含异烟肼凝胶药物介入治疗肺结核病安全性分析

含异烟肼凝胶药物介入治疗肺结核病安全性分析张霞 董迎华 李洪敏 王巍 冯端浩=摘要> 目的 对异烟肼凝胶联合体介入治疗的安全性进行分析和临床效果进行评价。

方法 利用最小抑菌浓度(M IC)和最小杀菌浓度(MBC)法测定异烟肼单体及异烟肼药物凝胶的抗结核效果,并用家兔进行经支气管的介入注药试验,进行了582例临床治疗。

结果 异烟肼凝胶对H 37Rv 标准株、牛型结核分枝杆菌、草分枝杆菌M IC 值分别为10、510、510mg /L,MBC 值分别为100110和100m g /L ;异烟肼凝胶与异烟肼单体M I C 、MBC 值无显著差异;家兔动物实验表明该药无任何毒副作用,临床治疗的显效率为73188%。

结论 异烟肼凝胶具有与异烟肼单体相同的抗结核菌药效,介入用药以10~100mg /L 为宜。

=关键词> 异烟肼凝胶;结核分枝杆菌;M IC ;MBCSa fety Ana lysis of ison iaz i d ge l interven tiona l ther apy aga i nst pul m ona r y tuber culosis Z HA NG Xia,DO NG Y ing 2hua,LI H ong 2m i n,et a l . 309H os pit a l of PL A ,B ejing 10009,Ch i na=Ab str act > O b jective To eval uate t h e cli n i cal app lication effect and safet y of is on iazi d gel co m b i nati on agai ns tMycobacteri um t u 2bercu l os i s by interven tion therapy .M ethod s Th e an ti 2t ub erculos i s eff ect of is on iazi d m ono m er and i son i azid gelwere m easured by the m et hod s ofM I C and MBC .Th e rabb its b ronch ial i nterven ti on therapy were don e by i n j ecti ng drug ,and the cli n ical treat m ent of 582cases s u ff ered fro m mycobacteri um tub erculosis by bronch i al i n terven tion therapy was observed at t he sa m e ti m e .Res u lts Th eM I C of is on i azi d gel t o M.tub erculoH 37Rv ,M.boris andM.ph leiwas 011,011and 014m g /L ,t heM B C of i son iazi d gel toM.tubercu l osisH 37Rv ,M.bovis and M.ph leiwas 012,012and 116m g/L ,respectivel y .TheM I C and MB C of is oniazi d gel and pasinigel and h ad no s i gn ifican t d iff eren ce ,w it hou t any har m f u l eff ect of rabb its an i m al experi m ent ,Th e t otal eff ecti ve rate of clinical treat m en twas 73188%.Con clu si on Th e res u lts s ugges t t hat is on i azi d has t he sa m e affect on the activit y of is oniazi d gel agai n stM ycobacteri u m tubercu l osis ,and t he best quan tit y ofm ed i 2ci n e of i n t erventi on t herapy is 10~100m g /L .=K ey w ord s >i son i azi d ge;l m ycobacteri um t uberc u los i s ;M I C ;MBC作者单位:100091 北京市海淀区解放军总医院第二附属医院结核研究所临检室北京市海淀区解放军总医院第二附属医院药剂科(冯端浩)在我国近500万结核病患者中,耐多药结核病人高达46%。

1998年世界卫生组织再一次提出/发动阻止结核病的运动已刻不容缓0[1]。

耐多药结核病感染率的增加,给治疗带来困难,空洞型肺结核病的治疗更加困难。

经纤维支气管镜导管介入治疗耐多药肺结核,其疗效显著优于单纯化疗,是目前治疗结核病的有效手段[2]。

本实验室以卡波姆为基质制备异烟肼介入凝胶剂,利用动物实验对其体外抗结核效果和安全性进行评价,并对582例病人进行临床治疗,收到满意效果。

材料与方法一、卡波姆(上海人民制药厂,批号(971109);异烟肼由北京双鹤药业股份有限公司提供。

人型结核分枝杆菌标准株(H 37R v)、牛型结核分枝杆菌标准株、草分枝杆菌标准株(北京结核病控制研究所);改良罗氏培养基、Bactec 2960快速分枝杆菌分析仪及专用培养基(美国BD 公司);实验药剂均符合药用标准。

二、实验动物日本大耳兔6只,a `各半,体重215~310kg(军事医学科学院实验动物中心,合格证号:京动许字99001号),适应环境6d 后进行实验(实验动物使用许可证号:SYX K ll 20020025)。

三、临床治疗582例病人均为我院已确证为耐多药肺结核的住院患者。

四、异烟肼与卡波姆凝胶联合药物的制备(简称:异烟肼凝胶)异烟肼1g ,1%卡波姆溶液30m ,l 2%NaO H 溶液适量,注射用水加至100g(每克凝胶含异烟肼10mg);p H 值618~710,符合2000年版中国药典凝胶剂标准。

五、最小抑菌浓度(M I C)的测定采用二倍稀释法,在专用培养管内分别加入异烟肼、异烟肼凝胶及空白对照,每品种6管,按Bactec 2960快速分枝杆菌分析仪说明进行标准化操作[3],分别加入H 37R v 标准株、牛型结核分枝杆菌、草分枝杆菌(104CFU /m l)015m ,l 每日观察,7d 内若出现阳性标本,仪器红色指示灯会自动闪亮,取出阳性标本,并打印结果,计算其M IC 值。

设异烟肼组、异烟肼凝胶组及空白对照组。

临床分离耐药结核菌30株,以异烟肼凝胶同法测定。

六、最小杀菌浓度(MBC)的测定采用M I C 试验的培养基,同样的方法进行活菌计数测定最小杀菌浓度,即先测出M IC ,再依次将未见细菌生长的各管培养物分别吸取011m l 倾倒于改良罗氏培养基中,在37e 培养箱中再孵育20d ,观察结果。

七、日本大耳兔支气管介入试验健康日本大耳兔6只,麻醉后固定于兔板行气管切开术,X 线仪器监视下自切口处插入纤维导管至支气管远端,在肺1588临床肺科杂志 2008年12月 第13卷第12期部一侧推注异烟肼凝胶(110m l/kg),另一侧作为无菌生理盐水空白对照(110m l/kg),退出导管,缝合。

6只日本大耳兔3只给药部位在左侧,2只在右侧,1只日本大耳兔做对照组。

术后分别于1、3、6d 观察动物体温、饮食、体征并记录。

7d 时解剖观察日本大耳兔主要脏器有无病理学改变,同时取肺脏用10%福尔马林溶液固定,经脱水包埋,石蜡切片,HE 染色,作病理组织学检查,(见图1)。

八、临床治疗一周一次,药物含量为100m g/L ,介入治疗量20m ,l 同时进行X 线和痰菌涂片观察。

空洞吸收;痰菌转阴;临床症状明显好转为治疗效果显效。

结 果一、M IC 值在107CFU /m l 菌浓度条件下,异烟肼凝胶对H 37R v 标准株、牛型结核分枝杆菌、草分枝杆菌M I C 值分别为10、510和510m g/L ,异烟肼凝胶与异烟肼单体M I C 值无显著差异;不同菌株的初生长期各有不同。

异烟肼凝胶对临床分离耐药株M I C 值在5~1010mg /L 之间。

二、MBC 值异烟肼凝胶对H 37R v 标准株、牛型结核分枝杆菌MBC 值分别为100110和100m g/L,异烟肼凝胶与异烟肼单体无显著差异。

异烟肼凝胶对临床分离耐药株MBC 值在1010~100m g/L 之间。

三、日本大耳兔支气管介入实验试验术后30m i n 大耳兔苏醒,此后恢复,行动自如(见图1),饮食、排便、体温正常,体重未减。

6d 内无1例死亡。

7d 时解剖,肉眼检查心、肝、肺等主要脏器无异常,气管切口已愈合。

肺病理组织学检查可见,肺组织大致正常,测试组肺泡壁轻度充血,其他未见异常,肺两侧比较结果未见明显差异(见图2)。

四、临床治疗分析582例病人均自愿接受异烟肼凝胶介入治疗,有44例出现胸闷、咳嗽、心慌等不良反映,立即停止治疗。

其余538例患者均进行了治疗,临床治疗的显效率为73188%(430/482)。

图1 苏醒后的日本长耳兔 图2 介入试验后兔肺组织的外观讨 论当前,耐多药结核病(MDR 2TB )疫情在全球范围内回升,我国已成为结核病高发的国家。

MD R 2TB 病诊断困难、耗时长,治疗费用惊人,死亡率高,MDR 2TB 和非结核分枝杆菌病(NT M )急剧增多和广泛传播扩散,使结核病控制措施已远远滞后于结核病的发展和传播。

要控制MDR 2TB,关键是争取时间,如何采用有效的、针对性强的治疗方案,是治疗MDR 2TB 的关键。

本课题拓宽了临床治疗的方法,建立了异烟肼卡波姆凝胶体外抗结核效果和动物实验安全性进行评价,和进行了耐多药结核病的初步治疗研究。

本试验证实,对H 37Rv 标准株、牛型标准株和草分枝杆菌标准株,异烟肼凝胶的M IC 值分别为10、510和510m g/L ,MBC 值分别为100110和100m g/L ,说明异烟肼凝胶具有良好的抗结核菌效果,优于单体[5]。

用临床耐药株测得M IC 值为10010m g/L ,比标准株稍高,可能与其耐药性有关。

异烟肼凝胶与异烟肼单体M IC 值无显著差异.凝胶卡波姆是丙烯酸与烯丙基蔗糖或季戊四醇交链而成的高分子聚合物,是一种优良的药用辅料,中国、英国、美国药典均已收载。