泰山散瘀膏对小鼠腹腔巨噬细胞活化及吞噬红细胞功能的影响

泰山散瘀膏对小鼠腹腔巨噬细胞活化及吞噬红细胞功能的影响
作者：翟献斌
来源：《风湿病与关节炎》2013年第01期
【摘要】目的：研究泰山散瘀膏对小鼠活血化瘀作用及作用机制。

方法：取32只小鼠，随机分为实验组和对照组各16只，实验组和对照组小鼠分别腹部贴覆涂有泰山散瘀膏和凡士林的透气薄膜，连续3天后通过腹腔注射抗凝鸡血至瘀血模型，利用瑞氏-吉姆萨染色法油镜下观察并计算红细胞、巨噬细胞及吞噬红细胞的巨噬细胞的数量，探讨泰山散瘀膏活血化瘀的作用机制。

结果：注射鸡血6 h后，实验组和对照组的吞噬红细胞的巨噬细胞数分别为（178.22±40.78）和（201.12±34.56，12） h后实验组和对照组的吞噬红细胞的巨噬细胞数分别为（30.29±9.99）和（48.12±12.28），两组比较差异均有统计学意义（P
【关键词】巨噬细胞；瘀血；泰山散瘀膏
急性软组织损伤是临床常见的外伤，外来暴力、扭伤等均产生不同程度的损伤，严重者可影响工作和生活。

其处理方法较多，局部外用药可以帮助缓解症状，促进损伤恢复。

泰山散瘀膏是山东省泰安市中医医院制剂，在临床应用20余年，疗效显著。

笔者通过实验对泰山散瘀膏的活血祛瘀作用机制进行初步研究，现将研究结果总结报告如下。

1 材料与仪器
1.1 实验动物成年SPF级小鼠，体重（25±5） g，雌雄不限，购自山东省泰邦生物制品有限公司。

1.2 实验仪器 MIUI-Q超纯水系统，购自法国MilliPore公司；JGL-16G型离心机，购自上海安亭科学仪器厂。

1.3 药物与试剂泰山散瘀膏主要由大黄、木香、川牛膝、玄参、羌活、当归、赤芍、三棱、莪术、延胡、南星、紫草、桃仁、枳实、青皮、花椒、降香、松节、透骨草、伸筋草、荆芥、薄荷、紫花地丁、制川乌、苏木、水蛭、乌梢蛇、制草乌、海桐皮、木瓜、土鳖虫、地龙、三七、红花等药物组成，由泰安市中医医院制剂科制；凡士林、吉姆萨染剂等为国产分析纯，购自天津市永大化学试剂有限公司。

2 方法
2.1 实验方法将泰山散瘀膏均匀涂到透气薄膜上，剪成1 cm2大小的片状，4 ℃冰箱内保存备用。

取32只小鼠，随机分为实验组和对照组，每组16只。

取实验组小鼠，将小鼠腹部去
毛并局部贴覆涂有泰山散瘀膏的透气薄膜1 cm2，四角缝在小鼠腹部，每天换药1次，连续3天。

以透气薄膜在小鼠腹部停留2 h以上为用药时间合格，停留时间不足2 h者重新换药。

末次给药后30 min，腹腔注射浓度1 %的抗凝鸡血0.3 ml，分别于注射鸡血后6 h、12 h各处死8只小鼠抽取腹腔液，作涂片，瑞氏-吉姆萨染色，镜下观察，计数红细胞、巨噬细胞及巨噬红细胞的巨噬细胞数量。

对照组除透气膜上涂凡士林外，其余操作与实验组相同，所得数据统计学处理。

2.2 统计学方法采用SPSS12.0统计分析软件处理数据。

计量数据以表示，两组间比较用t 检验。

P
3 结果
注射鸡血6 h后观察结果。

油镜下观察腹腔液涂片，可见对照组与实验组片中均有大量红细胞及巨噬细胞，多数红细胞呈游离状态，部分巨噬细胞呈球形，胞质内未见吞噬的红细胞，亦可见大量吞噬红细胞的巨噬细胞，其中实验组吞噬红细胞的巨噬细胞数量明显多于对照组。

用测微尺计数1 mm2内的游离红细胞、未吞噬红细胞的巨噬细胞及吞噬红细胞的巨噬细胞数，统计学处理数据，实验组吞噬红细胞的巨噬细胞明显多于对照组，差异有显著的统计学意义（P
注射鸡血12 h后观察结果油镜下观察腹腔液涂片，可见实验组与对照组中游离红细胞基本消失，被巨噬细胞吞噬的红细胞比例明显增多。

计数1 mm2内的游离红细胞、未吞噬红细胞的巨噬细胞及吞噬红细胞的巨噬细胞数，实验组未吞噬红细胞的巨噬细胞及吞噬红细胞的巨噬细胞数明显多于对照组，差异有显著的统计学意义（P
4 讨论
急性软组织损伤属于中医学“伤筋”范畴，是局部气血经络损伤后的病理反应。

现代医学认为，急性软组织损伤的原因主要有两方面：一方面是外力直接造成局部组织细胞微观结构损伤和微小血管破裂、出血，以及组织细胞充血水肿和变性坏死致受损局部肿胀、疼痛；另一方面是损伤后局部组织细胞释放出炎性介质、代谢产物聚集造成内环境改变，引起损伤细胞代谢障碍，从而加重局部症状和体征以及病理变化[1]。

祖国传统医学认为急性“伤筋”后，脉络破损，血离经脉而成瘀，瘀血不散，气血流行不通，不通则痛，气滞血瘀，筋脉阻滞是筋伤的病机，活血化瘀为治疗该病的大法[2]。

现代科学实验也证实了活血化瘀、消肿止痛中药起两方面的作用：①对损伤早期出现肿胀疼痛，活血化瘀药可以控制和减缓炎症反应吸收由炎症反应所致的渗出、充血及水肿，修复由损伤所致的软组织及血管壁，降低致痛物质的浓度，减轻对游离神经末梢的刺激，同时提高痛阈值起到消肿止痛作用。

②对于损伤中晚期出现肿胀疼痛，活血化瘀药可以使毛细血管扩张，
减轻毛细血管静脉段的压力，使白细胞与其它有形成分的渗出减少，降低损伤部位坏死发生率[3]。

本膏药通过透皮吸收作用于创伤局部，从而维持局部相对稳定的血药浓度，起到散瘀、消肿和止痛的功效[4]。

方中君药大黄、三七、红花、乳香、没药等活血化瘀，消肿止痛；臣药土鳖虫、三棱、莪术、泽兰破血逐瘀，当归补血活血、活血祛瘀、凉血消肿；佐药木香、玄参、乌蛸蛇、伸筋草、荆芥、紫花地丁、蒲公英等凉血泻火，活血祛瘀，使药冰片、薄荷、儿茶等引经通络止痛；以上诸药配伍使用，具有活血化瘀、消肿止痛、凉血止血的作用。

药理学研究方中大黄可降低毛细血管通透性，减少渗出，同时能扩张毛细血管，改善微循环灌注，解除损伤后微循环的障碍[5]；乳香提取物以及木瓜提取液能明显降低小鼠腹腔巨噬细胞及中性白细胞的吞噬功能。

土元能明显降低血脂及促进脂肪代谢[6]。

乳香、蒲公英、没药、土元均能增加红细胞变形能力，降低血小板黏性和纤维蛋白原含量，从而降低血液黏度，改善微循环，促进瘀血的吸收及转运，为机体组织的修复创造有利条件[7，8]。

本实验通过小鼠腹腔注射抗凝鸡血构建淤血模型，观察并比较巨噬细胞及吞噬红细胞的巨噬细胞的数量。

巨噬细胞广泛分布于机体各脏器和组织，是一类可塑性强、功能状态呈高异质性的细胞群体，在不同的免疫微环境影响下，表现出明显的功能的差别。

在正常组织中的巨噬细胞处于静息或未活化状态，但是外界的免疫炎症刺激可诱导其活化。

结果表明，泰山散瘀膏可通过增加巨噬细胞的数量和促进其活化，吞噬红细胞的巨噬细胞明显多于对照组，使巨噬细胞清除腹腔内红细胞的能力增强、速度加快，从而起到活血化瘀的作用。

4 参考文献
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[2] 王志华，王慧生，高纪和.消肿止痛液的药理实验研究[J].中草药，1998，29（1）：31.
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