13大熊猫乳汁中富含游离精氨酸

患胃肠道和呼吸道疾病 , 死亡率增加 。因此 , 大熊 猫乳的组成研究对提高大熊猫的繁育和饲养水平有 重要实际意义 。近些年来 , 对大熊猫乳的研究已经 引起研究人员的关注 。 刘选珍等 (1996 , 2003)先 后对 1 只大熊猫产后 1 个月和 17 d 内的乳中常规 营养成分 、 总氨基酸 、 矿物质的含量进行了分析 ;
Giant panda Ailuropoda melanoleuca milk contains high concentration of free arginine＊
ZHENG Yu-C ai1＊＊, LAN Jing-Chao2 , L C heng1 , HU ANG XiangM ing2 , WANG Jie1 , LI Guang-Han2 , JIN Su-Yu1
2 结 果
采用标样加入法测定回收率 , 除 Ile 和 Cy s-SS-
均为 Agilent 公司产品 ;乙腈 、 甲醇和三乙胺为色 Cys 回收 率较低 (分别 为 81.6 %和 82 %) 外 , 其
岁), 平均胎次 4.4 胎 (2 -9 胎), 健康状况良好 , min 时流速为 0.8 min/ ml , 24 min 时流速为 0.45
哺乳期日粮主要包括配方奶粉 、 苹果和竹子 。采用 min/ ml , 100 % B , 25 min 时流速为 0.45 min/ ml ,
手工挤奶方式获取大熊猫分娩后第 2 -10 d 的初乳 0 % B 。 紫外检测器 , 波长 338 nm (0 -16 min)和 样品 16 个 (3 号大熊猫娇子在挤奶前注射了 10 - 262 nm (16 -25 min)。
15 个单位 的催产 素)、 泌 乳 4 个月 的常 乳样 品 1 1.3.5 氨基酸的定性和定量 根据标准氨基酸层
个 、 断奶后 3 d 内干乳期的乳样 3 个 。 另外还采集 析图谱 , 以保留时间 定性 , 外标 法定量 , 均采用
了一头中国荷斯坦牛 (Bos taurus)的初乳 (泌乳 48 h 内)和常乳 、 人的初乳 (分娩后 20 h)、 藏绵
1.4 数据统计 由于乳样数量少 , 因此 , 进行统计时将初乳期
1.2 主要仪器和试剂
2 -4 d 、 5 -7 d 和 8 -10 d 的数据分列为 3 个组 ,
Agilent 1100 型 高 效 液 相 色 谱 仪 , 包 括 以泌乳 8 -10 d 为对照组 , 干乳期单独为 1 个组 。
1 只分娩后 13 d 的大熊猫乳中常规营养成分含量及 糖 、 脂肪的组成 。氨基酸是乳蛋白功能的主要体现
淀蛋白质 , 上清液用 0.45 μm 膜过滤备用 。 1.3.2 乳蛋白的酸水解 乳中总氨基酸测定采用
者 , 具有多种生物学功能 , 如合成新的蛋白质 、 提 盐酸水解法处理脱脂乳 (Liu and Boy kins , 1989)。
摘 要 采用高效液相色谱法测定了 8 只圈养大熊猫 20 个乳样中 游离氨基酸的含 量 。 结果显示 :大熊猫初乳 和 常乳中均含有丰富的游离精氨酸 , 并且是含量最高的游离氨基酸 ;泌乳 2 -10 d 的大熊猫初乳 中总游离氨基酸含 量约 为 82 mg/ 100 ml, 其中游离精氨酸 平均含量 达 61 mg/ 100 ml, 常 乳中游 离精 氨酸 含量约 为 54 mg/ 100 ml, 均明显高于人 、 牛和藏 绵羊乳 ;游离精氨酸在大熊猫 干乳期 乳腺分泌 物中含 量显著 下降 。 推测 乳中高 水平的 游 离精氨酸在大熊猫幼仔生长发育中可能发挥重要作用 [ 动物学报 52 (2):309-315 , 2006] 。 关键词 大熊猫 乳 精氨酸 游离氨基酸
Abstract F ree amino acid contents were measured in 20 milk samples of 8 captive giant pandas Ailuropoda melanoleuca using high performance liquid chromatography .Hig h concentrations of free arginine w ere observed in both colostrum and mature milk of giant pandas.Arginine concentration w as the hig hest among all the free amino acids assay ed .T he total free amino acid content in giant panda colostrum during day 2 to day 10 of lactation was approx imately 82 mg/ 100 ml, the average level of free arginine w as as high as 61 mg/ 100 ml, and in mature milk the free arginine co ncentration reached approx imately 54 mg/ 100 ml, bo th was much higher than in milks o f human, bovine and Tibetan sheep tested. F ree arginine co ncentration decreased significantly in mammary secretions of giant pandas during dry period.I t is suggest-
ed that hig h level of free arginine in giant panda milk may play an important role in the g row th and development of giant panda cubs [ Acta Zoologica Sinica 52 (2):309 -315, 2006] . Key words Giant panda , Ailuropoda melanoleuca , M ilk , Arginine , Free amino acid
HP ChemS tation Plus 化学工作站 完成 。 本 实验中 氨基酸在 0.01 mmol/ L -1 mmol/ L 范围内具有良
羊 (Ovis aries)常乳样品 , 用于氨基酸分 析的比 好线性 。
较 。 全乳经 800 g 于 4 ℃离心 20 min , 获得脱脂乳 , 分装后于 -80 ℃保存至分析 。
2005-08-30 收稿 , 2006-01-05 接受 ＊ 成都大熊猫繁育研究 基金会资 助项目 (No.CPF2002016) [ This research w as funded by t he grant (No.CPF2002016) from Chengdu
Breeding Research Foudation for giant panda] ＊＊ 通讯作者 (Corresponding author). E-mai l :yucaiz heng @ 2006 动物学报 Acta Zoologi ca S ini ca
1 .College of Life Science and Technology , Southw est U niversity for N ationalities , Chengdu 610041 , China
2 .Cheng du Research Base of Giant Panda Breeding , Cheng du 610081, China
猫繁育研究基地 , 编号依次为 1 -6 号和 8 号 ;1 腈 +40 %甲醇 。 洗脱梯度 :0 min 时 100 % A , 17
只饲养于陕西楼观台珍稀动物抢救饲养研究中心 , 编号为 7 号 。实验大熊猫平均年龄 13.1 岁 (8 -19
min 时 60 % B , 18 min 时 100 % B , 流速 为 0.45 ml/ min , 18.5 min 时 流 速 为 0.8 ml/ min , 23.9
3 10
动 物 学 报
52 卷
王成东等 (2003)研究了大熊猫初乳中免疫球蛋白 1.3.1 游离氨基酸的提取 取脱脂乳 100 μl , 加
含量的动态变化 ;费立松等 (2000)研究了 2 只大 入 400 μl 甲醇 , 充分混匀 1 min , 置于 4 ℃冰箱中
熊猫乳蛋白组分 ;Nakaruma et al .(2003)分析了 放置 30 min , 然后以 22 000 r/min 离心 20 min 沉
动物学报 52(2):309 -315 , 2006 Acta Zoologica Sinica
大熊猫乳汁中富含游离精氨酸 ＊
郑玉才1＊＊ 兰景超2 吕 程1 黄祥Байду номын сангаас2 王 杰1 李光汉2 金素钰1
1 .西南民族大学生命科学与技术学院 , 成都 610041 2 .成都大熊猫繁育研究基地 , 成都 610081
对大熊猫不同泌乳阶段乳中游离氨基酸的含量进行 合 8 次 ;吸取 1.0 μl 的 FMOC , 洗针一次 , 原位混
系统分析 , 以便全面认识大熊猫乳的组成特性 , 并 为大熊猫的人工育幼提供科学的依据 。
合 5 次 , 进样 4 μl 。 1.3.4 色谱条件 色谱柱为 Hypersil AA-ODS C18
G1314A VWD 紫 外可见 光检 测 器 、 G1313A ALS 自动进样系统 、 G1311A QuatPump 泵 、 HP Chem-
统计数据用平均值 ±标准差表示 , 用 SPSS 11.5 软 件进行方差分析 。
St ation Plus 化学工 作站 , 日 立高 速冷 冻离 心机 , Savant 离 心浓缩 冻干机 , Beckm an Ф390 酸度计 。 18 种氨基 酸标准 品 、 OPA 、 FMOC 、 硼 酸缓冲 液