解液的制备与活性研究 [J], 陈胜军;李来好;曾名勇;杨贤庆;吴燕燕;刁石强2.酶法制备鲟鱼皮胶原蛋白多肽及其抗氧化活性研究 [J], 李露园; 王升帆; 朱有贵; 章银军; 汪钊; 郑建永3.酶法制备草鱼皮胶原蛋白抗氧化肽的工艺优化 [J], 秦倩倩; 吴琼英; 贾俊强4.固态发酵法制备罗非鱼皮胶原蛋白肽及其抗氧化活性研究 [J], 邢瀚文;韩玮;施文正;李晓晖5.大孔树脂对罗非鱼皮胶原蛋白抗氧化肽脱盐作用的研究 [J], 夏光华;申铉日;酒志强;黄霜霞因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

罗非鱼皮胶原蛋白的提取条件优化及性质

罗非鱼皮胶原蛋白的提取条件优化及性质

罗非鱼皮胶原蛋白的提取条件优化及性质杨贤庆;张帅;郝淑贤;李来好;吴燕燕;石红;黄卉【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2009(030)016【摘要】采用Box-Benhnken中心组合试验设计及响应面分析法优化热水提取罗非鱼鱼皮胶原蛋白工艺,得到最佳提取工艺为:4℃条件下用0.213mol/L盐酸浸泡鱼皮2Imin(料液比1∶20,m/V),蒸馏水浸泡(料液比1∶7,m/V),42℃水浴提取12.6h,最终得到的胶原蛋白含量达293.018mg/g,产品甘氨酸、脯氨酸和羟脯氨酸含量丰富.SDS-PAGE实验结果表明胶原蛋白中含有α1、α2和β链,是典型的Ⅰ型胶原蛋白,凝胶强度为682g,特性黏度为1.461dl/g.【总页数】5页(P106-110)【作者】杨贤庆;张帅;郝淑贤;李来好;吴燕燕;石红;黄卉【作者单位】中国水产科学研究院南海水产研究所,广东,广州,510300;中国水产科学研究院南海水产研究所,广东,广州,510300上海海洋大学,上海,200090;中国水产科学研究院南海水产研究所,广东,广州,510300;中国水产科学研究院南海水产研究所,广东,广州,510300;中国水产科学研究院南海水产研究所,广东,广州,510300;中国水产科学研究院南海水产研究所,广东,广州,510300;中国水产科学研究院南海水产研究所,广东,广州,510300【正文语种】中文【中图分类】TS254.9【相关文献】1.碱性蛋白酶水解罗非鱼皮提取胶原蛋白肽的最佳条件研究 [J], 张寒俊;杨国燕;张蕾2.罗非鱼骨胶原蛋白质的提取及其性质 [J], 叶韬;林琳;张晓霞;姜绍通;陆剑锋3.乙酸溶胀-挤压提取对罗非鱼真皮胶原蛋白理化性质的影响 [J], 鲍虹蕾;杨敏;刘文文;何沁峰;崔改泵;陈伟;胡建恩;武龙4.罗非鱼鱼皮胶原蛋白提取条件的研究 [J], 丁卓平;刘振华;李仁冬;朱卫钦5.尼罗罗非鱼皮胶原蛋白乳酸提取工艺条件优化及理化特性研究 [J], 梁志桃;郭飞;胡柳花;鹿文红;张强;;;;;;因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

超声辅助酶法提取罗非鱼皮胶原蛋白及其溶解特性

超声辅助酶法提取罗非鱼皮胶原蛋白及其溶解特性
(1 上海海洋大学食品学院,上海 201306; 2 平太荣远洋渔业集团,浙江舟山 316100; 3 国家淡水水产品加工技术研发分中心( 上海) ,上海 201306)
摘要:以罗非鱼皮为原料,探究了超声辅助酶法提取罗非鱼皮胶原蛋白的最佳工艺及其溶解特性。 采用超声 功率、加酶量、超声时间作为单因素试验自变量,并进行响应面优化,求得使胶原蛋白得率最高的提取条件。 将罗非鱼皮超声辅助酶法所得胶原蛋白( Ultrasonic pepsin- soluble collagen,UPSC) 和常规酶法所得胶原蛋白 (Pepsin- soluble collagen,PSC) 进行蛋白得率、紫外光谱及溶解特性分析比较。 结果显示:最优提取工艺为超 声功率 165 W、超声时间 26 min、加酶量 1. 67%,此条件下 UPSC 得率(62. 26%) 显著高于 PSC(29. 02%) 。 紫 外光谱分析得到二者的最大吸收峰均在 230 nm 而不是 280 nm 处,符合 Ι 型胶原蛋白特征。 在不同 pH 条件 下,UPSC 的相对溶解度几乎均高于 PSC。 研究表明:超声辅助酶法是一种高效、环保、简便的提取罗非鱼皮 胶原蛋白的方法,适合工业化生产。 本研究不但提供了超声辅助酶法提取罗非鱼皮胶原蛋白的最佳工艺,而 且所得胶原蛋白得率高、相对溶解度较好,为其在食品加工方面的应用提供了依据。 关键词:罗非鱼皮;超声辅助酶法优化;胶原蛋白;得率;相对溶解度 中图分类号:TS254. 9 文献标志码:A 文章编号:1007- 9580(2022)06- 0127- 008
参考 Chen 等[22] 的方法并稍做改动,将胶原
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第6期
李家柔等:超声辅助酶法提取罗非鱼皮胶原蛋白及其溶解特性

罗非鱼鱼皮胶原蛋白多肽的制备及其理化性质研究

罗非鱼鱼皮胶原蛋白多肽的制备及其理化性质研究

罗非鱼鱼皮胶原蛋白多肽的制备及其理化性质研究梁拥军;孙向军;杨璞;张欣【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2009(037)004【摘要】[目的]制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白多肽,并对其理化性质进行研究.[方法]以从罗非鱼鱼皮中提取的胶原蛋白对原料,分离制备活性肽,并测定其理化性质.[结果]利用胰蛋白酶在45 ℃、pH值8、加酶量5%条件下,酶解3 h,进而用葡聚糖凝胶G-50通过蛋白质纯化仪进行分离,纯化得到较纯的多肽Y32.电泳得知Y32分子量为4.045 6 kDa; DSC820e测定Y32的变性温度为57.5 ℃;调节pH值测定其等电点为8.7;用氨基酸组成分析仪测定Y32氨基酸种类及其含量发现,Y32多肽中共含有19中氨基酸,其中,甘氨酸所占比例最大,符合胶原蛋白氨基酸的基本构成.[结论]为进一步开发利用罗非鱼鱼皮提供了基础资料.【总页数】3页(P1588-1590)【作者】梁拥军;孙向军;杨璞;张欣【作者单位】北京市水产科学研究所,北京,100068;北京市水产科学研究所,北京,100068;北京市水产科学研究所,北京,100068;北京市水产科学研究所,北京,100068【正文语种】中文【中图分类】S912【相关文献】1.不同提取方法对罗非鱼皮胶原蛋白理化特性的影响 [J], 郝淑贤;林婉玲;李来好;杨贤庆;周婉君;黄卉;魏涯;岑剑伟;叶鸽2.绿鳍马面鲀(Navodon septentrionalis)鱼皮胶原蛋白的分离纯化及理化性质研究 [J], 郁迪;丁冬各;王斌3.尼罗罗非鱼皮胶原蛋白乳酸提取工艺条件优化及理化特性研究 [J], 梁志桃;郭飞;胡柳花;鹿文红;张强;;;;;;4.胡子鲶鱼皮酸溶性胶原蛋白的理化性质研究 [J], 李八方;郭鸣;侯虎;王珊珊5.微射流-酶处理对罗非鱼皮胶原蛋白结构和理化特性的影响 [J], 李思佳;孙卫东;张业辉;刘磊;张友胜;阮奇珺;汪婧瑜因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

罗非鱼鳞胶原蛋白提取工艺研究

罗非鱼鳞胶原蛋白提取工艺研究

罗非鱼鳞胶原蛋白提取工艺研究孙宪迅;孙齐英;韩雪;周理红【摘要】研究用胃蛋白酶从罗非鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺。

根据测定水解液中羟脯氨酸(HYP)的含量计算胶原蛋白提取率,采用单因素和正交试验确定胃蛋白酶水解鱼鳞制备胶原蛋白的适宜酶解条件。

结果表明,采用底物质量分数7%,胃蛋白酶酶解罗非鱼鳞制备胶原蛋白的适宜温度、pH、加酶量、时间分别为65℃、2.0、2%、2h。

在适宜工艺条件下,胶原蛋白提取率可达94.24%。

%The technology of extraction collagen from tilapia fish scales through pepsin hy- drolysis has been studied. According to hydrolysate concentration of hydroxyproline (HYP), the single factor and orthogonal experiment was determined the best enzymatic hydrolysis condition. The optimum condition of temperature, pH, enzyme concentration and hydrolyzing time for the ex- traction is 65~C, pH 2.0, 2%, 2 h. The extraction rate of collagen from tilapia fish scales was 94.24% under this optimal condition.【期刊名称】《江汉大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2012(040)003【总页数】3页(P105-107)【关键词】罗非鱼鳞;胶原蛋白;胃蛋白酶【作者】孙宪迅;孙齐英;韩雪;周理红【作者单位】江汉大学生命科学学院,湖北武汉430056;江汉大学生命科学学院,湖北武汉430056;江汉大学生命科学学院,湖北武汉430056;江汉大学生命科学学院,湖北武汉430056【正文语种】中文【中图分类】TS254.9胶原蛋白在化妆品、医药、食品、饲料等领域得到越来越广泛的应用,需求量逐年增大[1-3]。

罗非鱼鱼皮胶原提取的研究

罗非鱼鱼皮胶原提取的研究

鱼 皮剪成 1c 见 方 的 碎 片 , 5 m 取 0g左 右加 人 物 料 比为 1: o w/ 的乙醚 浸 泡 2 , 2 ( V) 4h 用清 水 清 洗 干净后 , 以物料 比为 1: 0 W/ 的氢 氧 化 再 2 ( V) 钠 或氯 化 钠 溶 液 浸 泡 1 , 用 蒸 馏 水 冲 洗 至 2h 再
( 山东 美佳 集 团有 限 公 司 , 山东 日照 2 62 ) 7 8 6
胶原 是一 种重 要 的 功 能性 蛋 白质 , 与细 胞 它 增 生 、 化 、 动 、 疫 、 节 润 滑 、 化 、 口愈 分 运 免 关 钙 伤 合 、 官 支撑 、 体保 护 等密 切相 关 , 在 已 引起 器 机 现 人 们 的广 泛关 注 。由于 其特 殊 的 生 物功 能 , 提 其 取物 已被 广泛 应 用 与 医药 、 品 、 食 日用 化工 、 物 生 合 成 等 众 多 领域 , 制 造药 用 胶 囊 、 如 外科 手 术 材 料、 食用 明胶 、 照相 明胶 、 妆 品 等[ 。 目前 用 于 化 1 ]
粗提 液加入 氯化 钠 , 其 使
终浓度 达 到 0 9mo/ 盐 析 过 夜 , 0 / n . lL, 5 0 0 rmi
发达 国家 已经禁 止使用 从牛皮 及牛骨 中提 取 的胶
原制 品 。因此从水 产 品中提取 得到安 全 、 生 、 卫 无 害 的胶 原制 品具有广 泛 的市场前 景 。
( 方 法 , 定 羟 脯 氨 酸 含 量 , 以换 算 系 数 E) 测 乘 1. , 1 1 即得胶原 蛋 白含 量 。由 L一 羟脯 氨 酸 标 准 品得到 的回归方 程为 :
Y=0 0 5 + 0 079 相关 系 数 R 一 0 981 . 7 x . 1 , z .9 。

罗非鱼胶原蛋白

罗非鱼胶原蛋白

利用先进的生物工程定向酶切技术从罗非鱼鱼鳞中提取的胶原肽其蛋白质含量约95%,有18种氨基酸,含有7种人体必需氨基酸,具有蛋白质含量高、灰份少、重金属含量低、平均分子量为1000~2000D左右,可被人体表皮皮层和体内消化系统直接吸收产品特点。

1、产品质量稳定:采用海南本地养殖的罗非鱼鱼鳞或者鱼皮为原料,原料新
鲜无腐烂,保证产品性质稳定。

2、高品质的产品:产品白色,淡腥味,无糖无脂,无添加。

3、良好的价格性能:速溶性好,耐高温,适用pH值范围广,流动性佳。

4、优质的原料:
(1)原料的稳定性:产品采用单一鱼种(罗非鱼的鱼皮或者鱼鳞)
(2)原料的安全性:原料均来自当地罗非鱼加工出口企业,企业均通过GAP 认证,符合美国FDA和欧盟的卫生标准。

罗非鱼鱼皮胶提取及功能特性探讨

罗非鱼鱼皮胶提取及功能特性探讨

鱼皮胶基本成分分析方法
• 水分测定:105ºC常压干燥法 [1] • 总氮测定:半微量凯氏定氮法[2]
鱼皮胶的功能测定
• 水合性质的测定
• 吸水性
• 保水性 • 湿润性 • 吸油性 • 乳化性和乳化稳定性的测定 • 起泡性和泡沫稳定性
• 透明性
二、结果与讨论
• 原料处理方法的确定
• 本实验对原料处理所采取的是碱酸浸泡提取的方法。由于

安全象只弓,不拉它就松,要想保安 全,常 把弓弦 绷。20.10.2109:37:5009:37O ct-2021-Oct-20

加强交通建设管理,确保工程建设质 量。09: 37:5009:37:5009:37Wednes day, October 21, 2020

安全在于心细,事故出在麻痹。20.10.2120.10.2109: 37:5009:37:50October 21, 2020
251
9.15
24.1
98.30
50
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2.50
13.2
99.07
50
203
2.76
14.5
98.98
200
248
19.12
25.2
98.23
70
176
4.25
16.0
98.87
转吸油性
图1所示,为本实验8个样品的膨胀率、提胶率和蛋白质的回 收率的鱼胶提取结果分析。
图1:鱼胶提取结果分析
300 250 200 150 100

人生得意须尽欢,莫使金樽空对月。09:37:5009:37: 5009:3710/21/2020 9:37:50 AM

树立质量法制观念、提高全员质量意 识。20.10.2120.10.21Wednes day, October 21, 2020

脆肉罗非鱼皮胶原蛋白肽的性质研究

脆肉罗非鱼皮胶原蛋白肽的性质研究

脆肉罗非鱼皮胶原蛋白肽的性质研究目录一、内容描述 (1)二、材料与方法 (1)三、结果与讨论 (3)3.1 提取分离结果分析 (4)3.1.1 提取效率与纯度分析 (5)3.1.2 胶原蛋白肽的分子量分布特点 (6)3.2 胶原蛋白肽性质分析 (7)3.2.1 氨基酸组成特点 (8)3.2.2 物理化学性质研究 (9)3.2.3 功能性分析及应用前景探讨 (10)四、脆肉罗非鱼皮胶原蛋白肽的生物活性研究 (12)4.1 抗氧化活性分析 (13)4.2 抗炎及抗菌作用研究 (14)4.3 对皮肤保湿及抗衰老作用探讨 (15)五、结论与展望 (16)5.1 研究总结与主要发现 (17)5.2 研究不足之处及建议改进方向 (18)5.3 对未来研究的展望与应用价值分析 (19)一、内容描述本研究选用脆肉罗非鱼皮作为原料,这种鱼皮因其独特的质地和营养成分而备受关注。

罗非鱼广泛分布于热带和亚热带地区,其鱼皮富含胶原蛋白,是提取胶原蛋白肽的优质原料。

通过一系列物理和化学方法,从罗非鱼皮中提取胶原蛋白,并经过特定的酶解工艺,制备成胶原蛋白肽。

重点研究酶的种类、酶解时间、温度等因素对胶原蛋白肽分子量分布、溶解度和生物活性的影响。

对制备得到的胶原蛋白肽进行性质表征,包括分子量分布、氨基酸组成、热稳定性、溶解性、粘度等方面的分析。

通过对比研究,了解脆肉罗非鱼皮胶原蛋白肽与其他来源胶原蛋白肽的差异,以及其在不同条件下的物理化学性质变化。

探讨脆肉罗非鱼皮胶原蛋白肽在食品、医药、化妆品等领域的应用潜力。

分析其在改善食品质地、增强营养价值、促进人体健康等方面的作用,并评估其在化妆品中对皮肤保湿、抗衰老等功效。

将脆肉罗非鱼皮胶原蛋白肽的性质与其他来源(如鱼类、动物骨骼等)的胶原蛋白肽进行对比分析,以全面了解其独特性和优势。

二、材料与方法本实验选用鲜活尼罗罗非鱼,取其皮作为实验材料。

实验所需主要设备有:高速组织捣碎机、酸度计、离心机、高效液相色谱仪、质谱仪、氨基酸分析仪等。

罗非鱼皮营养成分分析及鱼皮明胶提取工艺的探讨

罗非鱼皮营养成分分析及鱼皮明胶提取工艺的探讨
第 4卷第 5期 2 0 0 8年 1 0月
南 方 水 产
South China Fisheries Science
Vol14, No15 Oct1, 2008
罗非鱼皮营养成分分析及鱼皮明胶提取工艺的探讨
叶小燕 , 曾少葵 , 余文国 , 吴文龙 , 曾祥根 , 黄丽明
(广东海洋大学食品科技学院 , 广东 湛江 524025)
(Gadus m a rhua ) 皮 ( 24% ) [ 7 ] , 是较好的蛋白质 来源原料 。 212 罗非鱼皮蛋白质氨基酸组成
对罗非鱼皮进行水解 , 再用氨基酸自动分析仪 测定其氨基酸含量 , 结果见表 3。
从表 3中可知 , 在罗非鱼皮蛋白质的氨基酸组 成中 , 必需氨基酸占氨基酸总量的 22133% , 显然 不是优质蛋白质 。但其中的甘氨酸含量极为丰富 , 约占氨基酸总量的 20% , 符合胶原蛋白氨基酸组 成特点 。可见罗非鱼皮的蛋白质组成主要为胶原蛋 白。
Abstract: The nutrient content was analyzed in th skin of tilap ia and the conditions of gelatin extraction from the skin of tilap ia were studied in this paper through the orthogonal experiment and the main physicochem ical p roperties and m icroorganism s were also tested1 The results showed that the contents of p rotein and collagen in the skin were 33114% and 2718% , respectively1 Collagen accounted for 8319% of all p rotein1The op timal conditions for gelatin extraction were established by soaking in 215% (W /V ) NaOH solution for 315 h and in 0102% (V /V ) HCl for 3 h and incubated at temperature 55℃1 Extraction yield of fish gelatin was 2615% , gel strength was 468 g and the content of p rotein was 82143% 1 The total number of bacteria was 113 ×105 CFU·g- 1 and coliform bacteria indicated negative1 Key words: tilap ia; skin; nutrient content; gelatin; extraction yield

热水提取罗非鱼鱼皮胶原蛋白的研究

热水提取罗非鱼鱼皮胶原蛋白的研究

热水提取罗非鱼鱼皮胶原蛋白的研究【摘要】摘要:目的研究热水水解法提取罗非鱼鱼皮胶原蛋白的最佳工艺及检测鱼皮胶原蛋白的氨基酸组成。

方法采用热水水解提取法,探讨于不同温度、pH值、提取时间和液固化等因素对罗非鱼鱼皮胶原蛋白提取的影响,并和多因素正交试验确定最佳工艺流程。

结果罗非鱼鳞胶原蛋白热水提取最佳提取工艺为温度90℃,pH 值6.0,固液比1:13,时间2h,蛋白得率为212mg/g原料。

特征氨基酸羟脯氨酸为9.7%。

结论研究建立的热水水解法提取罗非鱼皮胶原蛋白纯度高、色泽洁白无异味。

【关键词】罗非鱼鱼皮胶原蛋白胶原蛋白是一种高分子蛋白质,是细胞外基质的主要成分,对维持皮肤、血管壁弹性,保持毛发、保持结实而有弹性、指甲柔软亮泽,提高软骨的润滑性等都有重要作用。

它存在于人体皮肤、骨骼、牙齿、肌腱等部位,主要生理机能是粘合结缔组织。

胶原具有很强的生物活性和生物功能,能参与细胞的迁移、分化和增殖,使骨骼、肌腱、软骨和皮肤具有一定的机械强度。

胶原因为其较弱的抗原性和良好的生物相容性,在烧伤、创伤、眼角膜疾病、美容、矫形、硬组织修复、创面止血等医药卫生领域用途广泛[1~3]。

也广泛应用于食品包装、肉制品添加剂、胶原小食品、保健食品等[3]。

近几年来,胶原蛋白的开发与利用已引起人们广泛的关注。

胶原蛋白中含有丰富的甘氨酸、脯氨酸和羟脯氨酸,其水解产物中还含有丰富的生理活性肽,这些特性使胶原蛋白及水解产物在医疗、保健及美容方面具有良好的应用前景[4]。

由于欧洲疯牛病和口蹄疫的影响,以牛皮、猪皮作为主要原料的胶原蛋白的安全性受到人们的质疑,人们开始以鱼皮、鱼骨等海洋生物材料代替猪、牛皮作为提取胶原蛋白的新原料,海洋生物胶原蛋白与猪、牛等陆生动物的胶原蛋白相比,其特性、组成及溶液的性质都存在显著不同。

开发利用海洋鱼类中的胶原蛋白,不仅可以保护环境,扩大胶原蛋白的原料来源,同时拓宽了胶原蛋白的应用范围[5]。

鱼皮胶是由鱼皮中的胶原转变而成的一种明胶,其主要成分是生胶质,粘度很高,胶凝强度超过一般的动物胶,并具有良好的生物活性[6]。

木瓜蛋白酶提取罗非鱼鱼鳞胶原蛋白的研究

木瓜蛋白酶提取罗非鱼鱼鳞胶原蛋白的研究

木瓜蛋白酶提取罗非鱼鱼鳞胶原蛋白的研究
王春;周莉;周天;邱素淡;陈名海;李文姬
【期刊名称】《安徽农业科学》
【年(卷),期】2013(041)003
【摘要】[目的]优化酶法提取鱼鳞胶原蛋白的工艺,充分利用鱼类产品加工副产物.[方法]以罗非鱼鱼鳞为原料,采用木瓜蛋白酶酶解的方法,优化鱼鳞胶原蛋白提取工艺,并分析所得胶原蛋白的性质.[结果]试验表明,木瓜蛋白醇提取罗非鱼鱼鳞胶原蛋白的最佳工艺条件为:酶量为2.5‰,50℃下酶解时间为5h.[结论]试验所提取的胶原蛋白具有较好的吸水性、保水性和起泡稳定性,有良好的应用前景.
【总页数】2页(P1291-1292)
【作者】王春;周莉;周天;邱素淡;陈名海;李文姬
【作者单位】广东石油化工学院化学与生命科学学院,广东茂名525000;广东石油化工学院化学与生命科学学院,广东茂名525000;广东石油化工学院化学与生命科学学院,广东茂名525000;广东石油化工学院化学与生命科学学院,广东茂名525000;广东石油化工学院化学与生命科学学院,广东茂名525000;广东石油化工学院化学与生命科学学院,广东茂名525000
【正文语种】中文
【中图分类】S965.125
【相关文献】
1.响应面优化酶溶性罗非鱼鳞胶原蛋白的提取工艺 [J], 严子军;纪洁清;刘永
2.响应面法优化木瓜蛋白酶提取草鱼鱼鳞胶原蛋白的研究 [J], 张璟晶;唐劲松;王海波;力朝洲;冯晓蕊
3.酸溶性罗非鱼鳞胶原蛋白的响应面优化提取 [J], 梁巧荣;纪映君;刘永;韦寿莲
4.罗非鱼鳞胶原蛋白提取工艺研究 [J], 孙宪迅;孙齐英;韩雪;周理红
5.热水提取罗非鱼鱼鳞胶原蛋白的研究 [J], 刘石生;易美华;黄文艳
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从罗非鱼皮中提取与纯化非变性胶原蛋白的方法的研究

从罗非鱼皮中提取与纯化非变性胶原蛋白的方法的研究

从罗非鱼皮中提取与纯化非变性胶原蛋白的方法的研究摘要】以水产加工废弃物罗非鱼皮为原料,提取纯化非变性胶原蛋白,获得相关技术参数:5%NaCl溶液和0.1mol/L NaOH溶液进行鱼皮前处理;1:50料液比的0.5mol/L乙酸溶液抽提两次得到酸溶性胶原蛋白;0.1%~0.2%胃蛋白酶,酶解后得到酶溶性胶原蛋白;分级过滤、盐析、透析对胶原蛋白进行纯化处理;冻干后鱼皮胶原蛋白的得率达到11%以上,适合进行产业化推广。

【关键词】罗非鱼皮;提取;纯化;非变性胶原蛋白;方法【中图分类号】R914 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2018)32-0376-02天然高分子胶原来源广泛,可以从陆生动物如猪、牛的皮、骨、腱等部位获取,也可以从水生动物中如鱼皮鳞中获取。

由于陆生生物安全性问题日益受到人们的关注,很多国家和地区都限制了陆生生物来源胶原蛋白制品的使用范围,而水生生物的皮、骨、鳍等含丰富的胶原蛋白, 被国内外学者认为是安全的胶原蛋白来源。

本项目组以水产加工废弃物罗非鱼皮为原料,通过原料前处理、胶原提取、胶原纯化等方法的研究,探讨罗非鱼皮非变性胶原蛋白的产业化路线。

1.材料与方法1.1 原料前处理1.1.1从水产养殖厂购买新鲜罗非鱼皮,清洗去鳞取皮,去除附着鱼肉和鱼鳍,切成2cm*2cm小块,备用。

1.1.2适量浓度的NaCl溶液清洗鱼皮,料液比1:10(w/v),4 ℃以下,每隔12hr更换一次溶液,重复4次。

1.1.3再更换0.1mol/L的NaOH溶液清洗鱼皮,料液比1:10(w/v)4℃以下,每隔12hr更换一次碱液,重复4次,再用去离子水反复清洗至pH6.5~7。

1.2 提取粗胶原1.2.1酸溶性胶原的提取将前处理后的鱼皮放入0.5mol/L的乙酸溶液中,料液比1:20(w/v),缓慢搅拌6hr后,过滤,取上清。

重复上述酸溶步骤一次,合并滤液获得酸溶性胶原ASC(acid-soluble collagen)。

罗非鱼鱼皮胶原蛋白提取条件的研究

罗非鱼鱼皮胶原蛋白提取条件的研究
试验流程 :鱼皮解冻剪碎 →加 6% Nacl (样 品 :溶液 = 1: 10 )浸泡 12 h →重复前一步骤 →离 心 →水洗 →粗提产品 2. 3 采用正交试验确定提取胶原蛋白的最佳条 件 [ 2、5 ]
表 5 提取胶原蛋白的正交试验结果及因素 、级差分析
酸种类 时间 溶胀比 酸浓度 吸光度 Hyp%
工产生的废弃物 ,除小部分被用于生产饲料外 ,大 部分被丢弃 ,造成了污染和浪费 。因此 ,如果能从 这些废弃物中提取胶原蛋白加以利用 ,则既可促 进淡水鱼加工废弃物的综合利用 ,同时又能为胶 原蛋白的生产和加工利用提供丰富的原料 ,可带 来不菲的经济效益 。本试验着重研究了从罗非鱼 鱼皮中提取胶原蛋白的条件 。
1材料与方法
1. 1试验材料 尼奥杂交罗非鱼鱼皮 (上海水产品加工技术
开发中心提供 ,产地广州 ) , - 20℃低温冻藏 ,试 验时于 4℃解冻 。 1. 2主要仪器
752紫外可见分光光度计 。 1. 3试验方法与步骤 1. 3. 1罗非鱼鱼皮基本组分的测定 罗非鱼鱼 皮经解冻 、滤干 、剪碎 、捣碎后 ,进行水分 (直接干 燥法 ) 、灰分 (总灰分 ) 、粗蛋白 (凯氏定氮法 ) 、脂 质 (索氏抽提法 )的测定 。 1. 3. 2测定去除非胶原蛋白的量 [ 1 ] 在浓度分 别为 1、2 、3 mg /mL 的卵清蛋白溶液中加入双缩 脲试剂 2. 0 mL ,充分混匀 ,即有紫红色出现 ,测定 540 nm 处的吸光度 ,绘制出标准曲线 ,用以测定 试验中被去除的非胶原蛋白的量 。 1. 3. 3确定罗非鱼鱼皮中胶原蛋白的含量 [ 2、3 ] 羟脯氨酸是胶原蛋白的一种特性蛋白质 ,通过 ISO3496 ( E)对羟脯氨酸的测定来确定罗非鱼鱼 皮中胶原蛋白的含量 [ 2 ] 。称取 50 m g羟脯氨酸溶 解 于 水中 , 加 1滴 硫酸 溶液 , 定容 至 1 0 0mL。移

罗非鱼皮胶原酶抑制肽的制备、体外活性及其理化特性研究

罗非鱼皮胶原酶抑制肽的制备、体外活性及其理化特性研究

罗非鱼皮胶原酶抑制肽的制备、体外活性及其理化特性研究鲁晨;胡晓;陈胜军;吴燕燕;黄卉;相欢;戚勃;邓建朝【期刊名称】《南方水产科学》【年(卷),期】2024(20)2【摘要】罗非鱼皮富含胶原蛋白,是一种制备生物活性肽的理想原料。

以罗非鱼皮为原料,采用酶解法制备罗非鱼皮胶原酶抑制肽(Tilapia skin collagenase inhibitory peptide,TSCIP),并对其胶原酶抑制活性与金属离子结合活性的相关性进行研究,以期为罗非鱼加工副产物的高值化利用与食物蛋白源胶原酶抑制剂的研发提供参考。

结果表明,罗非鱼皮经碱性蛋白酶酶解4 h后的产物具有最高的胶原酶抑制活性和锌离子(Zn^(2+))、镁离子(Mg^(2+))结合活性,并探明其主要由小分子肽(<1000 D占85.65%)组成。

紫外、傅里叶变换红外光谱以及圆二色谱分析显示,TSCIP与Zn^(2+)、Mg^(2+)以及胶原酶结合后其二级结构发生了变化,β-折叠含量明显增加;Zn^(2+)、Mg^(2+)主要通过羧基氧、氨基氮原子以及羰基与TS-CIP结合,胶原酶主要通过氨基氮原子以及羰基与TSCIP结合。

【总页数】10页(P150-159)【作者】鲁晨;胡晓;陈胜军;吴燕燕;黄卉;相欢;戚勃;邓建朝【作者单位】上海海洋大学食品学院;中国水产科学研究院南海水产研究所/农业农村部水产品加工重点实验室;三亚热带水产研究院【正文语种】中文【中图分类】TS254.1【相关文献】1.注射用胶原酶对磷脂酶A2活性抑制作用的体外实验研究2.罗非鱼鱼皮肽的体外ACE抑制活性、消化性及分子对接对比3.罗非鱼肌浆蛋白源抗氧化肽的制备、分离纯化及其体外抗氧化活性4.罗非鱼皮胶原肽的酪氨酸酶抑制活性与铜离子结合活性研究5.鮸α-葡萄糖苷酶抑制活性肽的制备、分离及理化特性研究因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

罗飞鱼皮胶原蛋白肽氨基酸序列

罗飞鱼皮胶原蛋白肽氨基酸序列

罗飞鱼皮胶原蛋白肽氨基酸序列一、引言胶原蛋白是一种重要的蛋白质,广泛存在于动物结缔组织中,特别是在皮肤、骨骼、肌腱和韧带中。

它对维持组织的弹性和结构完整性起着至关重要的作用。

近年来,随着生物技术的不断进步,越来越多的研究集中在开发新型的胶原蛋白来源及其应用上。

其中,从鱼皮中提取的胶原蛋白由于其独特的生物相容性和低免疫原性而备受关注。

二、材料与方法为了研究罗飞鱼皮胶原蛋白肽的氨基酸序列,我们采用了以下实验方法:1. 罗飞鱼皮的收集和处理:选取新鲜的罗飞鱼皮,经过清洗、去鳞和切割后,用适量的酸和酶进行消化处理,以释放出胶原蛋白。

2. 胶原蛋白的纯化:使用离子交换层析和凝胶过滤层析等方法对消化液进行纯化,去除其中的非胶原蛋白成分。

3. 胶原蛋白肽的制备:将纯化的胶原蛋白进行酶解处理,得到胶原蛋白肽。

4. 氨基酸序列的分析:采用质谱分析法对胶原蛋白肽进行氨基酸序列的分析。

三、结果与讨论经过实验,我们得到了罗飞鱼皮胶原蛋白肽的氨基酸序列,并对其进行了详细的分析:1. 氨基酸组成:罗飞鱼皮胶原蛋白肽主要由甘氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸和丙氨酸等组成,与其它动物来源的胶原蛋白有较高的相似性。

2. 序列比对:将罗飞鱼皮胶原蛋白肽的氨基酸序列与已知的胶原蛋白序列进行比对,发现其具有较高的同源性,进一步证明了其生物相容性和低免疫原性。

3. 应用前景:由于罗飞鱼皮胶原蛋白肽具有较好的生物相容性和低免疫原性,它在组织工程、生物医学和美容等领域有着广阔的应用前景。

例如,可以作为人工皮肤、韧带和肌腱等生物材料,也可用于创面修复和疤痕治疗等方面。

此外,由于其具有保湿、美容等功效,罗飞鱼皮胶原蛋白肽在化妆品和保健品等领域也有着潜在的应用价值。

四、结论本研究成功地提取并分析了罗飞鱼皮胶原蛋白肽的氨基酸序列,发现其具有较好的生物相容性和低免疫原性,为进一步拓展其在组织工程、生物医学和美容等领域的应用提供了理论依据和实践基础。

未来,我们将继续深入研究罗飞鱼皮胶原蛋白肽的理化性质和生物学活性,以期为推动其在更多领域的应用提供支持。

罗非鱼鱼皮胶原蛋白的提取及其功能特性的研究的开题报告

罗非鱼鱼皮胶原蛋白的提取及其功能特性的研究的开题报告

罗非鱼鱼皮胶原蛋白的提取及其功能特性的研究的开题报告1. 研究背景和意义罗非鱼是一种重要的淡水养殖鱼类,在我国南方地区具有很高的经济价值。

罗非鱼鱼皮中含有丰富的胶原蛋白,而胶原蛋白是一种重要的结构蛋白,具有维持组织结构、提供弹性和水分保持能力等多种生物学功能。

因此,研究罗非鱼鱼皮胶原蛋白的提取及其功能特性,对于充分利用罗非鱼资源,提高其经济价值和开发新型保健食品等具有实际意义。

2. 研究内容和方法本研究将采用多种方法对罗非鱼鱼皮中胶原蛋白的提取和分离进行研究,并对其形态学、理化性质、功能特性等进行分析。

具体研究内容如下:(1) 罗非鱼鱼皮胶原蛋白的提取方法的优化:以罗非鱼鱼皮为原料,研究酸、碱、酶等不同的提取方法,以及不同的浓度、温度、时间等因素对胶原蛋白提取率的影响,确定最优提取工艺。

(2) 罗非鱼鱼皮胶原蛋白的分离和纯化方法的研究:采用离子交换、凝胶渗透、逆流色谱等多种方法对提取的罗非鱼鱼皮胶原蛋白进行分离和纯化,确定最佳方法。

(3) 罗非鱼鱼皮胶原蛋白的理化性质的研究:对提取和纯化的胶原蛋白进行分子量、电泳等分析,研究其理化性质。

(4) 罗非鱼鱼皮胶原蛋白的功能特性研究:研究其生物学活性、保湿性、抗氧化性等功能特性。

3. 预期成果(1) 最优的罗非鱼鱼皮胶原蛋白提取工艺和分离纯化方法;(2) 理化性质和功能特性的研究结果,为开发罗非鱼鱼皮胶原蛋白的新型保健食品和药物等提供了基础数据和理论依据;(3) 对罗非鱼资源的综合利用提供了一定的理论和实践指导。

4. 研究进度安排本研究的主要进度安排如下:第一年:完成罗非鱼鱼皮胶原蛋白的提取和分离,确定最佳提取工艺和分离纯化方法;第二年:对提取和纯化胶原蛋白的理化性质进行分析;第三年:对罗非鱼鱼皮胶原蛋白的功能特性进行研究,并撰写论文。

罗非鱼骨胶原蛋白质的提取及其性质

罗非鱼骨胶原蛋白质的提取及其性质

2 . 1 3 胶 原 蛋 白 质 的 热 变 性 温 度 的 测 定
图 1 0为罗 非 鱼 骨胶 原 蛋 白质 的差 示 量 热扫 描 ( D S C) 图谱 。 由图 1 0可 知 , 罗非 鱼 骨胶 原 蛋 白质 的 变性 温度 为 3 4 . 5℃, 高于 变性 温度 为 3 0 . 0 o C的鲤鱼 骨酶 溶性 胶原 蛋 白质 。P a t i 等嘲的研究 认 为 , 水产 动 物胶 原 的热 变 性 温 度 不 仅 与 栖 息 环 境 的温 度 有
带由C — N伸 缩振 动 与 N —H 弯 曲振 动产 生 ,其 特 征 吸 收频率 为 1 5 0 0 ~ 1 6 0 0 e m~ , 是胶 原 蛋 白肽链 仅 螺 旋 、B折叠 、 转 角 和无 规 卷 曲叠 加 , 以及 精 氨 酸 、
天 门冬 氨酸 和 谷 氨酸 侧 链 的 吸收 带 : 酰 胺 Ⅲ带 是 由
作 用 。I k o ma等伫 q 的研 究 表 明 , 真鲷 、 罗非 鱼 的 I型 鱼 鳞胶 原 蛋 白质 的 热 变 性 温 度 与 羟 脯 氨 酸 的含 量
之 间 呈 良好 的线 性 关 系 。而 罗非 鱼 属于 热 带鱼 类 , 抗冻能力差 , 其栖息水温不仅高于鲤鱼 , 而 且 其 骨 胶 原 蛋 白质 中 的亚 氨 基 酸 质 量 分 数 ( 2 1 . 4 7 %) 也 高 于 鲤 鱼 骨 胶 原 蛋 白质 的 ( 2 0 . 4 %) , 推 测 这 可 能 是 罗
非 鱼 骨 胶 原 蛋 白质 的变 性 温 度 高 于 鲤 鱼 骨 胶 原 蛋
白质 的变性 温度 所致 。
C —N 伸 缩 振 动 和 N —H 弯 曲振 动 形 成 的 ,特征 吸
收范 围为 1 2 0 0 ~ 1 3 6 0 e m~ ,属 于 甘氨 酸 骨架 和 脯

不同酸处理对罗非鱼皮明胶提取率及物化特性的影响

不同酸处理对罗非鱼皮明胶提取率及物化特性的影响

到食 品 、 药 、 影 和 化 妆 品工 业 … .由 于犹 太 教 、 制 摄 伊斯 兰教 、 印度 教等 宗教 信仰 , 传统 的牛 皮胶 和猪皮
胶产 品 的应 用 受到 限制 .鱼 皮 明胶 成 为一 种 良好 的替 代 品 , 鱼类加 工废 弃物 利用 提供 了新 的途径 . 为
宝 生物工 程 ( 连 ) 限公 司 . 大 有 1 2 仪 器 与 设 备 .
功 能 特 性 .罗 非 鱼 皮 明胶 提 取 已见 报 道 , P 如 .
Snc o kn a , m l 用 固定浓 度 的酸 与碱 对 oght u pn J i h i a a
U 30 P V 0 O C型 紫外 可见 分 光 光 度计 , 海 美 谱 上 达 仪 器 有 限 公 司 ; V一1 +Po型 黏 度 计 , 国 D 1 r 美 B ok e ro f l 司 ;S R D i d公 I — D 3型 台 式 恒 温振 荡 器 , 国 美
明胶是 一种 可 溶 的 高分 子 聚 合 物 , 也是 一 种 天
然蛋 白质 , 可从 含有 胶 原 蛋 白的 哺乳 动 物 和 鱼类 中 获取 .明胶 因其 独 特 的 化 学物 理 性 质 , 广 泛 应 用 被
试剂 : 氢氧化 钠 、 酸 、 乙酸 、 檬酸 、 盐 冰 柠 浓硫 酸 、 甲醇 、 水硫 酸 铜 、 酸钾 、 水 碳 酸钠 、 五 硫 无 甲基 红 、 溴 甲酚 绿 、 酸 、 硼 乙酸 镁 、 水 乙醚 、 石 酸钾 钠 、 无 酒 三水 醋酸 钠 、 甲苯 、 二 乙二 醇 独 甲醚 、 胺 T、 氯 酸 、 氯 高 对 二 甲氨基 苯 甲醛 、 烯 酰 胺 、 丙 甲叉 丙 烯 酰胺 、 羟 甲 三 基氨 基 甲烷 、 硫酸 铵 、 甲基 乙二胺 、 氨酸 、 马 过 四 甘 考
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2 结果与分析
2.1 响应面优化试验结果分析
2.1.1 响应面优化试验结果
表 2 响应面分析试验设计及结果 Table 2 Arrangement and results of the four-variable/five-levels
response surface central composite design
V) at 42 ℃ for 12.6 h, and the optimized extraction led to a collagen content of 293.018 mg/g. The collagen was rich in glycine,
proline and hydroxyproline. SDS-PAGE analysis showed that this collagen contained α1, α2 and β chains indicating that it
食品科学
※工艺技术
Box-Benhnken 的四因素五水平试验中共有 27 个试验 点,其中试验 1~24 是分析因子试验、试验 25~27 是 零点试验,胶原蛋白含量( Y ) 为响应值,试验所得的胶 原蛋白含量(Y)见表 2。
采用 SAS 9.0 软件对表 2 中胶原蛋白含量试验数据进 行多元回归分析,分析结果见表 3、4。由表 3、4 可 知方程的一次项、二次项的影响都是极显著的,交互 项不显著,方程的决定系数为 97.98%,说明响应值有 97.98% 来源于所选变量,回归方程可以较好地描述各因 素与响应值之间的真实关系。根据分析结果,去掉非 显著项得到胶原蛋白含量对盐酸浓度(X1)、盐酸浸泡时 间(X2)、提取温度(X3)和提取时间(X4)的二次回归模型, 该方程表达了提取所得胶原蛋白含量(Y)与各因素之间的 变化规律,其二次回归模型为:
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214.767
+1
220.647
-1
238.287
+1
261.807
-1
220.353
+1
224.910
-1
261.660
extraction of collagen from tilapia skin were determined as follows: soaking tilapia skin in 0.213 mol/L HCl solution with a ratio
of material to liquid of 1:20 (m/V) at 4 ℃ for 21 min prior to the hot water extraction with a ratio of material to liquid of 1:7 (m/
中图分类号:TS254.9
文献标识码:A
文章编号:1002-6630(2009)16-0106-05
胶原蛋白是一种天然高分子化合物,具有一定的凝 胶强度、乳化性、低黏度性、吸水和保湿性等,广 泛应用于食品、医药、化妆品等工业中[1]。胶原蛋白 主要存在于动物的皮、骨、软骨、牙齿、肌腱、韧 带和血管中,在鱼皮和鱼鳞中也有大量分布。我国是 世界上水产大国,每年有大量的鱼皮及鱼鳞等废弃物产 生,以往这些废弃物多被丢掉或制成鱼粉饲料出售,不 仅污染环境,还对资源造成极大的浪费,因此研究从 鱼类下脚料中提取胶原蛋白具有深远意义。
106 2009, Vol. 30, No. 16
食品科学
※工艺技术
罗非鱼皮胶原蛋白的提取条件优化及性质
杨贤庆 1,张 帅 1,2,郝淑贤 1,李来好 1,吴燕燕 1,石 红 1,黄 卉 1
(1.中国水产科学研究院南海水产研究所,广东 广州 510300;2.上海海洋大学,上海 200090)
摘 要:采用 Box-Benhnken 中心组合试验设计及响应面分析法优化热水提取罗非鱼鱼皮胶原蛋白工艺,得到最佳提 取工艺为:4℃条件下用 0.213mol/L 盐酸浸泡鱼皮 21min(料液比 1:20,m/V),蒸馏水浸泡(料液比 1:7,m/V), 42℃水浴提取 12.6h,最终得到的胶原蛋白含量达 293.018mg/g,产品甘氨酸、脯氨酸和羟脯氨酸含量丰富。SDSPAGE 实验结果表明胶原蛋白中含有α1、α2 和β链,是典型的Ⅰ型胶原蛋白,凝胶强度为 6 8 2 g ,特性黏度为 1.461dl/g。 关键词:罗非鱼鱼皮;胶原蛋白;热水提取;凝胶强度;黏度
Optimization of Extraction and Physico-chemical Properties of Tilapia Skin Collagen
YANG Xian-qing1,ZHANG Shuai1,2,HAO Shu-xian1,LI Lai-hao1,WU Yan-yan1,SHI Hong1,HUANG Hui1 (1. South China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Guangzhou 510300, China; 2. Shanghai Ocean University, Shanghai 200090, China)
表1 Table 1
中心组合试验 Box-Benhnken 方案设计因素水平编码表 Independent variables and levels in the four-variable/
five-levels response surface design
因素
代码
盐酸浓度(mol/L) X1
盐酸浸泡时间(min) X2
1.2.5 紫外光谱分析 参考赵苍碧等[4]的方法略有改进,将胶原蛋白成品
配制成 1mg/ml 溶液(溶剂为 0.5mol/L 醋酸),用紫外分光 光度计在波长 200~400nm 间进行扫描。
1.2.6 胶原蛋白的氨基酸组成 参考 Liu 等[5]的方法将一定量的胶原蛋白置于水解管
中,加入 6mol/L 盐酸,抽真空密封,110℃水解 24h, 用氨基酸自动分析仪测定各氨基酸含量。
1.2.3 实验条件响应面优化设计 经前期研究发现,盐酸浓度、酸处理时间、热水
提取温度和提取时间四个因素对胶原蛋白提取效果影响 较大,因此针对这四个因素进行优化,根据 B o x Benhnken 的中心组合设计原理,选用影响胶原蛋白提 取的四个主要因素:X1 盐酸浓度(mol/L),X2 盐酸浸泡 时间(min),X3 提取温度(℃),X4 提取时间(h)。每一个 自变量的水平分别以- 2 、- 1 、0 、+ 1 、+ 2 进行编码, 试验因素与水平设计见表 1 ,数据采用 S A S 9 . 0 和 Minitab15 软件分析。
is a typical type I collagen. Its gel strength and characteristic viscosity were 682 g and 1.461dl/g, respectively.
Key words:tilapia skin;collagen;hot water extraction;gel strength;characteristic viscosity
+1
265.629
-1
230.202
+1
225.057
-1
264.600
+1
278.271
0
224.910
0
269.010
Байду номын сангаас
0
247.401
0
263.277
0
158.760
0
251.370
-2
257.691
+2
283.710
0
287.091
0
287.532
0
287.973
108 2009, Vol. 30, No. 16
1.2.9 特性黏度的测定 参照文献[8]、[9]将胶原蛋白成品配成 1mg/ml 的胶原
蛋白醋酸溶液,以此溶液为基准,以 0.5mol/L 的醋酸 为对照,用乌氏黏度计在室温 25℃下分别测定 5/6、2/3、 1/2、1/3 含量时的黏度,计算公式为:
增比黏度ηsp=t/t0 - 1 特性黏度[η]= cl→im0ηsp/C 式中:t 是样品流出时间;t 0 为溶剂流出时间;C 为样品浓度;ηsp/C 为比浓度黏度;[η]为浓度外推到 0 时 的比浓度黏度即特性黏度。
※工艺技术
食品科学
2009, Vol. 30, No. 16 107
1.2.1 罗非鱼皮处理 将新鲜罗非鱼皮清洗去除脂肪等杂物,切成 1cm ×
1cm 块状后于- 20℃冷冻备用。
1.2.2 胶原蛋白提取 鱼皮解冻后清洗、沥干,经 20 倍体积(m/V)的盐酸
于 4℃浸泡处理后,取出鱼皮用蒸馏水洗涤至 pH5,沥 水后用 7 倍体积(m/V)的蒸馏水浸泡,水浴提取,提取后 的胶原蛋白经冷冻干燥后即得罗非鱼皮胶原蛋白成品。
试验号
X1
X2
X3
1
-1
-1
-1
2
-1
-1
-1
3
-1
-1
+1
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